激光共聚集显微镜检测大肠癌细胞株中Claudin-1的表达

目的检测紧密连接蛋白Claudin-1在人类大肠癌细胞株中表达。方法采用激光共聚集显微镜检测Claudin-1在3株不同转移潜能人类大肠癌细胞株中的表达。结果Claudin-1在SW1116(Dukes’ A期)为细胞膜、细胞浆表达;SW480(Dukes’ B期)以细胞浆表达为主;SW620(Dukes’ C期)为细胞核、细胞浆表达。结论Claudin-1的表达部位随着大肠癌的进展出现异位,即Claudin-1由细胞表面膜转移至细胞浆和细胞核。

大光斑低能量Q开关Nd:YAG激光治疗黄褐斑的临床及动物研究

目的探索激光治疗黄褐斑的合适方法和作用机制。方法采用大光斑低能量的QSNY分别进行临床试验和动物实验,并通过皮肤反应、MCI、CLSM和组织病理学等多种方法评估该方法治疗黄褐斑的有效性和安全性。结果临床试验显示：治疗结束后,基本治愈8例,显效25例,好转12例,无效1例,有效率为73.33%;MCI显著降低,较治疗前有统计学意义（P〈0.05）;CLSM见基底层及棘层中下部黑素显著减少,但是可见MC,且树突长。动物实验显示：治疗结束后豚鼠皮肤色素沉着完全消退,MCI显著降低,较治疗前有统计学意义（P〈0.01）,CLSM和组织病理见毛囊周围及基底层黑素颗粒和MC均显著减少;但是随访4周发现色素沉着复发,肉眼达治疗前的80%~90%,MCI显著增高,但较治疗前有统计学差异（P〈0.05）;CLSM和硫酸亚铁染色见黑素颗粒明显增加,MC的数目、密度明显增多。阳性对照组皮肤治疗前后无明显改变。结论大光斑低能量的QSNY治疗黄褐斑短期内疗效肯定,副作用小,但有复发的高风险。

垂体腺苷环化酶激活多肽抑制β淀粉样蛋白对Neuro-2a细胞神经毒性作用的机制

通过MTT方法检测细胞活性 ,同时采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子的瞬时运动 ,研究了垂体腺苷环化酶激活多肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide 2 7,PACAP2 7)通过调节细胞内钙对抗淀粉样蛋白Aβ2 5 35引起Neuro 2a细胞神经毒性作用的可能机制。结果表明 ,PACAP在一定浓度范围内 (<0 1μmol/L)可提高Neuro 2a细胞增殖能力并对抗Aβ引起的神经毒性 ,此作用可以被PACAP受体竞争性拮抗剂PACAP6 2 7所抑制。 2 5 μmol/LAβ使细胞内钙离子缓慢上升 ,并有一个较长时间的平台期。 0 1μmol/L的PACAP使细胞内钙离子迅速升高后下降 ,10min后回到接近基线水平 ,伴有较长时间的不应期。用PACAP预处理细胞 10min后Aβ引起细胞内钙的慢上升不再出现。推测 ,PACAP受体激活引起瞬时内向钙离子运动 ,而后伴随一个较长时间的不应期 ,可能是一个消除凋亡或阻止凋亡启动的保护机制。

基因科学的革命——基因芯片技术

基因芯片技术是一种建立在杂交测序基本理论上的全新技术 ,它利用固定在芯片上的几万至几十万条探针与样品进行杂交 ,在一步实验中获取大量的信息。它的出现 ,使基因序列测定、基因功能测定等工作的程序得到了极大的简化 ,使许多原来根本不可能实现的检测成为可能。基因芯片技术使用了包括光控固相化学合成、激光共聚焦等在内的多项先进技术 ,实验实现了全部自动化 ,操作极为简便 ,可以节约大量的时间和实验成本。该项技术 ,已经在基因多态性分析、基因表达分析等多方面得到了广泛的应用 ,并已开始应用于临床诊断。随着基因芯片技术的进一步成熟和越来越多的成品芯片的设计制造成功 。

Amiloride对离体自发高血压大鼠心肌肥厚的影响

目的:观察amilorid(阿米洛利)对自发高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心肌细胞内pH值(pHi)的影响。方法:胶原酶灌流分离得到单个心室肌细胞,以pH荧光染色剂BCECF/AM染色后,在激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)下,测量细胞内的荧光强度。结果:SHR对照组心肌细胞内荧光强度比正常SD大鼠对照组显著升高(P<0.01);高剂量、低剂量amiloride组和enalapril组心肌细胞内的荧光强度与SHR对照组比较,均明显下降(P值均<0.01);amiloride组低于enalapril给药组(P<0.01)。结论:SHR心肌细胞内pHi明显升高。amiloride,enalapril可以降低SHR心肌细胞内pHi,amiloride的作用比enalapril更明显。

高血黏度对小鼠脑细胞内游离钙浓度及脑组织丙二醛含量的影响

目的 :探讨慢性脑供血不足对脑细胞内 [Ca2 + ]i,脑组织丙二醛 (MDA)及超氧化物歧化酶 (SOD)含量的影响 .方法 :采用高分子右旋糖酐法建立小鼠高血黏度动物模型 ,以Fluo 3/AM为细胞内游离钙离子的荧光指示剂 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定脑细胞内 [Ca2 + ]i 的变化 ;用硫代巴比妥酸法及黄嘌呤氧化酶发光法分别测定脑组织匀浆MDA ,SOD含量 .结果 :高血黏度小鼠脑细胞内 [Ca2 + ]i 明显升高 (P <0 .0 1 ) ,脑组织匀浆中MDA含量明显升高 (P <0 .0 5 ) ,SOD含量明显降低 (P <0 .0 5 ) .相关分析显示小鼠全血高、低切黏度与脑细胞内 [Ca2 + ]i 均呈显著正相关关系 (Spearman等级相关系数分别为 0 .76 9,0 .82 1 ,P <0 .0 1 ) ;全血低切黏度与脑组织MDA含量也呈显著正相关关系 (Pearson相关系数为 0 .72 0 ,P <0 .0 1 ) .结论