妊娠早期滋养层组织人绒毛膜促性腺激素分泌的调节

为了探讨人早孕滋养层组织中人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）分泌的自分泌和旁分泌调节机制。将人工流产获得的正常绒毛组织剪成１ｍｍ３小块接种在涂有胶原的培养瓶中，每瓶加入２ｍｌ含有１．７５ｎｍｏｌ／ＬＮ－２－羟乙基哌嗪－Ｎ＇－２乙烷磺酸（ＨＥＰＥＳ）、２ｎｍｏｌ／Ｌ谷氨酰胺、１０５ＩＵ／Ｌ青霉素和１００ｍｇ／Ｌ链霉素的ＭｃＣｏｙ５ａ培养液，绒毛组织先培养在３７℃的ＣＯ２孵箱中（ＣＯ２：空气＝５％：９５％）４８ｈ，以排除其内源的激素，然后加入各种激素或作用物，每天采集并更换一次培养液，收集的培养液存于－２０℃留待放射免疫测定用。实验结束时以１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ裂解组织块供蛋白质测定用。结果表明ＧｎＲＨ对ｈＣＧ分泌呈现双相的作用：低剂量刺激而高剂量抑制ｈＣＧ分泌，而ＴＲＨ对滋养层未见效应。去甲肾上腺素亦具有促进ｈＣＧ分泌的作用，并呈现剂量依赖反应，随去甲肾上腺素处理时间的增长，其刺激效应亦更为明显。阻断内源孕酮的转化和代谢，或加入外源孕酮或其前体，均不影响ｈＣＧ的分泌。此外，睾酮、雌二醇、前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）和前列腺素Ｆ２α（ＰＧＦ２α）等激素对ｈＣＧ的分泌也无直接影响。

缺氧适应相关基因在不同妊娠阶段滋养层组织中的表达

目的:探讨缺氧诱导因子脯氨酸羟化酶1(HPH1/PHD1)和缺氧诱导因子-1抑制因子(FIH-1)在不同妊娠阶段中的作用。方法:采用RT-PCR和Western blotting方法从mRNA和蛋白水平比较分析14例10周以内妊娠者(早孕A组)、11例10-12周妊娠者(早孕B组)、8例中期妊娠者(中孕组)和24例正常晚期孕妇(晚孕组)滋养层组织中的HPH1/PHD1和FIH-1的表达差异。结果:①在不同妊娠时期滋养层组织中均有HPH1/PHD1和FIH-1 mRNA及蛋白的表达,且均是早孕A组最低,早孕B组明显升高并达到峰值,此后逐渐下降,但均高于早孕A组的水平(P均<0.01)。②在妊娠期的各个阶段,HPH1/PHD1的mRNA和蛋白表达水平均强于FIH-1的表达,并均呈显著正相关;PH1/PHD1 mRNA与其蛋白间和FIH-1 mRNA与其蛋白间也呈显著正相关。结论:HPH1/PHD1与FIH-1可能在妊娠进展过程中氧分压变化的情况下通过调节HIF-1的表达和翻译参与对滋养细胞浸润和增殖的调控,参与胎盘发育,对于妊娠成功起重要调节作用。

高剂量LH-RH对妊娠早期人滋养层组织蛋白分泌的影响

本研究分析了妊娠早期不同周龄人胎盘绒毛滋养层组织培液中蛋白含量的变化。可知6、7、8、10周组织培养液,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测得12种主要蛋白质,此12种蛋白的相对百分含量不同,其中有三种是随周龄增加而增加;有一种是随周龄增加而减少;另有七种蛋白在6周后,它们的百分含量维持在稳定状态;仅有一种蛋白从6周至10周几乎一直保持在稳定水平。有可能这些蛋白质在妊娠过程中起着不同生理作用,所以在不同周龄中的合成量亦有变化。本研究同时证明高剂量LH-RH对胎盘绒毛滋养层组织中分子量大约为50,000和6,000左右的蛋白有抑制作用。由此,讨论了这两种蛋白的消失是否与LH-RH终止妊娠的作用有密切关系。

妊娠早期人滋养层组织中抑制素α和βA亚基mRNA的表达

抑制素(inhibin)和激活素(activin)是2种主要由性腺分泌的肽类激素,因分别能抑制和促进体外培养的垂体促性腺细胞释放促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)而得名.抑制素和激活素亦存在于人胎盘中,并对胎盘的激素分泌具有调节作用.但有关妊娠早期人胎盘抑制素的表达调控尚未见报道.

妊娠早期子宫微环境中蜕膜、滋养层及子宫NK细胞基因表达的研究

目的检测妊娠早期子宫微环境中蜕膜、滋养层及子宫NK(uNK)细胞基因表达变化,为揭示妊娠中母胎免疫屏障及胚胎发育与植入等过程中的生理与病理机制提供新的研究靶点。方法首先用免疫磁珠(MACS)技术分离及纯化uNK细胞,流式细胞仪检测其纯度,RT-PCR技术检测与uNK细胞的侵袭、促血管形成等生物学活性有关基因的转录水平,同时检测蜕膜与滋养层组织相应的配体表达状况。结果通过MACS技术检测,所获得的NK细胞纯度较高,大于95%,RT-PCR检测发现妊娠早期uNK细胞可表达多种与侵袭和血管形成等功能有关的生物活性分子,同时在蜕膜与滋养层组织中检测到相应受体的表达。结论妊娠早期uNK细胞是一群具有强大调节功能的NK细胞亚群,在调控滋养层细胞的侵袭、母胎界面血管重建与免疫耐受形成中可能起重要的作用。

脱氢表雄酮对人早期胎盘孕酮分泌的影响

采用绒毛组织体外孵育模型，观察了脱氢表雄酮对人早期胎盘滋养层组织孕酮分泌的可能影响。结果表明，高浓度（１０－６ｍｏｌ／Ｌ以上）的脱氢表雄酮及其硫酸盐可以显著地抑制体外孵育的人早期胎盘滋养层组织的孕酮分泌（Ｐ＜０００１），低浓度则无效应。脱氢表雄酮及其硫酸盐抑制孕酮分泌的影响不依赖于其芳香化产物雌激素。芳香化酶抑制剂４羟基雄烯二酮也能抑制孕酮分泌（Ｐ＜０００１），但其作用可被１７β－雌二醇逆转。推测脱氢表雄酮及其硫酸盐抑制滋养层组织孕酮分泌的效应可能是其自身的功能，并依赖于其含量水平。

母-胎界面趋化因子及其受体表达与NK细胞在蜕膜中选择性聚集的关系

目的探讨母-胎界面中自然杀伤细胞(NK细胞)募集机制及生物学意义.方法留取8～10孕周正常孕妇行人工流产术后滋养层、蜕膜组织及外周血标本.采用免疫磁珠法分离、纯化外周血及蜕膜中NK细胞,逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测蜕膜和滋养层组织中的趋化因子,检测外周血、蜕膜NK细胞中相应的趋化因子受体及血源性生长因子.结果获得了高纯度的NK细胞;蜕膜和滋养层组织中可检测到某些趋化因子的表达;在蜕膜与外周血NK细胞中检测到有相应的趋化因子受体的表达及血源性生长因子.结论蜕膜中的NK细胞可能来源于外周血NK细胞,并由趋化因子募集而来,其可能参与母-胎界面血管形成.