滇山茶狮子头及其芽变品种大玛瑙间花色差异分析

滇山茶是世界著名观赏花木,花色是其重要的观赏性状。滇山茶狮子头花色为深红色,而其芽变品种大玛瑙是滇山茶中唯一红白双色的名贵品种,极具观赏价值。以上述2个品种为研究材料,采用RHSCC比色卡比色法和色差仪测定2个品种滇山茶花蕾期和盛花期花瓣的花色表型,并基于转录组与代谢组分析挖掘呈色相关的关键代谢物及关键基因。花青素靶向代谢分析表明,在滇山茶2个品种中共鉴定出28种花青素代谢物,其中狮子头与大玛瑙红色区域花瓣间没有差异代谢物,狮子头与大玛瑙白色区域花瓣间的关键差异代谢物为矢车菊素-3-O-桑布双糖苷、原花青素B2、原花青素B3、阿福豆苷,大玛瑙花瓣的红白区域关键差异代谢物为矢车菊素-3-O-桑布双糖苷、原花青素B2、阿福豆苷。转录组KEGG分析结果表明,苯丙醇生物合成和类黄酮生物合成途径与大玛瑙红白双色花瓣的形成有关;植物激素信号转导和昼夜节律-植物途径与滇山茶花色芽变有关。转录代谢联合分析共筛选出与滇山茶呈色高度相关的差异表达基因共17条,包括4条CHS、3条HCT、2条F3′H、1条LAR、5条MYB和2条b HLH。本研究结果对进一步揭示花色芽变育种具有一定的参考意义。

滇山茶bHLH基因家族鉴定及花色形成相关基因筛选

【目的】通过生物信息学方法初步筛选与滇山茶花色相关的bHLH基因,为后续深入研究滇山茶花色提供支持。【方法】基于滇山茶全长转录组数据,通过生物信息学方法鉴定滇山茶bHLH基因家族成员,并对其理化性质、二级结构、系统发育关系和结构域等进行分析。利用二代转录组和代谢组数据挖掘与滇山茶花色相关的bHLH基因,通过实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)验证bHLH基因在滇山茶开花过程中和不同品种间的表达情况。【结果】在滇山茶全长转录组中鉴定到71个滇山茶CrbHLHs基因,蛋白分子量的范围在22994.58-102996.96 Da,等电位为4.98-9.51,均为亲水性蛋白。与拟南芥聚类分析发现,滇山茶bHLH基因家族成员可分布到14个亚族。多组学联合分析发现,CrbHLH8、CrbHLH61和CrbHLH63与矢车菊色素苷呈正相关,而CrbHLH59与其呈负相关;CrbHLH13和CrbHLH71与原花青素呈正相关,其中CrbHLH8和CrbHLH61为IIIf亚族成员。【结论】从滇山茶全长转录组中鉴定出71个CrbHLHs家族成员,其中6个CrbHLHs与滇山茶花色相关。

五柱滇山茶结果树施肥试验

2019年3月开始对五柱滇山茶10年结果树采用随机区组设计进行施肥试验,2020-2022年进行五柱滇山茶叶片、春季新梢、花芽和果实调查、记录和统计。结果表明,合理科学的施肥能有效促进春梢生长、增加叶片、促进扩展冠幅和花芽分化,进一步改善果实品质,提高果实产量。施肥3个年度以上地块的单果重比未进行任何施肥地块的单果重高7.6倍以上。

龙陵县五柱滇山茶良种选育初报

为了提高云南省保山市五柱滇山茶良种供应能力,促进五柱滇山茶产业健康发展。在多年的五柱滇山茶良种选育工作基础上,通过访问民众、护林员及查阅森林资源调查资料,确定了优良母树选择标准,确定了30株优良单株。在遗传测定试验中,将胸径和种子产量表现较好的1号、4号、8号、15号、30号优良单株依次命名为1号、2号、3号、4号、5号母树。通过遗传测定试验数据对比与分析,3号候选优良母树的平均树高、胸径、种子产量、出仁率、含油率明显高于平均值和其他候选优良母树。它保持了亲本的优良性状,具有较强的稳定性,可作为良种进行申报。

滇山茶基因组DNA不同提取方法效果比较

选取3个滇山茶品种("早桃红"、"柳叶银红"及"菊瓣")采用4种方法(CTAB法、改良的CTAB法、SDS法及改良的SDS法)进行基因组DNA提取,并对提取效果进行了比较分析。结果表明,CTAB法提取效果最佳,其次为改良的CTAB法,而SDS法不能有效地提取DNA。同时发现,不同品种之间DNA提取效果也存在差异,柳叶银红DNA提取浓度及纯度最高(D260 nm/D280 nm=1.976 2),其次为菊瓣,最差为早桃红。本研究为下一步进行滇山茶分子标记研究与应用奠定了基础。

滇山茶多倍体栽培品种的细胞倍性

【目的】阐明滇山茶主要栽培品种的细胞倍性,以利于后期的遗传育种研究。【方法】采集昆明植物园滇山茶63个品种的嫩叶,并以二倍体怒江红山茶作为对照,利用流式细胞仪检测每个样本DNA含量的荧光强度,然后根据2C值估计细胞倍性。同时,每个倍性采集3个代表品种的茎尖和花药制作压片,在光学显微镜下进行染色体计数,验证流式细胞术的结果。【结果】在63个滇山茶品种中,DNA峰值最大的是‘恨天高’(304.43),2C值为18.32 pg;DNA峰值最小的为‘红霞迎春’(175.03),2C值为10.53 pg。峰值范围小于250、2C值低于15.00 pg的品种倍性被估计为六倍体,涉及的品种共29个,占被检品种总数的46.03%;峰值范围在250~300、2C值为15.00~18.00 pg的品种倍性被估计为八倍体,共涉及31个品种,占被检品种总数的49.21%;峰值范围大于300、2C值高于18.00 pg的品种倍性被估计为十倍体,涉及品种3个,占被检品种总数的4.76%。滇山茶代表品种‘五角绣球’(花药:n=45)、‘菊瓣’(花药:n=60)和‘恨天高’(茎尖:2n=150)的染色体计数结果与流式细胞术的倍性估计结果一致。【结论】滇山茶的栽培品种涉及六倍体、八倍体和十倍体,丰富的细胞倍性将为后期的杂交亲本选配、多倍体的遗传和进化等研究奠定基础。

含野生滇山茶花提取物医学护肤品辅助治疗干燥性皮炎临床观察

目的评价含野生滇山茶花提取物医学护肤品(商品名:滇虹润芙防干裂护肤品系列产品)辅助治疗干燥性皮炎的有效性及安全性。方法采用治疗前后对照的临床试验方法。经临床诊断及皮肤生理功能测试(水分,油脂含量)确诊30名干燥性皮炎患者,选择滇虹润芙防裂修复霜涂于患处(手或足部2次/d,连续使用15天,对侧不使用任何产品。采用无创性皮肤测试。在治疗前、治疗后7天、15天、分别对受试者两侧皮肤进行皮肤生理功能测试、皮损恢复情况、受试者对该产品的满意度及安全性进行评价。结果观察病例30例,治疗15天后水分含量由治疗前20.74±8.84提高到30.46±7.19,油脂含量由治疗前1.77±2.37提高到7.59±8.38,治疗前后比较,p<0.005,具有统计学意义。皮损干燥评分由治疗前1.63±1.10降低到0.27±0.64;p<0.005,具有统计学意义;试验未出现任何不良反应。结论滇虹润芙防干裂护肤品系列产品对干燥性皮炎有辅助治疗作用,安全性好,值得临床推广应用。

含野生滇山茶花提取物医学护肤品辅助治疗慢性唇炎临床观察

目的评价含野生滇山茶花提取物医学护肤品(商品名:滇虹润芙防干裂护肤品系列产品-抗裂护唇精华)辅助治疗慢性唇炎的有效性及安全性。方法采用治疗前后对照的临床试验方法。经临床诊断确诊30名慢性唇炎患者,选择滇虹润芙抗裂护唇精华唇膏涂于唇部2次/d,连续使用15天,对皮损恢复情况、受试者对该产品的满意度及安全性进行评价。结果观察病例30例,对产品满意度达82.5%。试验未出现任何不良反应。结论滇虹润芙防干裂护肤品系列产品-抗裂护唇精华对慢性唇炎有辅助治疗作用,安全性好,值得临床推广应用。

滇山茶的花色类型与细胞内环境关系初探

本文以19个不同花色的滇山茶(Camellia reticulata Lindl.)野生植株为材料,研究滇山茶的花色类型与细胞内环境之间的关系。结果表明,通过CIE L*a*b*表色系法测定花瓣颜色,花色不同的19个样品的花色可划分为白色、浅粉色、粉色和红色4种类型;随着滇山茶花色从浅粉色到红色的加深,花瓣细胞内p H值和蛋白质含量呈逐渐下降、可溶性糖含量呈逐渐增加的变化趋势;在相同花色型群体中,也表现出相似的变化趋势。本研究结果对揭示滇山茶的花色形成机理具有重要意义。

基于转录组测序的滇山茶花叶呈色机理分析

该研究采用Illumina Hi-Seq2500高通量测序技术,对滇山茶的花叶(绿叶区和金叶区)的cDNA进行了转录组测序,分析滇山茶的花叶呈色机理。测序结果得到了228 862条单基因序列,筛选得到了4 851条差异表达基因。2 291条差异表达基因在GO数据库中有功能注释,1 826条差异表达基因被注释到COG数据库,这些差异表达基因被分为23个主要功能类别,其中大部分基因与滇山茶的生长和代谢有关。1 363条差异表达基因注释到了KEGG数据库,进一步筛选出了差异表达基因注释序列最多的15条代谢通路,其中卟啉和叶绿素代谢途径中的GluRS、δ-ALAD、ALAS基因和类黄酮合成途径中ANS、LAR、CHS基因与滇山茶的花叶形成密切相关。研究表明,滇山茶的花叶呈色是由于叶色相关代谢通路中大量的基因表达量发生变化引起的,并不是由单基因突变所致,病毒诱导的多个代谢途径基因沉默可能是滇山茶花叶呈色的主要原因。该研究丰富了滇山茶的转录组信息,并为滇山茶的彩叶品种培育提供了一定的参考。

滇山茶提取物在化妆品中的应用

介绍了我国特色原产植物滇山茶提取物中含有的主要化学成分和提取工艺,对其在化妆品中的应用进行了综述,指出滇山茶提取物在化妆品中具有广阔应用前景和潜在经济价值。

滇山茶枝叶的化学成分研究

目的:研究滇山茶枝叶的化学成分。方法:采用聚酰胺、硅胶、Sephadex LH-20等方法分离纯化,并结合化合物的核磁共振、质谱数据及理化性质鉴定其结构。结果:从滇山茶枝叶75%的乙醇提取物中共分离得到了10个化合物,分别鉴定为:(-)-表儿茶素(1)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(2)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(3)、4-甲氧基-3,5-二羟基-苯甲酸(4)、2,5-二甲氧基-3-O-β-D-葡萄吡喃糖基肉桂醇(5)、undulatoside A(6)、linarionoside A(7)、myrciaphenone A(8)、tortoside A(9)和manglieside E(10)。结论:其中,化合物5、7~10为首次从山茶属植物中分离得到,化合物8对NO的生成有轻微抑制作用,化合物1~10对痤疮丙酸杆菌未表现出显著抑制活性。

五柱滇山茶芽苗砧嫁接育苗技术

五柱滇山茶为山茶科重要的油茶树种,芽苗砧嫁接是保留五柱滇山茶优良单株优良性状的主要技术。从嫁接前准备、嫁接、嫁接苗移栽、苗期管理、容器苗培育、病害防治、苗木出圃等方面论述了五柱滇山茶芽苗砧嫁接苗培育技术。

滇山茶茎流特征及其气象影响因子

为了深入了解茶花茎流特征这一重要生理指标,对滇山茶茎流及同期气象因子进行了1年的连续观测,利用相关分析法和错位对比法研究滇山茶茎流与气象因子的关系和茎流对气象因子的滞后情况。结果表明:茶花在夜间存在茎流现象,在11∶00-17∶30期间存在"午休"现象,夏季茶花茎流约6∶15启动,8∶00达到第1个峰值,春秋次之,冬季最晚。滇山茶茎流通量曲线在晴天呈现双峰型,茎流与温度和相对湿度相关性最好,雨天茎流通量曲线呈现多峰型,茎流与温湿度相关性较好,晴天和雨天茎流与气象因子存在时滞现象;得出结论:日出时间的季节性差异,可能导致夏季茎流启动最早,冬季最晚;滇山茶茎流形态曲线在晴天和雨天存在差异,这种差异可能是由于晴天和雨天的太阳辐射、相对湿度和空气温度的差异所导致;不同强度的太阳辐射对滇山茶的茎流具有不同的影响,晴天和雨天下空气温度、相对湿度与茎流表现出较好的相关性;茶花茎流与太阳辐射存在明显的时滞现象,结合其他气象因子对茎流的影响,建立了茎流的多元回归模型。

红花油茶、滇山茶育苗技术研究

研究结果表明:培育红花油茶、滇山茶苗时,采用胚根切根法及半年生小苗切根法可大幅度诱发侧根、提高小苗的移裁成活率及保存率,尤其是胚根切根处理效果最佳。

浅谈滇山茶杂交育种

本文从种质资源、栽培历史、育种方向、亲本选择等方面对滇山茶杂交育种进行概述,疏理滇山茶杂交育种中存在的问题,进行分析并提出建议。

低温胁迫下2种倍性滇山茶生理生化变化及抗氧化酶活性相关基因表达分析

【目的】滇山茶为云南八大名花之首,其耐寒性较差,从生理与分子层面探讨2种倍性滇山茶的耐寒性,可为滇山茶耐寒基因挖掘及分子育种提供参考。【方法】以野生滇山茶四倍体(4X)和六倍体(6X)的1年生幼苗为材料,测定低温(-4℃)胁迫处理后的滇山茶叶片生理指标及转录组测序。【结果】从叶片表型观测看,在胁迫期至复温期中,六倍体叶片受损程度相对较小,抗寒表现优于四倍体;从生理指标结果看,除MDA及GSH外,六倍体的其他生理指标含量积累均大于四倍体;将抗氧化酶活性与其差异基因进行相关性分析发现,在四倍体和六倍体中,与GSH含量及POD活性呈显著相关性的基因分别为5个和7个、7个和17个,仅六倍体有2个基因与SOD活性显著相关。【结论】六倍体较四倍体能更有效抵御植株遭受的低温胁迫伤害;抗氧化酶相关基因可能通过调控其活性参与对低温的响应。

滇山茶不同品种花表型性状的多样性分析

【目的】通过分析38个滇山茶Camellia reticulata品种的12个花表型性状在数量、大小和形状三个维度上的分布和差异,探讨滇山茶不同品种花表型变异的(横向和纵向)规律,为滇山茶新种质的选育和高效利用提供参考。【方法】对滇山茶的12个花表型性状进行方差分析、相关性分析、主成分分析、综合分析和聚类分析,箱线图和应用频率分布函数等方法进行分析。【结果】滇山茶不同品种花的12个表型性状存在丰富的变异,变异系数为13.00%~67.00%,平均变异系数为27.24%;变异系数法的权重计算结果显示,雌蕊数(20.485%)的变异性影响最大,花瓣长宽比(3.99%)的变异性影响最小;相关性分析结果表明,12个性状间都存在极显著相关关系,花径与花瓣宽度相关性最大(r=0.822);主成分分析结果表明,前4个主成分提取到的特征值都均大于1.00,累计贡献率达到82.129%;通过聚类分析将其分为3大类。综合评价结果表明‘大理茶’的综合得分最高(F=3.230),在38个滇山茶品种中综合特性最好。对聚类分析中的3类滇山茶进行箱形图和频率分布函数分析,其中9个性状表现出显著差异,其余3个性状无显著差异,第Ⅰ类各性状分布较向上,第Ⅱ类分布较为居中,第Ⅲ类分布较向下。而在频率分布函数分析中,各类的性状均表现出明显的偏置,变化程度依次为数量相关特征>尺寸相关特征>形状相关特征。【结论】滇山茶的12个花表型性状存在丰富的变异现象,主要以雌雄蕊群逐渐瓣化为演化方向,研究结果确定了滇山茶花表型演化的趋势,为后期滇山茶定向育种提供一定的理论依据。

滇山茶登录品种统计及表型性状分析

对世界山茶属(Camellia)植物品种注册中心2021年及以前已登录的滇山茶(C.reticulata)823个品种进行资源和形态特征分析,并对其中形态特征记载完整的213个品种进行性状多样性分析、主成分分析和聚类分析。结果表明:滇山茶品种资源丰富,中国、美国和澳大利亚是主要来源地;其花色以红色系为主,其次是粉色,稀有复色和白色;花型主要为半重瓣型和重瓣型,少有单瓣型;叶形以椭圆形为主,其次为圆形、卵形、披针形;叶尖以渐尖为主,叶基以楔形为主。213个品种的表型多样性指数(H)为0.41~1.91,其中叶宽的H值最大(1.91);变异系数(CV)为15.16%~49.08%,叶长的CV最小(15.16%),花瓣数的CV最大(49.08%);通过主成分分析,推测叶片的性状对滇山茶品种分类有重要作用;以叶片大小、花瓣数等聚类,213个品种可分为3个类群,第Ⅰ类群可作为单瓣型花良种选育的材料,第Ⅲ类群花瓣数和叶片较大,可作为重瓣型花良种选育的材料。

滇西4种山茶果实性状变异分析

对腾冲红花油茶、五柱滇山茶、云南连蕊茶和怒江红山茶的果实性状变异及性状间的相关性进行分析。结果表明:腾冲红花油茶、五柱滇山茶、云南连蕊茶和怒江红山茶果实在种间及种内均存在极显著的差异,4个物种果实变异系数最大的是单果重为53.94%,其次是果皮厚度为38.81%、果径为27.10%、果高为24.60%,最小的是果形指数为20.99%;物种变异丰富度分析可知:腾冲红花油茶的自然群落的变异最丰富;聚类分析表明腾冲红花油茶与五柱滇山茶果实性状较相似,怒江红山茶与云南连蕊茶果实性状较相似。单果重与果高、果径、果形指数、果皮厚度成极显著的相关关系。