FHA结构域蛋白TagH对霍乱弧菌肠道定植能力及致病力的影响

目的探究FHA结构域蛋白TagH对非O1/非O139群霍乱弧菌肠道定植能力和致病力的影响,并探讨这种影响是否依赖于溶血素HlyA和蛋白酶PrtV的表达。方法通过生长曲线实验测定各菌株的生长速率。取CD1乳鼠和CD1小鼠各分为PBS阴性对照组、WT菌株感染组、ΔtagH菌株感染组、ΔtagHΔhlyA菌株感染组和ΔtagHΔprtV菌株感染组,通过乳鼠肠道定植实验分析各菌株的肠道定植能力;通过小鼠灌胃感染实验测定各菌株感染组小鼠外周血白细胞数量以及IL-6、IL-8和TNF-α水平;观察各菌株感染组小鼠回肠组织病理损伤及7 d的生存情况。结果细菌生长曲线实验发现,各菌株的生长速度基本一致并无明显差异。乳鼠肠道定植实验发现,与WT菌株相比,ΔtagH菌株的肠道定植能力增强(P<0.01),ΔtagHΔhlyA菌株的肠道定植能力较ΔtagH菌株进一步增强(P<0.05),ΔtagHΔprtV菌株的肠道定植能力弱于ΔtagH菌株(P<0.05)。小鼠灌胃感染实验发现,与WT菌株相比,ΔtagH菌株的白细胞数升高(P<0.05)且肠组织损伤更严重,ΔtagHΔhlyA菌株的白细胞数较ΔtagH菌株明显下降(P<0.05)且几乎没有肠组织损伤,ΔtagHΔprtV菌株感染现象与ΔtagH菌株相似。WT菌株感染组、ΔtagH菌株感染组、ΔtagHΔhlyA菌株感染组和ΔtagHΔprtV菌株感染组的小鼠生存率分别为62.5%、75%、100%和75%。结论TagH抑制霍乱弧菌的肠道定植能力和致病力,其调控作用主要依赖于霍乱弧菌溶血素HlyA,而蛋白酶PrtV的作用不明显。