左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p、潜在转化生长因子结合蛋白2水平与射血分数保留的心力衰竭患者左心室重构的相关性

目的探讨左心室舒张功能结合血清微小RNA-152-5p(miR-152-5p)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)水平与射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)患者左心室重构的相关性。方法选取2019年8月至2020年8月在唐山中心医院进行治疗的HFpEF患者48例为HFpEF组,同期健康体检者52例为对照组。以实时荧光定量PCR法和酶联免疫吸附试验法分别检测血清miR-152-5p、LTBP-2水平。研究对象均进行超声心动图检查,收集二尖瓣环舒张早期峰值速度(E')、晚期峰值充盈速度(A)、二尖瓣口舒张早期峰值充盈速度(E)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、舒张末期后壁厚度(PWTd)、舒张末期室间隔厚度(IVSTd),并计算E/A、E/E'及左心室质量(LVM)值。使用Pearson法分析血清miR-152-5p、LTBP-2、E/A、E/E'与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM之间的相关性。结果HFpEF组患者E/A值低于对照组,血清miR-152-5p、LTBP-2水平及E/E'值高于对照组,差异有统计学意义(t=12.722、21.830、9.882、15.979,P<0.05)。HFpEF组患者的LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM水平高于对照组,差异有统计学意义(t=2.044、2.894、5.733、3.973,P<0.05)。HFpEF组患者血清miR-152-5p、LTBP-2、E/E'表达水平均与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈正相关(r=0.447、0.425、0.437、0.473、0.414、0.338、0.422、0.347、0.492、0.412、0.385、0.367,P<0.05);E/A与LVIDd、IVSTd、PWTd、LVM呈负相关(r=-0.441、-0.374、-0.369、-0.438,P<0.05)。结论血清miR-152-5p、LTBP-2水平以及E/E'值、E/A水平与HFpEF患者左心室重构有关。

冠心病患者血清微小核糖核酸-335、潜在转化生长因子结合蛋白2的表达及意义

目的观察冠心病(CHD)患者血清微小核糖核酸335(miR-335)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP-2)的表达,并探讨其意义。方法将102例CHD患者按疾病类型分为稳定型心绞痛(SAP)36例(SAP组)、不稳定型心绞痛(UAP)32例(UAP组)、急性心肌梗死(AMI)34例(AMI组),根据Gensini积分将102例CHD患者分为轻度病变组37例、中度病变组40例、重度病变组25例,另取冠状动脉(冠脉)造影诊断为非CHD患者40例为对照组。采用AU5800全自动生化分析仪检测空腹血糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-335,采用酶联免疫吸附法检测血清LTBP-2水平。CHD患者病情严重程度与血清miR-335、LTBP-2的关系采用Pearson积矩相关性分析。结果对照组、SAP组、UAP组、AMI组收缩压、舒张压、空腹血糖、TG、TC、LDL-C、HDL-C比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。对照组、SAP组、UAP组、AMI组血清miR-335水平呈逐渐下降趋势,而血清LTBP-2水平呈逐渐升高趋势,单因素方差分析结果显示,各组间血清miR-335、LTBP-2比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。轻度病变组、中度病变组、重度病变组血清miR-335水平呈逐渐下降趋势,而血清LTBP-2水平呈逐渐升高趋势,单因素方差分析结果显示,各组间血清miR-335、LTBP-2差异均有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关分析结果显示,CHD患者病变严重程度与血清miR-335水平呈负相关(r=-0.673,P<0.05),而与LTBP-2水平呈正相关(r=0.705,P<0.05)。结论CHD患者血清miR-335呈低表达,而LTBP-2呈高表达;二者联合检测有助于CHD患者病情程度的评估。

潜在转化生长因子结合蛋白2在老年宫颈癌病人血清中的表达及临床意义

目的探讨潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)在老年宫颈癌病人血清中的表达水平及临床意义。方法本研究纳入2017年7月至2019年7月达州市中西医结合医院收治的78例老年宫颈癌病人(宫颈癌组),另纳入同期在我院确诊为慢性宫颈炎的31例病人(宫颈炎组)及在我院体检的37例健康志愿者(对照组),收集宫颈癌病人的临床病理资料,并采用酶联免疫吸附法检测3组血清LTBP2水平。比较3组血清LTBP2水平的差异以及宫颈癌病人手术前后LTBP2水平变化,探讨LTBP2与宫颈癌病人病理特征间的关系。结果宫颈癌组血清LTBP2水平显著高于慢性宫颈炎组和正常对照组(P<0.05),慢性宫颈炎组和正常对照组血清LTBP2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同临床分期、分化程度、有无淋巴结转移病人血清LTBP2水平差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌病人术后1、3、6个月血清LTBP2水平显著低于手术前,且随着时间逐渐降低(P<0.05)。78例病人中,术前血清LTBP2阳性率为46.15%,术后6个月为2.56%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论老年宫颈癌病人血清中LTBP2表达增加,并与临床分期、分化程度及淋巴结转移有一定关系,监测血清LTBP2水平对于老年宫颈癌病人手术前后的病情评估具有一定的临床价值。

潜在转化生长因子β结合蛋白4影响肿瘤细胞伪足形成抑制结直肠癌转移的分子机制研究

目的 探究潜在转化生长因子β结合蛋白4(latent transforming growth factor beta binding protein 4,LTBP4)通过影响肿瘤细胞伪足形成从而遏制结直肠癌细胞转移的分子机制。方法 在结直肠癌细胞株DiFi中使用小干扰si-LTBP4敲减LTBP4,在结直肠癌细胞株HCT15中使用LTBP4过表达质粒过表达LTBP4。使用人源慢病毒在DiFi细胞株中稳定敲减/不敲减LTBP4构建稳转细胞株shLTBP4和shNC。Western blot法检测LTBP4、原肌球蛋白4(tropomyosin 4,TPM4)、金属基质蛋白酶14(matrix metalloproteinase-14,MMP14)及酪氨酸激酶底物5(tyrosine kinase substrate 5,TKS5)等蛋白。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测LTBP4及TPM4的表达。Transwell迁移实验检测敲低/过表达LTBP4后结直肠癌细胞的体外转移能力。使用裸鼠尾静脉注射shLTBP4或shNC稳转细胞株构建裸鼠肺转移模型及阴性对照,检测结直肠癌细胞敲减LTBP4后的体内转移能力。转录组测序检测差异基因表达情况。鬼笔环肽染色观察敲低LTBP4后细胞骨架改变及侵袭性伪足形成情况。结果 qPCR实验检测发现,LTBP4在DiFi、HCT8和KM12C细胞株中均高表达(均P<0.05),在HCT15和KM12SM细胞株中均低表达(均P<0.01)。Westen blot检测发现,LTBP4在DiFi、HCT8和KM12C细胞株中均高表达(均P<0.01),在HCT15、KM12SM及RKO细胞株中均低表达(均P<0.05)。在高表达LTBP4的DiFi细胞株中转染小干扰si-LTBP4,敲低LTBP4,转染后72 h后进行transwell迁移实验发现,肿瘤细胞迁移能力增强(P<0.01);而在低表达LTBP4的HCT15细胞株中过表达LTBP4,72 h后肿瘤细胞迁移能力减弱(P<0.01)。裸鼠肺转移模型在通过尾静脉注射稳转细胞株shLTBP4以及shNC 5周后进行小动物活体荧光成像发现,敲减LTBP4后,小鼠肺部荧光信号增强(P<0.01)。高通量转录组测序发现,在DiFi细胞株中敲减LTBP4使细胞骨架蛋白TPM4的表达量增加(P<0.01),维持细胞运动功能(如肌动蛋白丝束收缩、应力纤维改变和肌动蛋束的调节)相关通路显著富集(均P<0.05)以及细胞形态改变相关通路(如轴突伸展调节、突触前膜、核孔和活性离子跨膜传输等)显著富集(均P<0.05)。Western blot、qPCR及免疫荧光实验验证DiFi细胞株中敲减LTBP4促进细胞运动相关蛋白TPM4的表达(均P<0.01)。结论 LTBP4可以通过调控TPM4的方式抑制侵袭性伪足的形成从而遏制结直肠肿瘤细胞的转移。

胰岛素样生长因子2结合蛋白2基因多态性与妊娠期糖尿病的关系

目的分析胰岛素样生长因子2结合蛋白2(IGF2BP2)基因多态性与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法选择GDM患者84例为GDM组,另选取同期健康孕妇84例为对照组,收集两组一般资料。实时聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法检测IGF2BP2基因rs4402960位点、rs1470579位点和rs11705701位点的多态性。结果GDM组总胆固醇、空腹血糖和空腹胰岛素高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,GDM组IGF2BP2基因rs4402960位点GG基因型较少,TT基因型较多,等位基因T频率较高,等位基因G频率较低(P<0.05);rs11705701位点等位基因A频率较低,等位基因G频率较高(P<0.05);而其他基因型和基因频率两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论IGF2BP2基因多态性与GDM发生有关,可通过基因多态性结果评估和筛选GDM高风险人群,以提高对GDM控制。

成纤维细胞生长因子2和尿肝素结合蛋白在产后尿路感染诊断中的应用价值及影响因素分析

目的:分析成纤维细胞生长因子2(FGF2)和尿肝素结合蛋白(U-HBP)在产后尿路感染诊断中的应用价值及影响因素。方法:选取2021年3月—2023年8月临海市中医院收治的210例产妇为研究对象,根据是否发生产后尿路感染将其分为尿路感染组(n=36)和非尿路感染组(n=174)。比较两组临床资料,分析影响产后尿路感染的因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析FGF2、U-HBP早期诊断产后尿路感染的价值。结果:尿路感染组患者体质量指数、既往患尿路感染、患妊娠期糖尿病、FGF2、U-HBP水平高于非尿路感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,体质量指数、妊娠期糖尿病、FGF2、U-HBP是影响产后尿路感染的主要因素(P<0.05)。FGF2、U-HBP以及两者联合检测早期诊断产后尿路感染的ROC曲线下面积分别为0.713、0.930、0.952。结论:FGF2、U-HBP是产后尿路感染的危险因素,可作为早期诊断产后尿路感染的生物学标志物。

特发性肺纤维化患者血清血管生成素-2、潜在转化生长因子结合蛋白2、趋化因子配体14水平与预后的关系研究

目的:研究特发性肺纤维化(IPF)患者血清血管生成素-2(Ang-2)、潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)、趋化因子配体14(CXCL14)水平与预后的关系。方法:选取2019年3月~2020年3月河北医科大学第二医院东院区呼吸内科收治的100例IPF患者作为研究对象。将其按照随访结局分成预后不良组59例及预后良好组41例。比较两组Ang-2、LTBP2、CXCL14水平、肺功能指标、实验室指标以及一般资料,Pearson相关分析血清Ang-2、LTBP2、CXCL14水平与肺功能指标的相关性,多因素Logistic回归分析IPF患者预后的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析Ang-2、LTBP2、CXCL14对IPF患者预后的预测价值。结果:预后不良组血清Ang-2、LTBP2、CXCL14水平均高于预后良好组(P<0.05)。预后不良组第1s用力呼气容积(FVC_(1))、一氧化碳弥散量占预计值百分比(DLCO%)、动脉血氧分压(PaO_(2))/氧体积分数(FiO_(2))均低于预后良好组,而吸烟史、肺动脉高压人数占比高于预后不良组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:IPF患者Ang-2、LTBP2、CXCL14水平均和FVC_(1)、DLCO%呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:FVC_(1)、DLCO%、PaO_(2)/FiO_(2)、吸烟史、肺动脉高压以及血清Ang-2、LTBP2、CXCL14水平是IPF患者预后不良的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示:血清Ang-2、LTBP2、CXCL14三项联合检测预测IPF患者预后的曲线下面积高于上述三项指标单独检测。结论:IPF患者血清Ang-2、LTBP2、CXCL14水平与其预后密切相关,可作为评估其预后的辅助性指标。

敲低潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)抑制SK-MEL-28恶性黑素瘤细胞的侵袭和迁移

目的检测潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)在恶性黑素瘤组织及细胞中的表达,及其对恶性黑素瘤细胞侵袭和迁移的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测95例恶性黑素瘤组织LTBP2的表达,并采用Spearman秩相关法分析LTBP2阳性率与黑素瘤临床病理指标的关系。采用实时定量PCR检测恶性黑素瘤组织和SK-MEL-28黑素瘤细胞LTBP2的mRNA水平, Western blot法检测SK-MEL-28黑素瘤细胞LTBP2的蛋白水平。利用小干扰RNA技术沉默SK-MEL-28细胞中LTBP2的表达, Transwell^(TM)实验检测敲低LTBP2后对SK-MEL-28细胞侵袭能力的影响,细胞划痕实验检测对细胞迁移的影响。结果恶性黑素瘤组织中LTBP2阳性率显著高于皮肤良性痣组织, LTBP2阳性率与恶性黑素瘤患者TNM分期、远处转移及淋巴结转移正相关。LTBP2在恶性黑素瘤SK-MEL-28细胞中的表达高于正常黑素HEMa-LP细胞。敲低SK-MEL-28细胞LTBP2的水平后, SK-MEL-28细胞侵袭和迁移能力降低。结论 LTBP2在皮肤恶性黑素瘤组织和细胞高表达,敲低SK-MEL-28细胞LTBP2的水平后,抑制SK-MEL-28细胞的侵袭及迁移。

胰岛素样生长因子结合蛋白-7水平与2型糖尿病病人心血管风险的关系

目的:分析胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP7)水平与2型糖尿病病人心血管风险的关系。方法:选取2018年12月—2019年12月于我院就诊的158例2型糖尿病病人,入院时测量病人基线IGFBP7水平,根据IGFBP7水平中位数分为高水平组和低水平组,各79例。治疗后通过门诊、电话等方式随访2年,记录两组主要不良心血管事件(MACE)发生情况。采用Kaplan-Meier曲线分析两组2型糖尿病病人心血管风险,并将所有完成随访的病人根据是否发生MACE事件分为发生组和未发生组,采用多因素Logistic回归分析IGFBP7对2型糖尿病的影响,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析IGFBP7对2型糖尿病病人发生MACE的预测效能。结果:截至末次随访时间2021年12月19日,实际纳入有效病例:高水平组73例,低水平组70例。Kaplan-Meier曲线分析显示,高水平组MACE发生风险高于低水平组(Log-Rank χ^(2)=6.289,P=0.012)。多因素Logistic回归分析显示,基线IGFBP7水平(OR=1.428)、空腹血糖(OR=5.293)、糖化血红蛋白(OR=7.004)、餐后血糖(OR=2.037)、三酰甘油(OR=4.335)、总胆固醇(OR=20.327)、低密度脂蛋白胆固醇(OR=4.731)是2型糖尿病病人发生MACE的独立危险因素。ROC分析显示,IGFBP7水平预测2型糖尿病病人MACE发生的ROC曲线下面积为0.920,高于空腹血糖(0.730)、糖化血红蛋白(0.696)、餐后血糖(0.760)、三酰甘油(0.798)、总胆固醇(0.770)、低密度脂蛋白胆固醇(0.727)。结论:高基线IGFBP7水平的2型糖尿病病人发生MACE风险升高,IGFBP7水平联合高血脂代谢指标(三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇)及高血糖状态指标(空腹血糖、糖化血红蛋白、餐后血糖)建立的模型预测2型糖尿病病人MACE发生有较好的效能。

潜在转化生长因子结合蛋白2在镉致人支气管上皮细胞氧化损伤中的作用

目的研究潜在转化生长因子结合蛋白2基因(latent transforming growth factor-βbinding protein 2,LTBP2)在氯化镉致人支气管上皮细胞(the human bronchial epithelial cells,16HBE)氧化损伤中的作用。方法分别用10、20、30、40μmol/L氯化镉处理16HBE细胞24 h,用30μmol/L氯化镉处理16HBE细胞12、24、48 h,利用qRT-PCR法检测细胞LTBP2基因表达变化。针对目的基因设计特异性shRNA序列,退火并组装到慢病毒载体pCDH上,构建16HBE稳定LTBP2低表达细胞株。分别用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力。结果30、40μmol/L处理组细胞LTBP2 mRNA相对表达与氯化镉浓度为0μmol/L对照组比较有统计学意义(P<0.05),且随着氯化镉染毒剂量的增加,LTBP2 mRNA表达逐渐升高(P<0.01)。30μmol/L氯化镉分别处理16HBE细胞24、48 h,细胞LTBP2 mRNA基因相对表达与氯化镉未染毒细胞比较差异有统计学意义(P<0.01)。不同浓度氯化镉处理16HBE及LTBP2低表达细胞株16HBE-shLTBP2不同时间,与16HBE相比,氯化镉处理的16HBE-shLTBP2 SOD含量显著升高(P<0.05),而MDA含量显著降低(P<0.05)。结论LTBP2低表达细胞减弱镉致细胞氧化损伤毒性,提示LTBP2基因可能在镉致细胞氧化损伤过程中发挥促氧化作用。

尿液胰岛素样生长因子结合蛋白-7与金属蛋白酶组织抑制剂-2在脓毒症急性肾损伤中的应用价值

目的分析尿液胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)和金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在脓毒症急性肾损伤(AKI)中的早期预测价值。方法选取2020年1月—2021年12月山西省人民医院急诊科监护室收治的脓毒症患者58例,并根据KDIGO的诊断标准分成脓毒症AKI组22例和非AKI组36例。分别在入组后0 h、24 h、48 h、72 h采集患者尿液及血液标本,并检测血肌酐(SCr)与尿IGFBP-7、TIMP-2水平。分析SCr、尿IGFBP-7、TIMP-2与脓毒症AKI的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析SCr、尿IGFBP-7及TIMP-2在脓毒症早期急性肾损伤中的诊断价值。结果与非AKI组比较,AKI组各时点SCr、尿IGFBP-7、尿TIMP-2水平均升高,差异具有统计学意义(F/P=147.848/<0.001、330.849/<0.001、136.777/<0.001)。SCr与尿IGFBP-7、尿TIMP-2均呈正相关(r/P=0.680/<0.001,0.392/0.002),尿IGFBP-7与尿TIMP-2呈正相关(r/P=0.618/<0.001)。ROC曲线分析显示,SCr、尿IGFBP-7、尿TIMP-2及尿IGFBP-7联合TIMP-2预测脓毒症AKI的曲线下面积(AUC)分别为0.586、0.907、0.738、0.914,尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2优于SCr(Z/P=4.117/<0.001,4.196/<0.001);尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2优于尿TIMP-2(Z/P=2.663/0.008,3.378/0.008)。结论尿IGFBP-7、尿TIMP-2与尿IGFBP-7联合TIMP-2均可以作为早期预测脓毒症急性肾损伤发生的指标,且尿IGFBP-7、尿IGFBP-7联合TIMP-2的预测价值优于尿TIMP-2。

转化生长因子-β和镍纹样蛋白与2型糖尿病大血管病变的相关性

目的 探讨转化生长因子-β(TGF-β)和镍纹样蛋白(Metrnl)与2型糖尿病(T2DM)大血管病变的相关性。方法 选取T2DM患者106例,按颈动脉内中层厚度(CIMT)分为单纯T2DM组50例(CIMT≤1.0 mm)、T2DM合并大血管病变组56例(CIMT>1.0 mm),并随机选取同期体检的健康受试者52例为健康对照组。比较3组外周血清中的TGF-β、Metrnl水平,分析各代谢指标与T2DM大血管病变的相关性。结果 T2DM合并大血管病变组TGF-β、Metrnl水平低于单纯T2DM组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清TGF-β与Metrnl水平呈正相关(P<0.05);收缩压、吸烟、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、HOMA-IR是T2DM大血管病变的危险因素,Mernl、TGF-β是T2DM大血管病变的保护因素(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,TGF-β和Metrnl预测的曲线下面积(AUC)分别为0.757、0.846, TGF-β联合Metrnl预测的AUC为0.901。结论 血清TGF-β和Metrnl水平降低与T2DM大血管病变的发生相关,TGF-β联合Metrnl检测对T2DM大血管病变的早期评估具有重要意义。

潜在转化生长因子β结合蛋白2在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的通过检测子宫内膜癌组织中潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)的表达,探讨其对子宫内膜癌发病及预后的指导意义。方法采用免疫组化SP法对97例子宫内膜癌瘤组织和30例正常对照的增生期子宫内膜组织进行LTBP2表达情况的检测。结果正常对照组LTBP2阳性率为15%,子宫内膜癌组为91.8%,两组比较P<0.05。子宫内膜癌组织中LTBP2阳性表达率与组织细胞分化级别、临床分期及不良预后等因素有关。结论子宫内膜癌组织中LTBP2呈阳性表达,LTBP2在子宫内膜癌的发生发展过程中发挥重要作用。

潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)对氧化型低密度脂蛋白诱导的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的影响

目的探索潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人视网膜色素上皮(ARPE)细胞氧化损伤的影响。方法0 mg·L^(-1)、50 mg·L^(-1)、100 mg·L^(-1)和200 mg·L^(-1) ox-LDL处理ARPE-19细胞,CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒检测细胞活力和凋亡水平,Western blot检测不同浓度ox-LDL处理后细胞LTBP2蛋白表达水平。100 mg·L^(-1) ox-LDL处理ARPE-19细胞构建氧化损伤模型。将ARPE-19细胞随机分为对照组,ox-LDL组,转染LTBP2过表达载体或阴性对照的ox-LDL+ov-LTBP2组和ox-LDL+ov-NC组,转染LTBP2 siRNA或阴性对照的ox-LDL+si-LTBP2组和ox-LDL+si-NC组,以及ox-LDL+si-LTBP2+VEGF组。相应处理各组细胞后,采用CCK-8试剂盒和细胞凋亡检测试剂盒检测细胞活力和凋亡水平,酶联免疫吸附实验检测氧化应激标志物活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,Western blot检测各组细胞LTBP2、P38和p-P38的蛋白表达水平。结果与0 mg·L^(-1) ox-LDL处理后相比,50 mg·L^(-1)、100 mg·L^(-1)和200 mg·L^(-1) ox-LDL处理后APRE-19细胞活力下降,凋亡率升高,LTBP2蛋白表达水平增加,且变化均具有剂量依赖性(均为P<0.05)。与ox-LDL+ov-NC组相比,ox-LDL+ov-LTBP2组细胞LTBP2蛋白表达水平、ROS含量及细胞凋亡率均增加,细胞活力、SOD活性均降低,p-P38/P38比值和VEGF表达量均增加(均为P<0.05)。与ox-LDL+si-NC组相比,ox-LDL+si-LTBP2组细胞LTBP2蛋白表达水平、ROS含量及细胞凋亡率均降低,细胞活力、SOD活性均增加,p-P38/P38比值和VEGF表达量均减少(均为P<0.05)。而与ox-LDL+si-LTBP2组比较,ox-LDL+si-LTBP2+VEGF组细胞凋亡率和ROS含量均增加,细胞活力、SOD活性均降低(均为P<0.05)。结论LTBP2通过激活P38 MAPK信号通路促进VEGF表达加剧ox-LDL引起的ARPE-19细胞氧化应激损伤。

肌动蛋白结合蛋白2在人表皮生长因子受体2阳性型和三阴性乳腺癌患者中的表达及临床意义

目的探讨肌动蛋白结合蛋白2(TAGLN2)在人表皮生长因子受体2(HER2)阳性型和三阴性乳腺癌患者中的表达及临床意义。方法通过cBioPortal网站选取国际乳腺癌协会的分子分类数据库(METABRIC)中1904例浸润性乳腺癌患者的TAGLN2 mRNA表达数据和临床资料,以TAGLN2 mRNA表达值为标记,采用Kaplan-Meier法分析并计算TAGLN2 mRNA的cut-off值,根据该值将患者分为TAGLN2 mRNA高表达和TAGLN2mRNA低表达。比较不同受体表达状态乳腺癌患者TAGLN2 mRNA表达情况,比较HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者的临床特征,比较不同TAGLN2 mRNA表达情况乳腺癌患者的生存情况,采用单因素和多因素Cox回归分析HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者预后的影响因素。结果乳腺癌患者中TAGLN2 mRNA表达情况可能与雌激素受体(ER)表达、孕激素受体(PR)表达、HER2表达、HER2阳性(ER和PR阴性)、三阴性有关(P﹤0.01)。HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者确诊年龄、肿瘤直径、肿瘤分期比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同组织学分级三阴性乳腺癌患者TAGLN2 mRNA表达情况比较,差异有统计学意义(P﹤0.01)。HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者的生存情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);TAGLN2 mRNA低表达和TAGLN2 mRNA高表达HER2阳性型乳腺癌患者的生存情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);TAGLN2 mRNA低表达和TAGLN2mRNA高表达三阴性乳腺癌患者的生存情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。多因素Cox回归分析显示,淋巴结转移情况是HER2阳性型乳腺癌患者预后的独立影响因素(P﹤0.01),确诊年龄和淋巴结转移情况均是三阴性乳腺癌患者预后的独立影响因素(P﹤0.01)。单因素分析显示,TAGLN2 mRNA表达情况不是HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者预后的影响因素(P﹥0.05)。结论TAGLN2 mRNA表达情况不影响HER2阳性型和三阴性乳腺癌患者预后,可能不是这两种类型乳腺癌患者潜在的预后标志物。

转化生长因子β1对乳鼠心肌细胞转化生长因子结合蛋白2表达的影响

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在诱导心肌细胞表达转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)中的作用及信号传导通路。方法培养乳鼠心肌细胞;实时定量聚合酶链式反应、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测不同时间和不同浓度的TGF-β1对大鼠乳鼠心肌细胞LTBP2基因及蛋白表达的影响;用TGF-β1相关信号通路阻断剂探讨TGF-β1调节LTBP2表达改变的信号传导机制。结果 LTBP2基因表达随着TGF-β1浓度增加(0、2、5及10μg/L)而明显升高,在5μg/L时刺激最强(P<0.05);5μg/L的TGF-β1刺激下心肌细胞内LTBP2基因和蛋白表达的升高呈时间依赖性,均在12 h最高,24 h开始呈下降趋势(P<0.05或P<0.01);免疫细胞化学结果显示TGF-β1明显升高LTBP2的表达。信号传导通路研究显示TGF-β1在心肌细胞内主要通过ERK信号通路和PI3K信号通路诱导LTBP2的表达。结论 TGF-β1在乳鼠心肌细胞内通过ERK信号通路和PI3K信号通路上调LTBP2的表达。

SOX9通过转化生长因子β信号通路调节角膜内皮损伤后内皮-间质转化过程

目的探究性别决定区Y框蛋白9(sex-determining region Y-box protein 9,SOX9)是否会调控角膜内皮细胞损伤后的角膜上皮-间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)过程及具体机制。方法转染小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低人角膜内皮细胞B4G12中SOX9的表达,使用甲萘醌构建体外B4G12细胞损伤模型,设4个分组:si-NC组(转染siRNA-阴性对照)、si-SOX9组(转染siRNA-SOX9)、si-NC+甲萘醌组(转染siRNA-阴性对照后添加外源性甲萘醌做损伤处理)、si-SOX9+甲萘醌组(转染siRNA-SOX9后添加外源性甲萘醌做损伤处理)。通过实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot检测各组细胞中EndMT关键因子Snail家族转录抑制因子2(snail family transcriptional repressor 2,SNAIL2)及相关信号通路关键因子表达变化,阐明SOX9调控EndMT过程的功能和机制。结果转染siRNA-SOX9敲低细胞SOX9表达后,给予甲萘醌细胞损伤处理,观察到细胞中SNAIL2的表达会随SOX9的敲低而降低,同时观察到转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)信号通路中SNAIL2的上游关键因子Smad2/Smad3的表达也随着SOX9的敲低而降低。结论SOX9通过TGF-β信号通路调控角膜内皮损伤后EndMT过程。

象皮生肌膏对2型糖尿病大鼠溃疡肉芽组织转化生长因子-β及纤维结合蛋白表达影响的实验研究

[目的]探讨象皮生肌膏治疗2型糖尿病大鼠溃疡,观察溃疡创面肉芽组织转化生长因子-β(TGF-β)及纤维结合蛋白(FN)表达的影响。[方法]从160只SD大鼠中随机挑选40只为空白对照组,其余120只SD大鼠制备2型糖尿病模型,成模后再制备溃疡模型,其中糖尿病模型大鼠按照血糖及体重分层随机分为模型组、阳性对照组及实验组,每组40只;模型组予生理盐水纱布外敷,阳性对照组予水胶体敷料外敷,实验组予象皮生肌膏外敷。分别在第1天、第7天、第14天、第21天从每组随机挑选10只处死并取相同部位创面组织制成切片,采用免疫组化法检测TGF-β及FN含量。[结果]除空白对照组TGF-β和FN无明显变化,其余3组TGF-β表达在第7天均达峰值,而后一直降低;3组FN表达只有实验组最先在第14天达峰值,其余两组一直处于上升趋势。实验组大鼠在任意时间段TGF-β的表达、FN的表达及创面愈合率都高于阳性对照组和模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]对于2型糖尿病大鼠溃疡,象皮生肌膏能快速促进肉芽组织TGF-β及FN的表达,促进伤口愈合。

髓内钉固定与微创经皮钢板内固定对胫腓骨骨折患者血小板活化及血清转化生长因子-β1和骨形态发生蛋白-2影响的比较

目的:探讨髓内钉固定(intramedullary nail fixation,IMN)与微创经皮钢板内固定(minimally invasive percutaneous plate internal fixation,MIPPO)技术应用于胫腓骨骨折的效果及对患者血小板活化及血清转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)影响。方法:选取2019年2月至2020年2月胫腓骨骨折患者105例,分为MIPPO组53例和IMN组52例。其中MIPPO组男29例,女24例,年龄(41.74±6.05)岁;IMN组男31例,女21例,年龄(40.59±5.26)岁。比较两组围术期手术指标,术后并发症,术后12个月踝关节功能恢复情况,术前及术后3、7d血小板活化指标,术前及术后4、8周血清TGF-β1、BMP-2水平。结果:MIPPO组手术时间、骨折愈合时间短于IMN组(P<0.05);与术前相比,两组术后3、7 d的GMP-140、PAC-1、CD63、CD61水平均提高,但MIPPO组低于IMN组(P<0.05);两组术后4、8周血清TGF-β1、BMP-2水平均较术前提高,且MIPPO组提高幅度大于IMN组(P<0.05);MIPPO组术后并发症发生率低于IMN组(P<0.05)。两组术后随访12个月,踝关节功能Mazur评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:髓内钉固定与MIPO技术治疗胫腓骨骨折均可改善踝关节功能,但后者具有手术时间短、骨折愈合快、并发症少的优势,且血小板活化轻,血清TGF-β1、BMP-2水平改善快。

血清白细胞介素6和转化生长因子β_(1)及肠型脂肪酸结合蛋白水平对重症急性胰腺炎并发腹腔间隔室综合征的诊断价值

目的探讨血清白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))及肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)水平对重症急性胰腺炎(SAP)并发腹腔间隔室综合征(ACS)的诊断价值。方法选取2020年1月至2022年12月内蒙古自治区人民医院收治的89例SAP患者为SAP组,根据是否并发ACS分为ACS组(53例)和非ACS组(36例),另选取本院同期41例体检健康者为对照组。收集SAP患者临床资料,采用酶联免疫吸附试验法检测血清IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP水平。采用多因素Logistic回归方法分析SAP并发ACS的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP水平对SAP并发ACS的诊断价值。结果SAP组血清IL-6、I-FABP水平均高于对照组,TGF-β_(1)水平低于对照组[26(20,32)ng/L比7(5,9)ng/L、(162±26)μg/L比(100±19)μg/L、(36±8)μg/L比(53±6)μg/L],差异均有统计学意义(均P<0.001)。ACS组TGF-β_(1)水平低于非ACS组,IL-6、I-FABP水平均高于非ACS组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,入住重症监护病房时间延长、急性生理学和慢性健康状况评分系统Ⅱ评分增加和IL-6、I-FABP升高为SAP并发ACS的独立危险因素,TGF-β_(1)升高为独立保护因素(均P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP水平联合检测诊断SAP并发ACS的曲线下面积为0.888(95%置信区间:0.804~0.945),大于IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP单独检测(P<0.05)。结论SAP患者血清IL-6、I-FABP水平升高和TGF-β_(1)水平降低与并发ACS有关,血清IL-6、TGF-β_(1)、I-FABP水平联合检测诊断SAP并发ACS的价值较高。