滴金免疫测定法(DIGFA)检测血吸虫抗体的研究

目的建立一种简便、快速、敏感、特异的检测血吸虫抗体的新方法。方法用滴金免疫测定法（DIGFA）检测血吸虫病人血清抗体，并以ELISA作平行对照。结果DIGFA和ELISA的敏感性分别为97．1％和95．7％；特异性分别为99．1％和100％，两法无显著差异（P＞0．05）。62份其它寄生虫感染血清，除肺吸虫1例，ELISA呈阳性反应外，其余均为阴性。结论实验结果不仅显示了DIGFA的敏感性和特异性与ELISA相似，而且具有简便、快速、不需要特殊设备等优点，是一种值得推广应用的检测血吸虫抗体的新方法。

滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究

目的 建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法 应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果 对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论 DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。

滴金免疫测定法在检测日本血吸虫抗体中的应用

滴金免疫测定法(DIGFA)是以胶体金作为标记物的快速斑点免疫结合试验,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应,阳性结果出现红色斑点。本文用血吸虫虫卵浸出液为抗原,金标记A蛋白为显示剂,建立了检测血吸虫抗体的DIG-FA。以本法检测血吸虫病患者血清81份,阳性卒92.6％;献血者血清50份,特异性为98％;42份产前检查的孕妇血清均为阴性;6例华枝睾吸虫患者未出现交叉反应;6例并殖吸虫患者中4例出现不同程度的阳性反应,其中3例环卵反应亦为阳性,环沉率8～15％。提示本法的敏感性和特异性与环卵反应相近。

快速检测布鲁氏菌抗体的滴金免疫测定法的建立及应用

目的:建立一种快速诊断布鲁氏菌感染的方法。方法:将布鲁氏菌可溶性菌体抗原结合于硝酸纤维膜上,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体,建立滴金免疫测定法,检测布鲁氏菌感染者血清抗体,通过布鲁氏菌抗原抗体渗滤在硝酸纤维膜上反应,2 m in后肉眼观察结果。并与试管凝集试验比较。结果:滴金免疫测定法的敏感性为95.35%(41/43),特异性为98.99%(98/99),其他病患者血清反应均为阴性,Youden′s指数为0.9434。滴金免疫测定法与试管凝集试验的符合率为97.89%(139/142),两法无显著性差异(P>0.05)。结论:滴金免疫测定法可用于布鲁氏菌病的临床检测和流行病学筛查,具有推广应用价值。

滴金免疫测定法检测抗体在血吸虫病传播阻断地区的应用

目的探讨滴金免疫测定法检测抗体在血吸虫病传播阻断地区的应用价值。方法在已建立的滴金免疫测定法的基础上，应用该法检测原血吸虫病重度流行区、中度流行区和轻度流行区而现已阻断传播地区的人群以及现血吸虫病中度流行区人群的抗血吸虫抗体。结果原血吸虫病重、中和轻度流行区人群的阳性检出率分别为６．１８％、３．３１％、１．４７％，三者间有非常显著差异（Ｐ＜０．０１）；现血吸虫病中度流行区人群的阳性检出率为 ３９．３３％，与传播阻断地区人群的检出率间也有非常显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论摘金免疫测定法检测抗体可作为考核该类地区血吸虫病防治效果的一种方法。

滴金免疫测定法检测不同人群布鲁氏菌病

目的探讨滴金免疫测定法在不同人群中检测布鲁氏菌感染的应用价值。方法用已建立的布病滴金免疫测定技术检测不同职业和不同感染类型人员的布病抗体,并与布病试管凝集试验作平行检测。结果滴金免疫测定法与试管凝集试验两种方法符合率为99.88%,阳性符合率达到94.25%;且本法对布病发病人群和高滴度血清样本具有更高的检测敏感性;对不同职业人群检测,接触山羊和奶牛职业人群的布鲁氏菌病抗体检出率分别为6.40%和1.32%。结论滴金免疫测定法对布病疫区人群和非疫区重点职业人员开展布病监测具有实用价值,也可用于布病的临床检测和流行病学筛查。

血清肌红蛋白滴金免疫测定法试剂的研制及临床应用

应用亲和层析纯羊抗肌红蛋白（Ｍｂ）抗体或抗Ｍｂ单抗Ｇ３Ｂ分别包被硝酸纤维素膜，配以用抗Ｍｂ单抗Ｇ６Ｄ制备的胶体金结合物，建立了检测Ｍｂ的滴金免疫测定法。制备的试剂盒中应用双孔反应板。在相同条件下以Ｍｂ参照标准（含Ｍｂ１００μｇ／Ｌ）与血清标本作对比测定，可得到半定量结果，并实施试验的质量控制。试剂质量稳定，测定重复性良好，与ＲＩＡ测定结果符合。临床试用中急性心肌梗塞（ＡＭＩ）的阳性检出率为９４．５９％（３５／３７）。本法快速简便，适合于各级医疗单位用作ＡＭＩ的实验室诊断方法。

检测血清弓形虫IgG抗体的滴金免疫测定法的建立及应用

目的 :建立检测血清中弓形虫IgG抗体的简便、快速的滴金免疫测定法。方法 :将弓形虫抗原包被于硝酸纤维素膜上 ,通过胶体金 -SPA直接显色 ,阳性者在膜上出现红色斑点。结果 :用该法与间接ELISA法平行对比检测经间接血凝法确定的 11份阳性血清和 30份阴性健康人血清 ,结果有良好的一致性 ,符合率为 90 .9%。结论 :滴金免疫测定法检测血清中弓形虫抗体简便、快速、敏感 ,无需特殊仪器设备 ,适于基层应用。

滴金免疫测定法在检测血清抗幽门螺旋菌抗体中的应用

以幽门螺旋菌（HP）提取液为抗原，用胶体金标记的A蛋白为显示剂，建立了检测血清抗HP抗体的简便快速滴金免疫测定法。与美因Bio－Rad抗HP抗体IgGELISA试剂盒对比测定血清标本87份，方法的相对特异性和相对敏感性分别为92．9％和93．2％，符合率达93．1％。

HCG滴金免疫测定法试剂的研制及应用

应用自制的两种抗人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）单克隆抗体，分别包被硝酸纤维膜及制备胶体金结合物，建立了检测ＨＣＧ的滴金免疫测定法。结果表明，本法简便，快速，灵敏度高（最小抗原检测量为５０ｍＩＵ／Ｌ），特异性好，与高浓度的ＬＨ、ＦＳＨ、ＴＳＨ均无交叉反应，临床检验２１７例样品，与ＥＬＩＳＡ法对比测定的符合率为１００％。

检测CyPA自身抗体滴金免疫测定法的建立

建立一更快速、简便的检测人血清抗ＣｙＰＡ自身抗体的方法．用重组人ＣｙＰＡ和胶体金标记的蛋白Ａ建立了检测抗ＣｙＰＡ自身抗体的滴金免疫测定法．将ｒｈＣｙＰＡ点样包被于硝酸纤维素膜，抗体在血清渗滤过程中与膜上抗原反应而固定，通过胶体金标记的蛋白Ａ直接显色，阳性结果在膜中央出现一红色斑点．整个测定过程在５ｍｉｎ内完成．与ＥＬＩＳＡ法对比检测了４５份ＳＬＥ病人血清，两法均阳性２０份，均阴性２３份，总符合率为９５．６％．本法简便易行，耗时短，试剂安全、灵敏、特异。

滴金免疫测定法在检测血清甲胎蛋白中的应用

应用二个针对甲胎蛋白(AFP)分子上不同表位的单克隆抗体,一个滴于硝酸纤维素膜上,另一个与胶体金结合,建立了检测血清中AFP的滴金免疫测定法。本法中抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应,十分钟内即可用肉眼观察结果。本法的敏感度为30ng/ml。以这一浓度为界,判别阳性与阴性。在95例临床血清标本的检测中,本法与ELISA的结果全部符合。

检测流行性出血热病毒抗体的滴金免疫测定法的建立及应用

应用自行制备的直径１５ｎｍ的胶体金标记ＳＰＡ，建立了检测血清流行性出血热病毒抗体的滴金免疫测定法。与同步建立的ＥＬＩＳＡ法对比检测临床标本，结果有良好的一致性，两法符合率为９６．４％。本法中抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应，数分种内即可用肉眼观察结果，操作简单，试剂稳定、安全。

滴金免疫测定法在检测血清癌胚抗原中的应用

应用两个针对癌胚抗原（ＣＥ）分子上不同表位的单克隆抗体，一个包被硝酸纤维素膜，另一个制备胶体金结合物，建立了检测血清中ＣＥＡ的滴金免疫测定法。本法敏感度为２０μｇ／Ｌ。与放射免疫法对比测定７５份标本结果，本法的相对敏感度为１００％，相对特异性为９６．８８％，两方法符合率达９７．１３％。

应用ELISA和滴金免疫测定法检测血清肌红蛋白

从人心肌提取肌红蛋白（ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ，Ｍｂ）抗原，制备抗Ｍｂ血清和单克隆抗体，在此基础上建立了检测血清Ｍｂ的ＥＬＩＳＡ和滴金免疫测定法（ｄｏｔｉｍｍｕｎｏｇｏｌｄｆｉｌｔｒａｔｉｏｎａｓｓａｙ，ＤＩＧＦＡ）。ＥＬＩＳＡ法检测范围２５～８００ｎｇ／ｍｌ。批内ＣＶ＜５％，批间ＣＶ＜７％。健康男、女献血员各３２例和７４例老年人，血清Ｍｂ测定结果，参考值上限分别为５５．４０、５０．６７和６５．７５ｎｇ／ｍｌ。１５例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者血清Ｍｂ含量均大于１３０ｎｇ／ｍｌ．滴金免疫测定法可在５ｍｉｎ内完成检测，Ｍｂ含量＞１００ｎｇ／ｍｌ为阳性。７例ＡＭＩ患者检测结果均为阳性。两种方法结合应用对ＡＭＩ的早期诊断及疗效观察极有价值。