8例溶酶体运输调节因子杂合突变患者的临床特征及预后分析

目的:研究8例携带溶酶体运输调节因子(LYST)杂合突变的病例,并总结其涉及的病种类型、临床表现和预后。方法:收集8例携带LYST杂合突变的血液病患者临床资料。纳入标准为经二代测序技术检测出携带LYST杂合突变的血液病患者,病种不限。结果:8例患者中3例为嗜血细胞综合征(HLH),2例NK细胞白血病,1例慢性活动性EB病毒感染(CAEBV),1例Chediak-Higashi综合征(CHS-1)继发HLH,1例再生障碍性贫血(AA)。多数患者外周血(血浆和/或单个核)EBV-DNA拷贝数升高,EBV-sorting技术检测发现B细胞、T细胞和NK细胞均可被感染,合并NK细胞活性明显下降。7例患者均有全身多部位淋巴结肿大,正电子发射计算机断层显像(PET-CT)的标准摄取值(SUV)中位数5.5(2.7~13.3)。3例HLH患者初始采用HLH94方案治疗,短期复发,死亡2例,失访1例。CHS-1继发HLH的患者初始单用地塞米松,神经症状很快好转,但短期嗜血复发,采用标准HLH94方案治疗后嗜血控制,总生存期(OS)14个月。2例NK细胞白血病患者初始采用DEP+培门冬酶方案治疗,1例未缓解死亡,1例诱导治疗刚结束。1例CAEBV仍间断发热,OS 18个月。1例再生障碍性贫血的患者骨髓移植准备中,OS 3个月。结论:携带LYST杂合突变可涉及多种血液疾病,HLH起病居多,亦可表现为不典型CHS-1、NK细胞白血病、CAEBV和再生障碍性贫血。临床上可通过二代测序发现LYST突变,及时获得全面的诊断信息及判断预后。

利用CRISPR/Csa9技术构建溶酶体运输调节因子基因缺陷C57BL/6小鼠

目的获得自然杀伤(NK)细胞缺陷的小鼠动物模型,并研究溶酶体运输调节因子(Lyst)基因的功能。方法采用CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6小鼠的Lyst基因:针对小鼠Lyst基因编码区第50个外显子,设计CRISPR/Cas9靶点引物(sgRNA),并重组构建pUC57-Lyst-sg RNA载体。将重组质粒体与Cas9质粒分别利用T7 RNA聚合酶体外转录为mRNA,并按比例显微注射入小鼠受精卵,将受精卵移植到受体动物。获得子代小鼠后,利用PCR扩增和测序方法筛选Lyst基因发生改变的动物个体。结果显微注射移植后获得7只F0代基因敲除小鼠,且毛色均发生了明显的变化。结论利用CRISPR/Cas9技术可以构建Lyst基因缺陷小鼠,外观表型与已有的文献报道一致。

Trex1通过调控溶酶体诱导干扰素非依赖性抗病毒基因的活化

病毒感染机体后,病毒核酸作为主要的病原体相关分子模式,可被Toll样受体（Toll-like receptors,TLR）以及相关的DNAsensor、RNA sensor识别,通过下游接头分子TANK结合激酶1（TANK-binding kinase 1,TBK1）及干扰素调节因子3（interferonregulatory factor 3,IRF3）促进Ⅰ型干扰素的产生。

Chediak-Higashi综合征的相关基因及蛋白质

Chediak-Higashi综合征(CHS)是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病,其致病基因——溶酶体转运调节因子基因定位于染色体1q42.1-42.2。该基因在转录过程中可形成两种大小不同的转录本。两种转录体在各组织中的表达不同,提示它们的生物学性质也不相同。其编码的蛋白——溶酶体转运调节因子(ly-sosomal-trafficking regulator)属于一个大的BEACH蛋白家族,与家族中其他成员有着相似的结构和功能。BEACH家族蛋白的鉴别和相关动物模型的研究使我们认识到BEACH的蛋白质参与了多种不同的生化途径,BEACH蛋白突变或缺乏可以导致囊泡转运缺陷。