不同栽培辅料诱导对3个香菇菌株液体发酵产漆酶活力的影响

以南方香菇产业主栽品种香菇808、庆科R20以及贵州省特有香菇马桑香菇为研究对象,通过拮抗反应、系统发育树及温度试验,对香菇菌株进行了区别性鉴定,并利用碱性木质素(纯品)及4种食用菌栽培中常用的栽培辅料为诱导物,研究3种不同香菇菌株液体发酵产漆酶活力连续12 d的变化规律。研究结果表明,马桑香菇、香菇808、庆科R20虽均同为有机香菇的下属分支,但菌株间是有区别的,马桑香菇同香菇808和庆科R20间的亲缘性也较远,且两两间均有拮抗反应,3种菌株菌丝生长对适宜温度的选择也有较小差异,存在一定种源差异。此外,香菇液体产漆酶活力受菌株遗传差异和5种不同诱导培养基的影响差异均为极显著(P<0.001),但各处理漆酶整体变化规律均呈现先升后降的趋势。对香菇808产漆酶诱导力最强的是玉米芯,其次为麦麸,最高漆酶活力分别为464.06、205.44 U/L;对庆科R20产漆酶诱导力最强的是麦麸,其次为玉米芯,最高漆酶活力分别为265.07、237.15 U/L;对马桑香菇产漆酶诱导力最强的是米糠,其次为麦麸,最高漆酶活力分别为178.34、161.83 U/L。从诱导漆酶活力强度出发,香菇808、庆科R20和马桑香菇培养的最佳辅料分别为玉米芯、麦麸和米糠。

ABTS底物检测漆酶活力条件和算法比较——以长白山两种林分土壤为例

选取长白山针叶林与阔叶林A层土壤,以0.25~12.5 mmol L^(-1)不同终浓度2,2'-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)为底物,考察漆酶氧化产物在0~32、0~54和0~95 min吸光值线性变化率,并藉此获得3个不同时间段线性拟合漆酶活力值;以一级反应动力学方程拟合最大吸光值增幅及相应平均反应时间,计算吸光值平均变化率,并藉此获得非线性拟合漆酶活力值。当ABTS浓度为7.5 mmol L^(-1)时,反应体系吸光值增幅和酶活最大。阔叶林反应体系吸光值增量显著大于针叶林,前者在0~300 min持续增加,且不同算法间漆酶活力差异不显著;后者仅在0~21 min显著变化,且非线性拟合漆酶活力值显著高于线性拟合。非线性拟合测算的漆酶活力变异系数整体上低于线性拟合。因此,森林土壤漆酶活力测定应重视酶底物浓度、反应时间、算法和林分条件变化带来的显著影响。

亚热带木腐真菌产漆酶及其酶学性质

对选育的一株木腐真菌Psathyrella candolleana进行液体深层发酵生产漆酶,通过硫酸铵盐析和离子交换色谱等纯化技术分离发酵酶液后,得到纯度较高的漆酶,并对其酶学性质进行研究.结果表明:P.candolleana在发酵罐中的漆酶产量最高可达9100U/L;分离纯化后得到漆酶活性组分,其比活力达到438.0 U/mg,纯化倍数为13.2,得率为50.1%;该漆酶蛋白分子质量约为61.2 ku,米氏常数为16μmol/L;该漆酶催化反应最适温度和pH值分别为45℃和5.0,在4～10℃和pH 9.0的条件下漆酶活力稳定性较好,Mg2+、Mn2+、Zn2+等金属离子对其活力的影响较小.

培养条件对白腐菌分泌漆酶的影响

以7株白腐菌为研究材料,通过对漆酶活力的平板检验和培养白腐菌的碳源、氮源和初始pH值的初步筛选,找到产漆酶的菌株,并摸索出漆酶产量较高的培养条件。结果表明,(1)裂褶菌没有产生漆酶;(2)碳源对白腐菌产漆酶活力的影响,由高到低为葡萄糖、麸皮、淀粉、玉米粉、果糖和甘露糖;(3)氮源对白腐菌产漆酶活力的影响,由高到低是蛋白胨、黄豆粉、酵母膏、氯化铵、硫酸铵和硝酸钾;(4)初始pH值对白腐菌产漆酶活力的影响,由高到低是5.0、5.5、4.6、4.2、3.8、6.0和7.0。

不同类型食用菌产木素氧化酶系能力比较与分析

了解食用菌产木质素氧化酶系的特征及其与菌丝生长速度的关系,采用RB-PDA脱色法、苯胺蓝平板脱色法等4种方法,检测32种食用菌中漆酶(Lac)、木质素过氧化物酶(Lip)和锰过氧化物酶(MnP),并且利用PDA平板实验测量其菌丝生长速度。结果表明:12个品种可同时分泌漆酶(Lac)、木质素过氧化物酶(Lip)和锰过氧化物酶(MnP),2个品种未检测到Lac、Lip、MnP,6个品种只分泌Lac,2个品种只分泌MnP,而未曾发现只分泌Lip的品种。说明食用菌对Lac和MnP的产生分泌具有独立性,但是木质素过氧化物酶必需与锰过氧化物酶同时分泌。木质素氧化酶系丰富食用菌菌种,菌丝生长速度快;Lac活性高的菌种,其生物转化率也高。

共基质对白腐菌降解喹啉的影响

选用吲哚、苯酚和氨氮作为喹啉降解的共基质。通过白腐菌BP对共基质的降解，研究了白腐菌BP对不同共基质降解体系中喹啉的降解过程及其反应动力学，同时研究了共基质物质对白腐菌BP漆酶活力、生物量增长速率和降解体系pH的影响。结果显示，白腐菌BP对不同共基质降解体系中的喹啉均具有较高的降解率，共基质物质苯酚、吲哚和氨氮对喹啉的降解有一定的抑制作用；共基质降解体系使白腐菌BP漆酶系统启动更加迅速，漆酶活力峰值提前出现；共基质降解体系能促进白腐菌BP的生长，缩短白腐菌BP的生长周期；秸秆滤出液培养基中，pH为6．00～8．00时，白腐菌BP对喹啉均具有较强的降解能力。