高血压大鼠冠状动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的变化

目的研究在高血压背景下大电导钙激活钾(BK)通道的功能改变及其机制。方法用酶解消化方法分离12～16周龄自发性高血压大鼠(SHR)和WKY大鼠冠状动脉平滑肌细胞(CASMCS),采用膜片钳全细胞模式记录SHR和WKY大鼠CASMCSBK电流,SHR和WKY大鼠BKα亚基和β1亚基mRNA水平用实时定量取聚合酶链式反应和凝胶电泳测定,蛋白水平表达用免疫组化的方法测定。结果 SHR大鼠CASMCS(n=6)BK电流密度比WKY(n=7)高2.03±0.62(P<0.01);在mRNA水平,BKβ1亚基表达SHR组明显高于WKY组5.534±1.03倍(n=4,P<0.05),BKα亚基表达则无明显差异(1.266±0.12,n=4,P>0.05);BKβ1亚基和α亚基的表达SHR大鼠高于WKY大鼠。结论 SHR大鼠CASMCSBK电流密度比WKY大鼠增大,在mRNA和蛋白水平上BKβ1亚基表达也比WKY大鼠增强,这种变化可能是机体在高血压时自我调节的结果 。

香蕉ADA1家族成员鉴定及其在生物和非生物胁迫下的表达分析

Spt-Ada-Gcn5-乙酰转移酶(Spt-Ada-Gcn5-acetyltransferase,SAGA)是高度保守的辅助转录起始复合物,转录接头蛋白-激活的改变/缺失亚基1(alteration/deficiency in activation 1,ADA1),也称作组蛋白H2A功能互作因子1(histone H2A functional interactor 1,HFI1),它是SAGA核心模块中的一个亚基,在植物的生长发育和抗逆性方面发挥着重要的作用。为了解香蕉ADA1的分子特性,本研究基于香蕉基因组数据库,对香蕉ADA1基因家族成员进行鉴定,分析其基本理化性质、系统进化、选择压力、启动子顺式作用元件及生物与非生物胁迫下的表达等。结果显示,香蕉A、B及阿宽蕉基因组中分别有10、6、7个ADA1家族成员;成员均为不稳定的亲水性蛋白,均保守地含有SAGA-Tad1结构域,MaADA1和MbADA1均可与SAGA核心模块中的SAGA相关因子11(SAGA-associated factor 11,Sgf11)互作;系统发育显示香蕉ADA1基因家族成员可划分为3个亚族,进化过程中大多受纯化选择;香蕉ADA1基因家族成员的基因结构差异性较大;香蕉ADA1基因家族成员含有多个响应激素的作用元件;MaADA1-1可能对香蕉在低温胁迫下的抗性起着重要的作用,MaADA1均响应香蕉枯萎病菌胁迫。本研究表明,ADA1基因家族成员在香蕉中高度保守,并可能响应生物与非生物胁迫。

白藜芦醇对肾小球内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的探讨白藜芦醇(虎杖提取物)对肾小球内皮细胞氧化应激损伤保护的分子机制。方法将常规培养的肾小球内皮细胞分为对照组(A组)、过氧化氢(H2O2)诱导模型组(B组)和添加不同剂量白藜芦醇处理的H2O2诱导模型组[1μg/ml(C1组),0.1μg/ml(C2组)和0.01μg/ml(C3组)]。MTT法测定细胞存活率;实时定量PCR检测细胞中沉默调节蛋白1(SIRT1)和单磷酸腺苷激活的蛋白激酶α亚基(AMPKα)mRNA的表达;Western blot法检测SIRT1、AMPKα和磷酸化AMPKα蛋白的表达。结果 C1、C2和C3组细胞存活率均高于B组(P<0.01或P<0.05)。与B组相比,C1、C2和C3组的SIRT1 mRNA和蛋白表达量均增高;其中,C1组SIRT1 mRNA增高最显著(P<0.01)、C3组SIRT1蛋白表达增幅最大(P<0.01)。与B组相比,C2组中AMPKα蛋白表达有所增高。结论白藜芦醇可能通过上调SIRT1表达来减轻H2O2诱导的肾小球内皮细胞氧化应激损伤。