响应面法优化微波辅助提取滇桂艾纳香多糖工艺研究

用微波辅助提取滇桂艾纳香多糖(Blumearipaiapolysaacharide,BRP)首先通过单因素实验选取影响因素与水平,然后在单因素实验的基础上采用三因素三水平的响应面分析,依据回归分析确定最佳提取工艺条件为:微波提取时间11.0min,提取温度75.0℃,水料比37∶1,采用该工艺条件,提取3次,BRP的提取率达到2.44%。

滇桂艾纳香多糖的分离纯化及单糖组成分析

以滇桂艾纳香干燥全草为原料,以水为溶剂提取多糖BRP,经过D101大孔树脂脱色,DEAE-纤维素柱分离,依次用水和0.15,0.3,0.45 mol/L Na Cl溶液梯度洗脱,得BRP-0,BRP-1.5,BRP-3和BRP-4四个洗脱部分;将BRP-0,BRP-1.5采用Sevage法脱蛋白、活水透析和Sephadex G-15柱层析,再经琼脂糖Sepharose 6FF柱层析分离纯化,得到BRP-0-1,BRP-1.5-1,BRP-1.5-2,BRP-1.5-3和BRP-1.5-4五个组份;GPC检测其相对分子质量、分子质量分布及峰型,确定它们为均一组分多糖;HPLC分析结果显示,BRP-0和BRP-1.5主要由鼠李糖、果糖和半乳糖组成,其物质的量之比大致为:1.00∶0.962∶0.392和1.00∶1.125∶0.584.

滇桂艾纳香多糖BRP的结构解析

以滇桂艾纳香为原料,经热水抽提、Sevag法除蛋白、醇沉、DEAE-纤维素柱层析、Sephadex G-200、Sepharose 6 F.F.凝胶色谱纯化得到纯品BRP;经HPGPC检测分析表明,BRP为均一多糖,分子量为3.3×104 Da;用UV、IR、HPLC、HPGPC、GC-MS、甲基化、NMR(1H NMR、13C NMR、HMQC、HMBC)等方法对BRP结构进行表征,结果表明,BRP仅由呋喃果糖残基组成,以→2)Fruf(1→(或→1)Fruf(→2)方式链接,推导其结构式为:β-D-Fruf-{2[→1)-β-D-Fruf(2→]n-1}-β-D-Fruf.