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牛乳腺炎无乳链球菌β溶血素CylE基因对牛巨噬细胞炎性细胞因子的转录和表达及对信号通路MAPK的影响机制研究
被引量:
1
1
作者
布日额
吴金花
+1 位作者
锡林高娃
王华
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2021年第10期1178-1182,共5页
目的探讨牛乳腺炎无乳链球菌β溶血素CylE基因对牛巨噬细胞吞噬功能的免疫调理分子机制。方法利用牛乳腺炎无乳链球菌临床分离野生菌株及β溶血素CylE基因缺失突变株对牛巨噬细胞进行侵染,提取侵染细胞的总mRNA;利用qPCR检测细胞因子Il-...
目的探讨牛乳腺炎无乳链球菌β溶血素CylE基因对牛巨噬细胞吞噬功能的免疫调理分子机制。方法利用牛乳腺炎无乳链球菌临床分离野生菌株及β溶血素CylE基因缺失突变株对牛巨噬细胞进行侵染,提取侵染细胞的总mRNA;利用qPCR检测细胞因子Il-8、Il-10、Il-12、TNFα及NOS2的转录水平,ELISA检测相应表达水平。在此基础上,利用免疫印迹实验鉴定无乳链球菌β溶血CylE基因对MAPK信号通路下游接头分子p-38、p44/42的表达及其磷酸化水平的影响,以明确其调控该信号通路的分子机制。结果巨噬细胞-GBS^(WI)组与巨噬细胞-GBS^(ΔcyIE)组相比,IL-10、TNF-α细胞因子上调,而IL-8、IL-12、NOS2细胞因子表达水平降低,表明无乳链球菌β溶血素CylE对细胞因子IL-10、TNF-α的影响结果一致,相对转录水平均上调,同时抑制细胞因子IL-8、IL-12及NOS2的转录。巨噬细胞-GBS;组与巨噬细胞-GBS;组相比,IL-10及TNF-α的相对表达量增加,而IL-8及IL-12的相对表达量下调,差异均具有统计学意义(均P>0.05),NOS2的相对表达量降低。对MAPK信号通路下游分子磷酸化检测结果显示,无乳链球菌β溶血素CylE基因可激活其下游接头分子p38磷酸化为p-p38,不能激活下游分子p44/42。结论根据上述结果,p38 MAPK是无乳链球菌溶血素CylE基因发挥免疫调控的识别途径,可能成为对其进行识别钝化,实现信号通路封闭,提高对牛乳腺炎预防与治疗有效性的新靶位,为有效防控该病原菌的危害,保障乳源安全提供新的思路和有效途径。
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关键词
牛乳腺炎
无乳链球菌
溶血素cyle基因
免疫调节
原文传递
题名
牛乳腺炎无乳链球菌β溶血素CylE基因对牛巨噬细胞炎性细胞因子的转录和表达及对信号通路MAPK的影响机制研究
被引量:
1
1
作者
布日额
吴金花
锡林高娃
王华
机构
内蒙古民族大学生命科学与食品学院
内蒙古自治区乳源性致病菌防控工程技术研究中心
内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所
出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2021年第10期1178-1182,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No.31760725)
内蒙古自然科学基金项目(No.2019LH03015,2021MS03084)
内蒙古民族大学生命科学与食品学院资源生物与生态研究所2020年资助项目。
文摘
目的探讨牛乳腺炎无乳链球菌β溶血素CylE基因对牛巨噬细胞吞噬功能的免疫调理分子机制。方法利用牛乳腺炎无乳链球菌临床分离野生菌株及β溶血素CylE基因缺失突变株对牛巨噬细胞进行侵染,提取侵染细胞的总mRNA;利用qPCR检测细胞因子Il-8、Il-10、Il-12、TNFα及NOS2的转录水平,ELISA检测相应表达水平。在此基础上,利用免疫印迹实验鉴定无乳链球菌β溶血CylE基因对MAPK信号通路下游接头分子p-38、p44/42的表达及其磷酸化水平的影响,以明确其调控该信号通路的分子机制。结果巨噬细胞-GBS^(WI)组与巨噬细胞-GBS^(ΔcyIE)组相比,IL-10、TNF-α细胞因子上调,而IL-8、IL-12、NOS2细胞因子表达水平降低,表明无乳链球菌β溶血素CylE对细胞因子IL-10、TNF-α的影响结果一致,相对转录水平均上调,同时抑制细胞因子IL-8、IL-12及NOS2的转录。巨噬细胞-GBS;组与巨噬细胞-GBS;组相比,IL-10及TNF-α的相对表达量增加,而IL-8及IL-12的相对表达量下调,差异均具有统计学意义(均P>0.05),NOS2的相对表达量降低。对MAPK信号通路下游分子磷酸化检测结果显示,无乳链球菌β溶血素CylE基因可激活其下游接头分子p38磷酸化为p-p38,不能激活下游分子p44/42。结论根据上述结果,p38 MAPK是无乳链球菌溶血素CylE基因发挥免疫调控的识别途径,可能成为对其进行识别钝化,实现信号通路封闭,提高对牛乳腺炎预防与治疗有效性的新靶位,为有效防控该病原菌的危害,保障乳源安全提供新的思路和有效途径。
关键词
牛乳腺炎
无乳链球菌
溶血素cyle基因
免疫调节
Keywords
bovine mastitis
Streptococcus agalactiae
βhemolysin gene
immune regulation
分类号
R378.12 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛乳腺炎无乳链球菌β溶血素CylE基因对牛巨噬细胞炎性细胞因子的转录和表达及对信号通路MAPK的影响机制研究
布日额
吴金花
锡林高娃
王华
《中国病原生物学杂志》
CSCD
北大核心
2021
1
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