不同烟草品种花粉粒形态的激光共聚焦扫描显微镜观察

对野生烟、烤烟、晒烟花粉进行了激光共聚焦扫描显微镜观察，发现不同品种烟草花粉的形态、大小存在明显的差异，可以做为烟草分类、进化研究的重要依据。

海马脑片LTP中钙变化的激光共聚焦扫描技术测定方法

目的 探讨采用激光共聚焦扫描技术来测定海马脑片LTP诱出过程中锥体细胞胞内游离钙的变化。方法 海马脑片的常规孵育及LTP的诱出 ,通过间隙灌流法负载荧光剂Fluo 3AM的海马脑片内游离钙的激光共聚焦测定。结果 直接用Fluo 3AM孵育脑片 ,可得到轮廓清晰的神经元共聚焦图像 ,条件刺激诱出LTP之后 ,海马锥体细胞胞内游离钙显著增高。结论 所述方法对实时测定LTP诱出过程中海马锥体细胞胞内游离钙的动态变化具有较好的效果。钙离子参与了LTP过程中的信号传递。

不同饮料对SD大鼠牙釉质脱矿影响的激光共聚焦扫描电镜观察

目的通过激光共聚焦扫描电镜了解饮料对釉质脱矿的影响。方法80d龄SD大鼠42只,每只单笼饲养,喂饲致龋饲料15天后检测无牙釉质脱矿。余鼠随机分为去离子水组(阴性对照,A组)、雪碧组(碳酸类,B组)、伊力纯牛奶组(牛奶类,C组)、农夫山泉矿泉水组(矿泉水类,D组)、统一鲜橙多组(果汁类,E组)和康师傅鲜c组(果汁类,F组),每组6只,喂饲饮料3个月,用激光共聚焦扫描显微镜观察磨牙釉质的脱矿情况。结果雪碧、统一鲜橙多和康师傅鲜c组的荧光面积、总荧光面积及平均荧光量分别是12.75×10-3μm2、19.83×10-3及1.56;8.90×10-3μm2、14.52×10-3及1.63;15.05×10-3μm2、24.04×10-3及1.60,明显高于对照组(P<0.05),其值为6.03×10-3μm2、9.73×10-3及1.55,其中又以康师傅鲜c组为最高。矿泉水和牛奶类的荧光面积和总荧光量都较低,分别为3.45×10-3μm2、5.41×10-3和3.87×10-3μm2、6.14×10-3,与对照组相比没有显著性差异(P>0.05),与酸性饮料(包括碳酸类和果汁类)比较有显著差异(P<0.01)。结论酸性饮料具有较强的酸蚀性,牛奶和矿泉水对釉质脱矿没有明显的影响。

大鼠孤束核内5-HT和内脏神经初级传入终末与向臂旁核投射神经元的联系—激光共聚焦扫描显微镜研究

本文在激光共聚焦扫描显微镜下观察了内源性５－ＨＴ终末、Ⅸ、Ⅹ脑神经初级传入终末在孤束核内与向臂旁核投射神经元之间的联系。分别向臀旁外侧核微量注射四甲基罗丹明，Ⅸ、Ⅹ脑神经干内微量注射生物素化葡聚糖胺，以免疫荧光和荧光组织化学方法显示５－ＨＴ、内脏神经初级传入终末和孤束核内的四甲基罗丹明逆行标记神经元。结果发现，大量罗丹明逆行标记细胞（红色）主要位于注射侧孤束核的内侧、小细胞亚核及连合核。同部位也同时观察到５－ＨＴ能阳性终末（蓝色）和内脏神经初级传入终末（绿色）。两种终末的终扣和膨体紧靠逆行标记神经元的胞体和树突或与其重叠，这些可能是突触连接部位的接触点。本文结果提示：中枢内的下行性５－ＨＴ纤维可能直接作用于孤束核内向臂旁核投射的神经元且通过与内脏神经传入终末在此处的汇聚，而产生新的神经效应。

激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位

目的:观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞内的共定位。方法:在有无雌激素或拮抗剂刺激下,利用激光共聚焦扫描显微镜观察ERα和MTA1在乳腺癌细胞系MCF-7中的共定位。结果:在无雌激素刺激下两者共定位于细胞浆和细胞核,而在雌激素刺激后两者则共定位于细胞核内。在雌激素受体拮抗剂刺激下,两者在细胞浆内定位增加。结论:雌激素和雌激素受体拮抗剂刺激乳腺癌细胞改变ERα和MTA1的共定位。

激光共聚焦扫描显微镜及其在牙菌斑生物膜研究中的应用

激光共聚焦扫描显微镜是近年来发展起来的一种激光扫描、计算机自动化分析与显微镜技术相结合的医学图像分析仪器,具有图像清晰、特异性高、敏感性强、三维重建、空间定位、精确定量等优点,成为形态学、分子细胞生物学、遗传学等领域中新一代强有力的研究工具。本文就激光共聚焦扫描显微镜基本原理及其应用于口腔牙菌斑生物膜的研究作一综述。

激光共聚焦扫描显微镜对激光打印文件墨粉厚度的分析研究

使用激光共聚焦扫描显微镜,对六种品牌和型号的激光打印机分别在打印纸和高光相纸上打印的图文墨粉厚度进行测量。结果表明,测量普通打印纸张上激光打印形成墨粉厚度时,测量数据因纸张纤维凹凸不平的影响有一定波动,相纸上激光打印形成的墨粉厚度测量数据相对稳定,并总结出随着打印文件图文线条宽度与墨粉厚度的变化规律。实验表明激光打印文件墨粉厚度的数据测量具有可行性,同一台激光打印机的打印文件墨粉厚度相对稳定,该指标作为一种重要参数可以为激光打印文件检验提供量化依据,并为打印机的同一认定提供依据。

激光共聚焦扫描显微镜技术在食品领域中的应用

该文介绍了激光共聚焦扫描显微镜的特点及原理,重点对其在食品领域中的发展和应用概况进行了综述。该技术在研究食品的微观组织结构及变化有独特的优势。

人食管癌细胞株PTEN的激光共聚焦扫描显微镜检测

目的 对人胚食管上皮永生化细胞株SHEE、SHEEMT、食管癌细胞株EC8712中PTEN表达情况进行定量比较和定位观察。方法 采用激光共聚焦扫描显微镜光学切片和荧光探针的双重标记技术对三株细胞中PTEN的表达和分布情况进行检测。结果 人食管癌细胞中PTEN主要表达在细胞浆和细胞核 ,在人胚食管癌上皮永生化细胞株SHEE、SHEEMT主要表达在细胞浆 ,食管癌细胞EC8712中细胞核表达增多 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;PTEN在三种细胞株中表达强弱顺序为SHEE >SHEEMT >EC8712 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1)。结论 PTEN在SHEE、SHEEMT和EC8712分化程度不同的细胞株中均表达 ,表达和分布位置与分化程度相关。

激光共聚焦扫描显微镜数据采集与分析技术研究

以梨花粉与花柱为试材,探索出了一套方便实用的激光共聚焦扫描显微镜(Laser Confocal Scanning Micro- scope,LCSM)数据采集与分析方法。利用这套方法可使在LCSM系统上进行数据处理的时间缩减到最少,而大部分 的工作可以带出实验室到一般的计算机上进行处理,从而大大降低实验费用。详细介绍了在梨花粉与雌蕊信号转导 机制的研究上如何利用普通计算机进行LCSM图像堆栈的读取、增加/去除伪彩、"蒙太奇"处理、Time Course数据转 化与数据处理等的方法与技术,以便为利用LCSM开展果树细胞信号转导的研究提供参考。

受压前颌上颌骨缝变化的激光共聚焦扫描显微镜观察

目的 探索前颌骨术前主动加压矫治的合理性及规律。方法 利用激光共聚焦扫描显微镜及三色荧光标记观察前颌上颌骨缝的发育及受压后骨缝结构的细微变化。结果 加压3周后可见骨缝增宽,连接相邻骨端的纤维组织发生断裂;6周后可见有机成分增生,但局部结构紊乱;9-12周实验组与对照组结构无显著性差别。结论 前颌上颌骨缝受压后存在"延滞效应",受压后的骨缝在发育后期能够恢复正常状态,具有正常功能。

葡萄柚漱口液抗变异链球菌生物膜效果的激光共聚焦扫描显微镜观察

目的观察葡萄柚漱口液对不同阶段变异链球菌生物膜的作用效果,并与西吡氯铵漱口液相比较。方法体外形成3、24、48 h变异链球菌生物膜模型,各组漱口液作用1 min后,(葡萄柚漱口液为实验组,设PBS液和西吡氯铵漱口液作为空白和阳性对照组),荧光染料染色生物膜中的死菌和活菌,激光共聚焦扫描显微镜观察并比较漱口液处理前后活菌百分比的变化。结果葡萄柚漱口液与空白组相较,各时段生物膜经处理后,3 h变异链球菌生物膜外层和中间层的活菌百分比,以及24、48 h生物膜外层的活菌百分比均有明显降低,两者间均有显著性差异(P<0.05);与阳性组相比较,二者间各层活菌百分比无显著性差异(P>0.05)。结论葡萄柚漱口液对各时段生物膜的外层细菌有杀伤作用,但仅能影响早期(3 h)变异链球菌生物膜的深层细菌生存,与西吡氯铵漱口液对变异链球菌生物膜的作用效果相似。

利用激光共聚焦扫描显微镜观察根管外细菌的分布和活性

目的 :利用激光共聚焦扫描显微镜观察慢性根尖周炎患牙根尖区根管外细菌的分布范围和活性。方法:临床采集10例需拔除的伴有慢性根尖周炎的单根牙(实验组)和5例因正畸需要拔除的健康单根牙(对照组)。所有样本首先经LIVE/DEAD禄R Bac LightTM死活菌染色试剂盒染色,各样本包埋后由根尖向冠方切取5张1 mm厚的切片。每张切片上随机选择3个视野,用激光共聚焦扫描显微镜观察每张切片上根管外细菌的分布情况和细菌的活性。结果:对照组中,牙骨质有较弱的荧光信号,通过设定观察条件,以对照组切片上无荧光信号为基线进行观察。实验组10例样本中,8例样本的根尖区切片的牙根外表面可观察到由显示绿色荧光信号的活菌和显示红色荧光信号的死菌共同构成的根管外生物膜。根管外细菌主要分布于距根尖2~3 mm范围内的根面牙骨质上。在68%的被观察视野中,活菌的绿色荧光的强度强于死菌的红色荧光。结论:根管外生物膜由活菌和死菌共同构成,分布于部分慢性根尖周炎患牙的根尖区牙骨质外表面上。

激光共聚焦扫描技术在滑膜细胞波形蛋白形态学研究中的应用

激光共聚焦显微镜技术应用于细胞内骨骼波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ）中间丝在人滑膜细胞中分布的研究。该技术包括滑膜细胞的分离和培养，用抗Ｖｉｍｅｎｔｉｎ荧光抗体对细胞内骨骼染色，在粘附式细胞人选仪（ＡＣＡＳ５７０）上进行激光共聚焦扫描及三维图重建。获得了较理想的图像质量。本文对激光共聚焦扫描的光学原理，各实验步骤及技术参数作了较详细的报道。

激光共聚焦扫描显微镜在口腔科学中的应用

激光共聚焦扫描显微镜具有分辨率高、标本制备简单、可以对活细跑进行无损伤性动态观察和三维重建、空间定位等特点,广泛应用于几乎所有涉及细胞研究的医学和生物学领域。本文就激光共聚焦扫描显微镜在口腔医学中的具体应用作一综述。

室温固化PMMA弯曲强度与断面激光共聚焦扫描微结构的关系

目的:比较4种室温固化聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)材料的弯曲强度,激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察材料断面的物理构象,阐明宏观抗弯曲力与微观结构之间的关系。方法:4种室温固化PMMA材料的厂家分别为德山(硬衬型)、日进和贺利氏(纤维型)、上海齿科(单纯型),每种室温固化PMMA材料制备试件10个。根据ISO 1567标准,室温20℃条件下,按厂商提供的粉液比例,使用不锈钢模具制备试件,电子万能材料试验机上测定试件的弯曲强度,CLSM对试件断面进行图像重建观察断面微结构。结果:德山、日进、贺利氏和上海齿科生产的4种室温固化PMMA材料制作试件的弯曲强度分别为(41.00±12.22)、(87.80±14.82)、(76.30±7.51)和(81.20±8.93)MPa,德山、日进、贺利氏的弯曲强度两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);上海齿科的弯曲强度与德山的弯曲强度比较差异有统计学意义(P<0.05),但与日进、贺利氏的弯曲强度比较差异无统计学意义(P>0.05)。试件断裂界面的三维重建图像分析,日进断面图像中微裂纹产生的完全程度、数量明显高于其他3种材料,贺利氏与上海齿科无明显差别,德山最低。结论:4种PMMA材料的弯曲强度以德山最低,日进近似最高,贺利氏与上海齿科相似;弯曲强度大的材料,其断裂界面产生微裂纹的完全性高且数量多。

不同发育阶段大鼠不同大动脉光镜及激光共聚焦扫描显微镜观察

应用光镜和激光共聚焦扫描显微镜对初生、 3月龄、 2 4月龄大鼠升主动脉、胸主动脉、腹主动脉和髂总动脉的管壁面积、管腔面积、中膜厚度和弹性膜进行了观察。结果分析显示 ,大鼠升主动脉、胸主动脉、腹主动脉和髂总动脉显微结构随发育、衰老发生明显的变化 ,单位面积内弹性膜荧光强度、管壁面积、管腔面积和中膜厚度均呈增大趋势。这种结构变化是导致动脉功能产生相应变化的主要因素。

基于激光共聚焦扫描显微技术分析激光对扁藻的影响

本文以亚心形扁藻为样品,波长1 341 nm的Nd∶YAP激光为光源,通过激光共聚焦扫描显微技术,研究Nd∶YAP激光辐照亚心形扁藻对亚心形扁藻叶绿体自体荧光强度和叶绿体面积大小的影响。Nd∶YAP激光辐照后的亚心形扁藻通过488 nm Ar^+激光激发获得亚心形扁藻自体荧光图像及其荧光光谱。结果表明,试验中除(10 W,60 s)辐照剂量组外,其余辐照剂量组均提高了亚心形扁藻的自体荧光强度,且所有的辐照剂量组均增大了亚心形扁藻的叶绿体面积。Nd∶YAP激光可刺激亚心形扁藻的叶绿体发育,促进藻细胞的生长,改善叶绿体光合作用的活性。

激光共聚焦扫描显微镜观察变异链球菌高致龋力临床株与标准株合成胞外多糖能力差异

目的了解变异链球菌(简称变链菌)593号高致龋力临床分离株在生物膜状态不同时期与标准株ATCC25175(均为血清型c)合成胞外多糖的能力差异。方法在聚苯乙烯塑料片上分别形成3、12、20 h变链菌生物膜标本,采用异硫氰酸荧光素标记的伴刀豆球蛋白A对合成的胞外多糖进行染色,用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察。采用静置法培养形成黏附生长的细菌,蒽酮法测定3～24 h其合成胞外多糖的量。结果胞外多糖与染料结合后发出绿色荧光,各时间段593号临床株绿色荧光的分布较ATCC 25175标准株更致密和广泛。3～20 h 593号临床株合成水溶性葡聚糖能力强于标准株(P<0.05);3～16 h 593号临床株合成水不溶性葡聚糖能力强于标准株(P<0.05);其他时间两者合成胞外多糖的能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论在生物膜形成过程中两菌株合成胞外多糖的模式相同,均随时间延长而合成量增加,但在生物膜形成早期(3～16 h)高致龋力临床株表现出不同于标准株的胞外多糖合成模式,其更强的合成胞外多糖能力可能是其具高致龋力的原因之一,提示研究致龋机制时使用临床株作为研究样本较标准株更为敏感。

激光共聚焦扫描显微镜观测自噬小体变化的应用

文章探讨激光共聚焦扫描显微镜技术在检测低氧诱导小鼠心肌细胞损伤自噬小体变化的应用价值.在无菌条件下,取胚胎型小鼠心肌细胞备用.采用低氧环境+缺氧液方法诱导心肌细胞损伤并发生自噬现象作为实验组,正常环境下培养细胞的方法作为对照组.待心肌细胞长到一定程度后,分别利用激光共聚焦扫描显微镜和正置荧光显微镜对免疫荧光染色的自噬小体表达的LC3A/B蛋白情况进行观测并比较2种检测方法的优缺点.结果显示利用低氧环境+缺氧液方法诱导小鼠心肌细胞损伤并自噬小体形成是可行的.与正常对照组比较,低氧缺氧诱导小鼠心肌细胞损伤组(实验组)自噬小体呈高表达状态.与普通型正置荧光显微镜比较,激光共聚焦扫描显微镜成像速度快,一次可以获得多副图像且图像清晰.激光共聚焦扫描显微镜技术具有成像速度快、灵敏度高和精确度高等优点,可以实时、准确观测低氧诱导小鼠心肌细胞损失自噬小体的表达情况,具有重要临床应用价值.