血清抗链球菌溶血素O检测在强直性脊柱炎中的临床意义

目的检测强直性脊柱炎(AS)及其他风湿性疾病患者血清中抗链球菌溶血素O(ASO)的浓度,探讨ASO在AS诊断及疾病进展评估中的意义。方法采用胶乳凝集法检测AS患者及疾病对照者血清中的ASO水平。记录AS患者临床特征及影像学分级,并分析与ASO的关系。结果①121例AS患者中有40例ASO阳性(>200 IU/ml),阳性率为33.1%,在124例对照者中仅有6.5%阳性,AS患者中ASO阳性率显著高于对照组(P<0.01),AS患者血清ASO水平明显高于对照组[分别为(211.05±303.04)和(69.40±56.72)IU/ml,P<0.01]。②在AS患者中,ASO阳性组IgG水平显著高于ASO阴性组(P<0.01)、血红蛋白水平明显低于ASO阴性组(P<0.05);影像学检查中骶髂关节炎Ⅱ级以上改变比例明显高于ASO阴性组(P<0.05);"4"字试验阳性的发生率显著高于ASO阴性组(P<0.05);ASO阳性组患者平均年龄显著低于ASO阴性组患者(P<0.05)。③相关性分析显示,血清ASO水平与红细胞沉降率(ESR)、IgG呈正相关(rs=0.229,P<0.05;rs=0.262,P<0.01)。结论 AS患者溶血性链球菌感染发生率高于其它风湿性疾病,溶血性链球菌感染可能参与AS的发病,血清ASO检测有助于AS的诊断及疾病进展情况的评估。

抽动秽语综合征患儿抗链球菌溶血素O、外周血T淋巴细胞亚群、IL-6和IL-8水平测定

目的:观察抽动秽语综合征(TS)患儿抗链球菌溶血素O(ASO)、外周血T淋巴细胞亚群、血清IL -6、IL -8 水平的变化,以探讨其发病的可能机制。方法:选取32例TS患儿和30例正常儿童,分别采用免疫透射比浊法测定 ASO滴度,间接免疫SAP花环法检测外周血T淋巴细胞亚群,ELISA法检测血清IL -6和IL -8水平。结果:TS患儿 T淋巴细胞亚群及IL -8水平与正常儿童比较差异无统计学意义(P>0.05);ASO滴度、IL- 6水平高于正常儿童 (P<0.05)。结论:TS患儿可能存在免疫学方面的改变。

产单核细胞李斯特菌溶血素O基因在大肠杆菌中的优化表达及ELISA检测方法的建立

在克隆产单核细胞李斯特菌(LMO)hlyA基因并构建其原核表达载体的基础上,进一步对IPTG浓度、诱导时间、诱导温度等影响目的蛋白表达的重要条件进行了优化。根据确定的最佳诱导条件,使目的蛋白获得了高效表达。对表达的李斯特菌溶血素O(LLO)进行了纯化,以其作为靶抗原,采用间接ELISA方法检测了动物血清中的特异性LLO抗体。结果表明,用表达产物作为靶抗原可对LMO感染动物进行初步诊断,为建立基于LLO的动物李斯特菌病血清学诊断技术奠定了基础。

链球菌溶血素O提高细胞的通透性

背景:实验发现链球菌溶血素O引起的细胞通透在一定程度上是可逆的,链球菌溶血素O产生的孔道在Ca2+存在的情况下可以自然封闭。目的:观察链球菌溶血素O是否可以使猪成纤维细胞的通透性发生改变,及不同质量浓度的链球菌溶血素O对细胞状态的影响。方法:分别使用质量浓度为0,230,300,400μg/L的链球菌溶血素O溶液处理猪成纤维细胞,孵育50min后,加入PI染液,观察细胞的通透率。加入含Ca2+的培养液封闭细胞后,分别观察细胞的形态变化及增殖能力的变化。结果与结论:随着链球菌溶血素O溶液质量浓度的增加,细胞的通透率只轻度提高。链球菌溶血素O处理细胞后,细胞的形态没有发生明显的改变。质量浓度为230μg/L的链球菌溶血素O溶液对细胞的增殖能力无明显影响,而300μg/L和400μg/L的链球菌溶血素O溶液明显地降低了细胞的增殖能力。提示质量浓度为230μg/L的链球菌溶血素O溶液可以提高细胞的通透性,并保持细胞正常的形态及增殖能力。

单增李斯特菌溶血素O的功能研究进展

单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm,简称单增李斯特菌)是一种普遍存在的革兰阳性食源性病原体,可引起人类和一些动物的李斯特菌病。侵袭性李斯特菌病通常很严重,临床上表现为自然流产、败血症和脑膜脑炎,也可表现为发热性胃肠炎综合症。成孔蛋白单增李斯特菌溶血素O(Listeriolysin O,LLO,由hly基因编码)是一种重要的毒力因子,属于胆固醇依赖性细胞溶解素(cholesterol-dependent cytolysins,CDC)毒素,其通过膜穿孔机制介导Lm从吞噬体逃逸并引起李斯特菌病。最近的研究表明LLO除了主要的膜穿孔作用,还存在其他功能,在Lm感染过程中扮演了重要的角色。从LLO的功能和作用机制等方面综述了近些年对该毒素的研究进展,以便更好地理解单增李斯特菌的感染机制,为防治李斯特病的相关研究提供参考。

链球菌溶血素O抗原的原核表达及条件优化

目的构建链球菌溶血素O抗原(SLO)的重组表达质粒,并优化其在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法以A群链球菌DNA为模板,采用PCR法扩增SLO基因,将扩增的基因连接pET-32a(+)表达载体构建pET-32a(+)-SLO重组质粒,重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,转化后的表达菌经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导和自诱导的方式分别诱导及纯化,最终确定最佳的表达条件。结果 PCR扩增的基因大小与SLO基因大小一致,测序完全正确。不同浓度的IPTG诱导均为包涵体表达,且表达量均较低;自诱导的方式,不仅表达量明显提高,且实现了部分可溶性表达。结论成功构建了SLO的原核表达质粒,优化筛选出能高效可溶性表达的诱导条件,纯化获得了SLO重组融合蛋白质,为进一步的基础及临床研究应用奠定基础。

三种检测抗链球菌溶血素O方法的比较

目的 对 3种检测抗链球菌溶血素O(ASO)的方法进行比较。方法 同时用自动化散射比浊法、乳胶凝集试验和溶血抑制法检测 12 0例临床患者的血清ASO。结果 不同方法检测ASO阳性率 ,溶血抑制法为44 .17% (5 3/12 0 ) ,比浊法为 40 .83% (4 9/12 0 ) ,乳胶凝集法为 34 .16 % (4 1/12 0 ) ,3法检测结果呈平行关系 (r=0 .988～ 0 .997)。ASO水平较高 (>10 0 0kU/L)或较低水平增高时 ,乳胶法和溶血抑制法易有误差。结论 比浊法检测ASO敏感性好 ,结果重复性好 。

我院2013年儿童抗链球菌溶血素O检测结果分析

目的：了解不同年龄段、不同性别及不同季节儿童抗链球菌溶血素O（ASO）检测的阳性率,以便有效防治链球菌感染相关疾病。方法：选取我院儿科2013年就诊检测ASO的患儿4 052例,采用颗粒增强免疫透射比浊法检测ASO,从年龄、性别、季节三个方面对检测结果进行统计分析。结果：我院2013年儿童ASO检测阳性率为17.18%（696/4 052）,男童和女童的ASO检测阳性率分别为19.76%（472/2 389）和13.47%（224/1 663）（P〈0.01）;0~3岁、4~6岁、7~9岁、10~12岁、13~15岁儿童ASO检测阳性率分别为0.47%、7.94%、33.80%、42.02%、30.67%（P〈0.01）;第一、二、三、四季度儿童ASO检测阳性率分别为19.37%、16.69%、14.14%、18.84%（P〈0.01）。结论：ASO检测阳性多见于学龄期（〉6岁）儿童,在婴幼儿（0~3岁）少见;男童ASO检测阳性率高于女童;链球菌感染好发于冬季和春季。

免疫透射比浊法测定抗链球菌溶血素O和类风湿因子

目的 建立免疫透射比浊法测定 ASO、RF的方法。方法 用免疫透射比浊法测定 ASO、RF,并对其重复性、准确性、线性范围、相关性实验、干扰实验加以评价。结果 高、中、低三种浓度 ASO和 RF批内 CV分别为 2 .8% ,2 .9% ,3.1 %和 3.0 % ,3.2 % ,3.3% ;批间 CV为 3.9% ,4.1 % ,4.1 %和 4.1 % ,4.3% ,4.4% ;线性范围分别为 30～ 80 0 U/L,1 0～ 90 U/L;平均回收率分别为 1 0 0 .5%和 1 0 0 .1 %。与特种蛋白仪测定结果具有很好的相关性 (P<0 .0 5)。一定程度的溶血、脂血、黄疸对 ASO、RF的测定无明显干扰。结论 免疫透射比浊法的精确度好 ,快速 ,灵敏 ,与免疫散射比浊法有很好的相关性 ,可以作为测定ASO。

抗链球菌溶血素O在Cobas c501生化分析仪上的比对试验

目的:对"抗链球菌溶血素O诊断试剂盒"在Cobasc501生化分析仪上进行体外诊断和分析。方法:收集临床"风湿热"患者血标本135份,用已具备中国注册证和临床常规使用的免疫比浊方法与罗氏诊断产品(上海)有限公司"抗链球菌溶血素O诊断试剂盒"作比对检测,评价其试验结果。结果:用参比试剂和考核试剂共检测各类标本135份,参比试剂与考核试剂显著有关(r=0.966,y=1.204x-22.217,R2=0.9333)。结论:抗链球菌溶血素O在Cobasc501生化分析仪上的应用与参比试剂间总体的符合情况良好。

浅谈用胶乳凝集法和免疫透射比浊法检测抗链球菌溶血素O的临床价值

目的:探讨分析用胶乳凝集法和免疫透射比浊法检测抗链球菌溶血素O的临床价值。方法 :选取2014年6月1日~2014年12月31日我院接收的体检人员5025例作为研究对象,分别采用胶乳凝集法和免疫透射比浊法为其进行抗链球菌溶血素O的检测,观察对比两种检验方法的检测结果,并将对比的结果及所有患者的临床资料进行回顾性的分析。结果:在这5025份标本中,用胶乳凝集法检测抗链球菌溶血素O的阳性检出率为9.75%,用免疫透射比浊法检测抗链球菌溶血素O的阳性检出率为9.69%,二者之间的差异不显著(P>0.05),不具有统计学意义。将两种检测方法的检测结果进行交叉对比,发现在胶乳凝集法检查结果呈阳性的490份标本中,呈假阳性的标本有4份,而在免疫透射比浊法检查结果呈阳性的487份标本中,呈假阳性的标本有1份。用免疫透射比浊法检测抗链球菌溶血素O的准确性明显高于用胶乳凝集法检测抗链球菌溶血素O的准确性,差异显著(P<0.05),具有统计学意义。结论 :用免疫透射比浊法检测抗链球菌溶血素O的检测结果更为准确,该方法可作为临床上检测抗链球菌溶血素O的金标准。

人—人杂交瘤:分泌抗链球菌溶血素O单克隆抗体细胞株的建立

用人骨髓瘤细胞株和人脾脏细胞在PEG促进下进行人—人杂交,育选出能分泌抗链球菌溶血素O单克隆抗体杂交瘤S_(1)—19和S_(1)—22两株,共传了50多代,历时五个月,单克隆抗体分泌稳定,抗体为IgG型,杂交瘤染色体为68—76条而亲代细胞株仅为43条,证实杂交瘤是成功的。

重组单增李斯特菌溶血素O在HEK293T细胞中的分泌表达及活性分析

为研究单增李斯特菌分泌的溶血素O(LLO)的免疫佐剂作用,需要构建其真核表达载体,使其在动物体内进行分泌表达,从而发挥其生物佐剂活性。为此,本试验通过PCR方法从LM基因组DNA中扩增了LLO基因,并将其插入到带有CD5信号肽的质粒pcDNA3.1ACD5sp的信号肽下游构建成真核表达载体,然后转染人胚肾细胞HEK293T细胞使其分泌表达,用Ni-NTA琼脂糖凝胶层析法从培养基中分离纯化重组LLO蛋白,通过Western-blot对其进行鉴定,并用溶血试验鉴定其生物活性。结果表明,扩增的LLO基因序列与GenBank中的基因序列完全一致,在HEK293T细胞中表达的重组LLO在CD5信号肽介导下能被分泌到细胞外,并具有较强的溶血活性,这为进一步研究LLO的功能提供了必要的条件。

抗链球菌溶血素O与小儿急性呼吸道感染关系的多中心研究

目的探讨宝鸡地区抗链球菌溶血素O与小儿急性呼吸道感染(ARI)的关系,对儿科临床医师诊治小儿急性上呼吸道感染和经验选用抗生素提供指导。方法对宝鸡市5家医院儿科2010-08/2011-07小儿急性呼吸道感染病原学多中心调查时收集到的抗链球菌溶血素O检测结果进行汇总,结合已发表的宝鸡地区小儿急性呼吸道感染病原学多中心研究论文的相关摘要和其他临床资料进行分析。结果 848例小儿急性上呼吸道感染(AURI)住院儿咽拭子细菌培养结果阳性率24.9%。6324例小儿急性下呼吸道感染(ALRI)住院患儿痰细菌培养阳性率29.31%。5家医院共检测6591例急性呼吸道感染住院患儿血清中ASO的含量,阳性率为3.39%。儿童ALRI痰培养G+病原菌药敏试验结果显示,溶血性链球菌对儿科常规使用的青霉素、阿莫西林/克拉维酸、头孢唑啉等杀菌剂高度敏感。结论多中心、多方法联合检测结果,对指导本地区儿科临床医师诊治小儿急性上呼吸道感染和经验选用抗菌药物有重要的指导意义。

孩子抗链球菌溶血素O水平高怎么办

我孙子今年11岁了，身高142厘米，体重415千克，平素身体健康、食欲较旺盛，体型偏胖。去年8月因身体不适，到医院做了一次全面体检。血生化检查：碱性磷酸酶（ALP）226U／L、补体C31．85g／L、抗链球菌溶血素O（ASO）437．92IU／ml．这三项指标水平偏高，

225例体检红细胞沉降率与抗链球菌溶血素O抗体检测结果分析

红细胞沉降率是应用于临床诊断和观察某些疾病活动情况的一项重要指标,也是测定各种风湿病和炎症性疾病的最简便而又重要的检测手段。而人体感染溶血性链球菌后能产生相应的抗体,即抗链球菌溶血素(简称抗“O”),因A族溶血性链球菌引起的感染,占人类链球菌疾病的90％,尤其对活动性风湿热或急性肾炎的诊断具有较大意义。

血清抗链球菌溶血素O检测在强直性脊柱炎中的临床意义

目的:研究血清抗链球菌溶血素O(ASO)检测在强直性脊柱炎(AS)中的临床意义。方法随机选取60例AS患者作为研究组,另选60例健康体检者作为对照组。检查患者及对照组血清中ASO水平、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)及影像学资料,比较组间差异。结果①研究组60例患者中阳性26例,占43.3%,对照组60例中阳性仅10例,占16.7%,显著低于研究组,具有显著性差异,P﹤0.05。②比较可见,阳性组患者CRP、ESR明显高于阴性组,II级、III级、IV级患者明显多于阴性组,差异显著, P﹤0.05。结论 ASO水平的检测对AS诊断具有重要参考价值。

奥林巴斯AU5400检测血清抗链球菌溶血素O的测量范围评价

目的：评价奥林巴斯AU5400检测血清抗链球菌溶血素O（ASO）测量范围分析。方法参照EP6-A指南的要求收集高值（H）和低值（L ）的患者样本，按1L＋0H、0．8L＋0．2H、0．6L＋0．4H、0．4L＋0．6H、0．2L＋0．8H、0L＋1H配制方法，制成6个不同浓度的系列；将ASO含量为841 IU／mL的样本分别进行2、10、20、50、80、160倍稀释，将标本分别进行实验和评价。结果 AU5400测定ASO线性在8～1097 IU／mL良好；临床可报告范围为7～43764 IU／mL。结论奥林巴斯AU5400全自动生化分析仪检测ASO的测量范围可以满足临床要求。