氟伐他汀对肾小球硬化大鼠纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1和Ⅳ型胶原的影响

目的:探讨羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂(HCRI)氟伐他汀对肾小球硬化大鼠Ⅳ型胶原的影响。方法:用5/6肾切除的方法诱导大鼠肾小球硬化模型,随机分为对照组、氟伐他汀治疗组2mg/(kg·d)、苯那普利治疗组6mg/(kg·d)及假手术组。10周时测尿量、尿蛋白、内生肌酐清除率(Ccr)、血肌酐、血胆固醇和血甘油三酯。免疫组化检测肾组织Ⅳ型胶原水平表达。蛋白印迹(Westernblotting)测定肾皮质纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)蛋白水平表达。结果:氟伐他汀及苯那普利治疗组尿蛋白及肾组织Ⅳ型胶原水平表达明显低于对照组(P<0.01),PAI-1表达亦低于对照组,Ccr明显高于对照组(P<0.01)。结论:氟伐他汀可抑制PAI-1,减少Ⅳ型胶原积聚,减轻肾小球硬化,降低蛋白尿,改善肾功能,其对肾脏的保护作用并不依赖降胆固醇作用。

纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物-1基因多态性与抑郁发作及冠心病的关系

目的探讨纤维蛋白溶解酶原激活物抑制-1(PAI-1)基因4G/5G多态性与抑郁发作和冠心病的相关性。方法选取抑郁发作患者42例、冠心病患者65例和健康个体132例,分别组成抑郁发作组、冠心病组和健康对照组,应用等位基因特异性PCR的方法了解各组PAI-1基因4G/5G多态性情况。结果抑郁发作组和冠心病组的4G/4G基因型频率和4G等位基因频率均高于健康对照组(P<0.05),抑郁发作组与冠心病组PAI-1基因-675位点的4G/4G基因型频率和4G等位基因频率均差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PAI-1基因4G/4G基因型和4G基因可能与抑郁发作与冠心病都有关,推测与两者伴发有一定联系。

Ras蛋白激活物类似物-1基因在胃癌细胞株中的表达及生物学意义

目的:研究Ras蛋白激活物类似物-1基因(Ras protein activator like-1,RASAL1)在正常胃黏膜上皮细胞、胃癌细胞株中的表达情况及其生物学意义。方法:采用RT-PCR和Western blot分别检测高分化胃腺癌细胞株MKN-28、中分化胃腺癌细胞株SGC-7901、低分化胃腺癌细胞株BGC-823和正常胃黏膜上皮细胞株GES-1中RASAL1基因在mRNA水平和蛋白水平的表达,应用基因测序法检测上述3种胃癌细胞株中K-Ras基因第一外显子第12密码子点突变情况,并分析其意义。结果:RT-PCR和Westernblot检测结果显示,与正常胃黏膜上皮细胞相比,在3种不同分化胃腺癌细胞株中,RASAL1基因的表达在mRNA水平和蛋白水平均下调(P<0.05),分化程度越低表达下调越明显;测序结果表明3种胃腺癌细胞株中均未发现K-Ras基因第一外显子第12密码子点突变。结论:RASAL1基因在含野生型K-Ras的胃癌细胞中呈低表达状态,其表达水平与胃癌的恶性程度有一定的关系。

滋阴清心汤对代谢综合征患者纤维蛋白原、纤维蛋白溶酶原激活物抑制物-1的影响

目的:探讨滋阴清心汤对代谢综合征患者纤维蛋白原(FIB)、纤维蛋白溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的影响及可能的作用机制。方法:将100例患者按随机数字表法分成两组,两组均服用罗格列酮4mg,每天1次,治疗组在此基础上服用滋阴清心汤。观察治疗前后纤维蛋白原、纤维蛋白溶酶原激活物抑制物-1及代谢综合征相关指标的变化。结果:治疗组较对照组能进一步地改善代谢综合征的相关指标,如血压、血脂、糖耐量等(P<0.05);治疗后两组纤维蛋白原、纤维蛋白溶酶原激活物抑制物-1与治疗前比较均有明显改善(P<0.05);且治疗组比对照组改善更明显(P<0.05)。纤维蛋白原、纤维蛋白溶酶原激活物抑制物-1与腰围、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血压呈明显正相关(P<0.05)。结论:滋阴清心汤和罗格列酮合用可提高代谢综合征的治疗效果,并进一步降低代谢综合征的血栓形成风险。

洛伐他汀对肾小球硬化大鼠纤溶酶原激活物抑制剂-1和Ⅳ型胶原表达的影响

目的观察洛伐他汀对肾小球硬化大鼠纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和Ⅳ型胶原表达影响,探讨其对肾脏的保护作用机制。方法雄性Wistar大鼠24只随机分为对照组、高胆固醇组、洛伐他汀治疗组。饲养12周处死动物,观察血脂、尿蛋白、肾脏病理改变,免疫组织化学法检测PAI-1和Ⅳ型胶原表达。结果洛伐他汀治疗组血胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、尿蛋白、肾脏病理积分明显低于高胆固醇组,且PAI-1、Ⅳ型胶原表达及泡沫细胞较高胆固醇组明显减少。结论洛伐他汀不但可降低血脂,还可能通过抑制PAI-1表达,减少Ⅳ型胶原积聚,减轻肾小球硬化,降低尿蛋白,改善肾功能;其对肾脏保护作用并不依赖降胆固醇作用。

外周血sLox-1、tPAI-1水平与冠心病PCI术后MACE发生的关系

目的:研究外周血可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLox-1)、组织纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1(tPAI-1)水平与冠心病经皮冠状动脉介入术(PCI)后不良心血管事件(MACE)发生的关系。方法:选取161例行PCI术治疗的冠心病病人作为观察组,同期选取健康体检志愿者56名作为对照组,检测并比较2组外周血sLox-1、tPAI-1水平。观察组病人随访观察12个月,根据病人在随访期间是否发生MACE分为MACE组和非MACE组,分析冠心病病人PCI术后发生MACE的影响因素。结果:观察组外周血sLox-1、tPAI-1水平均明显高于对照组(P<0.01)。单因素分析显示,MACE组病人cTnI、hs-CRP、sLox-1、tPAI-1水平均明显高于非MACE组(P<0.01);logistic回归分析显示,cTnI、hs-CRP、sLox-1、tPAI-1水平均为冠心病PCI术后MACE的独立危险因素(P<0.01)。ROC曲线分析显示,外周血sLox-1联合tPAI-1水平预测冠心病病人PCI术后MACE的灵敏度、准确度、AUC分别为91.37%、93.12%、0.901,均高于外周血sLox-1、tPAI-1单独预测。结论:冠心病病人PCI术后外周血sLox-1、tPAI-1水平升高为术后MACE的危险因素,二者联合对冠心病PCI术后MACE具有较高预测价值。

健脾复方对人大肠癌移植瘤裸小鼠不同组织AP-1表达的影响

目的探索人大肠癌移植瘤裸小鼠肿瘤组织、肿瘤邻近正常肠组织和远端正常肠组织中激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)表达的差异以及健脾复方对这些AP-1表达的影响。方法将40只BALB/C裸小鼠按1∶1∶1∶1随机分入健脾复方组、5氟尿嘧啶(5-flurouracil,5-Fu)组、模型对照组和空白对照组,前3组建立人大肠癌原位移植瘤模型,分组治疗8周。采用免疫组化法检测各组肿瘤组织、肿瘤邻近(距肿瘤切缘1 cm)正常肠组织和远端(距肿瘤切缘>3 cm)正常肠组织的AP-1表达。结果模型对照组肿瘤组织和肿瘤邻近正常肠组织的AP-1表达高于空白对照组及远端正常肠组织;健脾复方组、5-Fu组和模型对照组的远端正常肠组织中也观察到AP-1平均光密度增高。健脾复方组肿瘤组织、肿瘤邻近正常肠组织AP-1表达与空白对照组以及远端正常肠组织未见显著差异,并有低于模型对照组的趋势,在5-Fu组可以看到类似的结果。结论肿瘤组织、肿瘤邻近正常肠组织甚至远端正常肠组织AP-1的异常升高与肿瘤生长、侵袭和转移存在一定关系,健脾复方的治疗在一定程度上能降低肿瘤组织和肿瘤邻近正常肠组织的AP-1表达,但其作用机制仍有待进一步研究。

福辛普利和氨氯地平对纤维蛋白溶酶原活化物抑制剂-1的作用的随机对照试验

纤溶功能损害在高血压和糖尿病患者动脉粥样硬化血栓形成事件中起着一定的作用。血管紧张素转换酶抑制剂和钙拮抗剂可以调节纤溶过程,为评价这些药物对纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的作用,作者进行了随机对照试验。 方法 在给予4周安慰剂之后,患有高血压和2型糖尿病的患者(共有96例,51％为黑人)被随机双盲分为福辛普利20mg或40mg/d组及氨氯地平5mg或10mg/d组,固定剂量给予4周。再经给予4周安慰剂洗脱期后,交叉治疗进行4周。

缬沙坦联合前列地尔治疗慢性肾小球肾炎的疗效及对肾功能、血流变学、t-PA和PAI-1的影响

目的探究缬沙坦联合前列地尔治疗慢性肾小球肾炎(CGN)的临床疗效及对患者肾功能、血流变学指标、血清组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响。方法选取东海县人民医院2015年1月至2016年12月收治的80例CGN患者,并依据治疗方式的不同分为观察组(n=40)和对照组(n=40)。观察组采取缬沙坦联合前列地尔疗法,对照组仅给予缬沙坦治疗。两组均以4周为一个疗程,且连续治疗两个疗程。评价两组患者临床疗效,测定并比较两组患者治疗前后肾功能、血流变学及t-PA、PAI-1等水平。结果观察组患者的治疗总有效率为92.5%,明显高于对照组的75.0%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者的尿蛋白量(Upro)水平为(1.02±0.36)g/24 h,血肌酐(SCr)水平为(135.45±31.45)μmol/L,尿素氮(BUN)水平为(10.72±2.98)mmol/L,尿红细胞计数为(16.34±6.98)个/HP,对照组分别为(1.45±0.34)g/24 h、(168.76±29.46)μmol/L、(12.12±3.12)mmol/L、(26.92±9.59)个/HP,均较治疗前显著下降,且观察组显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);治疗后,观察组患者的全血高切黏度为(3.23±1.27)mPa·s,全血低切黏度为(7.51±1.55)mPa·s,t-PA水平为(5.64±1.07)μmol/L,PAI-1水平为(27.65±4.60)μmol/L,对照组分别为(3.98±1.41)mPa·s、(8.47±1.62)mPa·s、(4.43±1.02)μmol/L、(38.74±5.06)μmol/L,两组均较治疗前显著下降,t-PA水平较治疗前显著升高,且组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论缬沙坦与前列地尔联用治疗CGN,可有效缓解患者肾功能状态,改善其血流速度,平衡机体血清t-PA和PAI-1水平,效果显著。

参附舒心汤对不稳定性心绞痛患者血清tPAI-1、sICAM-1、MMP-9水平的影响

目的：探讨参附舒心汤对不稳定性心绞痛血清因子及治疗效果的影响。方法：90例不稳定性心绞痛患者随机分为两组,每组45例,以接受西药治疗者为西药组,以接受西药联合参附舒心汤治疗者为联合组,分析两组治疗前后tPAI-1、sICAM-1及MMP-9变化情况,并探讨两组治疗效果。结果：入组时,两组间GRACE评分、SAQ评分及中医主要症状评分比较,无统计学差异（P〉0.05）,治疗2周后,联合组GRACE评分及中医主要症状评分低于对照组,SAQ评分高于对照组（P〈0.05）。同时,入组时,两组间tPAI-1、sICAM-1及MMP-9水平比较,无统计学差异（P〉0.05）;治疗2周后,联合组tPAI-1、sICAM-1及MMP-9水平低于对照组（P〈0.05）。此外,在2周的治疗时间内,两组不良反应发生率比较,未见统计学差异（P〉0.05）。结论：相对于单纯西药治疗,联合应用参附舒心汤可有效的提高患者的治疗效果及tPAI-1、sICAM-1及MMP-9水平。

虫草肾茶胶囊对人肾小球系膜细胞TGF-β_1 mRNA及PAI-1mRNA表达的影响

目的:研究虫草肾茶胶囊对培养在高糖条件下人肾小球系膜细胞(HMC)转化生长因子-β1mRNA(TGF-β1mRNA)和纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1mRNA(PAI-1mRNA)表达的影响,探讨其在糖尿病肾病(DN)防治中的意义。方法:制备虫草肾茶胶囊及福辛普利药物血清,用实时定量PCR方法测定各组HMCTGF-β1以及PAI-1mRNA表达,并以福辛普利为对照。结果:虫草肾茶胶囊高、中剂量组及福辛普利组TGF-β1mRNA和PAI-1mRNA表达均低于高糖组,且以虫草肾茶胶囊高剂量组表达最低(P<0.05)。结论:高糖可促进HMCTGF-β1mRNA和PAI-1mRNA表达,虫草肾茶胶囊可下调高糖刺激下HMCTGF-β1mRNA及PAI-1mRNA的表达,从而预防肾小球硬化的发生、发展,进而延缓DN的进展。

PAI-1反义寡核苷酸对肾间质细胞抑制作用的实验研究

目的研究纤维蛋白溶解酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODN)对大鼠肾间质细胞(NEK293)的抑制作用。方法采用RT-PCR、Western blot检测脂质体介导的PAI-1ASODN目的基因及蛋白的表达;通过细胞生长试验、流式细胞仪检测PAI-1 ASODN转染前后NEK293细胞增殖和凋亡的变化。结果PAI-1ASODN转染后可见NEK293中PAI-1mRNA及蛋白表达明显下调,与对照组相比较,可明显抑制细胞的增殖。诱导其凋亡(P<0.05)。结论PAI-1反义寡核苷酸具有明显抑制肾间质细胞增殖和诱导其凋亡的作用,转染脂质体介导的PAI-1 ASODN有望成为治疗肾纤维化的有效方法。

多发性骨髓瘤细胞对血管内皮细胞tPA及PAI-1表达的影响

目的:研究多发性骨髓瘤细胞(multiple myeloma cells,MMCs)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,t PA)、纤维蛋白溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)蛋白表达水平及m RNA表达水平的影响,了解多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者纤溶活性,从而进一步了解MM患者血栓形成的原因及机制。方法:MM细胞株U266与HUVEC共培养24、48、72 h,以同期单独培养的HUVEC、MMCs作为对照,ELISA法检测共培养组和对照组细胞培养上清中t PA、PAI-1的蛋白表达水平,PCR检测HUVEC、MMCs t PA、PAI-1 m RNA的表达水平。结果:无论是ELISA法还是PCR,均未检测到MMCs培养上清中t PA、PAI-1蛋白和m RNA的表达。与同期单独培养的HUVEC相比,ELISA法检测共培养体系中的HUVEC t PA、PAI-1表达水平均升高(P<0.05);对照组中,PAI-1与t PA的表达水平呈正相关(rs=0.80,P=0.01);HUVEC与MMCs共培养体系中,PAI-1与t PA的表达水平呈正相关(rs=0.88,P=0.002);HUVEC单独培养组中,t-PA、PAI-1表达水平与时间呈正相关(rs=0.90,P=0.001;rs=0.90,P=0.001);共培养组中,t-PA、PAI-1表达水平与时间呈正相关(rs=0.95,P<0.001;rs=0.84,P=0.004);两组中t PA、PAI-1与GAPDH条带灰度值比值无明显差异(P>0.05)。结论:MMCs可促进HUVEC对t PA及PAI-1的分泌,在保证细胞活力的前提下,随共培养时间延长,两者分泌增加,且PAI-1与t PA的表达呈一定相关性,然而,MMCs对HUVEC t PA及PAI-1 m RNA的表达无明显影响。

四肢创伤患者血清PAI-1、TF、ATⅢ水平变化及临床意义

目的探讨四肢创伤患者血清纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、血清组织因子(TF)、血清抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)水平变化及临床意义。方法选取2016年2月至2019年1月陕西省渭南市骨科医院收治的四肢创伤患者75例作为研究对象,依据创伤严重程度评分情况将所有患者分为轻度创伤组(41例)和重度创伤组(34例);另选取同期陕西省渭南市骨科医院健康体检者30例作为对照组。比较观察组与对照组在不同时间点血清PAI-1、TF及ATⅢ水平差异情况。结果与对照组比较,轻度创伤组及重度创伤组在伤后1、4、7d血清PAI-1水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);重度创伤组在伤后1dPAI-1水平明显高于轻度创伤组,差异有统计学意义(P<0.05),而伤后4、7dPAI-1水平与轻度创伤组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,轻度创伤组及重度创伤组血清TF水平在伤后1、4、7d均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);重度创伤组伤后1、4、7d血清TF水平均明显高于轻度创伤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,轻度创伤组及重度创伤组血清ATⅢ水平伤后1、4、7d均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);重度创伤组伤后1、4、7d血清ATⅢ水平明显低于轻度创伤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论监测血清PAI-1、TF及ATⅢ水平变化,有助于临床对四肢创伤患者病情发展及预后进行评估。

Sysmex HISCL-800全自动化学发光免疫分析仪检测血栓分子标志物的性能评价与分析

目的应用CLSI评价方案对Sysmex HISCL-800全自动化学发光免疫分析仪检测血栓分子标志物项目进行性能验证。方法根据CLSI系列文件(EP15-A、EP6-A),对Sysmex HISCL-800全自动化学发光免疫分析仪检测系统的血栓分子标志物项目的精密度、线性、参考区间、正确度进行评价与分析,结果与厂商声明的性能进行比较。结果血栓分子标志物4个检测项的实验室内变异系数结果均小于厂家声明的批内变异系数(CV<10%)。且该4项的线性回归方程的斜率均在1.00±0.05范围内,相关系数均R^(2)≥0.99。它们的参考区间验证结果均有95%以上检测值在参考范围内。该4项正确度均通过验证。结论Sysmex HISCL-800全自动化学发光免疫分析仪检测血栓分子标志物项目的实验结果与厂商声明的性能基本符合质量目标要求。

RASAL1基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨Ras蛋白激活物类似物-1(RASAL1)基因在胃癌组织中的表达情况及临床意义.方法:应用免疫组织化学SP法分别检测50例正常组织、50例低级别上皮内瘤变组织、50例高级别上皮内瘤变组织+早期胃癌组织及50例进展期胃癌组织中RASAL1基因的表达,并结合其临床病理资料进行综合分析.结果:RASAL1基因在正常组、低级别上皮内瘤变组、高级别上皮内瘤变+早期胃癌组及进展期胃癌组的阳性率分别为94.0%(47/50)、70.0%(35/50)、42.0%(21/50)及18.0%(9/50),各组之间的差异有统计学意义(均P<0.05);各组RASAL1基因的表达与性别、年龄、生长部位等均无相关性;高级别上皮内瘤变组织+早期胃癌组和进展期胃癌组中RASAL1基因的表达与肿瘤大小、分化程度、浸润深度及淋巴结转移有相关性(均P<0.05).结论:RASAL1基因的低表达与胃癌的发生及进展有密切关系,检测胃癌组织中RASAL1的表达可反映肿瘤大小、分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移.

健脾复方对人大肠癌移植瘤裸小鼠COX-2、NF-κB和AP-1表达的影响

目的:研究健脾复方对人大肠癌移植瘤裸小鼠肿瘤环氧化酶2(COX-2)、核因子κB(NF-κB)和激活物蛋白1(AP-1)表达的影响。方法:将40只近交系(BALB/C)裸小鼠建立人大肠癌原位移植瘤模型,随机分入健脾复方组、塞来昔布组、5-Fu组、模型对照组,另设空白对照组,共分组治疗8周。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测COX-2 mRNA表达,采用免疫组化法检测AP-1和NF-κB的表达。结果:健脾复方组、塞来昔布组和5-Fu组裸小鼠COX-2表达均显著低于模型对照组,且与空白对照组相似(P=0.0019)。健脾复方组、塞来昔布组、5-Fu组和模型对照组AP-1表达高于空白对照组(P=0.0065)。健脾复方组和空白对照组NF-κB表达低于5-Fu组和模型对照组(P<0.05),且健脾复方组与空白对照组间差异未见显著性。结论:健脾复方可以下调COX-2的表达,其机制可能与下调其上游因子NF-κB有关。健脾复方对AP-1表达的影响尚需进一步研究。

博莱霉素致肺纤维化大鼠模型的纤溶变化及低分子肝素的作用

目的探讨博莱霉素诱导大鼠肺纤维化过程中纤溶变化与肺纤维化的关系,观察低分子肝素的作用并探讨其机制。方法75只Wistar大鼠分为低分子肝素(LMWH)组、强的松组、低分子肝素和强的松联合用药组、模型组、对照组。应用气管内灌注博莱霉素A5制备大鼠肺纤维化模型,于第15天开始每天给药(低分子肝素或强的松或联合给药),第28、42、56天取肺组织行苏木精-伊红和Masson染色以观察其病理变化,免疫组织化学方法测定纤维蛋白溶解酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)的表达,加钙法测定优球蛋白溶解时间(ELT)。结果模型组PAI-1表达明显升高、ELT延长(均P<0.05),肺纤维化严重,但PAI-1表达与时间无相关性;LMWH组PAI-1表达持续降低,较强的松组显著,ELT明显缩短(均P<0.05),肺纤维化程度减轻;联合用药组肺纤维化程度减轻、PAI-1表达降低、ELT明显缩短(均P<0.05)。结论大鼠肺纤维化出现PAI-1高表达、ELT延长,纤溶活性下降。而LMWH能减轻大鼠肺纤维化,与强的松联合应用效果更明显,可能与抑制PAI-1表达、缩短ELT,提高纤溶活性有关。

多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗及性激素水平测定

目的:测定多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗及性激素水平,并探讨其在PCOS发病、进展中所起的作用。方法:采用ELISA法测定非肥胖对照组(Ⅰ组,n=15)、肥胖对照组(Ⅱ组,n=15)、PCOS非肥胖组(Ⅲ组,n=33)、PCOS肥胖组(Ⅳ组,n=36)胰岛素原(PI)、血浆纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物(PAI-1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-I)。结果:Ⅲ组与Ⅰ组、Ⅲ组与Ⅳ组、Ⅳ组与Ⅱ组比较,PI、PAI-1差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ组与Ⅰ组、Ⅲ组与Ⅳ组比较,IGF-1差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胰岛素抵抗和高胰岛素血症在PCOS的发病中起关键作用。