PD-L1降解途径与肿瘤免疫治疗

程序性死亡受体配体1(programmed death ligand 1,PD-L1)是肿瘤免疫检查点阻断治疗中的重要靶点,其在多种细胞中均有表达。肿瘤细胞可通过高表达PD-L1来增强程序性死亡受体1(programmed death 1,PD-1)抑制信号,从而促进肿瘤免疫逃逸。近年来,以抗PD-1/PD-L1抗体为代表的肿瘤免疫治疗给癌症治疗带来了革命性的变化。然而,肿瘤免疫治疗仅能对部分患者产生持久的疗效,多数患者对肿瘤免疫治疗的应答短暂或没有应答。研究发现,PD-L1的降解对肿瘤免疫治疗应答至关重要。本文综述了PD-L1的溶酶体降解途径、蛋白酶体降解途径及PD-L1降解与肿瘤免疫治疗的相互作用,旨在为进一步增强肿瘤免疫治疗的应答率和应答范围提供研究思路。

靶向蛋白降解技术及其在疾病治疗中的研究进展

靶向蛋白降解(Targeted protein degradation,TPD)技术利用细胞内天然存在的两大蛋白降解系统:泛素化-蛋白酶体系统与溶酶体降解途径实现对疾病相关蛋白的特异、高效降解,从而达到疾病治疗的效果。相较于传统的小分子抑制剂,基于TPD技术的药物在靶点蛋白的选择上限制性更小,能够作用于"无成药性"的蛋白,从而拥有更为丰富的靶点库。与在基因、m RNA层面干扰蛋白表达的技术相比,TPD药物具有特异、快速以及不受蛋白翻译后修饰约束等特点。在过去的20年里,基于TPD技术的各类降解系统层出不穷,相关研究成果在近些年呈爆发式增长,更令人兴奋的是,2019年两种基于TPD技术的治疗性药物进入临床阶段并初步显示出良好的治疗效果。虽然TPD技术的发展处于起步阶段,目前仍存在诸多缺陷,但凭借其独有的优势,在不久的将来,该技术必将成为药物研发的主要手段之一,同时,也将给学术界和产业界带来前所未有的机遇。本综述详细介绍了基于TPD技术的不同降解系统的研究现状,阐述了各系统在疾病治疗中的应用,系统地总结了各自的优势和不足,以期为TPD技术在科学研究和药物研发中的进一步应用提供理论指导。

WNK3激酶对肾脏大电导钙激活钾通道的调节作用及机制

目的探讨WNK3激酶对肾脏大电导钙激活钾通道（Maxi K通道）的调节作用及其机制。方法（1）在非洲绿猴肾成纤维细胞（Cos-7细胞）中转染0．5μg Maxi K质粒的同时分别转染0、0．6、1．2、1．8μg WNK3质粒，Western印迹检测细胞总蛋白中Maxi K通道的表达及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）细胞外信号调节激酶1／2（ERK1／2）的磷酸化水平。（2）Cos-7细胞分为转染2．5μg Maxi K质粒组（对照组）和转染2．5μg Maxi K质粒＋2．5μg WNK3质粒组（实验组），细胞表面生物素化方法检测细胞表面膜蛋白中Maxi K通道的表达，免疫沉淀和Westem印迹检测Maxi K通道蛋白泛素化水平。（3）用WNK 3siRNA沉默WNK3激酶基因，用质子泵抑制剂（Baf—A1）阻断溶酶体降解途径，Cos-7细胞分为Maxi K＋阴性对照siRNA组、Maxi K＋WNK3 siRNA组和Maxi K＋WNK3 siRNA＋Baf-A1组。Western印迹检测细胞中Maxi K通道蛋白的表达。结果（1）与0μg WNK3质粒组比较，转染0．6、1．2、1．8μg WNK3质粒组细胞总蛋白中Maxi K通道的表达均升高，MAPKERKl／2的磷酸化水平均降低（均P〈0．01），且呈剂量依赖性。（2）与对照组比较，同时转染WNK3和Maxi K的实验组细胞总蛋白和膜蛋白中Maxi K通道的表达均增加，Maxi K通道蛋白的泛素化水平降低（均P〈0．01）。（3）与Maxi K＋阴性对照siRNA组比较，Maxi K＋WNK 3siRNA组Maxi K蛋白表达降低（P〈0．01），Maxi K＋WNK 3siRNA＋Bar-A1组的Maxi K蛋白表达无明显变化（P〉0．05）；与Maxi K＋WNK 3siRNA组比较，Maxi K＋WNK 3siRNA＋Baf—A1组的Maxi K蛋白表达升高（P〈0．01）。结论WNK3激酶通过减少Maxi K通道蛋白的泛素化来抑制Maxi K通道的溶酶体降解途径，从而促进Maxi K通道在细胞内和细胞膜上的表达量。其机制可能与MAPK ERK1／2转导通路有关。