滇结香花改善糖尿病胰岛损伤及机制研究

本文旨在评价滇结香花正己烷提取物(EGH)降糖及保护胰岛作用,并通过胰岛损伤细胞模型探究其作用机制。采用链脲佐菌素(STZ)联合高脂饲料诱导小鼠2型糖尿病模型,通过检测小鼠空腹血糖、糖化血红蛋白和胰岛素分泌,评价EGH的降糖和保护胰岛作用。并采用棕榈酸联合葡萄糖诱导胰岛RIN-m5F细胞损伤模型,对ROS生成量、caspase-3基因水平、AKT、FOXO1和JNK蛋白水平进行检测,探究EGH改善糖尿病胰岛损伤作用机制。结果表明EGH可以减少ROS生成量、降低caspase-3基因转录水平、激活AKT抑制FOXO1,同时抑制JNK的激活,从而改善β细胞的损伤。

滇结香花提取物组分1(Fr.1)对C2C12肌细胞胰岛素抵抗的改善作用

探讨滇结香花正己烷提取物组分1(Fr.1)改善棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导C2C12肌细胞产生胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)的效果及其作用机制。方法:本文采用PA诱导C2C12肌细胞建立稳定的胰岛素抵抗细胞模型,通过检测Fr.1对胰岛素抵抗细胞(C2C12/IR)葡萄糖消耗量、葡萄糖摄取量的变化,研究其对PA介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)、胞内磷脂酰肌醇激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路中相关基因及蛋白表达的影响。结果:0.75 mmol/L PA作用C2C12肌细胞16 h作为最佳建模条件;Fr.1在无细胞毒性范围内(12.5~100μg/mL)可显著增加C2C12/IR对葡萄糖的消耗量及摄取量;Fr.1可明显上调胰岛素受体(Insulin receptors,IRs)、胰岛素受体底物(Insulin receptor substrate-1,IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(Glut4)、PI3K、AMPKα基因的表达水平,并上调p-IRs、p-IRS-1、Glut4、p-AMPKα、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、p-AKT蛋白质的表达水平,表明滇结香花提取物Fr.1可通过调控多个信号通路改善IR。

滇结香花中5种化学成分对四氯化碳肝损伤小鼠的保护作用

目的研究滇结香花中5种化合物对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用及其作用机制。方法用四氯化碳诱导化学性肝损伤小鼠模型,随机分为空白组、模型组、阳性对照组、紫云英苷低、高剂量组(ZL、ZH)、西瑞香素低、高剂量组(XL、XH)、结香苷C低、高剂量组(JL、JH)、水杨酸低、高剂量组(SL、SH)、银锻苷低、高剂量组(YL、YH)。测定血清中AST、ALT含量,肝组织中MDA、SOD水平;应用RT-PCR测定肝组织中IL-6、TNF-αmRNA的相对表达量;HE染色观察病理切片,研究该5种化合物的保肝作用及其可能的作用机制。结果与模型组相比,ZH、SH、JL、JH、XH、YH能够明显降低血清中ALT、AST含量,明显改善肝脏病理组织状况,各给药组均能明显降低肝组织中MDA,提高SOD含量;RT-PCR结果显示,除ZL组外,其他给药组均能明显抑制TNF-αmRNA表达,除YL、ZL、XL组外,其他给药组对IL-6 mRNA的相对表达量的影响均具有统计学意义。结论 ZH、SH、JL、JH、XH、YH对四氯化碳引起的小鼠肝损伤具有较好的保护作用,可能是通过调节小鼠的免疫功能,增强肝脏抗氧化能力,减少脂质过氧化物生成发挥作用。

滇结香花不同提取部位对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的影响

目的评价滇结香花不同提取部位对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的影响。方法取昆明种小鼠110只,随机分为空白对照组,模型组,联苯双酯组(阳性对照组,0.15 g·kg^(-1))以及滇结香花石油醚提取部位、30%乙醇提取部位、60%乙醇提取部位、90%乙醇提取部位的低、高剂量组(给药量分别为0.1,0.3 g·kg^(-1)),各剂量组连续给药7 d,腹腔注射0.2%四氯化碳花生油溶液(10 mL·kg^(-1))建立急性肝损伤小鼠模型,眼眶取血,测定血清中ALT、AST、TBIL、TBA的含量变化;小鼠肝脏处理,测定肝组织匀浆GSH、MDA、SOD含量,观察四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠肝组织病理学变化。结果滇结香花不同提取部位不同剂量组中,除石油醚部位低剂量组、90%乙醇提取部位低剂量组外,其他剂量组均可显著降低血清中ALT、AST、TBIL水平(P<0.01);除石油醚低、高剂量组外,其他剂量组均可降低血清TBA水平(P<0.05,P<0.01)。测定肝组织匀浆中各项指标,石油醚高剂量组和30%及60%乙醇提取部位低、高剂量组中,MDA水平明显降低,GSH、SOD水平显著升高(P<0.05,P<0.01);小鼠肝组织病理学变化,除石油醚低剂量组、30%乙醇提取部位低剂量组及90%乙醇提取部位低、高剂量组外,其他剂量组损伤均有明显缓解。结论滇结香花30%乙醇提取部位高剂量组及60%乙醇提取部位低、高剂量组具有保护肝组织的作用,缓解四氯化碳造成的肝损伤,并且60%乙醇提取部位其作用效果明显优于阳性对照组。其机制可能是通过阻断脂质过氧化反应,清除体内过量的自由基,保护细胞的正常代谢,维持细胞的稳定性,该研究为一种新的用药资源提供了一定的理论依据。

滇结香花对他克莫司诱导的糖尿病大鼠胰腺的保护作用及机制研究

目的研究滇结香花乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extraction from Edgeworthia gardneri Flos,EG)对他克莫司诱导的糖尿病模型大鼠胰腺的保护作用及其机制。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、滇结香花组和罗格列酮组,每组10只。采用他克莫司单因素干预制作SD大鼠糖尿病模型,通过检测大鼠空腹血糖、胰岛素、糖化血红蛋白水平,显微镜下观察胰腺组织病理学变化,评价EG降糖和保护胰腺组织的作用。并采用RT-PCR和Western blot分别检测胰腺组织中胰岛素受体底物蛋白2(insulin receptor substrate 2,IRS-2) mRNA和蛋白表达水平,探究EG保护糖尿病胰腺组织的作用机制。结果与正常组比较,他克莫司诱导的糖尿病模型大鼠血糖、胰岛素抵抗指数、糖化血红蛋白升高,胰岛素、胰岛素分泌指数降低(P<0.05)。与模型组比较,滇结香花组血糖、糖化血红蛋白降低,胰岛素、胰岛素分泌指数升高(P<0.05),大鼠胰腺组织IRS-2mRNA表达量和IRS-2蛋白表达量增加(P<0.05)。HE染色观察到滇结香花组大鼠胰腺组织切片中胰岛细胞形态结构明显改善,细胞数目增多,排列较整齐,胞浆分布均匀。结论 EG能降低他克莫司诱导的糖尿病模型大鼠的血糖、糖化血红蛋白水平,其机制可能是通过胰腺胰岛素信号转导通路中胰岛素受体底物,保护胰腺,促进胰岛素分泌,增强糖代谢。