SLC8A1-AS1靶向调控微小RNA-182-3p及对口腔鳞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA溶质运载蛋白家族8成员A1反义RNA 1(SLC8A1-AS1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学作用及其与微小RNA-182-3p(miR-182-3p)的靶向调控关系。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测OSCC组织和细胞(CAL-27、SCC-4、SCC-9和Tca8113)的SLC8A1-AS1和miR-182-3p水平。双荧光素酶报告实验鉴定SLC8A1-AS1和miR-182-3p的相互作用。将Tca8113细胞分为4组:对照组(空白对照)、SLC8A1-AS1过表达组(转染pcDNA3.1-SLC8A1-AS1+miR-182-3p阴性对照NC)、miR-182-3p过表达组(转染SLC8A1-AS1阴性对照pcDNA3.1+miR-182-3p模拟物mimics)和共过表达组(转染pcDNA3.1-SLC8A1-AS1+miR-182-3p mimics)。利用MTT法、划痕实验和Transwell小室实验检测SLC8A1-AS1和miR-182-3p对Tca8113细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果与癌旁组织相比,OSCC组织的SLC8A1-AS1水平下调,而miR-182-3p水平上调(P<0.05);与正常人口腔角质上皮细胞NHOK相比,OSCC细胞的SLC8A1-AS1水平下调,而miR-182-3p水平上调(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,miR-182-3p mimics降低了野生型SLC8A1-AS1的荧光素酶活性(P<0.05),而不影响突变型SLC8A1-AS1的荧光素酶活性(P>0.05)。与对照组相比,SLC8A1-AS1过表达组的Tca8113细胞活力降低至1.454±0.103、划痕愈合率降低至(17.416±1.645)%及穿膜细胞数量减少至(119.877±6.469)个,而miR-182-3p过表达组的Tca8113细胞活力增强至2.879±0.126、划痕愈合率升高至(73.929±7.488)%及穿膜细胞数量增多至(391.243±23.819)个,且与SLC8A1-AS1过表达组相比,共过表达组Tca8113细胞活力增强至2.228±0.109、划痕愈合率升高至(32.924±4.114)%及穿膜细胞数量增多至(234.356±38.766)个,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SLC8A1-AS1通过靶向miR-182-3p在OSCC中发挥抑癌作用,SLC8A1-AS1/miR-182-3p轴可作为OSCC治疗的新靶点。

lncRNA SLC16A1-AS1调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路对脑胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA 1(lncRNA SLC16A1-AS1)调节微小RNA-532-3p(miR-532-3p)/肌动蛋白结合蛋白2(TAGLN2)信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法实时荧光定量PCR检测胶质瘤细胞中lncRNA SLC16A1-AS1表达水平,筛选最佳干预细胞系;通过荧光原位杂交实验、下拉实验、双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SLC16A1-AS1、TAGLN2与miR-532-3p的靶向调控关系。①将U251细胞分为小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、si-SLC16A1-AS1组、si-SLC16A1-AS1+NC inhibitor组、si-SLC16A1-AS1+miR-532-3p inhibitor组、miR-NC组、miR-532-3p mimics组、miR-532-3p mimics+pcDNA组、miR-532-3p mimics+TAGLN2组:检测U251细胞的增殖、迁移和侵袭变化;Western blot检测TAGLN2、E-钙黏附蛋白、波形蛋白表达水平。②小鼠体内肿瘤形成实验:验证lncRNA SLC16A1-AS1对胶质瘤生长的影响。结果lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平升高(P<0.05);U251细胞FISH实验、下拉实验、双荧光素酶基因实验证实lncRNA SLC16A1-AS1,TAGLN2与miR-532-3p存在靶向调控关系;抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p可显著抑制U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(P<0.05);抑制miR-532-3p表达或过表达TAGLN2可逆转抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达或过表达miR-532-3p对U251细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化的抑制作用(P<0.05)。小鼠体内实验显示,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可显著抑制移植瘤的生长(P<0.05)。结论lncRNA SLC16A1-AS1在胶质瘤细胞中表达水平上调,抑制lncRNA SLC16A1-AS1表达可通过调节miR-532-3p/TAGLN2信号通路,进而抑制胶质瘤的恶性进展。