全麻显微镜支撑喉镜激光烧灼术在声带息肉治疗中的应用

目的研究全麻显微镜支撑喉镜激光烧灼术在声带息肉治疗中的应用。方法本文为前瞻性研究。选取2019年3月至2022年5月巴彦淖尔市医院治疗的90例行声带息肉切除术患者作为研究对象,根据信封法将患者随机分为观察组(47例)和对照组(43例)。对照组男23例、女20例,年龄(50.12±1.85)岁,采用支撑喉镜常规显微器械切除术;观察组男25例、女22例,年龄(49.75±2.18)岁,采用全麻显微镜支撑喉镜激光烧灼术。对比两组患者手术效果、嗓音嘶哑分级评估(GRBAS)、嗓音障碍指数量表(VHI)评分、生活质量综合评定问卷-74(GQOL-74)评分及并发症发生情况。采用t检验、χ^(2)检验。结果观察组治疗总有效率为93.62%(44/47),与对照组[86.05%(37/43)]比较,差异无统计学意义(χ^(2)=1.430,P=0.232)。两组患者术后总嘶哑度[观察组(1.39±0.41)、对照组(1.61±0.34)]、粗糙声[观察组(1.36±0.50)、对照组(1.42±0.52)]、气息声[观察组(0.91±0.52)、对照组(0.94±0.53)]及VHI评分[观察组(11.48±7.36)分、对照组(12.04±7.52)分]均低于术前,且观察组术后总嘶哑度低于对照组[(1.39±0.41)比(1.61±0.34)],差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组术后躯体健康[(20.14±4.02)分]、心理健康[(22.57±4.86)分]、物质生活[(13.54±3.57)分]及社会功能评分[(16.78±3.71)分]均高于对照组[(16.47±3.46)分、(19.67±3.76)分、(11.49±3.24)分、(13.47±3.16)分],差异均有统计学意义(t=4.621、3.145、2.843、4.535,均P<0.05)。观察组并发症发生率为8.51%(4/47),低于对照组的25.58%(11/43),差异有统计学意义(χ^(2)=4.712,P=0.030)。结论应用全麻显微镜支撑喉镜激光烧灼术治疗声带息肉患者总嘶哑度更低,术后生活质量更高,并发症少,值得在临床推广应用。

双光子及共聚焦激光扫描显微术研究天花粉蛋白对人绒癌细胞的作用机制

天花粉蛋白 (trichosanthin ,TCS)是从中草药栝楼根中提取的一种核糖体失活蛋白 ,具有抗肿瘤和抗HIV功能 .应用双光子及共聚焦激光扫描显微术结合特异性荧光探针Hoechst 3334 2、 2′,7′ 二氯荧光黄双乙酸酯(DCFH DA)、Indo 1和Fluo 3 AM ,首次同时观察了TCS诱导人绒癌细胞 (JAR细胞 )凋亡过程中活性氧自由基 (ROS)和细胞内钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的变化 ,实验结果表明TCS引起的 [Ca2 + ]i 升高和ROS形成参与了TCS诱导的JAR细胞凋亡 ,并且ROS形成和 [Ca2 + ]i 升高有关 .共聚焦激光扫描显微术的研究结果表明 ,[Ca2 + ]i 升高不是导致ROS形成的主要原因 。

用激光共聚焦显微术在小鼠卵母细胞中检测蛋白激酶C

用免疫荧光化学与激光共聚焦显微术结合的方法研究了小鼠卵母细胞中蛋白激酶C (PKC)α和 βⅠ的表达和定位 ,以及蛋白激酶C (PKC)和皮质颗粒的双标记 ,探讨了以哺乳动物卵母细胞为实验对象进行免疫荧光共聚焦显微研究的简便方法 .结果发现 ,PKCα和 βⅠ在小鼠生发泡期和MⅡ期卵母细胞中都有表达 ,但表达部位存在差异 .说明采用改进的激光共聚焦显微术 ,可以方便、灵敏地检测特异蛋白质在卵母细胞中的表达部位 ,从而为生殖。

应用激光扫描共聚焦显微成像术研究光敏剂亚细胞定位

目的应用激光扫描共聚焦显微成像系统及荧光定量分析方法,探讨血卟啉单甲醚(HMME)在靶细胞亚细胞结构中的精确定位及定量分析的可行性。方法将传代培养的鼠肺内皮细胞与HMME共同孵育24h。应用激光扫描共聚焦显微成像系统,选择特异性细胞器荧光探针若丹明(rhodamine)-123、荧光素黄(luciferyellow)、DiOC6(3)和BODIPY分别标记细胞内线粒体、溶酶体、内质网和高尔基体。采取不同的采集顺序激发染色细胞样品,通过预先设置的相应的发射滤光片分别采集细胞内HMME与细胞器探针的荧光图像。通过计算机图像处理,采用像素-荧光强度分析方法对光敏剂进行亚细胞定位。结果采用先激发探针后激发HMME的顺序,HMME及荧光探针的荧光强度及形态特征保持较好;细胞质与细胞核内HMME平均荧光光强差异有显著意义,前者是后者的2倍以上;HMME在4种细胞器区域平均荧光光强与细胞平均荧光光强(J1/J2)比值的差异有显著意义;随参数m的增高,HMME在4种细胞器区域J1/J2比值呈下降趋势。结论HMME在细胞内线粒体、溶酶体、内质网和高尔基体均有分布;应用激光共聚焦显微成像系统结合荧光定量分析法能对荧光效率极低的光敏剂进行精确的亚细胞定位及分布定量比较。

利用激光扫描共聚焦显微术对同源四倍体水稻胚囊形成与发育的进一步观察

应用改进的整体染色透明激光扫描共聚焦显微术(WCLSM),对同源四倍体水稻PDER-2B-4x胚囊的形成与发育过程进行观察。发现其胚囊的形成发育过程与二倍体的一致,可以清楚地划分为8个发育时期,即孢原细胞形成期、大孢子母细胞形成期、大孢子母细胞减数分裂期、功能大孢子形成期、单核胚囊形成期、胚囊有丝分裂期、八核胚囊发育期和成熟胚囊期。除正常发育的过程外,大孢子发育的各个过程均出现一些异常现象,包括:细胞退化、核位置异常、核数目异常和细胞分化异常等。这些异常可能最终导致多种结构异常成熟胚囊的形成。

基于激光共焦扫描术的亚心形扁藻显微图像与光谱

采用激光共聚焦扫描显微技术,针对亚心形扁藻开展了研究。从获得的488 nm Ar+激光单光子激发的亚心形扁藻自体荧光光谱与图像,可知细胞内有一杯状叶绿体物质,其荧光峰值为682 nm,对应叶绿体发出的红色荧光。在单通道模式下,获得800 nm fs激光双光子激发的扁藻自体荧光光谱与图像,可知每个杯状叶绿体的内部有一个自体荧光更强的圆形物质。在双通道模式下,可分别获得小圆形物质的自体荧光图像,杯状叶绿体自体荧光图像,以及两个通道图像的叠加。进一步获得了双光子藻细胞荧光图的6个主要的荧光峰。采用单光子激光激发可获得亚心形扁藻叶绿体自体荧光图像及其荧光光谱,而双光子激光激发荧光光谱的多通道以及Lambda模式下采集光谱信号与图像,不仅可观察到亚心形扁藻的内部形态结构,还可能从双光子激发荧光图中研究分析亚心形扁藻生化物质的存在,灵敏度较单光子激发高。激光扫描共聚焦显微技术,特别是双光子荧光与图像技术可为海藻的检测与研究提供一种快速、实时、有效、简便的方法。

应用激光共聚焦显微术检测脑星形细胞瘤中EphrinB2及EphB4蛋白的表达

背景与目的:EphrinB2是一种新型促血管生成因子。EphrinB2与其受体EphB4可表达于多种肿瘤细胞,并与肿瘤发生及血管生成有关。本研究旨在了解EphrinB2及EphB4蛋白在脑星形细胞瘤中的表达规律,并初步探讨其可能意义。方法:利用双标免疫荧光分别检测EphB4/EphrinB2蛋白与胶质纤维酸性蛋白(glialfibrilaryacidprotein,GFAP)或CD34蛋白在35例脑星形细胞瘤新鲜标本及人脑胶质瘤细胞系CHG-5、SHG-44中的共表达,以LeicaSP2激光共聚焦显微镜观察、摄像并分析。结果:EphB4或EphrinB2蛋白与CD34蛋白可在部分间质血管内共表达,定位于血管内皮细胞。在肿瘤细胞及两种细胞系,亦可见EphB4或EphrinB2蛋白与GFAP的共表达。在分化程度较低的SHG-44细胞中,EphB4或EphrinB2平均荧光强度分别为72.48±33.78和96.80±36.98,均强于相应分化较好的CHG-5细胞(56.7±21.7和53.6±18.8),而CHG-5细胞GFAP绿色荧光强度(47.5±16.7)较SHG-44细胞(22.3±15.3)则明显增强。结论:EphB4/EphrinB2蛋白表达可能与肿瘤细胞的分化程度有关。

飞秒激光和显微板层刀行LASIK手术后视觉质量比较

目的:比较飞秒激光和角膜板层刀制瓣准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)的视觉质量。方法:回顾性系列病例研究。选取2011-06/09我院完成的LASIK手术病例150例300眼,根据制瓣方式分为飞秒激光组和板层刀组各75例150眼,所有手术均采用EC5000CX-Ⅱ(日本Nidek公司)行基质切削,且都由同一手术医师完成。比较两组患者术前及术后1wk;1,3mo的裸眼视力(uncorrected visual acuity,UCVA)、屈光度、术后最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)、波前像差及明视和暗视状态下的对比敏感度。结果:术后1wk;1,3mo两组患者的UCVA和屈光度(等效球镜)比较差异均无统计学意义。在术后1mo时,飞秒组C7的绝对值、RMSh,RMS3和RMS6值均低于板层刀组(P<0.05);术后3mo时飞秒组C7的绝对值、C14和RMS6的值均显著低于板层刀组(P<0.05)。明视和暗视对比敏感度在术后1wk时,飞秒组和板层刀组均较术前降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后1mo时,明视和暗视对比敏感度较术后1wk有所提高,至术后3mo略高于术前水平,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:飞秒激光制作角膜瓣的LASIK手术在治疗近视和散光方面具有安全性、有效性的特点。飞秒激光在提高UCVA的同时,还能减少高阶像差的产生,并且不会导致术后对比敏感度的下降,能够提高了患者的视觉质量。其术后效果优于角膜板层刀制作角膜瓣的LASIK手术。

内镜黏膜下剥离术诊治高度可疑结直肠癌或癌前病变及共聚焦激光显微内镜在随访中的价值

目的探讨内镜黏膜下剥离术(Endoscopic submucosal dissection,ESD)治疗和诊断高度可疑或早期结直肠癌和癌前病变的有效性和安全性,比较整块活检病理与内镜活检病理对早期癌诊断意义及共聚焦激光显微内镜在随访中的价值。方法对于内镜下高度可疑早期结直肠癌或早期结直肠癌及癌前病变的19例患者行ESD治疗,术后评价ESD治疗相关的一次性整块切除率、组织学治愈性切除率、手术并发症;比较术后整块病理与术前内镜活检诊断符合率;在术后随访时用共聚焦激光显微内镜检查(1、3个月)以指导活检并观察局部复发情况。结果 19处病灶一次性整块切除率为94.7%(18/19),组织学治愈性切除率为84.2%(16/19);病变平均大小(2.3±0.5)cm,平均手术时间(70±19.4)min;术后腹痛2例,延迟性出血1例,内镜下钛夹止血成功,其余病例未发生急性或延迟性出血以及穿孔;术后病理:黏膜内癌7例,癌前病变10例,黏膜下癌2例,其中2例黏膜下癌均进一步补充开腹手术,术后切除病变肠段未发现癌组织残留和周边淋巴结转移;所有病例术后平均随访(24.6±8.0)个月,局部未见残留、复发及异时病灶发生;其中7例黏膜内癌ESD术后1、3个月采用共聚焦激光显微内镜检查以指导活检进行随访未见癌组织残留及复发。19处病灶ESD术后大块组织病理诊断符合率为100%,而术前活检病理诊断符合率仅为57.9%,有统计学意义(P<0.01)。结论 ESD具有较高一次性整块切除率和组织学治愈性切除率,是一种治疗和诊断高度可疑或早期结直肠癌病变或癌前病变的安全有效的方法。共聚焦激光显微内镜可能对早期结直肠癌的术后随访具有一定的价值。

用激光共聚焦显微术检测哺乳动物卵母细胞中纺锤体相关蛋白的方法(英文)

哺乳动物卵母细胞是发育生物学和细胞生物学的重要研究对象 .激光共聚焦显微术是检测卵母细胞中纺锤体相关蛋白的有用技术 ,但是针对哺乳动物卵母细胞的特点需要做许多调整以得到理想结果 .其中 ,卵母细胞的准备、固定、透膜、脂类抽提、抗体孵育步骤十分关键 .另外 ,不同物种的卵母细胞也有差异 。

共聚焦激光扫描显微术研究天花粉蛋白对小鼠胚胎细胞的作用机制

天花粉蛋白是从中草药禾古楼根中提取的一种核糖体失活蛋白 ,具有致流产、抗肿瘤和抗 HIV功能。本文应用共聚焦激光扫描显微术结合特异性荧光探针 2′,7′-二氯荧光黄双乙酸酯和 Fluo3- AM,观察了天花粉蛋白作用于小鼠胚胎细胞过程中活性氧自由基和细胞内钙离子浓度的变化。实验结果表明 ,天花粉蛋白能诱导小鼠胚胎细胞钙浓度升高和产生活性氧自由基 ,并且天花粉蛋白能有效抑制小鼠胚胎细胞的分裂 。

咽喉反流对CO2激光喉显微手术后喉功能及创面愈合影响及对策初探

目的探讨咽喉反流对CO_2激光喉显微手术后喉功能康复与创面愈合的影响及其对策。方法回顾性分析2010年1月至2014年7月我院支撑喉镜下CO_2激光喉显微手术患者63例,根据RSI、RFS量表得分确定患者是否存在咽喉反流;术后对部分咽喉反流患者进行质子泵抑制剂治疗。患者随访3月,应用嗓音障碍指数量表对患者进行嗓音评估。结果咽喉反流组的术后声带肉芽肿发生率高于无咽喉反流组(P<0.05)。无咽喉反流且未行质子泵抑制剂干预患者术后肉芽肿发生率为57.1%,咽喉反流阴性但行PPI干预治疗患者术后肉芽肿发生率为16.7%,组间差异具有统计学意义(P<0.05);咽喉反流阳性而未行质子泵抑制剂干预患者术后肉芽肿发生率为61.1%,咽喉反流阳性并行PPI干预患者术后肉芽肿发生率为27.8%,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。无论咽喉反流阴性或阳性,给予或不给予PPI干预治疗,其术后嗓音障碍指数评分指数分布差异均有统计学意义(P<0.05)。结论咽喉反流对CO_2激光喉显微手术后的喉功能康复及创面愈合有一定影响,应用PPI干预治疗能有效减少术后声带肉芽肿等并发症的发生,促进喉功能及创面恢复。

激光共聚焦显微术在检测脑胶质瘤蛋白共表达中的应用

目的 了解ephrinB2及其受体EphB4蛋白在脑胶质瘤中的表达规律 ,并评价激光共聚焦显微术在检测脑胶质瘤组织和细胞蛋白共表达中的应用性。方法 利用双标免疫荧光分别检测EphB4 /ephrinB2蛋白与GFAP或CD34蛋白在 35例脑胶质瘤新鲜标本及人脑胶质瘤细胞系CHG 5、SHG 4 4中的共表达状况 ,以LeicaSP2激光共聚焦显微镜观察、摄像并分析。结果 EphB4或ephrinB2蛋白与CD34蛋白可共表达于部分间质血管 ,EphB4和ephrinB2在肿瘤血管的表达主要定位于血管内皮细胞。在瘤组织内肿瘤细胞及两种细胞系 ,亦可见EphB4或ephrinB2蛋白与GFAP的共表达。SHG 4 4细胞中EphB4或ephrinB2红色荧光强度强于CHG 5细胞 ,而CHG 5细胞GFAP绿色荧光强度较之SHG 4 4细胞则明显增强。结论 (1)脑胶质瘤间质可能存在不同免疫表型的血管内皮 ,提示肿瘤血管的不同属性 ;(2 )EphB4 /ephrinB2蛋白表达可能与肿瘤细胞的分化程度有关 ;(3)双标免疫组化结合激光共聚焦显微术是一种可用于观测肿瘤蛋白共表达的良好方法。

支撑喉镜下喉显微激光术治疗喉部疾病的护理

总结159例喉部疾病患者行支撑喉镜下喉显微激光术的护理。认为术前做好患者及家属的心理护理,术后密切观察生命体征、及时吸氧、保持呼吸道通畅、严格禁声、指导正确的发声方法,是预防术后并发症发生,促进患者康复的重要保证。

共聚焦激光显微内镜在内镜黏膜下剥离术后残留和复发病变诊断中的应用价值

背景:内镜黏膜下剥离术(ESD)目前已广泛应用于胃癌前病变和早期胃癌的根治。普通白光内镜检查难以发现ESD术后的残留和复发病变,而共聚焦激光显微内镜(CLE)可对黏膜病变作出实时体内组织学诊断而无需活检。目的:探讨CLE在ESD术后残留和复发病变诊断中的应用价值。方法:连续纳入2009年6月～2011年12月上海仁济医院因胃上皮内瘤变或早期胃癌而接受ESD治疗的患者,分别于术后1、3、6个月行CLE随访。综合首次ESD、CLE复查发现病变后追加的手术切除以及CLE活检病理结果作出最终诊断,并与CLE诊断进行对照。结果:共20例行ESD治疗者纳入研究,所有患者均完成CLE随访。ESD术后1个月CLE复查发现2例残留病变,术后6个月CLE复查发现1例复发病变,CLE诊断均为高级别上皮内瘤变(HGIN)。追加剖腹手术病理诊断2例残留病变为HGIN,1例复发病变为早期分化型腺癌。其余17例患者3次CLE复查均未见病变残留或复发。结论:CLE检查可准确诊断ESD术后残留和复发病变,对ESD术后内镜随访具有重要价值。

支撑显微喉镜下声带息肉激光切除术的围术期护理

目的探讨全麻支撑显微喉镜下声带息肉激光切除术围术期的护理措施。方法回顾性分析69例声带息肉患者行支撑显微喉镜下声带息肉激光切除术的临床护理资料。结果 69例患者均手术顺利,治愈出院,无1例发生并发症,术后随访声嘶症状均缓解,无复发。结论充分的术前准备、精心细致的术后病情观察和护理、正确的出院指导及提高患者的遵医行为对保证手术效果、减少并发症及预防复发起着重要作用。

CO2激光喉显微手术治疗声带白斑的临床疗效及安全性分析

目的对CO2激光喉显微手术治疗声带白斑的疗效及安全性进行分析。方法收治的40例声带白斑患者随机分为研究组和对照组,研究组行CO2激光喉显微手术治疗,对照组行传统声带黏膜剥脱术治疗,对两组治疗结果进行评价。结果两组治疗前各项嗓音功能指标比较,差异无统计学意义(P>0.05),研究组治疗后振幅微扰、基频微扰显著低于对照组,NNE显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组总有效率为95.00%,显著高于对照组70.00%,差异有统计学意义(P<0.05);研究组复发率为0,显著低于对照组20.00%(P<0.05),研究组并发症率为5.00%,与对照组10.00%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对声带白斑患者应用CO2激光喉显微手术治疗安全有效,可改善患者嗓音功能,且并发症较少,安全性较高,值得应用。

激光软X射线高速显微技术的现状与发展

软X射线显微技术可使活的生物样品成象。与电子显微镜相比,它具有低的损伤和强的穿透能力,而且分辨率高于光学显微镜。利用“水窗”波段的X射线(0.28—0.53 keV),样品可以在其自然状态下或有培养物的环境下成象。与电子显微镜有关的一些样品准备程序(如固定、脱水、着色等等)都可以避免。它在光学和电子显微镜之间是一个重要的补充。本文阐述了软X射线显微技术的原理、类型和未来的发展。