从慢性胆囊炎患者胆汁中分离出河流漫游球菌1例报道

河流漫游球菌(Vagococcus fluvialis)是漫游球菌属(Vagococcus)中的一个菌种,1989年由COLLINS等[1]首次报道。目前报道的菌株多分离自动物或动物制品[2-7],分离自人类的很少,根据可查阅到的少数文献报道,漫游球菌属,尤其是河流漫游球菌可引起人类感染[8-11]。武汉亚心总医院近期从慢性胆囊炎患者胆汁样本中分离出河流漫游球菌,鉴于国内外尚未见从胆汁中分离出河流漫游球菌的相关报道,本实验室对该菌进行了生化鉴定、质谱鉴定、16S rRNA分析和纸片扩散法、微量肉汤稀释法药物敏感性试验,现报道如下,供临床参考。

一株河流漫游球菌的分离鉴定

本试验从一头进口病死种猪的病料中分离得到1株革兰氏阳性球菌,通过对其进行细菌形态学、培养特性、生化特性和分子生物学鉴定,确认为河流漫游球菌。药敏试验显示该分离株对大多数抗生素有较好的敏感性。

漫游球菌的研究进展

1989年Collins等报道了漫游球菌属,当时只有1个种,截止到2004年已增加到5个种,其中只有河流漫游球菌与人类感染有关,可从患者的血液、腹膜液和伤口中分离而来,其他漫游球菌尚未发现有引起人类感染的报道,鉴于国内尚无报道,临床细菌学实验室在从临床标本分离出肠球菌样细菌时,应注意与漫游球菌的鉴别,以免漏检。

一株漫游球菌的分离鉴定

目的:鉴别一株与李斯特菌相似的革兰阳性球菌。方法:按常见细菌系统鉴定手册进行。结果:鉴定为一株漫游球菌。结论:检验时注意与李斯特菌的区别。

漫游球菌研究进展

漫游球菌是一类独特的革兰氏阳性菌,可感染多种动物,首株漫游球菌发现于1989年,为河流漫游球菌,随后陆续发现了鲑鱼漫游球菌、水獭漫游球菌、海豹漫游球菌和嗜肉漫游球菌。笔者等对每种漫游球菌的特性进行了详细描述,同时探讨了漫游球菌对动物的致病作用以及人体感染情况,并阐述了现阶段可用的检测手段以及治疗方式,最后展望了漫游球菌作为益生菌用于水产业的潜能。

猪源水獭漫游球菌的鉴定与耐药性分析

本实验从临床送检病死白猪的心血病料中分离得到一株革兰阳性球菌,对分离菌进行分离培养,观察其生长特性,进行生化特性和药物敏感性鉴定,并对其16S rRNA进行PCR扩增,测序结果表明,该菌为水獭漫游球菌。药敏试验显示,分离株对美洛西林有较高的敏感性;但对广谱类氟苯尼考、诺氟沙星、左氧氟沙星及大部分氨基糖苷类抗菌素都有较强的耐药性。

河流漫游球菌蛋白质组鉴定及功能初探

目的基于高精度串联质谱技术的蛋白质组方法,对河流漫游球菌的蛋白质组组分进行全面鉴定,并对其生物学功能开展探讨。方法通过分离临床骨科患者深部组织穿刺液获得并鉴定得到一株河流漫游球菌,采用液相色谱-串联质谱系统开展无标定量蛋白质组实验,对河流漫游球菌进行蛋白质组组分鉴定,将分析所得的数据通过MaxQuant软件进行数据库检索完成蛋白质的鉴定和相对定量,并对鉴定出的蛋白质从生物学途径、分子功能和细胞组分,以及KEGG通路多个方面进行分类和注释分析。结果通过3次质谱重复实验,共鉴定得到河流漫游球菌的1372个蛋白质;通过功能注释分析发现大部分蛋白质主要参与维持细菌生存的转录翻译、代谢以及物质的生物合成等生物过程。结论河流漫游球菌蛋白质丰度排名前10的主要为酶和核糖体蛋白,其中高富集蛋白质烯醇化酶、磷酸甘油酸激酶为参与糖酵解功能的关键酶,并有可能与河流漫游球菌毒性密切相关。本研究构建的河流漫游球菌蛋白质组表达谱数据集为临床河流漫游球菌的诊断与治疗提供了新的蛋白质组实验数据参考。

牦牛漫游球菌的分离与生物学特性鉴定

为探究1只牦牛屠宰后肝脏有干酪样结节形成的原因,对肝脏进行细菌的分离培养,对分离到的1株细菌的16S rRNA和16S～23S rRNA基因序列用通用引物扩增和并用NCBI blast和MEGA 7进行序列分析,并用Vitek 2全自动微生物鉴定仪进行生化表型的鉴定,用K-B法进行药敏试验,结果显示:该菌的16S rRNA为1 524 bp,NCBI GenBank登录号为MG753544.1,与水獭漫游球菌的同源性较高,16S～23S rRNA有大小不同的2个片段,分别为522,425 bp,NCBI GenBank登录号分别为MG758122.1和MG758123.1。Vitek 2全自动微生物鉴定仪鉴定为迟缓葡萄球菌。该菌对妥布霉素、头孢哌酮、米诺环素等多种药物高度敏感,对苯唑西林、头孢西丁有抗性。结果表明,分离出的细菌为漫游球菌,该菌是否具有致病性还有待进一步试验验证。

首次从人左股骨下段术后感染穿刺液中分离河流漫游球菌

目的对国内首例从人左股骨下段术后感染穿刺液中分离的疑似河流漫游球菌进行鉴定。方法收集该女性患者2018年8月入院就诊左股骨远端创口术后感染穿刺液标本,应用VITEK-2 Compact System全自动微生物鉴定系统、16S rRNA分析、VITEK MS全自动快速微生物质谱检测系统进行细菌鉴定,K-B法进行药敏试验。结果全自动微生物鉴定系统、16S rRNA分析、MALDI-TOF MS均鉴定为河流漫游球菌,其置信度分别为97.0%、99.0%、99.9%。药敏试验提示其对利奈唑胺、红霉素、万古霉素等12种临床抗菌药物均敏感,但其对克林霉素、苯唑西林、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶等药物耐药。结论本研究是国内首次从人左股骨下段术后感染穿刺液中分离鉴定出河流漫游球菌的研究报道,为指导河流漫游球菌感染的临床合理用药及相关致病机制研究奠定实验基础。

2株海水鱼源潜在益生菌的分离、鉴定及特性分析

为筛选用于微生态制剂研发的海水鱼源益生菌,本研究对海捕野生许氏平鲉(Sebastes schlegelii)和大泷六线鱼(Hexagrammos otakii)的消化道内壁黏膜样品进行细菌分离纯化,获得80株可培养细菌。使用选择性培养基对菌株的产酶能力进行测定,选取海水鱼常见病原菌为指示菌测定分离菌株产物的抑菌活性,筛选出2株潜在益生菌TS2和TH8,并进行菌株的生理生化检测、16S rDNA序列分析、生长特性及其对宿主安全性的研究。结果显示,TS2产蛋白酶(protease)、淀粉酶(amylase)和脂肪酶(lipase),其无菌培养产物可显著抑制鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harvey)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)的生长。TH8产蛋白酶和脂肪酶,其无菌培养产物可显著抑制鳗弧菌、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、副溶血弧菌、假交替单胞菌、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)和大肠杆菌(Escherichia coli)的生长。基于细菌生理生化检测和16S rDNA序列比对,鉴定TS2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),TH8为河流漫游球菌(Vagococcus fluvialis)。TS2在温度为15~40℃、Na Cl浓度为0~0.08 g/L、p H为5~9时生长较快,6 h进入对数期,26 h后进入稳定期;TH8在温度为20~40℃、Na Cl浓度为0~0.08 g/L、p H为5~12时生长较快,2 h进入对数期,14 h后进入稳定期。菌株对同源宿主的安全性检测发现,TS2和TH8在108 CFU/mL浓度条件下对同源宿主是相对安全的。筛选的枯草芽孢杆菌TS2、河流漫游球菌TH8产酶能力强,其产物能抑制多种病原菌的生长,具有广温、广盐、耐酸碱、生长速度快等优点,可作为候选菌株开发为微生态制剂,研究结果为其在海水鱼养殖业中的应用提供数据支撑。

海洋石油降解厌氧微生物的分离鉴定及降解性能分析

以大连新港石油污染海域的海底沉积物为研究对象,通过平板分离技术从石油污染环境样品中筛选到4株海洋厌氧菌株,对其16SrDNA测序鉴定发现,这4株菌属于Vagococcus(漫游球菌属),并分别命名为Vagococcus sp.08,Vagococcus sp.11,Vagococcus sp.26,以及Vagococcus sp.38。以石油为唯一碳源对4株菌进行培养,测定4株菌株的石油降解率,依次为23.78%、31.20%、32.11%、44.31%。结果表明:4株菌株对石油均具有降解性能,其中菌株C04-38对石油具有较高的降解率,达到44.31%,此次首次发现并报道了能够降解石油的Vagococcus属菌株,为开展海底石油污染物的厌氧修复奠定研究基础。