流式细胞仪筛选环磷酰胺诱导骨髓嗜多染红细胞微核的技术方法

目的利用单一荧光试剂吖啶橙(acridine orange,AO)和简单的单激光流式细胞仪(FCM)计数骨髓嗜多染红细胞的微核率,达到了解化合物诱导微核作用的目的。方法分别以环磷酰胺(CP)处理雄性KM小鼠和SD大鼠,采用AO荧光染色和单激光流式细胞仪检测小鼠和大鼠骨髓含微核的嗜多染红细胞(MNPCE)及含微核的成熟红细胞(MNNCE)的微核率,并对结果进行比较分析。结果随着CP浓度的增高,骨髓中MNPCE和MNNCE也相应增多,呈良好的量效关系。实验结果同时和手工计数比较,没有显著差异。结论 AO_FCM自动化检测方法完全适用于小鼠和大鼠骨髓MNPCE及MNNCE微核率的检测。

第二节流式仪对红细胞微核的自动化检测

一、研究概况红细胞因为没有主核,因此其MN的检测要相对容易一些。早在1982年,法国癌症研究中心Hutter博士等就用单激光流式细胞仪做了红细胞MN自动化检测的尝试。他们用染色体损伤剂环磷酰胺（CP）和丝裂霉素C（MMC）诱导小鼠骨髓红细胞MN,选用二氨基苯茚酮（简称DAPI）荧光染料染DNA（主核和微核）,SRIOI染蛋白质成分,并将机检结果和镜检结果作了比较,两种MN检测结果相关系数为0.96,吻合很好。

肝细胞肝癌对机体细胞免疫的影响

目的 探讨原发性肝细胞肝癌(HCC )对机体细胞免疫机能的影响。方法 采用血常规检测,应用荧光标记抗体及三色激光流式细胞仪对5 1例肝细胞肝癌患者和17例对照样本术前、术后外周血的细胞免疫指标进行检测。检测项目包括:T辅助淋巴细胞(THL) ,细胞毒T淋巴细胞(CTL) ,NK细胞,单核细胞,并进行手术前后的对比分析。结果 原发性肝细胞肝癌(HCC)术后THL、CTL、NK和单核细胞百分比、单核细胞绝对值的平均值较术前分别增高0 .91% ,8.5 8% ,8.85 % ,3 1.45 % ,66.5 5 % ,手术前后有显著性差异(P <0 .0 5或P <0 .0 1)。良性对照组的术前与术后上述各项指标比较,均无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论 肝细胞肝癌(HCC)对机体的细胞免疫产生明显抑制作用,在肿瘤切除之后,这种抑制能力随之减弱,细胞免疫得到恢复。而良性对照组对机体细胞免疫的抑制不显著。综合分析细胞免疫的变化情况,对判断HCC的预后及肿瘤复发有重要的意义。

我校细胞生物实验室的开放管理模式

我校细胞生物实验室的开放管理模式上海第二医科大学贾建德，丁文彬，张怿我校的细胞生物实验室是医学基础性实验室，经重点学科的资助和扶植，在基础研究、应用研究、技术服务上逐渐形成了自身的特色，具有良好的实验条件。１９９２年起该实验室开始探索对外开放的途径和...

激光技术在生命科学中的地位

激光技术在生命科学中的地位许松林（上海第二医科大学）激光技术已深入到生命科学的各个领域，尤其在医学方面取得了广泛的应用。如眼科，激光改变了传统的手术治疗方法，提高了疗效；激光内腔镜的使用免除了病人开刀手术的痛苦；激光革新了传统的显微成像术；激光技术促...

基于FCM技术对喉癌细胞最佳X射线剂量的研究

目的:本文采用Annexin V-FITC/PI双染色、激光流式细胞术(Annexin V-FITC/PI-FCM)对经过不同剂量X射线(X-ray)辐照后的人上皮样喉癌细胞(Hep-2)继续培养48h时的凋亡情况进行了研究。观察受到不同剂量X-ray辐照后细胞活性的变化,探索Hep-2细胞的最佳X-ray放射剂量,进而为临床探索X-ray放射治疗喉癌的最佳剂量提供试验上的初步参考。方法:采用Annexin V-FITC/PI双染色、激光流式细胞术对受不同剂量X-ray辐照后的人上皮样喉癌细胞继续培养48h时进行研究,观察细胞形态、活性的变化,探索不同剂量组细胞的凋亡率。结果:试验结果表明,X-ray的辐照明显地引起了癌细胞的凋亡。总体上讲,细胞的凋亡率与X-ray的辐照剂量成一定的依赖关系,但并非线性。在所设定的剂量组中以12Gy剂量组细胞的凋亡率(20.793±1.133)%(P<0.01,n=5)为最高,2Gy～8Gy之间的剂量组Hep-2细胞凋亡率变化不够显著(P>0.05,n=5)。单位剂量凋亡率(凋亡率/辐照剂量)以2Gy组的(4.887±0.211)%(P<0.05,n=5)为最高。结论:经综合分析得出初步结论,对Hep-2细胞进行X-ray辐照,单次辐照剂量2Gy,周累计辐照剂量8Gy,对抑制Hep-2细胞的增殖效果有望更好。

流式细胞术定量检测细胞凋亡

本文报道了几种药物处理人体外周血细胞后，用双染色法在流式细胞仪检测凋亡细胞的发生。将凋亡细胞分选出用琼脂糖核酸电泳ＤＮＡ分析，证实了流式细胞仪所测定的结果。比较了单染色法检测凋亡细胞的局限性．

弓形虫速殖子群体DNA蛋白质含量及其形态特征测定的生物学意义

用激光流式细胞仪对弓形虫RH株速殖子的群体(10000个速殖子)DNA进行了分析。结果显示其DNA、蛋白质群体呈现相同分布规律有两个群体,两个峰值,表明速殖子群体在小鼠腹腔是以两个时相存在。并用显微图象处理系统对其形态特征(虫体投影面积,投影周长,长轴径,长径,宽径以及核面积,核周长,最大径,最小径)进行定量测定,发现在大样本(1000个速殖子)时还不能反映出这种群体分布规律。

编委简介

编委简介张金谷男，１９３２年生。毕业于河北医学院，现任首都医科大学附属北京红十字朝阳医院核医学科教授。张教授一直从事核医学临床工作，友表论文５０余篇，并参与各种专著及卫生部统编教材的编审工作（公开出版６本），参加“七五”肺动脉高压课题，曾获卫生部科技...

编委简介

编委简介张金谷男，１９３２年生。毕业于河北医学院，现任首都医科大学附属北京红十字朝阳医院核医学科教授。张教授一直从事核医学临床工作，发表论文５０余篇，并参与各种专著及卫生部统编教材的编审工作（公开出版６本），参加“七五”肺动脉高压课题，曾获卫生部科技...