潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)对氧化型低密度脂蛋白诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的影响

目的探索潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人视网膜色素上皮(ARPE)细胞氧化损伤的影响。方法0 mg·L^(-1)、50 mg·L^(-1)、100 mg·L^(-1)和200 mg·L^(-1) ox-LDL处理ARPE-19细胞,CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒检测细胞活力和凋亡水平,Western blot检测不同浓度ox-LDL处理后细胞LTBP2蛋白表达水平。100 mg·L^(-1) ox-LDL处理ARPE-19细胞构建氧化损伤模型。将ARPE-19细胞随机分为对照组,ox-LDL组,转染LTBP2过表达载体或阴性对照的ox-LDL+ov-LTBP2组和ox-LDL+ov-NC组,转染LTBP2 siRNA或阴性对照的ox-LDL+si-LTBP2组和ox-LDL+si-NC组,以及ox-LDL+si-LTBP2+VEGF组。相应处理各组细胞后,采用CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒检测细胞活力和凋亡水平,酶联免疫吸附实验检测氧化应激标志物活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,Western blot检测各组细胞LTBP2、P38和p-P38的蛋白表达水平。结果与0 mg·L^(-1) ox-LDL处理后相比,50 mg·L^(-1)、100 mg·L^(-1)和200 mg·L^(-1) ox-LDL处理后APRE-19细胞活力下降,凋亡率升高,LTBP2蛋白表达水平增加,且变化均具有剂量依赖性(均为P<0.05)。与ox-LDL+ov-NC组相比,ox-LDL+ov-LTBP2组细胞LTBP2蛋白表达水平、ROS含量及细胞凋亡率均增加,细胞活力、SOD活性均降低,p-P38/P38比值和VEGF表达量均增加(均为P<0.05)。与ox-LDL+si-NC组相比,ox-LDL+si-LTBP2组细胞LTBP2蛋白表达水平、ROS含量及细胞凋亡率均降低,细胞活力、SOD活性均增加,p-P38/P38比值和VEGF表达量均减少(均为P<0.05)。而与ox-LDL+si-LTBP2组比较,ox-LDL+si-LTBP2+VEGF组细胞凋亡率和ROS含量均增加,细胞活力、SOD活性均降低(均为P<0.05)。结论LTBP2通过激活P38 MAPK信号通路促进VEGF表达加剧ox-LDL引起的ARPE-19细胞氧化应激损伤。

敲低潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)抑制SK-MEL-28恶性黑素瘤细胞的侵袭和迁移

目的检测潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)在恶性黑素瘤组织及细胞中的表达,及其对恶性黑素瘤细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测95例恶性黑素瘤组织LTBP2的表达,并采用Spearman秩相关法分析LTBP2阳性率与黑素瘤临床病理指标的关系。采用实时定量PCR检测恶性黑素瘤组织和SK-MEL-28黑素瘤细胞LTBP2的mRNA水平, Western blot法检测SK-MEL-28黑素瘤细胞LTBP2的蛋白水平。利用小干扰RNA技术沉默SK-MEL-28细胞中LTBP2的表达, Transwell^(TM)实验检测敲低LTBP2后对SK-MEL-28细胞侵袭能力的影响,细胞划痕实验检测对细胞迁移的影响。结果恶性黑素瘤组织中LTBP2阳性率显著高于皮肤良性痣组织, LTBP2阳性率与恶性黑素瘤患者TNM分期、远处转移及淋巴结转移正相关。LTBP2在恶性黑素瘤SK-MEL-28细胞中的表达高于正常黑素HEMa-LP细胞。敲低SK-MEL-28细胞LTBP2的水平后, SK-MEL-28细胞侵袭和迁移能力降低。结论 LTBP2在皮肤恶性黑素瘤组织和细胞高表达,敲低SK-MEL-28细胞LTBP2的水平后,抑制SK-MEL-28细胞的侵袭及迁移。

左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p、潜在转化生长因子结合蛋白2水平与射血分数保留的心力衰竭患者左心室重构的相关性

目的探讨左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p(miR-152-5p)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)水平与射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者左心室重构的相关性。方法选取2019年8月至2020年8月在唐山中心医院进行治疗的HFpEF患者48例为HFpEF组,同期健康体检者52例为对照组。以实时荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验法分别检测血清miR-152-5p、LTBP-2水平。研究对象均进行超声心动图检查,收集二尖瓣环舒张早期峰值速度(E')、晚期峰值充盈速度(A)、二尖瓣口舒张早期峰值充盈速度(E)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、舒张末期后壁厚度(PWTd)、舒张末期室间隔厚度(IVSTd),并计算E/A、E/E'及左心室质量(LVM)值。使用Pearson法分析血清miR-152-5p、LTBP-2、E/A、E/E'与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM之间的相关性。结果HFpEF组患者E/A值低于对照组,血清miR-152-5p、LTBP-2水平及E/E'值高于对照组,差异有统计学意义(t=12.722、21.830、9.882、15.979,P<0.05)。HFpEF组患者的LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM水平高于对照组,差异有统计学意义(t=2.044、2.894、5.733、3.973,P<0.05)。HFpEF组患者血清miR-152-5p、LTBP-2、E/E'表达水平均与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈正相关(r=0.447、0.425、0.437、0.473、0.414、0.338、0.422、0.347、0.492、0.412、0.385、0.367,P<0.05);E/A与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈负相关(r=-0.441、-0.374、-0.369、-0.438,P<0.05)。结论血清miR-152-5p、LTBP-2水平以及E/E'值、E/A水平与HFpEF患者左心室重构有关。

非小细胞肺癌患者血浆转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)水平及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌患者血浆转化生长因子结合蛋白2(laten transforming growth factor binding protein 2,LTBP2)水平及临床意义。方法选取2017年1月至2018年7月我院收治的150例非小细胞肺癌患者作为观察组研究对象,另选取100例同期于我院体检健康者作为对照组,分别采集两组血浆标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清LTBP2水平,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果非小细胞肺癌患者血清LTBP2水平显著高于健康对照组[(35.28±8.93)μg/L vs(15.86±7.24)μg/L],且两组比较差异有统计学意义(P<0.05);血清LTBP2水平与非小细胞肺癌患者的年龄、性别、病理分型、浸润程度及分化程度无明显相关性(P>0.05),而与非小细胞肺癌肿瘤直径、临床分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05);LTBP2诊断非小细胞肺癌的ROC曲线下面积为0.834(95%CI:0.629~1.854),诊断敏感性为90.04%,特异性为82.39%。结论非小细胞肺癌患者血清中LTBP2呈高表达,推测其可能与非小细胞肺癌的发生发展存在相关性。

转化生长因子β1对乳鼠心肌细胞转化生长因子结合蛋白2表达的影响

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在诱导心肌细胞表达转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)中的作用及信号传导通路。方法培养乳鼠心肌细胞;实时定量聚合酶链式反应、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测不同时间和不同浓度的TGF-β1对大鼠乳鼠心肌细胞LTBP2基因及蛋白表达的影响;用TGF-β1相关信号通路阻断剂探讨TGF-β1调节LTBP2表达改变的信号传导机制。结果 LTBP2基因表达随着TGF-β1浓度增加(0、2、5及10μg/L)而明显升高,在5μg/L时刺激最强(P<0.05);5μg/L的TGF-β1刺激下心肌细胞内LTBP2基因和蛋白表达的升高呈时间依赖性,均在12 h最高,24 h开始呈下降趋势(P<0.05或P<0.01);免疫细胞化学结果显示TGF-β1明显升高LTBP2的表达。信号传导通路研究显示TGF-β1在心肌细胞内主要通过ERK信号通路和PI3K信号通路诱导LTBP2的表达。结论 TGF-β1在乳鼠心肌细胞内通过ERK信号通路和PI3K信号通路上调LTBP2的表达。

冠心病患者血清微小核糖核酸-335、潜在转化生长因子结合蛋白2的表达及意义

目的观察冠心病(CHD)患者血清微小核糖核酸335(miR-335)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)的表达,并探讨其意义。方法将102例CHD患者按疾病类型分为稳定型心绞痛(SAP)36例(SAP组)、不稳定型心绞痛(UAP)32例(UAP组)、急性心肌梗死(AMI)34例(AMI组),根据Gensini积分将102例CHD患者分为轻度病变组37例、中度病变组40例、重度病变组25例,另取冠状动脉(冠脉)造影诊断为非CHD患者40例为对照组。采用AU5800全自动生化分析仪检测空腹血糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-335,采用酶联免疫吸附法检测血清LTBP-2水平。CHD患者病情严重程度与血清miR-335、LTBP-2的关系采用Pearson积矩相关性分析。结果对照组、SAP组、UAP组、AMI组收缩压、舒张压、空腹血糖、TG、TC、LDL-C、HDL-C比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。对照组、SAP组、UAP组、AMI组血清miR-335水平呈逐渐下降趋势,而血清LTBP-2水平呈逐渐升高趋势,单因素方差分析结果显示,各组间血清miR-335、LTBP-2比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。轻度病变组、中度病变组、重度病变组血清miR-335水平呈逐渐下降趋势,而血清LTBP-2水平呈逐渐升高趋势,单因素方差分析结果显示,各组间血清miR-335、LTBP-2差异均有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关分析结果显示,CHD患者病变严重程度与血清miR-335水平呈负相关(r=-0.673,P<0.05),而与LTBP-2水平呈正相关(r=0.705,P<0.05)。结论CHD患者血清miR-335呈低表达,而LTBP-2呈高表达;二者联合检测有助于CHD患者病情程度的评估。

潜在转化生长因子β结合蛋白2在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的通过检测子宫内膜癌组织中潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)的表达,探讨其对子宫内膜癌发病及预后的指导意义。方法采用免疫组化SP法对97例子宫内膜癌瘤组织和30例正常对照的增生期子宫内膜组织进行LTBP2表达情况的检测。结果正常对照组LTBP2阳性率为15%,子宫内膜癌组为91.8%,两组比较P<0.05。子宫内膜癌组织中LTBP2阳性表达率与组织细胞分化级别、临床分期及不良预后等因素有关。结论子宫内膜癌组织中LTBP2呈阳性表达,LTBP2在子宫内膜癌的发生发展过程中发挥重要作用。

潜在转化生长因子结合蛋白2在老年宫颈癌病人血清中的表达及临床意义

目的探讨潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)在老年宫颈癌病人血清中的表达水平及临床意义。方法本研究纳入2017年7月至2019年7月达州市中西医结合医院收治的78例老年宫颈癌病人(宫颈癌组),另纳入同期在我院确诊为慢性宫颈炎的31例病人(宫颈炎组)及在我院体检的37例健康志愿者(对照组),收集宫颈癌病人的临床病理资料,并采用酶联免疫吸附法检测3组血清LTBP2水平。比较3组血清LTBP2水平的差异以及宫颈癌病人手术前后LTBP2水平变化,探讨LTBP2与宫颈癌病人病理特征间的关系。结果宫颈癌组血清LTBP2水平显著高于慢性宫颈炎组和正常对照组(P<0.05),慢性宫颈炎组和正常对照组血清LTBP2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同临床分期、分化程度、有无淋巴结转移病人血清LTBP2水平差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌病人术后1、3、6个月血清LTBP2水平显著低于手术前,且随着时间逐渐降低(P<0.05)。78例病人中,术前血清LTBP2阳性率为46.15%,术后6个月为2.56%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论老年宫颈癌病人血清中LTBP2表达增加,并与临床分期、分化程度及淋巴结转移有一定关系,监测血清LTBP2水平对于老年宫颈癌病人手术前后的病情评估具有一定的临床价值。

血浆转化生长因子结合蛋白2联合鳞状细胞癌抗原检测在肺癌诊断中的应用价值

目的探讨血浆转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)联合鳞状细胞癌抗原(SCC)检测在肺癌诊断中的应用价值。方法将2019年1月至2021年1月该院收治的原发性肺癌患者104例纳入研究作为肺癌组,另选取50例肺炎患者作为肺炎组,100例体检健康者作为健康对照组。采集上述人群血液标本,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和全自动化学发光仪分别检测血清LTBP2和SCC水平。分析血清LTBP2水平与肺癌患者临床特征的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LTBP2和SCC水平检测用于肺癌诊断的价值。结果肺癌组血清LTBP2及SCC水平均高于肺炎组和健康对照组(P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、深层浸润的肺癌患者血清LTBP2水平较高(P<0.05)。血清LTBP2水平检测用于诊断肺癌的曲线下面积(AUC)为0.842(95%CI:0.704~0.916),灵敏度为89.15%,特异度为83.94%;血清SCC用于肺癌诊断的AUC为0.794(95%CI:0.529~0.843),灵敏度为82.17%,特异度为70.63%。血清LTBP2和SCC联合检测用于肺癌诊断的AUC为0.887(95%CI:0.752~0.974),灵敏度为92.67%,特异度为86.63%。结论原发性肺癌患者血清LTBP2水平升高,可能与肺癌的发生及进展有关,LTBP2联合SCC检测更利于临床肺癌的鉴别诊断。

转化生长因子β对成骨细胞增殖、BMP-2及Cbfal基因表达的影响

目的:通过转化生长因子β(TGF-β)对体外成骨细胞增殖、骨形态蛋白-2(BMP-2)及核心结合因子1(Cbfal)基因表达的影响,探讨TGF-β对骨代谢影响的可能机制。方法:不同浓度的TGF(0、0.01、100ng/ml)刺激体外培养的大鼠成骨细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,用半定量RT-PCR法检测成骨细胞BMP-2、Cbfal基因的表达。结果:TGF-β可明显促进成骨细胞增殖(P<0.05),并促进成骨细胞BMP-2、Cbfal基因的表达(P<0.01),具有浓度依赖性。结论:TGF-β可促进成骨细胞的增殖、分化及成熟,可能是通过增强BMP-2、Cbfal基因的表达来实现的。

环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控转化生长因子β1对人根尖牙乳头干细胞分化的作用

目的观察过表达第二信使环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-responsive element-binding protein,CREB)调控转化生长因子β1(transforming growth factor-beta,TGF-β1)对人根尖牙乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)分化的作用。方法通过采用酶消化法培养hSCAPs,实验分成4组:(1)Control组,即正常矿化诱导液(α-MEM、10%FBS、10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50μg/ml维生素C、10 nmol/L地塞米松);(2)TGF-β1组,加入正常矿化诱导液后,加入5μg/m L TGF-β1;(3)TGF-β1+LV-empty组,除正常矿化诱导液外,加入转染空病毒载体和TGF-β1,TGF-β1浓度为5μg/m L;(4)TGF-β1+ov-CREB组,除正常矿化诱导液外,加入转染过表达CREB病毒载体和TGF-β1,TGF-β1浓度为5μg/m L。矿化培养2周后,通过茜素红染色观察各组矿化结节形成情况,实时荧光定量PCR法检测各组矿化相关基因,Runt相关基因2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)m RNA的表达。结果 TGF-β1作用SCAPs后,与Control组(1.12±0.11)相比,抑制矿化结节的形成(0.67±0.12)(P<0.05);下调矿化基因RUNX2(0.60±0.03)、DSPP(0.43±0.12)、ALP(0.69±0.05)的m RNA表达(P<0.05)。过表达CREB后逆转TGF-β1对SCAPs分化的抑制作用,与TGF-β1组相比,促进矿化结节的形成(1.27±0.10)(P<0.01)并上调RUNX2(1.33±0.07)、DSPP(1.32±0.11)和ALP(1.26±0.03)m RNA的表达(P<0.05)。结论过表达转录因子CREB能够逆转TGF-β1对hSCAPs分化的抑制作用,促进其分化。

血清LTBP2、TM4SF1在大肠癌患者预后评估中的研究

目的探讨血清转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)、四次跨膜蛋白1(TM4SF1)在大肠癌患者预后评估中的意义。方法将南阳市中心医院2016年7月至2019年7月手术治疗的大肠癌患者108例作为试验组,同期108例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清LTBP2、TM4SF1水平;比较不同血清LTBP2和TM4SF1表达水平的大肠癌患者临床资料的差异;采用免疫组化染色法分析大肠癌组织中LTBP2、TM4SF1的表达;Pearson相关分析明确血清LTBP2和TM4SF1表达的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LTBP2和TM4SF1联合评估大肠癌患者预后的价值。结果试验组血清LTBP2和TM4SF1水平均高于对照组(P<0.05),二者表达水平呈正相关(r=0.305,P<0.05),大肠癌组织LTBP2和TM4SF1表达阳性率高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤直径>5cm、肿瘤低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有脉管瘤栓的大肠癌患者血清LTBP2和TM4SF1表达水平高于患者肿瘤直径≤5 cm、肿瘤中高分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无脉管瘤栓的大肠癌患者(P<0.05)。血清LTBP2、TM4SF1联合预测大肠癌患者预后不良的AUC为0.886。结论大肠癌患者血清LTBP2和TM4SF1水平升高,二者联合对大肠癌患者预后不良具有较好的预测价值。

转化生长因子-β受体Ⅱ环状RNA通过调节核糖核酸结合蛋白2/胚胎致死性异常视觉样蛋白1促进前列腺癌发生发展

目的探讨前列腺癌细胞中转化生长因子-β受体Ⅱ环状RNA(circTGFBR2)调节核糖核酸结合蛋白2(PTBP2)/胚胎致死性异常视觉样蛋白1(ELAVL1)激活SMAD2信号途径促进前列腺癌发生发展。方法利用生物信息学方法, 寻找与circTGFBR2结合microRNA以及其他相关蛋白结合位点, 以及与PTBP2存在相互作用的RNA结合蛋白。PC3转染pcDNA3.1-circTGFBR2后, 实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circTGFBR2的表达。PC3细胞过表达circTGFBR2同时敲低微小RNA(microRNA, miR)-29b, 蛋白质印迹法(Western blot)检测ALK5、SMAD2及p-SMAD2表达。PC3分别转染pcDNA3.1-circTGFBR2及对照质粒后, 利用circTGFBR2特异性探针进行pulldown, 检测PTBP2与circTGFBR2的相互作用。过表达circTGFBR2与ELAVL1, 检测细胞上皮-间充质转化(EMT)的标志基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及ZMYM1表达, 以及Transwell检测细胞迁移。组间比较应用单因素方差分析。结果分析结果显示circTGFBR2存在多个miR-29b结合的位点, ALK5(又名TGFBR1)mRNA 3’端非编码区(3’UTR)同样存在miR-29b的结合位点, 并证实PTBP2与另一个RNA结合蛋白ELAVL1存在相互作用。用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激PC3细胞发现, circTGFBR2的表达高于对照组(1.83±0.02比1.03±0.02, F=2 832.200, P<0.01)。PC3分别转染pcDNA3.1-circTGFBR2及对照质粒后, RT-qPCR检测circTGFBR2的表达, 可见circTGFBR2组高于对照组(176.41±1.21比1.04±0.02, F=63 426.15, P<0.01)。应用miR-29b抑制剂或circTGFBR2处理细胞后ALK5的蛋白水平明显高于对照组, 应用miR-29b抑制剂同时过表达circTGFBR2后进一步增加ALK5的表达(分别为0.15±0.01、0.48±0.02、0.55±0.01、0.74±0.01, F=1268.314, P<0.01), 并且SMAD2(分别为1.14±0.02、1.28±0.02、1.42±0.01、1.5±0.25, F=4.852, P<0.01)和p-SMAD2(分别为0.18±0.02、0.36±0.01、0.65±0.01、0.94±0.02, F=1663.667, P<0.01)的磷酸化水平也呈相同趋势。Pulldown-MS实验, 多个蛋白质能与circTGFBR2结合, 并证实PTBP2与circTGFBR2相互作用。与对照组比较, 敲低前列腺癌细胞PTBP2或过表达circTGFBR2时, 间质标志基因Vimentin表达高于对照组, 而上皮样标志基因E-cadherin表达低于对照组, 当同时过表达circTGFBR2并敲低PTBP2会逆转上述结果(Vimentin分别为0.22±0.02、0.87±0.02、0.85±0.02、0.6±0.01, F=1319.52, P<0.01;E-cadherin分别为0.80±0.01、0.45±0.03、0.36±0.02、0.9±0.02, F=614.919, P<0.01)。当过表达circTGFBR2或高表达ELAVL1时, PTBP2与ELAVL1的相互作用减弱, 细胞EMT的标志基因E-cadherin表达低于对照组, Vimentin及ZMYM1表达高于对照组, Transwell检测细胞迁移高于对照组, 而当同时高表达ELAVL1及circTGFBR2时, 上述趋势会进一步增强(Vimentin分别为0.22±0.02、0.87±0.02、0.85±0.02、0.6±0.01, F=1 319.52, P<0.01;E-cadherin分别为0.93±0.02、0.76±0.02、0.43±0.02、0.27±0.01, F=1 108.46, P<0.01;ZMYM1分别为0.24±0.01、0.53±0.02、0.32±0.01、1.04±0.02, F=2 023.794, P<0.01)。结论 circTGFBR2通过调节PTBP2/ELAVL1激活SMAD2信号途径促进前列腺癌发生发展。

结缔组织病相关间质性肺炎患者血清DKK-1,LTBP2水平表达与疾病活动度及对预后的相关性分析

目的分析结缔组织病(CTD)相关间质性肺炎(IP)患者治疗前后血清Dickkopf相关蛋白1(DKK-1)、潜在转化生长因子结合蛋白2(latent transforming growth factor binding protein 2,LTBP2)表达水平变化及其与疾病活动度和预后的关系。方法收集2022年1月~2023年10月河北北方学院附属第一医院收治的121例CTD患者,按照IP发生情况分为观察组(CTD相关IP患者,n=62)和对照组(CTD无IP患者,n=59);观察组依照疾病活动度分为稳定期组(n=26)和急性加重期组(n=36)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清DKK-1,LTBP2水平;采用Pearson或Spearman分析急性加重期CTD相关IP患者血清DKK-1,LTBP2水平与临床资料的相关性;采用Logistic回归分析CTD相关IP患者病情急性加重的影响因素。结果观察组血清DKK-1(14.98±3.32 ng/ml),LTBP2(32.64±4.01ng/ml)水平高于对照组(2.21±0.67 ng/ml,8.73±2.15 ng/ml),差异具有统计学意义(t=28.983,57.518,均P<0.05)。急性加重期组磨玻璃影占比(66.67%)、蜂窝影患者占比(52.78%)及血清DKK-1(19.67±4.10 ng/ml),LTBP2(38.76±4.92 ng/ml),C反应蛋白(CRP)(32.46±3.12 mg/L)水平高于稳定期组(30.77%,23.08%,8.48±1.37 ng/ml,24.17±3.65 ng/ml,22.05±2.80 mg/L),差异具有统计学意义(t/χ^(2)=7.790,5.534,13.362,12.781,13.524,均P<0.05)。急性加重期CTD相关IP患者治疗前血清DKK-1,LTBP2水平与磨玻璃影、蜂窝影、CRP,疾病活动度呈正相关(r=0.526,0.518,0.513,0.548;0.499,0.514,0.520,0.561,均P<0.05)。随着治疗时间延长,稳定期组和急性加重期组CTD相关IP患者血清DKK-1,LTBP2水平均下降,且治疗前、治疗1个月后、治疗3个月后急性加重期组血清DKK-1,LTBP2水平均高于稳定期组,差异具有统计学意义(t=13.355,13.206,15.913;12.781,12.263,11.161,均P<0.05)。DKK-1[OR(95%CI):2.458(1.297~4.657)],LTBP2[OR(95%CI):2.739(1.567~4.789)]是CTD相关IP患者病情急性加重的独立危险因素(均P<0.05)。结论CTD相关IP患者血清DKK-1,LTBP2水平显著升高,与疾病活动度密切相关,且治疗3个月后二者均明显下降,可一定程度监测患者治疗疗效。

草鱼TAB2与TAK1蛋白互作鉴定及其对两种抗菌肽基因表达的影响

为了探究草鱼TAB2(Ci TAB2)与Ci TAK1能否互作及其对2种草鱼抗菌肽基因(Cihepcidin与Ciβ-defensin1)表达的影响,实验首先采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法分析拟态弧菌感染后Citab2和Citak1在草鱼免疫相关组织中的时空表达模式。然后利用荧光共定位、免疫共沉淀及Western blot技术鉴定Ci TAB2与Ci TAK1在细胞内共定位及相互作用情况。最后将过表达质粒pEGFP-N1-Citak1与pEGFP-N1-Citab2共同转染草鱼肾细胞(CIK细胞),检测Cihepcidin与Ciβ-defensin1的相对mRNA表达水平。结果显示,拟态弧菌感染能够显著改变Citab2和Citak1的相对表达水平,前者于感染后不同时间在各检测组织中表现出不同的时空表达模式,而后者均呈现先上调后下调的表达模式;荧光显微镜下观察到Ci TAB2与Ci TAK1共定位于转染后的HEK293T和CIK细胞的胞质中,且在HEK293T细胞内能够形成Ci TAB2-Ci TAK1蛋白复合物;共同过表达Ci TAB2与Ci TAK1后,CIK细胞内Cihepcidin与Ciβ-defensin1的相对mRNA表达水平在各检测时间点均显著上调。结果表明,Ci TAB2与Ci TAK1存在互作关系且二者互作能够促进上述两种抗菌肽的转录表达。本研究从蛋白互作调控抗菌肽表达的角度为防治鱼类弧菌病提供了新策略。

血清LTBP2、Ucn1、CD90水平在子宫内膜异位症诊断及病情严重程度评估中的价值

目的探讨血清转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)、尿皮质醇1(Ucn1)、抗原分化簇90(CD90)水平在子宫内膜异位症(EMT)诊断及病情严重程度评估中的价值。方法选取2020年1月至2023年12月在该院进行诊断治疗的EMT患者103例作为实验组,按病情程度将实验组分为重度组与轻度组,另选取同期在该院体检的体检健康者82例作为对照组。采用Pearson分析血清LTBP2、Ucn1、CD90水平相关性,采用多因素Logistic回归分析影响EMT患病因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血清LTBP2、Ucn1、CD90对EMT的诊断价值。结果实验组与对照组比较,血清LTBP2、Ucn1、CD90水平呈显著升高的趋势(P<0.05)。实验组血清LTBP2、Ucn1、CD90之间呈正相关(r=0.377、0.344、0.246,P<0.001、<0.001、=0.012)。轻度组与重度组血清LTBP2、Ucn1、CD90水平均显著高于对照组患者,轻度组患者血清LTBP2、Ucn1、CD90水平显著低于重度组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组白细胞介素(IL)-4水平低于对照组,而经期疼痛及盆腔手术史占比高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清LTBP2、Ucn1、CD90水平、经期疼痛、盆腔手术史是发生EMT的危险因素(P<0.05),IL-4水平是发生EMT的保护因素(P<0.05)。血清LTBP2、Ucn1、CD90及三者联合对EMT诊断的曲线下面积为0.788、0.801、0.810、0.916,灵敏度为63.11%、63.11%、62.14%、84.47%,三者联合(Z_(LTBP2-三者联合)=4.054、P<0.001,Z_(Ucn1-三者联合)=3.966、P<0.001,Z_(CD90-三者联合)=4.193、P<0.001)对EMT诊断价值更高。结论EMT病情程度较重者血清LTBP2、Ucn1、CD90水平较高,血清LTBP2、Ucn1、CD90联合对EMT具有一定诊断价值。

LTBP2、COL4A3、CA125与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性及临床意义

目的 探讨血清转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)、Ⅳ型胶原蛋白α3(COL4A3)、糖类抗原125(CA125)水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床病理特征的相关性及诊断价值。方法 选取2021年5月~2023年5月周口市中心医院收治的NSCLC患者97例,纳入观察组,另选取肺部良性病变患者97例,纳入对照组。采用双抗酶联免疫吸附法测定血清LTBP2、COL4A3,采用双抗体夹心法测定血清CA125水平,比较2组患者血清各指标水平,分析各指标水平与病理特征的相关性及联合检测对NSCLC的诊断价值。结果 观察组血清LTBP2、COL4A3、CA125水平高于对照组(P<0.05);不同TNM分期、浸润深度、淋巴结转移患者血清LTBP2、COL4A3、CA125水平比较:Ⅲ~Ⅳ期>Ⅰ~Ⅱ期、T3+T4>T1+T2、伴有淋巴结转移>无淋巴结转移(P<0.05);血清LTBP2、COL4A3、CA125水平与NSCLC患者TNM分期、浸润深度、淋巴结转移均呈正相关,且各指标联合诊断NSCLC的AUC为0.889,最佳敏感度、特异度分别为90.72%、84.54%,约登指数为0.753。结论 血清LTBP2、COL4A3、CA125水平与NSCLC患者临床病理特征呈正相关,联合检测对NSCLC具有一定诊断价值,可作为临床诊断NSCLC辅助指标。

宫颈上皮内瘤变患者血清中DCLK1、LTBP2的表达及与临床病理特征、术后复发的关系

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者血清双皮质素样激酶1(bicorticoid like kinase 1,DCLK1)、潜在转化生长因子结合蛋白2(latent transforming growth factor binding protein 2,LTBP2)水平与临床病理特征和术后复发的关系。方法:收集整理2019年03月至2022年09月期间于本院确诊的342例CIN患者的相关临床资料并作为CIN组,依据术后复发情况分为未复发组293例和复发组49例;收集351例健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清DCLK1、LTBP2水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清DCLK1、LTBP2水平对CIN患者术后复发的预测价值;采用Cox比例风险回归模型筛选CIN复发的影响因素。结果:CIN组血清DCLK1、LTBP2水平高于对照组(P<0.05)。CIN分级Ⅲ级、有高危人乳头瘤病毒(HPV)感染的CIN患者血清DCLK1、LTBP2水平高于CIN分级Ⅰ-Ⅱ级、无高危HPV感染患者(P<0.05)。复发组血清DCLK1、LTBP2水平及CIN分级Ⅲ级、有高危HPV感染的CIN患者比例高于未复发组(P<0.05)。DCLK1、LTBP2单独及联合预测CIN患者术后复发的AUC分别为0.803、0.710、0.870。DCLK1、LTBP2、CIN分级是CIN患者术后复发的独立危险因素(P<0.05)。结论:CIN患者血清DCLK1、LTBP2高表达与CIN分级增加和高危HPV感染有关,且二者联合可有效预测术后复发。

血清DCLK1、LTBP2联合经阴道实时剪切波弹性成像对宫颈癌的早期诊断价值

目的探讨血清双皮质素样激酶1(DCLK1)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)联合经阴道实时剪切波弹性成像(SWE)对宫颈癌的早期诊断价值。方法选取2021年8月至2022年12月于本院就诊的宫颈病变患者155例为研究对象,经手术病理确诊宫颈癌患者75例(宫颈癌组)和宫颈上皮内瘤变(CIN)患者80例(CIN组),另取同期于本院体检的无宫颈相关疾病志愿者80例作为对照组。各组受试者均进行血清DCLK1、LTBP2水平检测及经阴道SWE检查。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清DCLK1、LTBP2对宫颈癌的诊断价值;采用四格表法分析血清DCLK1、LTBP2联合经阴道SWE对宫颈癌的诊断价值。结果宫颈癌组患者血清DCLK1、LTBP2水平显著高于CIN组及对照组(P<0.05)。与术前相比,宫颈癌患者术后1、3、6个月的血清DCLK1、LTBP2水平逐渐下降,各时间点两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。血清DCLK1、LTBP2诊断宫颈癌的曲线下面积分别为0.868、0.754,敏感度为86.67%、78.67%,特异度为81.25%、60.00%,最佳截断值为1.49 ng/mL、19.02μg/mL。宫颈癌组患者病灶组织的最大弹性模量、平均弹性模量均显著高于CIN组(P<0.05)。血清DCLK1、血清LTBP2、经阴道SWE诊断宫颈癌的阳性率分别为86.67%、78.67%、82.67%,与金标准均具有一致性(Kappa=0.624、0.501、0.673,P<0.001),三项联合诊断宫颈癌的阳性率为97.33%,与金标准的一致性较高(Kappa=0.846,P=0.001);三项联合诊断的敏感度、准确度均显著高于血清DCLK1、血清LTBP2、经阴道SWE单一指标诊断,三项联合诊断的特异度显著高于血清DCLK1、LTBP2单一指标诊断,三项联合的误诊率均显著低于血清DCLK1、LTBP2单一指标诊断,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清DCLK1、LTBP2联合经阴道SWE在宫颈癌诊断中应用价值较高,可提升诊断的敏感度、准确度,降低误诊率。

血清FGF23、salusin-β、LTBP-2水平与急性心肌梗死病人直接PCI术后无复流的关系

目的:探讨血清成纤维细胞生长因子23(FGF23)、心血管调节肽(salusin-β)、转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)水平与急性心肌梗死(AMI)病人直接经皮冠状动脉介入(PCI)术后无复流的关系。方法:选取2020年1月—2022年3月中国人民解放军联勤保障部队第九二○医院收治的104例AMI病人作为研究对象,均行直接PCI术治疗,根据PCI术后即刻是否发生无复流分为正常血流组(80例)与无复流组(24例),比较两组临床资料、血清FGF23、salusin-β、LTBP-2水平,分析各血清指标之间的相关性,评价各指标对PCI术后无复流的影响及预测价值,并以最佳截断值为界分析血清FGF23、salusin-β、LTBP-2与PCI术后无复流的关系。结果:无复流组发病至罪犯血管开通时间长于正常血流组,罪犯血管狭窄程度、美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级、血清FGF23、salusin-β、LTBP-2水平高于正常血流组(P<0.05);罪犯血管重度狭窄/闭塞病人血清FGF23、salusin-β、LTBP-2水平高于中度病人(P<0.05);心功能分级Ⅳ级病人血清FGF23、salusin-β、LTBP-2水平>Ⅲ级病人>Ⅱ级病人(P<0.05);FGF23与salusin-β、LTBP-2呈正相关(r值分别为0.823,0.819,P<0.05),salusin-β与LTBP-2呈正相关(r=0.827,P<0.05);发病至罪犯血管开通时间、罪犯血管狭窄程度、心功能分级等其他混杂因素校正前后,血清FGF23、salusin-β、LTBP-2均与PCI术后无复流独立相关(P<0.05);3项血清指标联合预测PCI术后无复流的AUC为0.910,优于三者单独预测;血清FGF23、salusin-β、LTBP-2阳性病人PCI术后无复流风险分别是阴性病人的4.103倍、4.546倍、5.152倍。结论:血清FGF23、salusin-β、LTBP-2表达与AMI病人病情程度有关,且与PCI术后无复流独立相关,3项血清指标联合预测PCI术后无复流的预测价值较高,血清FGF23、salusin-β、LTBP-2阳性可增加PCI术后无复流风险。