HPLC法同时测定满山红疏肝颗粒中5种有效成分含量的研究

目的:建立同时测定满山红疏肝颗粒中夏佛塔苷、田基黄苷、异槲皮苷、槲皮苷和原儿茶酸5种成分的含量的方法。方法:研究采用Agilent Zorbax SB-Aq-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长为255 nm。结果:夏佛塔苷、田基黄苷、异槲皮苷、槲皮苷和原儿茶酸分别在浓度为0.0976~1.1712μg/mL、0.0833~0.9996μg/mL、0.0469~0.5628μg/mL、0.0374~0.4488μg/mL、0.0110~0.1320μg/mL范围内线性关系良好,有效成分在24 h内稳定性良好,重现性好,平均加样回收率分别为100.8%、100.8%,101.7%、101.3%、101.1%,RSD分别为1.1%、1.0%、0.7%、1.1%、1.3%。6批满山红疏肝颗粒中夏佛塔苷的含量在0.8869~0.9031 mg/g之间,田基黄苷的含量在0.1917~0.2034 mg/g之间,异槲皮苷的含量在0.0827~0.1052 mg/g之间,槲皮苷的含量在0.0098~0.0140 mg/g之间,原儿茶酸的含量在0.0655~0.0694 mg/g之间。结论:所建立的方法简便准确、专属性强、重现性好,为满山红疏肝颗粒建立了有效可行的质量控制体系。

满山红配方颗粒提取工艺优化及质量标准研究

对满山红配方颗粒的提取工艺进行优化,并建立了相应的质量标准,为其临床应用奠定基础。采用单因素试验结合Box-Behnken响应面法进行研究,以出膏率和杜鹃素含量为评价指标,对提取次数、提取时间和加水倍数进行考察,利用高效液相色谱法(HPLC)对杜鹃素含量进行定量测定,得出各因素对出膏率和杜鹃素含量的影响程度,并依据《中华人民共和国药典》2020年版,采用薄层鉴别法对满山红进行定性分析。通过Box-Behnken中心组和设计模型分析回归模型方差以及响应面图,确认满山红的最佳提取条件为:提取4次,提取时间2 h,加水18倍。薄层鉴别法显示,满山红斑点清晰,重现性佳,高效液相色谱法也显示出高度的准确性和重复性。优化后的满山红配方颗粒提取工艺操作简便、稳定可行,为满山红的深度开发和利用提供了科学依据。

满山红质量标志物含量测定及最佳采收期研究

目的:建立满山红药材质量标志物含量测定方法,依此对不同采收时期质量进行评价。方法:采用Agilent Extend-C18色谱柱,流动相为0.2%磷酸(A)-乙腈溶液(B)梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为360 nm(0~35 min)和296 nm(35~45 min),进样量为10μL。结果:金丝桃苷、槲皮素、山柰酚、8-去甲杜鹃素、杜鹃素分别在12.32~123.20、20.00~200.00、3.28~32.80、9.32~93.20、120.56~1 205.60μg/mL与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为99.70%~103.96%(RSD=1.85%)、99.13%~102.61%(RSD=1.71%)、98.10%~102.86%(RSD=1.76%)、98.29%~100.85%(RSD=0.90%)、98.76%~100.62%(RSD=0.66%);确定7月份为最佳采收期。结论:采用高效液相色谱(HPLC)法同时建立了金丝桃苷、槲皮素、山柰酚、8-去甲杜鹃素、杜鹃素的测定方法,使满山红的质量评价方法更便捷、更全面,以此评价的最佳采收时期方法合理,可为保证满山红药材质量及促进其开发利用提供实验依据。

RP-HPLC法测定满山红叶及其制剂中杜鹃素含量

目的 建立 RP- HPL C测定满山红叶及其制剂芩暴红胶囊中杜鹃素含量的方法。方法 固定相为 Shim-Pack VP- ODS反相柱 ;流动相为甲醇 -水 ( 65 .5∶ 3 4 .5 ) ;检测波长 2 96nm。结果 该方法的线性范围为 0 .1～2 .0 μg,r=0 .9991;平均回收率为 96.60 % ,RSD=1.0 7% ( n=5 )。结论 本法简便 ,准确 ,灵敏度高 ,重现性好 。

满山红止咳平喘有效成分的研究

目的研究满山红中的止咳平喘活性化学成分。方法利用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱等多种现代色谱分离成分,并根据理化常数和光谱分析进行结构鉴定。结果从满山红中分离得到了7种活性化合物,分别为杜鹃素(farrerol),杨梅素(myricetin),槲皮素(quercetin),二氢槲皮素(taxifolin),伞形花内酯(umbelliferone),金丝桃苷(hyperine),杜松脑(ju-niper camphor)。结论为下一步开发满山红抗咳喘新药提供了可靠的化学基础,且对修正以往认为满山红药材挥发油中以杜鹃酮为主要成分的观念提供了实验依据。

RP-HPLC法测定东北地区不同产地满山红中齐墩果酸与熊果酸

目的建立同时测定满山红中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱方法。方法采用Hyporsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.03 mol/L磷酸盐缓冲液(pH=3.0,含6 mmol/L的β-环糊精)-甲醇(13∶87)为流动相,体积流量1.0 mL/min;检测波长210 nm。结果齐墩果酸和熊果酸分别在0.026 0～0.130 mg/mL和0.087 2～0.436 mg/mL线性关系良好,平均回收率分别为99.2%(RSD=1.1%)和98.6%(RSD=1.2%)。结论该方法简便快速,结果准确可靠,各产地满山红中熊果酸的量均高于齐墩果酸。

高效液相色谱法快速测定满山红中槲皮素和杜鹃素的研究

研究了用固相萃取预分离，高效液相色谱法测定满山红中槲皮素和杜鹃素。槲皮素和杜鹃素用90%甲醇加热回流提取，提取液用Waters Sep-Pak-C18固相萃取小柱预分离，然后用ZORBAX Stable Bound（50×4．6mm i．d．，1．8μm）色谱柱，以O．2％的磷酸和甲醇（52：48，V／v）为流动相，槲皮素和杜鹃素在1．0min内可达到基线分离；用紫外二极管矩阵检测器检测。方法的加入标准回收率为98％～102％，相对标准偏差为1．6％～1．8％。本法可用于满山红样品中的槲皮素和杜鹃素的测定，结果满意。

满山红滴丸急性毒性试验和主要药效学试验

目的:考察满山红滴丸的急性毒性和主要药效作用。方法:通过小鼠灌胃测定LD50,评价药物急性毒性;采用小鼠浓氨水致咳法、豚鼠枸橼酸致咳法、小鼠酚红排泌法考察其主要药效。结果:满山红的总黄酮有效部位灌胃给药,LD50为12.7863g·kg-1;分别以70,140,280mg·kg-1的满山红滴丸灌胃,能够显著缩短小鼠咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数,增加痰液的排除,分别以28,56,112mg·kg-1豚鼠灌胃,能够显著缩短豚鼠咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数。结论:满山红滴丸有较低的急性毒性,有显著的止咳和祛痰作用。

微波辅助萃取满山红叶中总黄酮的研究

用带可控温的Star-2型开罐式微波消解仪对满山红叶中的总黄酮进行了微波萃取研究。通过正交试验考察了微波萃取溶剂、微波辐照时间、萃取温度和液固比等条件对满山红中总黄酮萃取率的影响。结果表明,在乙醇浓度为80%、萃取温度为90℃、微波辐照时间为10 min、液固比为40∶1的条件下,微波萃取满山红叶中总黄酮萃取率最佳。与传统回流法相比,萃取率提高了16%。

满山红挥发油的分析及在卷烟中的应用

为开发新的天然烟用香原料,采用同时蒸馏萃取法提取了满山红挥发油,GC/MS法对挥发油成分进行了分离鉴定,并用该挥发油进行了B2F和C3F等烟叶加香试验。结果表明:①满山红挥发油中共鉴定出78种挥发性成分,主要有石竹烯、1,5,9,9四甲基-1,4,7环十一碳三烯、杜鹃酮、桉叶醇和糠醛等;②该挥发油具有提高B2F和C3F等香气质和香气量,降低刺激性和改善余味的作用。

超临界二氧化碳萃取满山红中黄酮类物质的工艺研究

目的确定超临界CO2萃取满山红中黄酮类物质的最佳工艺条件。方法通过正交实验考察最佳萃取工艺条件,并测定萃取物中总黄酮含量。结果最佳工艺条件是:原料粒度65目,萃取压力28 MPa,萃取温度为45℃,夹带剂用量1.5 m l/g。结论采用超临界二氧化碳萃取满山红中黄酮类物质是可行的。

两种微波辅助萃取法萃取满山红叶中总黄酮

用敞口和密闭两种微波萃取装置,对满山红叶中有效成分总黄酮进行了微波萃取的比较研究.在乙醇体积分数为80%,敞口微波辐射时间为10 min,温度为90℃,液固比为40∶1时,萃取效率为115.6%;密闭微波辐射时间为20 min,压力为600 kPa,液固比为20∶1的条件下萃取效率为114.0%.与传统的回流提取法相比较,两种微波萃取法萃取效率都高于回流提取法,敞口微波萃取效果则更好一些.

满山红滴丸平喘抗炎作用的研究

目的研究满山红滴丸的平喘及抗炎作用。方法通过对豚鼠的平喘作用实验、豚鼠离体气管平滑肌试验考察满山红滴丸的平喘作用;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、大鼠棉球肉芽肿试验考察抗炎作用。结果满山红滴丸分别以28、56、112mg/kg豚鼠灌胃,能够缩短豚鼠喘息潜伏期;0.12、0.24、0.48mg/ml的浓度均能显著对抗1.67×10-5g/ml磷酸组胺引起的豚鼠气管平滑肌收缩;分别以70、140、280mg/kg小鼠灌胃,能较明显地抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀;35、70、140mg/kg大鼠灌胃,中剂量和高剂量能够显著抑制大鼠棉球肉芽肿。结论满山红滴丸有较明显的平喘和抗炎作用。

满山红油的高效液相特征色谱考察

目的：探求不同产地和同一产地不同采收期的满山红油的高效液相（HPLC）特征色谱，为建立满山红油的色谱特征图谱提供依据。方法：按中国药典2005年版一部附录XD中挥发油测定的甲法，水蒸气蒸馏提取挥发油。采用梯度洗脱技术进行HPLC分离分析。色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18柱，流动相为乙腈-0．1％磷酸水溶液，流速为1mL·min^-1；检测波长为210nm。用聚类分析方法处理色谱指纹信息，比较色谱以牻牛儿酮为参照色谱峰的32个特征峰的信息、单波长的全部指纹信息及200-350nm全波长的二维特征图谱的指纹信息。结果：所用的特征图谱测定系统对满山红油的分离良好，牻牛儿酮的纯色谱峰得到确认。采用200-350nm全波长的二维特征图谱的指纹信息较采用单波长全部特征指纹信息及色谱特征峰指纹信息的聚类结果更加可靠。结论：不同产地的满山红油中吉马酮的含量差异较大。不同产地的满山红油的色谱特征色谱比较相近，但有差别。200-350nm全波长的二维特征图谱的指纹信息更能全面表达满山红油的内在质量。

满山红总黄酮对肠平滑肌收缩功能影响

目的：观察满山红总黄酮（Rhododendron dauricum L.total flavonoids,RTF）对肠平滑肌收缩功能的影响并探讨其作用机制。方法：采用炭末推进法,观察RTF对正常小鼠小肠蠕动的影响;采用离体小肠灌流技术,观察RTF对乙酰胆碱（Ach）、组胺和氯化钡所致肠平滑肌收缩的影响。结果：RTF（180、90、45 mg·kg^-1）可以剂量依赖性的降低炭末推进率（P〈0.01）;RTF（0.5-4 g·L^-1）对乙酰胆碱（Ach）、组胺和氯化钡所致肠平滑肌收缩也具有剂量依赖性的抑制作用（P〈0.01）。在无钙灌流液中,RTF（2 g·L^-1）孵育10 min后可使CaCl2的量效曲线向下移位且可使Ach在无钙灌流液中诱导的肠管最大收缩幅度明显降低（P〈0.01）。结论：RTF在体内外能剂量依赖性的抑制小肠平滑肌的收缩,其机制与阻断M3受体和H1受体、降低细胞内游离钙离子浓度有关。

大孔吸附树脂纯化满山红总黄酮工艺研究

目的:从11种树脂中优选纯化满山红总黄酮的最佳型号,确定工艺条件及参数。方法:以饱和吸附量为指标,考察11种不同型号树脂的吸附能力;采用正交试验设计,以固形物中总黄酮含量为考察指标,对影响总黄酮提取工艺的因素进行研究。结果:11种树脂中,WLD型树脂对满山红总黄酮具有较好的吸附能力;树脂柱的径高比及样品溶液流速对纯化效果有显著影响。结论:经大孔吸附树脂纯化后,满山红中总黄酮含量达35%,表明本法可用于纯化满山红总黄酮。

HPLC法测定满山红油中牻牛儿酮含量

目的：建立满山红油中牻牛儿酮含量测定的高效液相色谱法。方法：使用Eclipse XDB-C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相为65%乙腈水溶液,流速为1.0m l.m in-1;检测波长为210nm。结果：牻牛儿酮在0.1010~1.010μg范围内与其色谱峰面积线性关系良好r=0.9996,平均回收率为100.1%,RSD为1.0%。结论：本法简便、准确、重复性好,可用于满山红油中牻牛儿酮含量的测定。

满山红的化学成分和提取方法研究进展

满山红为杜鹃花科杜鹃花属植物兴安杜鹃的干燥叶,具有止咳、祛痰的功效,主要用于治疗急(慢)性支气管炎、哮喘,且镇咳、祛痰效果较好。满山红所含化学成分多达数十种,现对近年来满山红化学成分和提取工艺的研究进行综述,从而为进一步研究开发满山红新药提供参考。

超临界CO_2萃取的满山红挥发油成分分析

目的:对超临界CO2萃取法和水蒸气蒸馏法提取的满山红挥发油化学成分进行比较研究。方法:采用GC-MS法对两种方法提取的满山红挥发油进行成分分析。结果:超临界CO2萃取法提取的挥发油鉴定出52个成分,水蒸气蒸馏法提取的挥发油鉴定出48个成分,两者共有成分45个。结论:两种方法提取的挥发油成分接近。

HPLC测定满山红中杜鹃素、槲皮素的含量

目的 建立高效液相法测定满山红中杜鹃素、槲皮素的含量。方法 用Nova pakC18(2 5 0mm× 4 .6mm ,4 μm)色谱柱 ,杜鹃素流动相为乙腈 水 (45∶5 5 ) ,检测波长为 2 96nm ;槲皮素流动相为甲醇 0 .0 6 %磷酸 (5 0∶5 0 ) ,检测波长为 36 0nm。流速均为 1.0mL·min-1。结果 杜鹃素在 0 .1118～ 0 .5 5 92 μg范围内呈良好的线性关系 ,回归方程为Y =2 792 .2X - 2 .76 19(r =1.0 0 0 0 ) ,平均回收率为 10 1.34% (RSD =1.5 5 % ,n =5 ) ;槲皮素在 0 .10 0 2～ 0 .5 0 0 8μg范围内呈良好的线性关系 ,回归方程为Y =336 1.5X +0 .95 2 4 (r =1.0 0 0 0 ) ,平均回收率为 99.75 % (RSD =1.71% ,n =5 )。结论 本法简便 ,快速 ,灵敏 ,准确 ,重现性好 。