新型溶血磷脂酸2受体激动剂的设计、合成及初步抗辐射活性评价

目的设计合成具有抗辐射活性的新型溶血磷脂酸2(LPA_2)受体激动剂。方法以DBIBB为先导化合物,设计并合成了9个新型LPA2受体激动剂(Ⅰ_2~Ⅰ_5和Ⅱ_1~Ⅱ_5),通过人脐静脉内皮细胞(HUVEC)抗辐射实验测定目标化合物的抗辐射活性。结果和结论合成了9个未见文献报道的目标化合物,结构经~1H NMR和MS确证。初步药理结果显示,化合物Ⅰ4和Ⅱ1具有明显的抗辐射活性,值得进一步研究。

溶血磷脂酸受体2调控胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移以及增殖凋亡

为探讨LPA2是否可调节胃癌细胞SGC-7901的侵袭迁移及增殖凋亡,将LPA2 siRNA和pc DNA3.1-LPA2表达载体转染SGC-7901,转染后利用Western blotting检测LPA2、E-cadherin及Vimentin蛋白表达情况,Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力,MTS实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测凋亡情况。结果表明LPA2 siRNA对胃癌细胞SGC-7901敲除成功后,细胞内的E-cadherin表达增高,Vimentin表达降低;同时其侵袭、迁移和增殖能力降低,凋亡能力升高。细胞SGC-7901过表达LPA2后,细胞内的E-cadherin表达降低,Vimentin表达增加,其侵袭、迁移和增殖能力升高,凋亡能力降低。可见LPA2可调控胃癌细胞SGC-7901侵袭迁移以及增殖凋亡,为胃癌的治疗提供新的靶点。

溶血磷脂酸受体2在乳腺癌中的表达及预后相关性分析

目的:研究溶血磷脂酸受体2(LPAR2)在乳腺癌组织中的表达,并分析其与乳腺癌预后之间的相关性。方法:收集乳腺癌患者癌组织及癌旁组织,利用实时定量PCR及免疫组化染色技术检测乳腺癌及癌旁组织中LPAR2 m RNA及蛋白的表达,回顾性分析乳腺癌患者临床病理资料及预后生存状态与LPAR2表达的相关性。结果:72%(64/89)乳腺癌患者癌组织中LPAR2的表达高于癌旁组织,实时定量PCR定量分析显示乳腺癌组织LPAR2表达升高具有显著统计学意义(P<0.001)。乳腺癌组织中LPAR2的表达与患者的年龄、BMI、肿瘤分级、肿瘤大小及ER、PR、HER2表达无相关性(P>0.05);但肿瘤分期越晚,LPAR2的表达越高(P<0.001),且乳腺癌淋巴结转移患者的LPAR2的表达显著高于非转移患者(P<0.001)。此外,癌组织中LPAR2高表达的患者无进展生存期显著小于无LPAR2高表达的患者(52.7±5.46 vs.64.3±3.09,P=0.016)。结论 :LPAR2在乳腺癌组织中表达显著升高,且可作为判断乳腺癌预后的标志物。

组织芯片检测溶血磷脂酸受体2蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨溶血磷脂酸受体2(LPA2)蛋白在胃癌组织中的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法选取52例手术切除胃癌组织标本、22例上皮内瘤变标本及13例正常胃黏膜标本为研究对象,采用免疫组织化学SP法检测上述3组标本组织芯片中LPA2的表达水平;分析LPA2表达水平与胃癌患者临床病理特征(年龄、性别、临床分期、部位、浸润深度、肿瘤分级和淋巴结转移情况)是否存在相关性。结果 LPA2主要表达于细胞膜和胞浆,呈棕褐色颗粒状,在胃癌组织、上皮内瘤变及正常胃粘膜中的阳性表达率分别为73.1%(38/52)、54.5%(12/22)和46.2%(6/13),癌组织中的阳性率显著高于上皮内瘤变及正常胃粘膜(P<0.05);LPA2阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、分化程度无关(P>0.05),而与肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况及临床分期有关(P<0.05)。浸润浆膜层、存在淋巴结转移和晚期患者LPA2阳性率显著高于未浸润浆膜层、无淋巴结转移和早期患者。结论LPA2在胃癌组织中阳性表达率较高,并与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关,可作为胃癌预后的潜在生物学标志物。

溶血磷脂酸受体1-3在牦牛不同时期卵巢中表达定位

为探究正常生理下条件下溶血磷脂酸受体(LPAR)1-3在牦牛不同时期卵巢(卵泡期、黄体期、妊娠期)表达及生物学作用,利用RT-qPCR检测LPAR1-3基因在不同时期卵巢上的表达,同时利用蛋白质免疫印迹、免疫组织化学(IHC)等方法对LPAR1-3基因和蛋白的表达进行分析和定位。结果显示,LPAR1-3在牦牛不同时期卵巢上均有表达,其中LPAR1-3的表达量在妊娠期显著高于卵泡期和黄体期(P<0.05),卵泡期表达量最低;在卵泡期、黄体期、妊娠期LPAR3的表达量均显著高于LPAR1和LPAR2(P<0.05),LPAR2的表达量最低;IHC结果显示,LPAR1-3在卵巢生殖上皮、颗粒细胞、卵泡液、卵泡膜和黄体细胞均有表达。研究结果提示LPAR1-3可能在卵泡生长、发育、排卵以及维持妊娠等一系列生殖过程中发挥重要的作用,其中LPAR3可能在这一过程中起主要作用,该结果有助于对牦牛繁殖机能的进一步研究,可为高原哺乳动物生殖生理的研究提供理论依据。

溶血磷脂酸受体2通过调控缺氧诱导因子-1α的表达对乳腺癌细胞转移与侵袭能力的影响

目的观察溶血磷脂酸受体2（LPAR2）对缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的调控及两者对乳腺癌细胞转移、侵袭能力的影响。方法利用脂质体LipofectamineTM2000作为质粒及小干扰RNA（siRNA）转染人乳腺癌细胞7（MCF-7）乳腺腺癌细胞株；实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）及Westernblot检测转染后细胞LPAR2mRNA及蛋白的表达；Transwell实验检测LPAR2表达抑制后乳腺癌细胞的转移及侵袭能力。结果与未转染或空载体质粒转染的MCFG细胞比较。LPAR2高表达的MCF-7细胞转移能力显著提高（P=0．000），其侵袭能力也明显增强（P=0．000），抑制LPAR2表达降低乳腺癌细胞转移及侵袭能力；同时高表达HIF-1α促进乳腺癌细胞转移侵袭，抑制HIF-1α表达降低乳腺癌细胞转移及侵袭能力；同时，LPAR2具有调控乳腺癌细胞中HIF-1α表达的作用。结论高表达LPAR2及HIF-1α可以促进乳腺癌细胞的转移及侵袭，而抑制LPAR2及HIF-1α表达可降低乳腺癌细胞的转移及侵袭能力，表明LPAR2及HIF-1α具有作为乳腺癌治疗靶点的潜力。LPAR2作为HIF-1α的上游信号分子可以调控HIF-la的表达。

溶血磷脂酸受体2

溶血磷脂酸受体2(lysophosphatidic acid receptor 2,LPA2),也称内皮分化基因受体4(endothelial differentiation gene receptor 4,EDG4),是溶血磷脂酸G蛋白偶联受体类的一种,对溶血磷脂酸有较高亲和力,可介导多种细胞活动。近年研究发现,LPA2/EDG4在卵巢癌细胞中过表达,同时与乳腺癌、结直肠癌、动脉粥样硬化、呼吸道疾病、妊娠性高血压等有着密切关系。

LPA2在PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡中的作用

目的探讨溶血磷脂酸(LPA)2受体在PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡中的作用。方法以实验方法完成研究,通过建立PC12细胞缺血再灌注受损细胞模型,分别于缺氧环境中培养0、3、6、9、12、15h以进行糖氧剥夺,之后再将其放入高糖培养基中再次复氧培养24h,然后利用MTT来检测细胞存活率,并对其进行分组,分为正常组、缺血再灌注组(A组)、缺血再灌注+溶剂对照组(B组)、缺血再灌注+LPA2激动剂组(C组)、缺血再灌注+LPA2抑制剂组(D组)。先进行缺氧培养一定时间后再复氧培养24h,并采用MTT检测细胞存活率,同时,检测LPA2受体与P-akt蛋白的表达情况。结果经糖氧剥夺培养6h后,缺血再灌注的细胞存活率较正常组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),且缺血再灌注损伤糖氧剥脱处理最适时间为12h。A组LPA2表达水平明显低于B组;C组与B组相比较,LPA2表达水平显著增高,且P-akt表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LPA2受体在PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡中起着重要的保护作用,且升高LPA2受体表达水平有助于提高细胞生存率。

Hhip和Lpar2基因表达与胃癌相关性的研究进展

胃癌(gastric cancer,GC)是源于胃粘膜上皮细胞的恶性肿瘤,近年来研究表明Hhip与Lpar2基因在GC的发生发展中分别发挥着抑制和促进的作用,Hhip基因通过参与Hh信号通路抑制GC细胞的增殖与侵袭,而Lpar2基因通过激活ATX-LPA信号通路促进GC的发生发展.本文就Hhip与Lpar2基因在GC患者中的表达水平变化、相关分子机制及未来在临床上的应用作一综述.

LPA_2对PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡的作用

目的探讨LPA_2在PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡中发挥的作用。方法测最适缺氧时间:将PC12细胞分为6组,分别在三气培养箱中糖氧剥夺0、3、6、9、12、15 h。换高糖培养基普通培养箱中复氧24 h,MTT测细胞存活率;将PC12细胞分为5组:正常组、缺血再灌注组(OGD组)、缺血再灌注+溶剂对照组(OGD+DMSO组)、缺血再灌注+LPA_2激动剂(Dodecylphosphate)组(OGD+激动剂组)、缺血再灌注+LPA_2抑制剂(H2L5186303)组(OGD+抑制剂组),缺氧最适时间后再复氧24 h,MTT测细胞存活率,Western Blotting检测LPA_2及p-akt蛋白表达水平。结果缺氧处理12 h是模拟缺血再灌注损伤的最适时间;缺血再灌注组与正常组比较LPA_2表达水平降低;激动剂组与溶剂对照组比较LPA2表达水平增高,p-akt表达水平增高。结论升高LPA_2表达水平可提高细胞的存活率,LPA_2在缺血再灌注损伤中发挥保护作用。

新型苯并异喹啉类衍生物的设计、合成及抗辐射活性

分别以5-氯戊酸或4-(氯甲基)苯甲酸为原料,经取代、成酰胺和水解反应合成了14个新型苯并异喹啉类衍生物(I1~I7和II1~II7),其结构经1H NMR和HR-MS(ESI)表征。通过MTS法检测HUVEC细胞在辐射照射后的增殖活性,结果显示:化合物I1和I2具有抗辐射活性,其细胞存活率分别为64.68±1.04*#和58.95±1.34*#。