丹参与滇丹参正交后代育性鉴定及花部形态与生化活性

【目的】探索丹参类正交后代不育类型及不育原因,为丹参类药材新种质的研究提供材料。【方法】以丹参与滇丹参正交后代作为试验材料且以亲本作为对照,利用TTC和I2⁃KI对3种材料进行花粉活力鉴定、花朵形态学观察以及不同发育时期花蕾的可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸和丙二醛含量测定和过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的酶活性测定。比较3种材料各指标的变化后分析引起不育的原因。【结果】花粉活力测定表明正交后代花粉粒无活力,判定其为雄性不育;观察不同材料花部特征可知:正交后代花丝长度介于亲本之间但3种材料无显著差异;花药长度3种材料间存在显著差异;正交后代的花瓣上唇长和宽均介于2个亲本之间,正交后代和滇丹参之间无显著差异;丹参下唇长和宽均大于正交后代及滇丹参。在花的整个发育过程中,丙二醛(MDA)含量正交后代高于丹参与滇丹参;可溶性糖含量正交后代较亲本略有升高;游离脯氨酸含量正交后代呈先上升后下降趋势;SOD活性呈先升高后下降再升高趋势;POD活性正交后代比亲本高。而从单核期到成熟期,可溶性蛋白含量正交后代急剧下降而滇丹参与丹参则依然呈上升趋势;CAT活性正交后代变化不大,2个亲本略有下降。【结论】丹参与滇丹参正交后代的不育类型为雄性不育,其花部形态均无异常变化。在花的整个发育过程中,由于可溶性糖、可溶性蛋白含量变化,导致正交后代的花营养不足,而脯氨酸含量低导致花药抗逆性差,MDA含量、CAT、SOD及POD等酶活性异常造成细胞内不能及时清除自由基、活性氧等对细胞膜造成伤害的物质,最终导致正交后代不育。

滇丹参中酚酸类化学成分研究

目的:研究滇丹参Salvia yunaansis根中的化学成分。方法:采用水提取,经Diaion HP20大孔吸附树脂、Sephadex LH-20凝胶、ODS等柱色谱,对滇丹参中的酚酸类成分进行分离纯化,运用现代波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从滇丹参中分离并鉴定了12个酚酸类化合物,分别为原儿茶醛(1),咖啡酸(2),阿魏酸(3),迷迭香酸(4),丹酚酸A(5),丹酚酸C(6),紫草酸(7),紫草酸B(S),9′-紫草酸B甲酯(9),9″′-紫草酸B甲酯(10),9′,9″′-紫草酸B二甲酯(11),9′-紫草酸B乙酯(12)。结论:化合物1,2,3,5,6,9,10,11,12为首次从该植物中分离。

滇丹参的化学成分与药理活性研究进展

滇丹参为唇形科鼠尾草属植物。在云南多作为丹参的代用品使用,具有与丹参相似的药理活性。其化学成分以二萜及酚酸类化合物为主。本文综述了滇丹参的化学成分及药理作用研究进展,为其进一步研究和开发利用提供参考。

滇丹参药用植物资源

滇丹参(云南鼠尾草)Salvia yunnanensis为云南习用的丹参药材,广泛分布我国西南地区,且有效成分丹参酮Ⅱ-A和原儿茶醛的含量较高,是较为理想的丹参药用植物资源。

正交试验法优选滇丹参中水溶性成分提取工艺

目的用正交试验法优选滇丹参水溶性有效成分丹酚酸B的最佳提取工艺。方法以高效液相色谱法测得的丹酚酸B的含量和提取物出膏率为指标,采用以乙醇浓度、加醇量、提取时间、提取次数为影响因素的正交试验法,对滇丹参中丹酚酸B的提取工艺进行优选。结果滇丹参中水溶性成分丹酚酸B的最优提取工艺为8倍量20%乙醇回流提取3次,每次1h。结论此工艺稳定可行,可为滇丹参水溶性有效成分的提取提供实验依据。

滇丹参、甘西鼠尾、褐毛甘西鼠尾水提取液对鼠血栓形成及微循环的影响

目的 :观察云南产甘西鼠尾属药物滇丹参、甘西鼠尾、褐毛甘西鼠尾的水提取物对鼠血栓形成及微循环的影响。方法 :用电刺激法造成大鼠颈动脉血栓形成 ,观察血流阻塞时间 (OT值 ) ;小鼠尾静脉注射血栓形成诱导剂 ,观察滇丹参、甘西鼠尾、褐毛甘西鼠尾对抗肺血栓形成的作用 ;采用活体微循环观察方法 ,研究滇丹参、甘西鼠尾、褐毛甘西鼠尾对去甲肾上腺素和高分子右旋糖苷所致小鼠、大鼠肠系膜微循环障碍的影响。结果 :滇丹参、甘西鼠尾、褐毛甘西鼠尾 2、4 g/kg时 ,能明显延长闭塞性血栓形成时间 (OT值 ) (P <0 0 1)。 2 0、4 0g/kg时 ,能有效抑制胶原和肾上腺素复合液所致小鼠肺血栓形成 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。能显著改善微动脉、微静脉痉挛和血液流态 ,增加毛细血管开放数 ,加快血流速度 (P<0 0 1,P <0 0 5 )。结论 :滇丹参、甘西鼠尾、褐毛甘西鼠尾均能防止血栓形成。

滇丹参干预后瘢痕成纤维细胞生物学行为的变化

背景:研究证实丹参在创伤修复和愈合过程中起重要作用。滇丹参所含化学成分与正品丹参基本一致,其中某些活性成分含量高于正品丹参。目的:观察滇丹参对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响,揭示其对瘢痕的作用及机制。设计、时间及地点:分组对照观察,于2005-03/2006-03在昆明医学院完成。对象:瘢痕标本取自8例患者颌面颈部遗留瘢痕,男5例,女3例;年龄7～38岁;瘢痕病程1～12年,患者对实验均知情同意。方法:对瘢痕成纤维细胞进行体外培养,随机分组,分别加入0.05,0.1,0.2,0.4g/mL不同质量浓度的滇丹参液培养24h,阴性对照组加入不含滇丹参的DMEM培养液,阳性对照组加入含稀释成1000U/mLrhIFN-α2a的DMEM培养液。主要观察指标:采用光镜观察、四甲基偶氮唑盐比色测定分析、流式细胞术对成纤维细胞DNA水平、细胞周期分析。结果:实验组加入滇丹参后,细胞生长密度降低,梭状突起回缩,细胞双极变得圆顿,细胞形态变得不规则。与阴性对照组相比,加入滇丹参组成纤维细胞的生长受到明显的抑制(P<0.05),较高质量浓度(0.4,0.2g/mL)滇丹参对瘢痕成纤维细胞生长和抑制比低质量浓度(0.1,0.05g/mL)和rhIFN-α2a1000U/mL组明显(P<0.05)。增殖期(S-G2-M)细胞百分数明显降低,细胞凋亡水平明显提高。结论:滇丹参对瘢痕成纤维细胞的生长、增殖及胶原合成有抑制作用,不同的质量浓度作用效果有差别。

滇丹参注射液对兔血小板功能的影响

观察云南产滇丹参对血小板聚集功能的影响。方法 :采用Born氏比浊法 ,测定滇丹参体内、体外对抗ADP、PAF、AA诱导的兔血小板聚集的作用。体外每种药物浓度分别为 40 g/L、2 0 g/L、10 g/L、5g/L、2 5 g/L ,体内实验分为 7组 ,即生理盐水组、两种丹参低中高剂量组分别为 5 g/kg、10 g/kg、2 0 g/kg ,每组 6只。 结果 :与对照组相比 ,滇丹参体外显著抑制ADP、AA诱导的血小板聚集 ,抑制效应呈浓度 效应关系 (P <0 0 5 ,0 0 1) ,IC50 为 33 7g/L(ADP)、18 1g/L(AA)。滇丹参也显著抑制PAF诱导的血小板聚集 ,其最大抑制率为 36 8% ;体内实验结果显示 ,滇丹参在高剂量时可显著抑制ADP、PAF和AA诱导的血小板聚集 (P <0 0 5 ,0 0 1) ,且均具有剂量依赖性。滇丹参在药后 2 0min开始显效 ,40min达到最大抑制作用 ,抑制率分别为 95 6 % (ADP)、91 5 % (PAF)和 88 5 % (AA)。结论 :以上结果表明 ,滇丹参体外、体内显著抑制血小板聚集 ,且其抗血小板聚集作用优于丹参 。

滇丹参提取液对心肌缺血大鼠血液流变性的影响

目的:探讨云南产甘西鼠尾属药物滇丹参对大鼠血液流变性的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支造成急性心肌梗塞模型,股静脉给药,1.5h后颈动脉取血测定全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、血浆纤维蛋白原含量等血液流变学指标。结果:滇丹参10g/kg4、g/kg2、g/kg三种剂量均能显著降低高、中、低切变率下的全血粘度和血浆粘度(P<0.01,P<0.05),能显著降低纤维蛋白原含量(P<0.01);10g/kg时,能降低红细胞压积(P<0.01,P<0.05)。结论:滇丹参具有改善心肌缺血大鼠血液流变异常的作用。

滇丹参、甘西鼠尾、褐毛甘西鼠尾对离体豚鼠心脏的影响

采用Langendorff离体豚鼠心脏灌流法 ,观察滇产 3种唇形科鼠尾属药物扩张冠脉作用并与标准丹参进行比较 .结果发现 :4种药物在高剂量可明显增加正常离体豚鼠心脏的冠脉流量、降低心肌收缩力、减慢心率 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,甘西鼠尾低剂量即能增加冠脉流量 (P <0 0 5 ) ,4种药物高、低剂量均能够对抗垂体后叶素致冠脉流量的减少和心肌收缩力的减弱 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) .结果表明 ,滇产 3种丹参均能够增加正常离体豚鼠冠脉流量 。

滇丹参的生药学研究

滇丹参为云南地区习用药材 ,来源于SalviayunnanensisC .H .Wright的干燥根及根茎。对其植物来源 ,药材性状 ,显微及理化特征作了研究 。

滇丹参与丹参脂溶性成分指纹图谱的比较研究

目的:建立滇丹参脂溶性成分的指纹图谱,并与丹参药材的指纹图谱进行比较。方法:采用高效液相色谱法,建立指纹图谱,并用相似度评价软件对指纹图谱进行评价。结果:滇丹参各样品脂溶性成分的指纹图谱相似度高,与丹参药材脂溶性成分的指纹特征峰组成基本一致,但滇丹参中几个主要脂溶性有效成分的含量均低于丹参。结论:滇丹参与丹参药材的脂溶性成分显示较高的相似性,但其主要成分的含量比例显示明显差异。

滇丹参对血管狭窄和金属基质蛋白酶的影响

目的探讨滇丹参对高血脂兔腹主动脉球囊损伤后血管狭窄的影响,及其与基质金属蛋白酶、血管内膜中层平滑肌细胞增生的关系。方法25只日本大耳兔随机分为正常对照组、球囊损伤组与滇丹参组。正常对照组不予任何方式处理。另两组行腹主动脉球囊损伤术,其中滇丹参组给予静脉注射滇丹参注射液(238mg.kg-1.d-1)2周,观察各组血管组织中基质金属蛋白酶表达情况的变化以及血管损伤处血管狭窄、血管内膜中层平滑肌细胞增生的情况。结果应用滇丹参2周后滇丹参组血管组织中基质金属蛋白酶表达减少,血管损伤处血管内膜、外膜增生减轻,新生内膜面积减少,管腔面积增加。结论滇丹参可以抑制血管组织中基质金属蛋白酶的表达,抑制血管内膜中膜平滑肌细胞增殖,抑制球囊损伤后兔腹主动脉血管的狭窄。

高效液相色谱法测定云南6个产地滇丹参中5种水溶性成分的含量

目的建立了高效液相色谱法同时测定云南6个产地滇丹参中5种水溶性成分含量,为滇丹参资源的合理开发利用提供依据。方法采用Agilent 1200系列高效液相色谱仪,Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长280nm,柱温25℃。结果 5种水溶性成分均呈现较好的回归方程和相关系数,原儿茶醛、咖啡酸、紫草酸相关系数均达到0.9999,丹酚酸B为0.9998,丹参素为0.9969。其中丹参素进样范围为(6.08~39.52)×10^(-2)μg,原儿茶醛进样范围为(3.23~21.01)×10^(-3)μg,咖啡酸进样范围为(8.56~55.64)×10^(-3)μg,紫草酸进样范围为(32.56~211.64)×10^(-2)μg,丹酚酸B进样范围为(102.48~666.12)×10^(-2)μg,丹参素平均回收率为99.353%,原儿茶醛平均回收率为99.077%,咖啡酸平均回收率为99.023%,紫草酸平均回收率为98.750%,丹酚酸B平均回收率为99.098%。结论云南6个产地滇丹参药材中的水溶性成分含量有较大差异,其中新平和洱源产的药材水溶性成分总含量明显高于其他产地,丹酚酸B是这5种水溶性成分中的主成分。本检测方法简单准确、高效、稳定性好,可为滇丹参质量控制及地方药材资源的充分开发利用提供参考依据。

复方滇丹参注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的与复方丹参注射液（丹参十三七）比较，探讨复方滇丹参（滇丹参十三七）对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用在体和离体缺血心肌再灌注模型，检测血清和灌流液中MDA（丙二醛）、LDH（乳酸脱氢酶）、CK（肌酸激酶）、SOD（超氧化物歧化酶）、GSH-Px（谷胱甘肽过氧化物酶）含量。结果复方滇丹参注射液能显著降低在体和离体缺血再灌注后血清和灌注液中MDA、cK和LDH水平，升高sOD和GsH-Px，作用相似于复方丹参，并能减少心肌梗死面积。结论复方滇丹参注射液有较好的抗心肌缺血再灌注损伤作用，其机制可能与抗氧自由基损伤有关。

滇丹参醇提工艺中总丹参酮的降解动力学考察

目的:考察传统提取工艺中总丹参酮的降解动力学。方法:采用紫外分光光度法,考察在常温贮放、浓缩(60℃)、常压干燥(80℃、100℃)和减压干燥(60℃、70℃)条件下总丹参酮的含量变化及降解率。结果:60℃浓缩和100℃干燥下总丹参酮降解迅速,其他干燥温度降解缓慢,常温贮放有一定降解。结论:醇提液不宜久贮,醇提液和水提液宜分开低温浓缩,浓缩液宜低温减压干燥。

滇丹参醇提与SFE-CO_2萃取中总丹参酮的降解动力学比较

目的:考察传统提取工艺与超临界二氧化碳(SFE-CO2)萃取中总丹参酮在干燥过程中的降解动力学异同。方法:采用紫外分光光度法,考察在常压干燥(90℃)和减压干燥(75℃)条件下总丹参酮的含量变化及降解率。结果:SFE-CO2萃取液有效成分纯度高,更不宜用常压干燥;其减压干燥降解较醇提液缓慢。结论:SFE-CO2萃取液在减压干燥时与传统提取液相比有一定优势。

SFE-CO_2萃取滇丹参中总丹参酮成分工艺研究

目的:探讨从滇丹参中提取总丹参酮成分的工艺。方法:采用超临界二氧化碳(SFE-CO2)萃取法,并与传统醇提相比较。结果:SFE-CO2萃取的最佳工艺为压力15Mpa,夹带剂为95%乙醇,萃取温度35℃,萃取时间3h,夹带剂加入量250ml,CO2流量为25L/h。结论:用SFE-CO2萃取滇丹参中总丹参酮其提取率高于传统醇提,具有应用价值。