二种滤纸血滴片SPA-ELISA诊断囊虫病的应用

用快速SPA－ELISA和SPA－ELISA一步法检测囊虫病人的滤纸血滴片和血清，前者阳性率分别为83．05％和86.44％．后者分别为96．67％和94.91％，均无统计学差异（P＞0．05）；两法的假阳性率均为3．33％。实验条件的研究表明：血滤纸4℃浸泡过夜和室温浸泡2h的阳性率为83．05％和84．38％，直径1．2cm和0．6cm阳性率为83．05％和85．29％，亦均无显著性差异（P＞0．05）。说明滤纸血滴片可以代替血清样本，具有敏感、安全、简便以及非常实用等优点，血滴片SPA－ELISA在囊虫病的诊断及流行病学调查中有较好的应用价值。

套式PCR检测滤纸干血滴中恶性疟原虫的研究

目的：建立简易、实用的套式ＰＣＲ检测恶性疟原虫（Ｐ．ｆ．）的方法。方法：以小亚单位核糖体核糖核酸基因（ＳＳＵｒＤＮＡ）为目的片段的双温度点套式ＰＣＲ扩增滤纸干血滴中Ｐ．ｆ．ＤＮＡ，并将结果与镜检法进行比较研究。结果：１４３例标本中两法均阳性和均阴性分别有５５份和５１份，镜检阴性而ＰＣＲ阳性者３４份，镜检阳性而ＰＣＲ法阴性３份。套式ＰＣＲ总阳性率为６２％，显著高于镜检法的４１％，两者符合率为７４％。结论：本法简便、快速，敏感性高、特异性强，具有一定的现场应用价值。

检测滤纸干血滴中间日疟原虫(英文)

从滤纸干血滴上用Chelex处理洗脱下的疟原虫DNA,经套式PCR扩增间日疟原虫SSUrRNA基因特异性121bp片段,分析该方法的敏感性和特异性。37例血样检测结果全部阳性,当原虫密度低至25个原虫/uL血时仍可成功检测到该特异条带,且其它三种人疟原虫(恶性疟原虫,三日疟原虫和卵形疟原虫)血样均为阴性。提示滤纸干血滴与PCR扩增技术相结合,是疟疾诊断或流行病学调查的实用工具。

滤纸干血滴间接血凝法检测人群弓形体感染的研究

弓形体病(Toxoplasmosis)是一种广泛分布于世界各地的人畜共患的疾病。近十年来,我国各地大多取静脉血进行弓形体的流行病学调查,该法在开展大面积的血清流行疯学调查工作中甚为不便。为寻找一种简便、快速、特异和敏感的方法供基层应用,我们于1988年9月进行了滤纸干血滴和血清标本间接血凝试验(IHA)对比研究,获得了令人满意的结果,现报告如下。

滤纸片收集样品分离恶性疟原虫DNA的方法

滤纸片收集样品分离恶性疟原虫ＤＮＡ的方法牟玲（沈阳市传染病院，沈阳１１０００６）罗恩杰（中国医科大学寄生虫学教研室）关键词恶性疟原虫滤纸片干血滴ＤＮＡ分离聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术以其操作简便、特异性强、敏感性高为特征，被广泛地应用于疟疾的诊断、流行...

血清与滤纸干滴血ELISA法诊断丝虫病对比观察

血清与滤纸干滴血ＥＬＩＳＡ法诊断丝虫病对比观察沈毓祖１倪季刚２陈建民１（１安徽省卫生防疫站２３００６１２全椒县卫生防疫站）国内目前用于诊断丝虫病的ＥＬＩＳＡ方法大都采用血清作为样本，而滤纸干滴血报道较少。由于血清采集困难，群众不易接受，且携带及保存均...

聚合酶链反应用于恶性疟疾诊断初步研究

合成一对恶性疟原虫特异引物，用聚合酶链的反应（PCR）技术检测海南岛恶性疟病人滤纸血滴30例，结果28例阳性，在206bp处可见一条清晰易辨的扩增条带，2例阴性经血片复查，其中1例为间日疟原虫；同时检测间日疟病人血滴和未发现原虫的发热病人血滴各16例，均为阴性，与镜检符合率达98．4％（61／62例）。初步表明PCR法具有准确、敏感、特异、简捷等优点，采用滤纸血滴方便现场采样、保存和送检，且易批量检测，在疟疾临床诊断和流行病学调查方面，将可替代血片镜检法，逐步扩大应用。

疟原虫DNA模板制备用于PCR诊断方法的研究

为确立一种快速、敏感、特异的疟原虫检测方法，根据红内期疟原虫ＳＳＵｒＲＮＡ基因序列，设计合成引物３条，采用微量全血和滤纸干血滴标本快速制备疟原虫ＤＮＡ模板的９种方法，进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）并比较。结果显示有５种方法的实验效果最佳，其中，全血ＰＣＲ仪预热及滤纸干血滴Ｃｈｅｌｅｘ煮沸两法操作简单、所需试剂较少。采用该两法对深圳地区２０２份和湖北地区１６份镜检阳性的全血和深圳地区１２９份滤纸干血滴标本进行检测，结果与镜检的符合率分别为９８．５％和９９．２％。表明本研究筛选出的两种方法制备ＤＮＡ模板的ＰＣＲ检测体系，适用于临床快速准确诊断间日疟、恶性疟或两者混合感染，尤其适用于流行病学调查，值得推广。

α-半乳糖苷酶A活性检测与Fabry病诊断筛查

目的:建立α-半乳糖苷酶A(α-GalA)活性的检测方法,为Fabry病的诊断和筛查提供依据。方法:分别采用外周血粒细胞和干燥血滴滤纸片(干血片)检测11个家系15例Fabry病患者和30名健康者的α-GalA活性,检测采用底物荧光法。比较Fabry病患者组与健康对照组间、干血片法不同保存时间组间的酶活性,并建立酶活性正常参考范围,计算2种检测酶活性方法的灵敏度。结果:正常人干血片酶活性为(3.68±0.98)nmol/(ml·h),粒细胞酶活性为(46.21±8.56)nmol/(h·mg),两者正常参考范围分别为≥1.68nmol/(ml·h)、≥25.45nmol/(h·mg)。男性半合子患者酶活性显著下降(P<0.001),干血片酶活性值<0.15nmol/(ml·h)、粒细胞酶活性值<1nmol/(h·mg),酶活性的2种检测方法在男性半合子患者中的灵敏度为100%。在女性杂合子患者酶活性部分下降,4例女性杂合子患者中3例干血片检测酶活性的结果、2例检测外周血粒细胞酶活性的结果处于正常范围,检测女性杂合子干血片和粒细胞酶活性的灵敏度分别为25%和50%。干血片在室温下保存3、14和28d后酶活性值分别为(3.63±0.96)nmol/(ml·h)、(3.60±0.88)nmol/(ml·h)和(3.06±0.68)nmol/(ml·h),残余酶活性值大于基线值80%,显著高于男性半合子酶活性值(P<0.001)。结论:干血片检测酶活性更简易、快速、经济,便于保存运输,可用于高危人群筛查,外周血粒细胞酶活性测定对女性杂合子灵敏度更高,测定值更精确,适于家系筛查研究。酶活性检测可有效诊断和筛查男性半合子Fabry病患者。