广东地区人群抗核抗体检测滴度及核型特征分析

目的通过分析广东地区抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)受试者滴度及核型阳性检出情况,探讨ANA阳性人群的临床特征,便于为广东地区人群的健康管理提供科学依据,为潜在的自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)患者提供早期健康指导和参考。方法回顾性分析2021年4月至2023年7月广东地区22家医院通过间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF)常规检测ANA的患者23771例,统计ANA滴度、核型阳性检出率及性别、年龄特征。结果23771例ANA检测患者阳性检出率为14.21%(3378/23771),随年龄增大ANA阳性患者数量呈递增趋势,60岁以上ANA阳性有1440例(42.63%)人数最多。不同年龄段ANA阳性检出率女性均高于男性。滴度以1∶80抗体低滴度为主,有2662例(78.81%),高滴度1∶1000与1∶1280阳性率均较低,其中颗粒型阳性检出2288例(67.73%)最高,60岁以上有879例(46.31%)人数最多,但男女颗粒型阳性率差距随着年龄增加逐渐缩短。结论广东地区女性ANA阳性检出率较高,其中1∶80颗粒型最多,提示患有系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病、干燥综合征或多发性肌炎等疾病有较大的风险,尤其是绝经后的中老年女性,同时60岁以上的男性也应多留意发生免疫疾病的风险。

Th1/Th2免疫应答平衡与肺炎支原体肺炎患者支原体抗体滴度及预后的关系探讨

目的探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)肺炎患者的血清MP-IgM(immunoglobulin M,IgM)抗体滴度与T辅助细胞(helper Tcells,Th)1型/Th2免疫应答平衡的关系。方法选取2020年1月至2022年3月收治于岳池县人民医院的214例MP肺炎患者作为研究对象,根据患者MP-IgM抗体滴度分为低滴度组(n=92)、中滴度组(n=75)、高滴度组(n=47),根据预后病情分为好转组(n=125)和恶化组(n=89)。用单因素分析不同MPIgM抗体滴度组以及不同预后组患者间的临床差异;用广义加性模型(generalizedadditivemodel,GAM)分析指标间的相关性;用多因素Logistic回归分析影响预后病情恶化的危险因素;用样条函数与Logistic回归结合的限制性立方样条法分析Th1/Th2与患者预后病情恶化风险的剂量反应关系。结果不同MP-IgM抗体滴度的3组患者间发热比例、发热消退时间、白细胞计数(white blood cell,WBC)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)、IFN-γ/IL-5差异具有统计学意义(P均<0.05),其中发热消退时间、WBC水平、CRP水平、IFN-γ水平、IL-5水平随着MP-IgM抗体滴度的升高而逐渐升高,IFN-γ/IL-5水平随着MP-IgM抗体滴度的升高而降低。MP-IgM抗体低滴度组和中滴度组患者的发热比例差异无统计学意义(P>0.05),但高滴度组患者中发热比例明显高于其余2组(P均<0.05)。IFN-γ、IL-5与MP-IgM抗体滴度均呈正相关,Th1/Th2免疫平衡指标IFN-γ/IL-5与MP-IgM抗体滴度呈负相关。多因素分析结果显示,IFN-γ>5.25 pg/mL、IL-5>4.05 pg/mL以及血清MP-IgM抗体滴度增加是病情恶化的最主要危险因素,IFN-γ/IL-5>1.40为保护因素。Th1/Th2的连续变化与预后病情恶化风险呈非线性剂量反应关系,Th1/Th2水平与患者预后病情恶化风险大致呈负相关,当Th1/Th2>1.20时,随着Th1/Th2水平的升高,预后病情恶化风险显著降低。结论MP肺炎患者血清MP-IgM抗体滴度与Th1/Th2免疫应答平衡指标IFN-γ/IL-5呈负相关,检测血清MP-IgM抗体滴度与Th1/Th2细胞因子指标有助于早期判断MP肺炎患者病情和预后。

柯萨奇病毒B1型病毒培养及滴度检测方法建立

筛选出COXB1的最适培养基及病毒保护剂,并用微量细胞病变法建立COXB1滴度检测方法。方法 通过对比HepG2、Vero 和293T三种细胞接种COXB1后细胞的病变程度(CPE)及速度确定了COXB1的适宜培养基质,并通过比较六种保护液对COXB1反复冻融7次的稳定性影响,确定最适病毒保护液,最后通过微量细胞病变法建立了COXB1滴度检测方法。结果 三种细胞中Vero 细胞为COXB1最适培养基质,六种病毒保护液,其中配方以20mM Tris-HCl+1%牛血清白蛋白+0.5mM氨基比林+2%硫酸庆大霉素 pH7.4为最佳保护液。通过微量细胞病变法标定病毒滴度为TCID50/mL为1.62×108,接毒后76h细胞CPE为100%,同时用ELISA检测病毒效价结果显示76h时不同稀释比例组抗原效价均达到峰值,即76h为病毒的最佳收获时间。结论 建立了稳定可靠的COXB1培养及滴度检测方法。

肺炎支原体肺炎患儿外周血PCT、IL-6水平与MP抗体滴度、MP-DNA的相关性分析

目的探究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿外周血降钙素原(PCT)和白细胞介素-6(IL-6)水平与肺炎支原体(MP)抗体滴度、肺炎支原体DNA(MP-DNA)的相关性。方法选取2023年3月至2024年3月武汉市第三医院收治的97例MPP患儿为研究对象,根据病情严重程度将其分为轻症组(n=63)和重症组(n=34),根据血清MP抗体滴度不同分为1∶160亚组(n=19)、1∶320亚组(n=56)和≥1∶640亚组(n=22)。比较轻症组和重症组患儿临床肺部感染评分(CPIS)、外周血PCT和IL-6水平、血清MP抗体滴度及MP-DNA阳性率,分析外周血PCT和IL-6水平与血清MP抗体滴度、MP-DNA阳性率的相关性。结果重症组患儿CPIS评分、外周血PCT水平、IL-6水平和MP-DNA阳性率均高于轻症组(P<0.05);两组患儿血清MP抗体滴度分布比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同血清MP抗体滴度亚组患儿外周血PCT、IL-6水平及MP-DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),外周血PCT、IL-6水平随血清MP抗体滴度增加而升高(P<0.05),血清MP抗体滴度1∶160亚组的MP-DNA阳性率低于MP抗体滴度1∶320亚组和≥1∶640亚组(P<0.05);Spearman分析结果显示,MPP患儿外周血PCT和IL-6水平、MPP重症、CPIS评分与血清MP抗体滴度、MP-DNA阳性结果均呈正相关(P<0.05)。结论MPP患儿外周血PCT和IL-6水平随病情严重程度而升高,与血清MP抗体滴度和MP-DNA阳性结果呈正相关,二者对MPP患儿病情评估具有一定参考价值。

密度法测定盐水中硫酸根滴度

目前,在黏胶纤维生产过程中,通常对盐水中硫酸根滴度的测定采用络合滴定法,但该方法操作繁琐、测定时间长且终点颜色不易辨别,不便于过程分析使用。通过试验发现,盐水中主要组分为硫酸钠和氯化钠,可采用密度法计算出硫酸根滴度,此方法相比其他方法操作简便,测定时间短,而且准确可靠。

不同抗生素对老年晚期潜伏梅毒患者血清RPR滴度及IL-17、IL-23水平的影响

目的探讨不同抗生素对老年晚期潜伏梅毒患者血清快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)滴度及白细胞介素(IL)-17、IL-23水平的影响。方法采用抽样便利法选择2021年12月至2022年7月南京中医药大学附属南京医院皮肤科收治的100例老年晚期潜伏梅毒患者为研究对象,按照不同抗生素治疗分为头孢曲松钠组和苄星青霉素组,各50例。头孢曲松钠组给予静脉滴注头孢曲松钠,每次1 g,每日1次,连续治疗10 d;苄星青霉素组给予肌内注射苄星青霉素,每次240万U,每周1次,连续治疗3次。治疗结束后对所有患者进行为期1年的随访。比较两组治疗后6个月、治疗后1年血清RPR滴度转阴情况,同时对比两组治疗前和治疗后1年IL-17、IL-23及免疫功能变化情况,并观察两组治疗期间不良反应发生情况。结果治疗后6个月、治疗后1年,头孢曲松钠组患者血清RPR滴度转阴率均高于苄星青霉素组[28.00%(14/50)比12.00%(6/50)、58.00%(29/50)比38.00%(19/50)](P<0.05)。IL-17、IL-23治疗前后的主效应差异有统计学意义(P<0.01),不考虑测量时间,各指标组间的主效应差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);各指标组间和时点间存在交互作用(P<0.05或P<0.01),治疗后1年,头孢曲松钠组IL-17、IL-23水平低于苄星青霉素组(P<0.05)。CD3^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)治疗前后的主效应差异有统计学意义(P<0.01),不考虑测量时间,各指标组间的主效应差异有统计学意义(P<0.05);各指标组间和时点间存在交互作用(P<0.05或P<0.01),治疗后1年,头孢曲松钠组CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于苄星青霉素组,CD8^(+)低于苄星青霉素组(P<0.05)。两组治疗期间腹泻、局部皮疹及不良反应总发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与苄星青霉素相比,头孢曲松钠治疗老年晚期潜伏梅毒更能提高患者血清RPR滴度转阴率,降低IL-17、IL-23水平,提高免疫功能,且安全性良好。

免疫染色法检测杆状病毒滴度方法的建立和优化

目的建立并优化杆状病毒滴度的检测方法。方法按照免疫染色法建立杆状病毒滴度检测方法,并对该方法的适用参数进行优化,通过筛选细胞接种浓度、病毒接种浓度、最适抗体稀释倍数,选择最佳反应条件优化检测方法,通过重复性、适用性实验验证该方法的准确性和特异性。结果细胞接种浓度选择0.65×10^(6)个/ml、病毒接种浓度选择104、抗体稀释倍数选择1∶500时检测结果最佳,应用最适检测参数进行重复验证,检测不同样品,仅杆状病毒组出现特异性病毒噬斑。结论建立并优化了重组杆状病毒滴度免疫染色方法,该方法具有良好的重复性、特异性和准确性,可用于生产中病毒滴度的检测。

sPLA2R-Ab滴度在特发性膜性肾病中的相关性研究

目的 探讨sPLA2R-Ab滴度与特发性膜性肾病(IMN)患者临床相关性,以期为临床诊断及治疗提供依据。方法 选取2021年1月至2023年1月,潍坊市人民医院肾内科诊断为IMN的91例患者作为研究对象,根据患者sPLA2R-Ab滴度不同分为阴性组、低浓度组和高浓度组,同时随机选取65例非膜性肾病(NO-IMN)患者作为NO-IMN组。分析不同滴度组间的病理分期,以及各组之间血清学指标和尿液学指标的关系。结果 IMN组中sPLA2R-Ab阳性患者70例,阳性率76.92%,48例患者处于低浓度组中。IMN组的24 h蛋白尿(24hUTP)、尿微量白蛋白(UALB)、白蛋白(ALB)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和sPLA2R-Ab与NO-IMN组的差异有统计学意义(P<0.05)。不同滴度组间血清学指标ALB、LDL、sPLA2R-Ab和全血Total-B(CD19^(+))差异有统计学意义(P<0.05),尿液学指标24hUTP,UALB,UIgG的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 sPLA2R-Ab滴度可作为IMN诊断的重要血清学检测指标,s PLA2R-Ab滴度还与IMN的病理分期以及临床症状相关,可根据sPLA2R-Ab滴度制订临床治疗方案。

温阳消瘿方治疗桥本甲状腺炎临床疗效及对患者TPOAb、TGAb抗体滴度的影响

目的 观察温阳消瘿方治疗桥本甲状腺炎临床效果及对患者TPOAb、TGAb抗体滴度的影响。方法 将医院内分泌科收治的89例桥本甲状腺炎患者(2021年6月—2022年6月)纳入本次试验,以随机数字法将纳入患者分成对照组(44例)与试验组(45例)两组,对照组患者均接受西医常规治疗,试验组患者在对照组治疗基础上结合温阳消瘿方治疗,比较两组患者的临床疗效、治疗前后血清抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)和抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)滴度、中医证候积分(颈前肿大、神疲乏力、畏寒肢冷、腰膝酸软)、甲状腺左右叶前后径及峡部厚度以及治疗不良反应。结果 试验组较对照组的治疗总有效率更高(P<0.05)。两组患者治疗前TPOAb、TGAb抗体滴度、中医证候积分(颈前肿大、神疲乏力、畏寒肢冷、腰膝酸软)、甲状腺左右叶前后径及峡部厚度比较(P>0.05),具有可比性;治疗后两组患者TPOAb、TGAb抗体滴度、中医证候积分均明显降低,试验组较对照组TPOAb、TGAb抗体滴度、中医证候积分降低幅度更大(P<0.05);治疗后甲状腺左右叶前后径及峡部厚度变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论 温阳消瘿方治疗桥本甲状腺炎临床效果显著,患者症状显著好转,甲状腺抗体滴度明显改善,治疗过程中均未见不良反应,安全有效。

蚀斑法测定呼吸道合胞病毒滴度的建立和验证

目的建立蚀斑法用于呼吸道合胞病毒的病毒滴度测定,并进行验证。方法通过测定样品的病毒滴度,比较滴度结果,筛选最佳覆盖物、覆盖物浓度和病毒孵育时间,从而建立蚀斑法用于测定呼吸道合胞病毒滴度。根据国际人用药品注册技术协调会指导原则和《中华人民共和国药典》要求,验证该方法的准确性、精密性、线性和耐用性。结果采用0.8%微晶纤维素作为覆盖物,病毒孵育2~3 h为建立蚀斑法的最优条件。该蚀斑法测定不同浓度样品病毒滴度的结果相对偏倚均小于10%;试验内和试验间精密性几何变异系数分别为11%和18%;本方法的线性斜率为1.004,相关系数为0.9991;本方法中固定细胞的时间0.5~24 h均适用,差异无统计学意义(F=1.767,P=0.2225)。结论建立的蚀斑法具有较好的准确性、精密性、线性和耐用性,适用于呼吸道合胞病毒的滴度测定。

冻干鼻喷流感减毒活疫苗病毒滴度FFA法的建立及验证

目的:建立并验证荧光灶法(FFA)检测冻干鼻喷流感减毒活疫苗病毒滴度的可行性。方法:采用FFA分别检测冻干鼻喷流感减毒活疫苗H1N1型、H3N2型、B型单一病毒收获液病毒滴度,并验证该方法的专属性、准确度、精密度、线性和耐用性。结果:该方法专属性良好;准确度回收率均为80%~115%,病毒滴度的试验内及试验间精密度RSD值均<10%;3个型别样品稀释倍数对数与病毒滴度呈线性关系,相关系数R2均>0.98;不同孵育温度的病毒滴度RSD值均<10%,耐用性良好。结论:建立的FFA具有良好的专属性、准确度、精密度、线性及耐用性,可用于冻干鼻喷流感减毒活疫苗病毒滴度检测。

重组腺相关病毒基因药物三种滴度的比较与分析

采用酶联免疫吸附测定(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)和转导方法对重组腺相关病毒(rAAV)的衣壳滴度、基因组滴度、转导滴度进行定量,并比较衣壳滴度/基因组滴度(P/GC)和基因组滴度/转导滴度(GC/TU).实验结果表明:3批rAAV的平均衣壳滴度为3.65×10^(13)P·mL^(-1),平均基因组滴度为8.67×10^(11)GC·mL^(-1),平均转导滴度为9.85×10^(9)TU·mL^(-1),P/GC平均值为41.70,GC/TU平均值为88.20,P/GC和GC/TU平均值接近于AAV2标准品,说明文中方法的制备工艺成熟、稳定,制备的rAAV感染活性较高.

脑脊液梅毒加热甲苯胺红试验滴度转阴的麻痹性痴呆患者预后的影响因素

目的 分析脑脊液梅毒加热甲苯胺红试验(TRUST)滴度转阴的麻痹性痴呆患者预后的影响因素。方法 纳入38例脑脊液TRUST滴度经治疗后转阴的麻痹性痴呆患者,根据日常生活能力量表(ADL)和简易精神状态量表(MMSE)进行分组,比较2组患者的性别、年龄、文化程度、脑脊液TRUST滴度转阴时的血清TRUST滴度、脑脊液白细胞计数和蛋白定量以及头颅磁共振情况,分析上述指标与患者预后有无相关性。结果 患者预后与年龄、性别相关性不大,而与其文化程度存在一定相关性,预后良好组文化程度较高。2组血清TRUST滴度比较,差异无统计学意义(P=0.506)。2组白细胞计数、蛋白比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。预后良好组头磁共振显示责任病灶的患者约占27.8%,预后不良组占40.0%,预后不良组高于预后良好组,但差异无统计学意义(P=0.833)。结论 麻痹性痴呆患者脑脊液TRUST滴度转阴并不代表预后良好,患者的预后还受文化程度、脑脊液白细胞计数、蛋白定量的影响。

基于母婴结局、TRUST滴度评价苄星青霉素G用药不同时机治疗妊娠合并梅毒患者的效果

目的探讨苄星青霉素G不同用药时机治疗妊娠合并梅毒患者的效果及对母婴结局、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)滴度的影响。方法回顾性选取2019年1月至2021年12月临平区分娩单位的119例妊娠合并梅毒患者作为研究对象,根据苄星青霉素G用药时机分为孕早期组(≤13+6周,n=40)、孕中期组(14~27+6周,n=55)和孕晚期组(≥28周,n=24)。三组均给予苄星青霉素G进行治疗,均连续治疗2个疗程。比较三组治疗前后的氧化应激水平,产妇、新生儿TRUST滴度及母婴结局。结果与治疗前比较,治疗后三组血清隐性氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)水平均降低,孕早期组均低于孕晚期组、孕中期组;与治疗前比较,治疗后三组血清超氧化物歧化酶(SOD)水平均升高,孕早期组高于孕晚期组、孕中期组;与孕晚期组、孕中期组比较,孕早期组患者及新生儿的TRUST阴性率、新生儿体重、出生后5 min Apgar评分均升高,先天梅毒儿、早产发生率均较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在孕早期采用苄星青霉素G治疗妊娠合并梅毒患者可有效改善其氧化应激水平,改善妊娠结局和围产儿的预后情况,提高产妇及新生儿的TRUST阴性率,减少先天梅毒儿、早产的发生。

肺炎支原体抗体滴度与RNA病原检测在儿童肺炎支原体肺炎诊断和治疗中的应用价值

目的探究肺炎支原体(MP)抗体滴度与RNA病原检测在儿童肺炎支原体肺炎(MPP)诊断和治疗中的应用价值。方法选取2020年6月至2021年6月本院收治的86例MPP患儿作为研究对象,所有患儿均采用颗粒凝集法检测MP抗体滴度,RNA实时荧光恒温扩增技术(SAT)测定MP-RNA。比较两种指标检测的阳性检出率,并分析阳性检出率的影响因素。结果MP抗体滴度的阳性检出率为88.37%,MP-RNA的阳性检出率为86.05%,组间比较差异无统计学意义。两种指标检测方法病程>1周阳性检出率分别为92.50%、97.83%均明显高于<1周的65.22%、70.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。两种指标检测方法使用大环内酯类药物阳性检出率分别为96.88%、88.88%,均明显高于未使用的68.52%、65.63%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MP-RNA与肺MP抗体滴度检测各有优劣,病程和大环内酯类药物用药史是影响阳性检出率的因素,单独检测时应注意避免检测的影响因素,以提高检测准确率及临床应用价值。

高危人群血清甲苯胺红不加热血清试验滴度与梅毒发生的相关性

探讨与分析高危人群血清甲苯胺红不加热血清试验滴度与梅毒发生的相关性。方法 2022年1月-2022年12月选择在本院进行诊治的梅毒高危人群108例作为研究对象,所有患者都给予血清甲苯胺红不加热血清试验与梅毒螺旋体颗粒凝集试验,判定血清甲苯胺红不加热血清试验滴度与梅毒发生的相关性。结果 在108例患者中,梅毒螺旋体颗粒凝集试验判断梅毒72例(梅毒组),占比66.67%,临床分期:Ι期40例,Ⅱ期24例,Ⅲ期8例。不同分期患者的血清甲苯胺红不加热血清试验滴度对比有显著差异(P<0.05)。血清甲苯胺红不加热血清试验滴度判断为梅毒70例,血清甲苯胺红不加热血清试验对高危人群梅毒诊断的敏感性与特异性分别为95.83%(69/72)、97.22%(35/36)。结论 血清甲苯胺红不加热血清试验对于高危人群梅毒的检测具有很高的敏感性与特异性,且试验滴度与梅毒患者的临床分期存在相关性,具有很好的临床应用价值。

滴度数据统计处理的再研究

血清学滴度资料的统计处理，在求几何均数时，传统方法由于取了每个组区间的下限值计算，而使计算结果出现偏差。自詹氏提出用求组中值（ｌｇｘ）中方法计算以来（詹绍康．滴度数据的统计处理．中国卫生统计１９８８；５（６）：２９）这一情况得到了纠正。但由于分组时取...

汉坦病毒感染Vero细胞病毒滴度和抗原滴度的动态观察

目的 观察汉坦病毒 (HV)在Vero细胞上的适应能力和毒株在该细胞中的增殖规律。方法 将HV感染Vero细胞 ,每隔 3d收取细胞培养液 ,直到细胞衰老 ,并观察细胞的病变情况。采用间接免疫荧光法 (IFAT)和反向被动血凝试验 (RPHA) ,观察细胞培养液的病毒滴度和抗原滴度的动态变化。结果 HV不致Vero细胞产生病变 ,病毒感染细胞第 8～ 11天时细胞培养液的病毒滴度和抗原滴度最高 ,以后逐渐降低 ,但直到细胞感染病毒 3 2d时其培养液的病毒滴度和抗原滴度仍稳定在 5 .0 0LgTCID50 /ml和 1∶2 0以上。结论 两株病毒已适应于Vero细胞 ,且具有病毒滴度高、毒力强和抗原性良好的特性 ,是Vero细胞肾综合征出血热灭活疫苗良好的后备筛选毒株。