一种新型的定量测定特异性体液免疫功能的溶血空斑试验

根据补体经典途径激活时，可通过“旁立损伤”机制使邻近正常细胞溶解破坏的原理，该种溶血空斑试验不仅可以用来定量检测分泌ＩｇＭ的抗体形成细胞，也可直接用来定量检测分泌ＩｇＧ的抗体形成细胞。与传统溶血空斑试验相比，其最大的优点是可用来检测机体对任何一种可溶性抗原的特异性体液免疫应答能力，从而扩展了应用范围。

一种改良的溶血空斑试验

一种改良的溶血空斑试验首都医学院微生物学教研室李郁英，李玉兰，安云庆溶血空斑试验（ｈｅｍｏｌｙｔｉｃｐｌａｑｕｅｔｅｓｔ）是由Ｊｅｒｎｅ和Ｎｏｒｄｉｎ创立的一种体外检测抗体形成细胞（浆细胞）的方法［１］，又称空斑形成细胞测定法（ｐｌａｑｕｅｆｏｒｍｉ...

应用溶血空斑免疫法动物实验复验育血Ⅰ号和Ⅱ号作用效果观察

本文在中西医结合治疗出血性疾病60例分析、血小板减少性紫癜巨核细胞的变异分析及育血Ⅰ号Ⅱ号治疗血小板减少性紫癜作用机制初步探讨等工作基础上,选纯系615小鼠进行溶血空斑免疫实验,结果表明空白对照组、育血Ⅰ号和Ⅱ号组溶血空斑各不相同,育血Ⅱ号数据最大而其他二者不相上下,三组均数相比其差异有显著性,三组两两相比则育血Ⅱ号与Ⅰ号和空白时照其溶血空斑数据均差异显著,P均<0.05,而育血Ⅰ号与空白对照比较差异无统计学意义,由于育血Ⅰ号的标准差变异范围较大,有必要对其进行进一步探讨。

束缚应激小鼠对溶血空斑的影响

目的：研究束缚应激对小鼠溶血空斑形成试验的影响．方法：４０只小鼠，随机等分为对照组和应激组，用直接空斑形成试验（Ｐｌａｑｕｅ－ｆｏｒｍｉｎｇｃｅｌｌａｓｓｎｙ，ＰＦＣ）玻片法，测其溶血空斑形成数量．结果：应激组溶血空斑形成数量明显降低（Ｐ＜０．０１）．结论：束缚应激可致小鼠体液免疫功能降低．

有机锗恢复带瘤小鼠溶血空斑的观察

本实验观察了有机锗对带瘤小鼠(ICR/JCL)溶血空斑(PFC)的影响。结果显示,适量的有机锗(10mg/日/鼠)能明显提高带瘤鼠的PFC数(P【0.05),但不能提高正常小鼠的PFC数。说明有机锗对于因肿瘤所致的免疫反应低下具有一定程度的恢复作用。

溶血空斑分析仪在抗体形成细胞检测中的应用

目的了解溶血空斑分析仪计数溶血空斑的准确性。方法昆明种小鼠经口连续分别给予低、中、高剂量的3个样品(鳄鱼酒、益生菌冲剂及洋参胶囊),另设空白对照组及酒基对照组,30 d后进行溶血空斑试验(PFC),分别用仪器法和人工计数法对溶血空斑进行计数,并比较两种方法的计数结果;另选取高、中、低3份溶血空斑数值不同的标本,分别用两种方法进行计数,每份标本重复计数10次,比较CV值。结果用仪器法和人工计数法所得结果之间差异无统计学意义(P>0.05);且相关系数分别为0.986、0.988和0.982,两种方法计得的溶血空斑数呈正相关。用仪器法和人工计数法对3份溶血空斑数值不同的标本重复计数的CV值分别为1.12%、1.31%、1.59%和3.46%、3.44%、3.05%,显示仪器法的精密度高于人工计数法。结论用溶血空斑分析仪计数溶血空斑是一种客观、准确的方法,并可取代人工计数法。

富硒酵母对小鼠IL-2水平、空斑形成细胞溶血能力及肠道菌群的影响

为研究富硒酵母对小鼠血浆IL-2水平、空斑形成细胞溶血能力及肠道菌群的影响,本试验选用60只清洁级KM小鼠(雌雄各半),随机分为对照组、亚硒酸钠组和富硒酵母组,每日分别灌胃蒸馏水、亚硒酸钠(2μg Se/mL)和富硒酵母(2μg Se/mL)各0.5 mL。试验期为28 d。结果表明,富硒酵母组、亚硒酸钠组小鼠血浆IL-2含量和空斑形成细胞溶血能力的OD413较对照组分别提高18.24%(P<0.01)、17.65%(P<0.05)和12.82%(P<0.01)、7.69%(P<0.05);而富硒酵母组、亚硒酸钠组和对照组小鼠肠道中葡萄球菌、肠球菌、肠杆菌、乳杆菌和双歧杆菌数量均无显著差异(P>0.05)。

六味地黄汤醇溶部分免疫调节活性成分的药理学导向分离评价

目的 :定向追踪分离六味地黄汤醇溶部分 (Fr1)中发挥免疫调节作用的活性成分。方法 :以环磷酰胺 (Cy)处理小鼠为活性导向评价动物模型 ,以绵羊红细胞 (SRBC)诱导的脾细胞抗体生成反应为活性导向评价指标。结果 :Fr1对Cy所致抗体生成反应能力低下具有明显的改善作用 ,其正丁醇和水萃取部分的活性较强 ,正丁醇萃取部分以硅胶柱层析所得组分 3A活性最强 ,水萃取部分以C18反相柱层析所得组分C18 1活性最强。结论 :Fr1发挥免疫调节作用的主要活性成分来源于 3A和C18 1。

羧甲基壳聚糖硒对小鼠脏器指数、脾脏空斑形成细胞溶血能力及血浆SOD活性的影响

为研究羧甲基壳聚糖硒对小鼠脏器指数、脾脏空斑形成细胞溶血能力及血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,试验选择KM小鼠60只(雌雄各半)随机分为对照组、亚硒酸钠组和羧甲基壳聚糖硒组,每组20只(雌雄各半)。对照组饲喂基础日粮,亚硒酸钠组和羧甲基壳聚糖硒组分别在基础日粮中添加亚硒酸钠和羧甲基壳聚糖硒(其剂量以硒计均为0.2 mg/kg),试验期28 d。结果表明:羧甲基壳聚糖硒组小鼠脾脏空斑形成细胞溶血能力高于亚硒酸钠组,亚硒酸钠组高于对照组,且差异极显著(P<0.01);羧甲基壳聚糖硒组小鼠血浆SOD活性高于亚硒酸钠组,亚硒酸钠组小鼠血浆SOD活性高于对照组,且羧甲基壳聚糖硒组与亚硒酸钠组之间无显著差异(P>0.05),亚硒酸钠组与对照组之间差异显著(P<0.05);羧甲基壳聚糖硒组与亚硒酸钠组和对照组小鼠的肝脏、肾脏、心脏和脾脏指数相比均有所增加,亚硒酸钠组与对照组相比有所下降,但差异不显著(P>0.05)。说明羧甲基壳聚糖硒与亚硒酸钠均能显著增加小鼠的脾脏空斑形成细胞溶血能力和血浆SOD的活性,但对小鼠的脏器指数无影响。

桑枝多糖对正常小鼠免疫功能的影响

将桑枝整体干燥粉碎后提取并精制多糖。给正常小鼠灌胃不同剂量的桑枝多糖,通过对小鼠胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率及吞噬指数、淋巴细胞转化率、血清溶血素含量、溶血空斑形成数量等生化指标的检测,研究桑枝多糖对正常小鼠的免疫调节作用。结果表明:桑枝多糖能显著提高正常小鼠的胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率与吞噬指数,高剂量组(600 mg/kg)小鼠的胸腺指数和脾脏指数的提高幅度达显著水平(P<0.05),低剂量(200mg/kg)组、中剂量(400 mg/kg)组、高剂量组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率与吞噬指数的提高幅度均达极显著水平(P<0.01);桑枝多糖还可显著促进小鼠淋巴细胞的转化以及血清溶血素和溶血空斑的形成,中剂量组、高剂量组小鼠的淋巴细胞转化率提高幅度均达极显著水平(P<0.01),中剂量组小鼠的血清溶血素含量和溶血空斑数量的提高幅度均达显著水平(P<0.05),高剂量组小鼠的血清溶血素含量和溶血空斑数量的提高幅度均达极显著水平(P<0.01)。研究结果显示,桑枝多糖对正常小鼠具有较好的免疫增强作用。

胎盘因子对冷应激小鼠的免疫调节作用

目的探讨胎盘因子 (PF )对冷应激小鼠免疫功能的调节作用。方法用超滤法从健康产妇胎盘中提取PF ;强迫小鼠在 ( 10± 0 .5 )℃水中游泳制备冷应激模型 ;检测免疫器官重量、脾脏溶血空斑形成细胞数、E花环形成率、T淋巴细胞转化试验及白细胞介素 2 (IL 2 )活性。结果PF能明显改善冷应激所引起的小鼠免疫功能抑制 ,使脾脏重量及脾脏溶血空斑形成增多 ,E花环形成率及T淋巴细胞转化提高 ,并使IL 2活性升高。

双酚A对小鼠免疫系统的影响

目的了解双酚A对小鼠免疫系统的影响。方法小鼠用不同剂量双酚A灌胃7 d后,测定其脏器系数、腹腔巨噬细胞吞噬率、溶血空斑数及足跖厚度。结果中、高剂量组小鼠巨噬细胞吞噬功能、溶血空斑形成能力及迟发性变态反应均受抑制,而低剂量组则增强。结论双酚A对小鼠免疫系统的影响具有双向调节作用,即在低剂量时对体液免疫和细胞免疫功能具有增强作用,而在较高剂量时则具有抑制作用。

大鼠特异性体液免疫毒性两种评价方法的可行性

目的 建立大鼠28天染毒的特异性体液免疫毒性模型，说明溶血空斑试验和血清溶血素试验用于评升大鼠特异性体液免疫毒性的可行性。方法 雄性Wistar大鼠40只，体重180～200g，随机分为对照组和5，10，20mg／kg环磷酰胺（已知的免疫抑制剂）染毒组，每组10只大鼠，各剂量组每日灌胃染毒1次，连续28d，对照组给予生理盐水；染毒第24天，大鼠腹腔注射1ml 10％绵羊红细胞进行免疫；染毒结束后24h，断头处死大鼠，取脾脏，制备脾细胞悬液，进行溶血空斑测定；收集血液，制备血清，进行血清溶血素试验。结果5，10和20mg／kg环磷酰胺染毒组大鼠的溶血空斑数（分别为159．6±91．8，93．6±14．8，39．8±11．0）及血清溶血素水平（分别为125．6±38．5，36．4±5．9，1．5±0．3）低于对照组（溶血空斑数为355．0±96．3，血清溶血素水平为283．1±96．3），差异有显著性（P〈0．05）。结论 溶血空斑试验和血清溶血素试验两种方法用于评价大鼠特异性体液免疫功能具有可行性，可为我国化学品免疫毒性评价方法的建立提供参考。

有机锗(Ge-401)对小鼠B淋巴细胞产生抗体的调节

本文报道了有机锗(Ge-401)对Balb/C小鼠产生抗SRBC抗体能力的调节。Balb/C小鼠先经SF_1(人精浆经Sephadex G-100分离得到的第一组分)抑制其免疫功能,然后实验小鼠经腹腔注射Ge-401,每天一次连续7天,对照组小鼠则以等量生理盐水代替。在实验第7天用SRBC免疫小鼠,于免疫后第4天进行溶血空斑试验和血清抗SRBC抗体凝集效价测定。结果表明,Ge-401能明显提高实验组小鼠的溶血空斑数和抗体凝集效价,与对照组相比,p<0.01。提示Ge-401能增强免疫功能抑制状态下小鼠的免疫应答能力——B细胞产生特异性抗体的能力。

前列舒乐胶囊的抗炎作用及对小鼠免疫功能的影响

前列舒乐对巴豆油所致小鼠耳肿胀及醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高有明显抑制作用 ,并能显著增加小鼠脾脏指数、胸腺指数 ,对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及溶血空斑细胞 (PFC)形成亦有显著增强作用。

法氏囊细胞培养上清的免疫活性

法氏囊细胞培养上清经浓缩、离心后，分别进行溶血空斑形成试验和鸡NDⅣ系免疫试验。结果表明．法民囊细胞培养上清能够显著提高SRBC免疫，小鼠脾细胞的PFC数目（P<0.01）．对雏鸡NDⅣ系免疫有促进作用．与免疫对照组相比．HI抗体水平平均提高1个滴度，证明体外培养的法葡萄氏囊细胞能分泌免疫活性因子。

西藏灵菇发酵奶对小鼠免疫功能的影响初探

以西藏灵菇发酵奶为研究对象,以小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬率、溶血空斑实验和迟发性致敏反应实验为检测对象,初步研究其免疫调节作用。结果表明:西藏灵菇发酵奶实验组的巨噬细胞吞噬率有所增加,低剂量组吞噬率增加83.78%,中剂量组增加87.39%,高剂量组增加102.7%。实验组小鼠的溶血空斑数也明显增加,低剂量组增加22.52%,中剂量组增加49.18%,高剂量组增加55.53%。迟发型变态反应中实验组的足跖增厚明显,低剂量组的足跖厚度增加了19%,中剂量组增加了29%,高剂量组增加了47%。均呈现有量效关系。说明西藏灵菇发酵奶具有增强动物免疫功能的作用。

黄芪多糖对环磷酰胺所致免疫低下小鼠作用的实验研究

为探讨黄芪多糖对环磷酰胺引起副作用的影响，我们应用溶血空斑形成（ＰＦＣ）实验观察了黄芪多糖（ＡＰＳ）２５０ｍｇ，５００ｍｇ，１０００ｍｇ／ｋｇ口服对环磷酰胺（ＣＹ）５０ｍｇ／ｋｇ皮下注射所致实验小鼠免疫低下的作用，结果表明黄芪多糖可拮抗环磷酰胺所致免疫低下，分别使溶血空斑计数据高了３５４．６％，１８６．６％，１３８．６％，提示黄芪多糖对环磷酰胺所致体液免疫障碍有明显改善作用。

鲨肝活性肽S-8300免疫调节作用的研究

目的 :研究鲨肝活性肽S-830 0对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法 :观察鲨肝活性肽S-830 0对环磷酰胺致免疫抑制小鼠血清溶血素、溶血空斑形成及血清IL-2含量的影响。结果 :鲨肝活性肽S-830 0可显著促进免疫抑制小鼠溶血素、溶血空斑形成及血清IL-2水平增高。结论 :鲨肝活性肽S-830