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溶酶体相关膜蛋白3通过VEGF/AKT通路抑制PC-3细胞增殖、转移及血管生成
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作者 陈灿伟 廖壮文 +3 位作者 范子文 黄帅 黄彦 陈斌伟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期182-187,共6页
目的探索LAMP3对PC-3细胞增殖、迁移及血管生成的影响。方法Western blot(WB)及RT-PCR检测LAMP3在正常前列腺上皮细胞及前列腺癌骨转移细胞中的表达。构建稳定沉默LAMP3的PC-3细胞,分别使用CCK8、划痕试验、Transwell试验检测LAMP3对PC-... 目的探索LAMP3对PC-3细胞增殖、迁移及血管生成的影响。方法Western blot(WB)及RT-PCR检测LAMP3在正常前列腺上皮细胞及前列腺癌骨转移细胞中的表达。构建稳定沉默LAMP3的PC-3细胞,分别使用CCK8、划痕试验、Transwell试验检测LAMP3对PC-3细胞增殖、迁移与侵袭的影响。通过ELISA及血管生成试验检测血管内皮生长因子VEGF、基质金属酶MMP9的表达及HUVEC细胞的血管生成,最后使用WB及RT-PCR检测VEGF、AKT/p-AKT的表达。结果LAMP3在前列腺癌细胞中的表达较正常前列腺上皮细胞明显升高,以PC-3细胞最明显(P<0.05)。沉默LAMP3能抑制PC-3细胞的增殖、迁移与侵袭能力,同时能抑制VEGF、MMP9的表达及PC-3细胞诱导的血管生成,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,LAMP3能下调PC-3细胞中VEGF、AKT/p-AKT的表达。结论LAMP3能通过调控VEGF/AKT通路影响PC-3细胞的增殖、转移和血管生成,LAMP3可能是前列腺癌骨转移的潜在治疗靶点之一。 展开更多
关键词 溶酶体相关蛋白3 前列腺癌 骨转移 血管内皮生长因子 血管生成
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溶酶体相关膜蛋白2AshRNA对乳腺癌细胞株紫杉醇耐药的影响 被引量:2
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作者 韩起 陈莎 +4 位作者 杨明珍 张竹君 陈安 胡川闽 李淑慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期351-354,共4页
目的制备针对人溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)的shRNA重组慢病毒,获得稳定低表达LAMP2A的MDA-MB-231乳腺癌细胞株,观察LAMP2A分子下调对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性的影响。方法通过对LAMP2A的mRNA序列分析,设计了4条shRNA,通过基因重组技术构... 目的制备针对人溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)的shRNA重组慢病毒,获得稳定低表达LAMP2A的MDA-MB-231乳腺癌细胞株,观察LAMP2A分子下调对乳腺癌细胞紫杉醇耐药性的影响。方法通过对LAMP2A的mRNA序列分析,设计了4条shRNA,通过基因重组技术构建pGLV-EGFP-shRNA慢病毒表达质粒,并测序鉴定。将构建的表达质粒和包装质粒共转染人胚肾HEK293T细胞包装产生慢病毒,测定病毒滴度。将构建的shRNA慢病毒表达载体感染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株后,Western blot法检测LAMP2A表达,验证蛋白表达抑制效果。采用1 nmol/L、10 nmol/L、100nmol/L的紫杉醇处理LAMP2A低表达乳腺癌细胞株后,用MTT法观察LAMP2A低表达组和对照组之间增殖效率的差异。结果测序结果显示重组慢病毒质粒构建正确,病毒滴度达2×108TU/mL。乳腺癌稳定细胞株中LAMP2A蛋白表达量显著降低。在10 nmol/L、100 nmol/L紫杉醇处理后,LAMP2A低表达乳腺癌细胞株对紫杉醇耐药性明显降低(P<0.05)。结论成功构建了人的LAMP2A基因shRNA慢病毒载体,获得了稳定低表达LAMP2A的乳腺癌细胞株,证实LAMP2A下调能够降低乳腺癌细胞株对紫杉醇的耐药性。 展开更多
关键词 溶酶体相关蛋白2A 小发夹RNA 慢病毒载体 紫杉醇
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食管癌组织中溶酶体相关膜蛋白2a的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 闵燕飞 黄荣 +1 位作者 蒋军 何瀚 《实用临床医药杂志》 CAS 2020年第7期72-76,共5页
目的探讨溶酶体相关膜蛋白2a(LAMP2a)在食管癌组织中的表达及其临床意义.方法采用免疫组织化学方法检测58例患者的食管癌组织标本和30例正常食管组织中LAMP2a的表达水平,分析其与临床病理特征的相关性.结果LAMP2a在食管癌组织中呈显著... 目的探讨溶酶体相关膜蛋白2a(LAMP2a)在食管癌组织中的表达及其临床意义.方法采用免疫组织化学方法检测58例患者的食管癌组织标本和30例正常食管组织中LAMP2a的表达水平,分析其与临床病理特征的相关性.结果LAMP2a在食管癌组织中呈显著高表达,与肿瘤临床分期(P<0.001)、T分期(P=0.043)及分化程度(P=0.018)密切相关,与性别(P=0.740)、年龄(P=0.590)和淋巴结转移(P=0.188)无显著相关性;LAMP2a表达水平与患者的预后呈负相关(P<0.05);Cox比例风险模型显示,肿瘤浸润深度和LAMP2a蛋白表达是食管癌患者独立影响因素(P<0.05).结论LAMP2a的表达可成为肿瘤早期诊断及预后状况评估的有效指标. 展开更多
关键词 溶酶体相关蛋白2a 食管癌 免疫组化法 预后
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抗溶酶体相关膜蛋白2抗体在抗中性粒细胞胞质抗体相关血管炎肾损害中的研究进展 被引量:2
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作者 李小伟 刘志红 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期455-460,共6页
抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关血管炎(AAV)是继发性肾损害的重要病因之一,发病率及致死率均较高,且病情易反复,治疗困难,其发病机制目前并不清楚。深入研究AAV致病原因及发病机制是提高疗效的重要方法,而抗溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)... 抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关血管炎(AAV)是继发性肾损害的重要病因之一,发病率及致死率均较高,且病情易反复,治疗困难,其发病机制目前并不清楚。深入研究AAV致病原因及发病机制是提高疗效的重要方法,而抗溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)抗体作为新发现的ANCA抗体,与AAV的关系成为目前研究的焦点之一。虽然目前研究结果并不一致,但随着细菌感染、Ⅰ型菌毛蛋白H(FimH)与LAMP-2分子模拟、动物实验及人体实验观察的深入,抗LAMP-2抗体将可能进一步揭示AAV肾损害发病机制,并可能成为AAV诊断、监测病情活动的新的标志物,为免疫抑制剂个体化治疗提供依据。本文就抗LAMP-2抗体与AAV肾损害的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 抗中性粒细胞胞质抗体相关血管炎 溶酶体相关蛋白2抗体 分子模拟 发病机制
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胃癌组织中溶酶体相关四次跨膜蛋白B、三叶因子家族1表达与胃癌的关系 被引量:5
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作者 宋铁英 李莹莹 郭娟 《安徽医药》 CAS 2021年第11期2219-2222,I0003,共5页
目的探讨胃癌组织中溶酶体相关四次跨膜蛋白B(LAPTM4B)、三叶因子家族1(TFF1)蛋白表达与胃癌的关系。方法选取2015年8月至2018年6月郑州人民医院收集的80例胃癌组织及40例胃癌癌旁组织,采用免疫组织化学染色技术检测LAPTM4B、TFF1蛋白... 目的探讨胃癌组织中溶酶体相关四次跨膜蛋白B(LAPTM4B)、三叶因子家族1(TFF1)蛋白表达与胃癌的关系。方法选取2015年8月至2018年6月郑州人民医院收集的80例胃癌组织及40例胃癌癌旁组织,采用免疫组织化学染色技术检测LAPTM4B、TFF1蛋白表达情况,观察不同病灶最大径、TNM分期、组织学分化程度、淋巴结转移情况、浸润程度及胃癌组织中LAPTM4B、TFF1蛋白的阳性表达率。结果胃癌组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率为61.25%、TFF1蛋白阳性表达率为68.75%,胃癌癌旁组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率为25.00%、TFF1蛋白阳性表达率为35.00%;胃癌组织均高于癌旁组织(P<0.05)。在TNM分期(Ⅲ期+Ⅳ期)、发生淋巴结转移的胃癌组织中LAPTM4B蛋白阳性表达率分别为78.79%、74.42%,高于TNM分期(Ⅰ期+Ⅱ期)48.94%、未发生淋巴结转移45.95%的病人(P<0.05);在TNM分期(Ⅲ期+Ⅳ期)、发生淋巴结转移、低分化的胃癌组织中TFF1蛋白阳性表达率分别为90.91%、81.40%、87.10%,高于TNM分期(Ⅰ期+Ⅱ期)53.19%、未发生淋巴结转移54.05%、高分化和中分化的57.14%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌组织中LAPTM4B、TFF1表达强度明显较癌旁组织增强,可能与胃癌的发生及发展有一定的关系。 展开更多
关键词 胃肿瘤 溶酶体相关四次跨膜蛋白(LAPTM4B) 三叶因子家族1
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溶酶体相关4次跨膜蛋白质基因多态性与肝癌易感性的关系 被引量:1
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作者 孙桂珍 李卓 +3 位作者 郝娃 牛京勤 殷继明 严艳 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第8期908-911,共4页
目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质B(lysosome-associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因多态性与肝癌易感性的关系.方法:应用病例对照研究方法,收集190例肝癌患者、190例慢性乙型肝炎患者、175例健康献血者全血,... 目的:探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白质B(lysosome-associated protein transmembrane 4 beta,LAPTM4B)基因多态性与肝癌易感性的关系.方法:应用病例对照研究方法,收集190例肝癌患者、190例慢性乙型肝炎患者、175例健康献血者全血,分离白细胞,提取基因组DNA,采用特异性引物PCR方法,扩增LAPTM4B第一外显子5′UTR内的部分序列,对三组人群进行分析研究.x^2检验分析肝癌组与对照组LAPTM4B的基因多态性和其他相关因素的相关性.结果:LAPTM4B等位基因在三组观察对象中的分布,^*1和^*2在健康对照组的频率分别是75.71%和24.29%,慢肝组73.16%和26、84%,肝癌组中66.84%和33.45%,三组比较等位基因分布频率有统计学意义,健康对照组与肝癌组比较有统计学意义(x^2=6.979,P=0.008).LAPTM4B的基因型LAPTM4B1^*1型、LAPTM4B^*1/2混合型和LAPTM482^*2型在肝癌组中的频率分别是37.9%、57.9%和4.2%、慢肝组50.5%、45.3%和4.2%、健康对照组56.6%、38.3%和5.1%,三组间三种基因型分布频率比较有统计学意义(x^2=14.854,P〈0.005).结论:基因型^*1/2和等位基因^*2可能与肝癌的发生有关. 展开更多
关键词 肝癌易感性 基因多态性 乙型肝炎 溶酶体相关4次跨膜蛋白质B
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食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶-3和溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35的表达 被引量:1
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作者 曹婧 《肿瘤基础与临床》 2018年第1期12-14,共3页
目的探讨食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35(LAPTM4B-35)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测120例食管鳞癌和60例癌旁正常食管黏膜组织中MMP-3和LAPTM4B-35的表达。结果食管鳞癌组织中MMP-... 目的探讨食管鳞癌组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35(LAPTM4B-35)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测120例食管鳞癌和60例癌旁正常食管黏膜组织中MMP-3和LAPTM4B-35的表达。结果食管鳞癌组织中MMP-3和LAPTM4B-35的阳性率分别为75.00%(90/120)、58.33%(70/120),癌旁正常食管黏膜组织中分别为15.00%(9/60)、10.00%(6/60),差异均有统计学意义(P均<0.05)。食管鳞癌组织中MMP-3的表达与浸润纤维膜与否、TNM分期、淋巴结转移与否有关(P均<0.05)。食管鳞癌组织中LAPTM4B-35的表达与浸润纤维膜与否、TNM分期有关(P均<0.05)。食管鳞癌组织中MMP-3和LAPTM4B-35的表达呈正相关关系(r=0.488,P<0.001)。结论食管鳞癌组织中MMP-3和LAPTM4B-35具有较高的阳性表达水平,且两者可能与食管鳞癌的侵袭转移有关。 展开更多
关键词 食管鳞癌 基质金属蛋白酶-3 溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35
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MPO-ANCA相关性血管炎中抗溶酶体相关膜蛋白-2抗体的作用初探 被引量:3
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作者 桂雅迪 帅宗文 +3 位作者 胡子盈 张铭明 武琳琳 陈珊宇 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第8期1196-1199,共4页
目的初步探讨抗溶酶体相关膜蛋白-2抗体(LAMP-2A)在髓过氧化物酶抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎(MPO-AAV)中的存在及意义。方法采用ELISA法分别检测入选者周围血的LAMP-2A、髓过氧化物酶抗中性粒细胞胞质抗体(MPO-ANCA)、溶酶体相关... 目的初步探讨抗溶酶体相关膜蛋白-2抗体(LAMP-2A)在髓过氧化物酶抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎(MPO-AAV)中的存在及意义。方法采用ELISA法分别检测入选者周围血的LAMP-2A、髓过氧化物酶抗中性粒细胞胞质抗体(MPO-ANCA)、溶酶体相关膜蛋白-2(LAMP-2)、髓过氧化物酶(MPO)及活化补体C5a水平,比较LAMP-2A阳性与阴性患者间临床资料及上述指标间的差别,并分析其相关性。结果MPO-AAV患者中LAMP-2A的阳性率为48.44%,阳性率在有无肾、肺损害患者中差异无统计学意义;病例组LAMP-2水平显著高于对照组(P<0.001);LAMP-2A阳性患者C5a、MPO及LAMP-2水平显著高于阴性患者(P<0.01),并且LAMP-2A分别与C5a、MPO及LAMP-2水平呈显著正相关性(rs=0.056、0.525、0.723,P<0.001),与MPO-ANCA及BVAS无明显相关性。结论MPO-AAV中自身抗体LAMP-2A常见,其独立于自身抗体MPO-ANCA,可能通过促进补体旁路激活、结合升高的自身抗原(LAMP-2)等途径影响MPO-AAV的临床损害,更确切的作用和意义有待进一步探讨。 展开更多
关键词 ANCA相关性血管炎 髓过氧化物酶 溶酶体相关蛋白-2抗体 溶酶体相关蛋白-2 补体激活 致病机制
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系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中微管相关蛋白轻链3和溶酶体相关膜蛋白2基因表达及其临床意义 被引量:4
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作者 吴邱红 贾艾敏 +4 位作者 袁佳利 刘静 杨明辉 陈勇 袁国华 《中华临床免疫和变态反应杂志》 2018年第4期373-378,共6页
目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中巨自噬标志性分子微管相关蛋白轻链3 (LC3)和分子伴侣介导的自噬(CMA)标志性分子溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)基因表达,探讨其与SLE发病的关系。方法纳入2017年11月至2018年3月... 目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中巨自噬标志性分子微管相关蛋白轻链3 (LC3)和分子伴侣介导的自噬(CMA)标志性分子溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)基因表达,探讨其与SLE发病的关系。方法纳入2017年11月至2018年3月在川北医学院附属医院风湿免疫科诊治的88例SLE患者(SLE),采用密度梯度离心法分离外周血单个核白细胞(PBMCs);采用实时荧光定量PCR法测定患者PBMCs中LC3和LAMP-2在mRNA水平的表达量;采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分判断疾病活动度,分析LC3和LAMP-2表达与SLE患者临床特点及病情活动度的相关性。同期纳入年龄匹配的40例健康体检者作为正常对照组。结果正常对照组受检者PBMCs中LC3 mRNA和LAMP-2 mRNA相对表达量分别为1. 021±0. 551和1. 015±0. 667,SLE组患者分别为0. 783±0. 435和2. 402±2. 233,组间比较差异均有统计学意义(P=0. 020、0. 000)。SLE患者PBMCs中LAMP-2 mRNA表达水平与SLEDAI呈明显正相关(rs=0. 312,P=0. 003),LC3mRNA表达水平与SLEDAI无明显相关性(rs=-0. 175,P=0. 103)。LAMP-2 mRNA表达量升高患者肾脏损害发生率明显高于非升高患者(40. 7%vs. 16. 3%),LC3 mRNA表达量降低患者的血液系统受累率明显高于无LC3 mRNA表达降低患者(65. 2%vs. 32. 3%),差异均有统计学意义(P=0. 013、0. 006)。不同LC3 mRNA和LAMP-2 mRNA表达水平组实验室检查指标和治疗效果的患者分布差异均无统计学意义(均P>0. 05)。结论 SLE患者LC3 mRNA表达水平下调,LAMP-2 mRNA表达水平上调,提示SLE患者存在巨自噬功能不足。SLE患者CMA功能增强,并且与肾脏和血液系统受累有关。 展开更多
关键词 微管相关蛋白轻链3 溶酶体相关蛋白2 自噬 分子伴侣介导的自噬 系统性红斑狼疮
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慢病毒介导的shRNA沉默溶酶体相关膜蛋白2A表达可抑制多发性骨髓瘤细胞增殖 被引量:2
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作者 李礼轩 李佳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期605-608,614,共5页
目的研究短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体下调多发性骨髓瘤细胞中溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)表达对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响。方法将构建的shRNA慢病毒表达载体感染人MM.1S多发性骨髓瘤细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株,Western blot法... 目的研究短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体下调多发性骨髓瘤细胞中溶酶体相关膜蛋白2A(LAMP2A)表达对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响。方法将构建的shRNA慢病毒表达载体感染人MM.1S多发性骨髓瘤细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定细胞株,Western blot法验证LAMP2A蛋白表达抑制效果;MTT法观察LAMP2A对MM.1S细胞增殖的影响及其对辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)抗MM.1S细胞的影响,乳酸检测观察LAMP2A对糖酵解的影响。结果在构建人LAMP2A-shRNA重组慢病毒载体的基础上,获得稳定低表达LAMP2A的多发性骨髓瘤细胞株;下调LAMP2A表达明显抑制MM.1S细胞的增殖并增强SAHA抗骨髓瘤细胞的作用,下调LAMP2A表达抑制MM.1S细胞乳酸分泌。结论下调多发性骨髓瘤细胞LAMP2A的表达可抑制多发性骨髓瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 溶酶体相关蛋白2A SHRNA 慢病毒载体 SAHA
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溶酶体相关膜蛋白3过表达促进肝细胞脂质沉积 被引量:2
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作者 宋铃榆 廖晓玉 +1 位作者 郑宏庭 杨仕明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第21期2059-2065,共7页
目的探讨溶酶体相关膜蛋白3(lysosome associated membrane protein 3,LAMP3)对肝细胞脂质代谢的作用。方法以肝癌细胞系Huh7为研究对象,利用qRT-PCR及Western blot法检测游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)0.4 mmol/L处理后肝细胞LAMP... 目的探讨溶酶体相关膜蛋白3(lysosome associated membrane protein 3,LAMP3)对肝细胞脂质代谢的作用。方法以肝癌细胞系Huh7为研究对象,利用qRT-PCR及Western blot法检测游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)0.4 mmol/L处理后肝细胞LAMP3表达变化;过表达LAMP3后,分别使用油红染色及甘油三酯检测试剂盒检测肝细胞内脂滴及甘油三酯沉积情况;采用ATP及β-羟基丁酸检测试剂盒检测细胞内ATP及β-羟基丁酸含量变化;过表达LAMP3,使用qRT-PCR、Western blot法检测脂质合成相关基因PPARγ与SCD-1及脂质分解相关基因CPT1A与PGC-1α表达变化。结果 FFAs处理后肝细胞Huh7中LAMP3表达显著上调(P<0.05);过表达LAMP3可显著促进肝细胞内脂滴和甘油三酯的沉积(P<0.05);过表达LAMP3对肝细胞内ATP及β-羟基丁酸含量的影响差异无统计学意义(P>0.05);过表达LAMP3可促进PPARγ及SCD-1表达(P<0.05),但对CPT1A、PGC-1α表达的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LAMP3可通过调控脂肪合成促进肝细胞内脂质沉积。 展开更多
关键词 溶酶体相关蛋白3 肝细胞脂质代谢 甘油三酯 油滴
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溶酶体相关膜蛋白1在结直肠癌的表达及其与临床预后的相关性
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作者 潘英 杨俊荣 黄晓丽 《中国临床研究》 CAS 2024年第3期383-387,391,共6页
目的 检测溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)在结直肠癌(CRC)的表达情况同时研究LAMP1表达与CRC重要临床病理指标,尤其是疾病预后的关系。方法 通过生物信息学分析在大数据层面检索LAMP1在CRC的表达情况和预后特性。分别在10例CRC肿瘤组织和包... 目的 检测溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)在结直肠癌(CRC)的表达情况同时研究LAMP1表达与CRC重要临床病理指标,尤其是疾病预后的关系。方法 通过生物信息学分析在大数据层面检索LAMP1在CRC的表达情况和预后特性。分别在10例CRC肿瘤组织和包含60例CRC样本的组织芯片中进行qPCR和免疫组化检测,使用单因素及多因素Cox回归法及Kaplan-Meier生存曲线分析影响CRC预后的因素。结果 大数据显示LAMP1蛋白主要定位于溶酶体,在CRC细胞系上有不同程度的高表达,同时在CRC肿瘤组织中显著高于正常对照组织,高表达LAMP1的CRC患者无复发生存率和总生存率均低于低表达LAMP1患者。临床10例qPCR及免疫组化结果均显示CRC中LAMP1表达明显高于癌旁对照组织(P<0.05)。在队列60例分析中,单因素Cox模型分析示,LAMP1表达(P=0.030)、肿瘤分化(P=0.041)、CEA水平(P=0.028)及远处转移(P=0.002)与CRC病例的预后显著相关;多因素分析示,肿瘤分化(P=0.006)及远处转移(P=0.041)是其独立预后因素;生存分析示,LAMP1高表达、肿瘤分化差、CEA水平≥15 ng/mL及远处转移阳性的患者总生存期较短。结论 LAMP1在CRC中存在异常高表达且LAMP1表达与CRC恶性表型明显相关。LAMP1表达可作为CRC预后的预测指标。 展开更多
关键词 结直肠癌 溶酶体相关蛋白1 生物信息学 免疫组化 淋巴转移 肿瘤分化 远处转移
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青光安颗粒剂含药血清对RGC5细胞损伤模型线粒体自噬及相关蛋白的影响 被引量:3
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作者 刘倩宏 陈立浩 +3 位作者 时健 朱冰瑶 曾令聪 姚小磊 《湖南中医药大学学报》 CAS 2021年第10期1517-1522,共6页
目的观察青光安颗粒剂含药血清对视网膜神经节细胞-5(retinal ganglion cells-5,RGC-5)损伤模型中线粒体自噬和相关蛋白的影响。方法将14只大鼠随机分为空白对照组(3只)和青光安组(11只)。青光安组灌胃青光安颗粒剂,空白对照组灌胃同等... 目的观察青光安颗粒剂含药血清对视网膜神经节细胞-5(retinal ganglion cells-5,RGC-5)损伤模型中线粒体自噬和相关蛋白的影响。方法将14只大鼠随机分为空白对照组(3只)和青光安组(11只)。青光安组灌胃青光安颗粒剂,空白对照组灌胃同等剂量的生理盐水,1次/d,灌胃7 d,第7天灌胃后提取含药血清和空白血清。培养RGC-5细胞,用谷氨酸毒性模拟青光眼所造成的神经细胞损伤,CCK8法筛选合适的含药血清和谷氨酸浓度。细胞分组为正常细胞组、空白血清组(谷氨酸+空白血清)、含药血清组(谷氨酸+含药血清)、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)+空白血清组(谷氨酸+3-MA+空白血清)、3-MA+含药血清组(谷氨酸+3-MA+含药血清组)。细胞培养24 h后,荧光共定位检测线粒体自噬发生情况;Western blot检测微管相关蛋白轻链3(microtubule associated protein light chain 3,LC3)中LC3-Ⅱ/LC3-I、溶酶体相关膜蛋白1(lysosome associated membrane protein1,LAMP1)蛋白的表达。结果通过CCK8结果筛选,确定谷氨酸最佳的作用浓度为20 mmol/L,空白血清和含药血清的作用浓度均为20%。与空白血清组相比,含药血清组、3-MA+空白血清组和3-MA+含药血清组的溶酶体含量显著降低(P<0.05)。与空白血清组相比,含药血清组、3-MA+空白血清组和3-MA+含药血清组中LAMP1和LC3-Ⅱ/LC3-I蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与3-MA+空白血清组相比,3-MA+含药血清组中LAMP1和LC3-Ⅱ/LC3-I蛋白表达水平水平显著降低(P<0.05)。结论青光安颗粒剂含药血清对青光眼损伤的保护作用可能通过抑制细胞的线粒体自噬,调控LAMP1和LC3-Ⅱ/LC3-I蛋白的表达,从而起到对RGCs的保护作用。 展开更多
关键词 青光眼 视网膜神经节细胞 青光安颗粒剂 谷氨酸 3-甲基腺嘌呤 微管相关蛋白轻链3 溶酶体相关蛋白1
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模拟失重大鼠胸主动脉和腹主动脉溶酶体相关分子表达改变
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作者 谷政慧 李方方 +1 位作者 谢小萍 暴军香 《心脏杂志》 CAS 2021年第1期61-66,71,共7页
目的研究四周尾部悬吊模拟失重大鼠胸主动脉(thoracic aorta, TA)和腹主动脉(abdominal aorta, AA)溶酶体相关分子的基因和蛋白表达改变。方法采用4周尾部悬吊大鼠模拟失重对心血管系统的影响,通过Western blot技术、免疫组织化学染色... 目的研究四周尾部悬吊模拟失重大鼠胸主动脉(thoracic aorta, TA)和腹主动脉(abdominal aorta, AA)溶酶体相关分子的基因和蛋白表达改变。方法采用4周尾部悬吊大鼠模拟失重对心血管系统的影响,通过Western blot技术、免疫组织化学染色和实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测溶酶体相关膜蛋白1(lysosomal associated membrane protein 1, LAMP1),调控溶酶体合成的转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)、转录因子E3(transcription factor E3, TFE3)以及溶酶体相关基因包括LAMP1、酸性神经酰胺酶(N-acylsphingosine amidohydrolase 1, ASAH1)、液泡型ATP酶转运协助蛋白1(adenosine triphosphatase(ATPase)H+ transporting accessoryprotein 1, ATP6AP1)、液泡型ATP酶H亚基(AT Pase H+transporting V1 subunit H,ATP6V1H)以及粘脂蛋白1(mucolipin 1,MCOLN1)的蛋白表达、分布和m RNA水平变化。结果 Western blot显示,与对照(control, CTR)组相比,悬吊(hindlimb unloading tail suspension, HU)组大鼠TA和AA的LAMP1蛋白表达均显著降低(P<0.05)。免疫组化则显示LAMP1主要分布于TA和AA的内膜和中膜;CTR大鼠TA内膜、中膜的LAMP1蛋白表达均显著高于AA(P<0.05);与CTR组相比,HU组大鼠TA、AA内膜LAMP1表达无明显变化,但在TA中膜呈现均匀的表达降低,而在AA中膜则呈现不均匀的表达降低(P<0.05);qRT-PCR显示,与CTR组比较,溶酶体相关基因表达在HU组大鼠TA显著增加(P<0.05),但在AA则显著降低(P<0.05)。转录因子TFEB和TFE3呈现与溶酶体相关基因相同变化,蛋白表达在HU组大鼠TA和AA中均显著降低(P<0.05),但基因表达在TA增加,在AA降低(P<0.05)。结论 HU组大鼠TA和AA溶酶体相关蛋白表达均降低,但基因转录及转录因子表达呈现部位特异性改变,可能参与动脉重塑过程。 展开更多
关键词 模拟失重 大鼠 胸主动脉 腹主动脉 溶酶体 溶酶体相关蛋白1 转录因子EB 转录因子E3
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sFlt-1与LAMP-2在ANCA相关性肾炎患者血清中的表达水平及其相关性分析 被引量:6
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作者 翟英 赵明 +2 位作者 李向东 李毅 沈海燕 《临床肾脏病杂志》 2018年第12期748-751,共4页
目的探究可溶性血管内皮细胞生长因子受体1(sFlt-1)与溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)在抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关性肾炎患者血清中的表达水平及其相关性。方法选择2016年10月至2017年10月间90例ANCA相关性肾炎患者作为研究组,根据24h... 目的探究可溶性血管内皮细胞生长因子受体1(sFlt-1)与溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)在抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关性肾炎患者血清中的表达水平及其相关性。方法选择2016年10月至2017年10月间90例ANCA相关性肾炎患者作为研究组,根据24h尿蛋白水平分为低蛋白尿组和高蛋白尿组。选择同期单纯慢性肾小球肾炎患者共90例作为对照组以及50例健康者作为健康组。分别比较不同组间的血清和尿液中的sFlt-1和LAMP-2水平,并分别研究sFlt-1和LAMP-2水平与ANCA相关性肾炎以及24h尿蛋白的相关性。结果研究组血清和尿液中的sFlt-1和LAMP-2水平均显著高于对照组和健康组(P<0.05)。将尿液和血清中的sFlt-1和LAMP-2纳入Logistic多元回归分析,结果显示血清LAMP-2以及尿液LAMP-2是ANCA相关性肾炎的高危因素(P<0.05)。在ANCA相关性肾炎患者(研究组)中,高蛋白尿组患者血清和尿液中的sFlt-1和LAMP-2水平均显著高于低蛋白尿组(P<0.05),并且均显著高于健康组(P<0.05)。血清和尿液中sFlt-1和LAMP-2与ANCA相关性肾炎患者24h尿蛋白呈现显著的正相关性(P<0.05)。结论慢性肾小球肾炎患者血清和尿液中sFlt-1和LAMP-2水平显著升高,ANCA相关性肾炎患者LAMP-2水平显著高于慢性肾小球肾炎患者,并且血清和尿液中LAMP-2是ANCA相关性肾炎的高危因素。 展开更多
关键词 慢性肾小球肾炎 ANCA相关性肾炎 可溶性血管内皮细胞生长因子受体1 溶酶体相关蛋白2
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仙附温阳通络饮对血栓闭塞性脉管炎模型大鼠抗中性粒细胞抗体相关抗原的影响 被引量:3
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作者 赵晶 王学军 +2 位作者 贲睿 张树明 李怀军 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2015年第6期80-83,共4页
目的观察仙附温阳通络饮对血栓闭塞性脉管炎(TAO)模型大鼠抗中性粒细胞抗体(ANCA)相关抗原的影响,探讨其作用机制。方法 SPF级Wistar雄性成年大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、脉络宁颗粒组及仙附温阳通络饮低、中、高剂量组。以股... 目的观察仙附温阳通络饮对血栓闭塞性脉管炎(TAO)模型大鼠抗中性粒细胞抗体(ANCA)相关抗原的影响,探讨其作用机制。方法 SPF级Wistar雄性成年大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、脉络宁颗粒组及仙附温阳通络饮低、中、高剂量组。以股动脉注射月桂酸钠溶液方法造模。造模后次日开始给药,假手术组、模型组给予蒸馏水灌胃,其他各组给予相应药物灌胃。给药15 d后取材,采用紫外分光光度法检测血清中髓过氧化物酶(MPO)活性,免疫组化法检测股动脉及周围组织中蛋白酶3(PR3)和溶酶体相关膜蛋白-2(LAMP-2)蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清中MPO活性及PR3、LAMP-2蛋白表达均升高;与模型组比较,各给药组MPO活性及PR3、LAMP-2蛋白表达降低,其中仙附温阳通络饮中剂量组下降最明显。结论仙附温阳通络饮可能通过降低ANCA相关抗原水平,进一步抑制体液免疫功能亢进。 展开更多
关键词 仙附温阳通络饮 血栓闭塞性脉管炎 抗中性粒细胞抗体 髓过氧化物酶 蛋白酶3 溶酶体相关蛋白-2 体液免疫 大鼠
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远隔缺血处理对大鼠脑组织TFEB-溶酶体功能影响的研究 被引量:1
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作者 李志伟 崔小丽 +3 位作者 刘杨 刘小玲 吕桦 刘军 《脑与神经疾病杂志》 2020年第5期305-309,共5页
目的观察远隔缺血处理(RIPC)对大鼠脑组织转录因子EB(TFEB)-溶酶体功能的影响。方法SD大鼠随机分为3组:对照组、RIPC 24h组和RIPC 10d组。1次RIPC为3个循环的大鼠双后肢缺血-再灌注处理,每个循环缺血10 min,再灌注10 min。RIPC 24h组给... 目的观察远隔缺血处理(RIPC)对大鼠脑组织转录因子EB(TFEB)-溶酶体功能的影响。方法SD大鼠随机分为3组:对照组、RIPC 24h组和RIPC 10d组。1次RIPC为3个循环的大鼠双后肢缺血-再灌注处理,每个循环缺血10 min,再灌注10 min。RIPC 24h组给予RIPC 1次,RIPC 10d组给予RIPC1次.d^-1,共10d。RIPC处理结束后留取大鼠血清,ELISA进行组织蛋白酶B(CTSB)测定,取出大鼠脑组织,ELISA进行CTSB测定,Western-blot进行溶酶体相关膜蛋白-1(LAMP-1)、TFEB测定。结果三组大鼠血清CTSB无差异,与对照组比较,RIPC 24h组大鼠脑组织CTSB以及细胞核内TFEB的含量明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。RIPC 10d组大鼠进一步增加。与对照组相比,RIPC 24h组大鼠脑组织LAMP-1的含量有增加趋势,但差异无统计学意义;RIPC 10d组大鼠脑组织LAMP-1的含量明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论RIPC可能通过激活脑组织TFEB,促进大鼠脑组织溶酶体相关蛋白的表达,增强溶酶体功能。 展开更多
关键词 远隔缺血处理 大鼠 组织蛋白酶B 溶酶体相关蛋白-1 转录因子EB
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有氧锻炼通过TFEB-自噬溶酶体途径减轻慢性脑缺血大鼠认知功能障碍的研究 被引量:1
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作者 李志伟 崔小丽 +3 位作者 刘杨 刘小玲 吕桦 刘军 《脑与神经疾病杂志》 2020年第8期476-480,共5页
目的观察有氧锻炼对慢性脑缺血大鼠TFEB-自噬溶酶体途径及认知功能障碍的影响。方法SD大鼠随机分为3组:对照组、慢性脑缺血组和慢性脑缺血+有氧锻炼组。用双侧颈总动脉结扎的方法建立慢性脑缺血模型。有氧锻炼组进行跑步锻炼12w。用Mor... 目的观察有氧锻炼对慢性脑缺血大鼠TFEB-自噬溶酶体途径及认知功能障碍的影响。方法SD大鼠随机分为3组:对照组、慢性脑缺血组和慢性脑缺血+有氧锻炼组。用双侧颈总动脉结扎的方法建立慢性脑缺血模型。有氧锻炼组进行跑步锻炼12w。用Morris水迷宫比较各组大鼠的空间学习能力。用苏木精-伊红染色比较各组大鼠海马神经元损伤的状况。用Western-blotting比较各组大鼠海马组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62、LAMP-1、CTSD以及核内TFEB的含量。结果与对照组相比,慢性脑缺血组大鼠平均逃避潜伏期显著延长,隐匿平台象限停留时间显著缩短,通过隐匿平台次数显著降低;形态异常的海马神经元显著增加,Western-blotting显示,LC3/LC3、LAMP-1、CTSD以及核内TFEB显著降低,p62显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与慢性脑缺血组相比,有氧锻炼组大鼠平均逃避潜伏期显著缩短,隐匿平台象限停留时间显著延长,通过隐匿平台次数显著增加;形态异常的海马神经元显著减少,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、LAMP-1、CTSD以及核内TFEB显著升高,p62显著降低;差异有统计学意义(P<0.05)。结论有氧锻炼通过激活TFEB-自噬溶酶体途径减轻慢性脑缺血所致的大鼠认知功能障碍。 展开更多
关键词 有氧锻炼 大鼠 微管相关蛋白轻链3 溶酶体相关蛋白-1 组织蛋白酶D 转录因子EB
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血清LAPTM4B-35及DKK1联合低剂量超声造影在肝肿瘤良恶性诊断中的应用价值
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作者 徐鹏 于德洋 +2 位作者 董茹婷 王宁 王磊 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第1期53-57,共5页
目的探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35(LAPTM4B-35)、Dickkopf相关蛋白1(DKK1)在肝肿瘤血清中的表达以及联合低剂量超声造影在肝肿瘤良恶性诊断中的应用价值。方法收集2021年1月至2022年8月青岛市中心医院急诊创伤外科进行治疗的160例肝... 目的探讨溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35(LAPTM4B-35)、Dickkopf相关蛋白1(DKK1)在肝肿瘤血清中的表达以及联合低剂量超声造影在肝肿瘤良恶性诊断中的应用价值。方法收集2021年1月至2022年8月青岛市中心医院急诊创伤外科进行治疗的160例肝肿瘤患者临床资料。根据病理学结果,将患者分为良性组(n=74)和恶性组(n=86)。比较两组血清LAPTM4B-35、DKK1水平及低剂量超声造影指标;多因素Logistic回归分析肝恶性肿瘤的影响因素;ROC曲线分析血清LAPTM4B-35、DKK1联合低剂量超声造影对肝恶性肿瘤的诊断效能。结果恶性组患者血清LAPTM4B-35、DKK1表达水平均高于良性组(P<0.05)。恶性组达峰时间低于良性组(P<0.05),峰值强度显著高于良性组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析,结果显LAPTM4B-35、DKK1、达峰时间、峰值强度是发生肝恶性肿瘤的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清LAPTM4B-35、DKK1、低剂量超声造影联合检测诊断肝恶性肿瘤的AUC为0.960,敏感性为89.53%,特异性为91.89%,优于其各自单独预测(Z两者联合-LAPTM4B-35=5.116、Z两者联合-DKK1=4.986、Z两者联合-达峰时间=4.657、Z两者联合-峰值强度=4.214,P<0.05)。结论肝肿瘤恶性患者血清LAPTM4B-35、DKK1表达水平显著升高,联合低剂量超声造影在肝恶性肿瘤的诊断中具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 溶酶体相关4次跨膜蛋白B-35 Dickkopf相关蛋白1 低剂量超声造影 肝肿瘤 良恶性诊断
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高密度脂蛋白对血小板ɑ 颗粒膜糖蛋白及CD63表达的影响
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作者 杨升华 杜大勇 +2 位作者 柳杨 王双双 李运田 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第7期647-649,I0001,共4页
目的研究高密度脂蛋白(HDL)对凝血酶刺激的人血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P或P-选择素)、溶酶体膜糖蛋白(CD63)表达的影响。方法 3组等体积手工制备的洗涤血小板分别加入0.5、1和10U/mL的凝血酶(低、中、高凝血酶组),另外3组同样含量的凝... 目的研究高密度脂蛋白(HDL)对凝血酶刺激的人血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P或P-选择素)、溶酶体膜糖蛋白(CD63)表达的影响。方法 3组等体积手工制备的洗涤血小板分别加入0.5、1和10U/mL的凝血酶(低、中、高凝血酶组),另外3组同样含量的凝血酶加入37℃孵育15min的HDL,分别为低、中、高复合组。同时37℃环境下孵育10min,以流式细胞仪检测各组CD62P、CD63的表达。结果低、中、高复合组CD62P表达率分别为11.55%±1.34%,17.19%±0.17%,19.79%±0.32%,均低于相应凝血酶组的18.14%±1.50%,26.24%±0.77%,80.38%±5.66%(均P<0.01),低、中、高复合组CD63表达也低于相应的凝血酶组即(2.92%±0.22%、4.20%±0.98%,5.12%±0.09%vs8.09%±0.48%、14.15%±1.39%、24.48%±1.71%,均P<0.01)。低、中复合组血小板CD62P、CD63抑制率均低于高复合组(均P<0.05)。结论在体外,HDL抑制了凝血酶刺激的血小板α颗粒膜糖蛋白和溶酶体膜糖蛋白的表达。 展开更多
关键词 蛋白 HDL P选择素 凝血酶 流式细胞术 溶酶体相关蛋白质1 抗原 CD36
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