益气化瘀法中药对糖尿病大鼠肉芽增生期创面TGF-β/ALK5/Smad2/3通路的影响

目的 :探讨益气化瘀法中药对糖尿病大鼠肉芽增生期创面转化生长因子-β(TGF-β)/激活素受体样激酶(ALK)5/Smad蛋白2/3通路的影响。方法 :将50只大鼠随机分为益气化瘀组、益气组、化瘀组、糖尿病对照组、正常对照组。通过腹腔注射链脲佐菌素和外科方法建立糖尿病大鼠全层皮肤缺损模型,运用Westernblot技术手段分别检测各组肉芽增生期创面成纤维细胞ALK5/Smad2/3的表达水平。结果:糖尿病对照组ALK5表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);益气化瘀组ALK5表达水平明显低于糖尿病对照组(P<0.05),其与益气组、化瘀组、正常对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。糖尿病对照组smad2表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);益气化瘀组smad2表达水平与各组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病对照组smad3表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);益气化瘀组smad3表达水平低于化瘀组(P<0.05),明显低于糖尿病对照组、益气组(P<0.01),高于正常对照组(P<0.05)。结论:糖尿病创面难以愈合及瘢痕形成的机制可能与ALK5/Smad2/3通路有关,益气化瘀中药可能通过抑制ALK5/Smad2/3通路,加速创面愈合,减少瘢痕形成。

逍遥丸对人卵巢壁颗粒细胞ALK5／Smads通路的影响

目的研究逍遥丸治疗不孕症的可能作用机制。方法 60例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者中肝郁证者21例(治疗组),其余39例患者为对照组。对照组采用西医常规方案促排卵,治疗组在对照组的基础上口服逍遥丸,每次20丸,早晚分服。测定两组患者成熟卵泡壁颗粒细胞激活素受体激酶5(ALK5)、Smad2、Smad3和Smad 4mRNA和蛋白的表达。结果治疗组颗粒细胞ALK5和Smad2 mRNA及蛋白的表达显著高于对照组(P<0.05);Smad3、Smad4 mRNA和蛋白的表达两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论逍遥丸治疗不孕症的机制可能与上调壁颗粒细胞受体ALK5和Smad2 mRNA及蛋白,调节ALK5/Smads信号通路而达到促进卵泡发育目的 ,调节卵巢功能。

转化生长因子-β与新生血管形成

文章综述近年来对TGF—β及其受体和信号传导通路在血管新生中的作用，包括：两条TGF—β信号级联反应，ALKl一Smadl／5通路和ALK5一Smad2／3通路同时存在于内皮细胞表面，使TGF—β对血管新生呈现相反的作用；TGF—β作用的剂量依赖性；细胞外环境对其作用的影响以及血管新生化与脑缺血的研究进展。

大鼠肝再生模型中上皮细胞黏附分子及转化生长因子-β的动态表达

目的观察肝再生模型中上皮细胞黏附分子（EpCAM）和转化生长因子-β（TGF-β）的动态表达。 方法 将35只雄性F344大鼠（Fisher344大鼠）随机分为假手术组、肝切除组（PH组）和2-乙酰氨基芴组（2-AAH/PH组），采用免疫组织化学染色法观察不同时间点EpCAM阳性细胞在肝组织中的增殖及分布；应用Western blot和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测不同时间点TGF-β和激活素受体样激酶-5（ALK-5）的蛋白表达和基因表达。结果 EpCAM阳性细胞在假手术组很难见到；PH组在术后第7天可见少量EpCAM阳性细胞，术后14 d可见阳性细胞向肝内迁移，术后21 d仅见很少量的阳性细胞；2-AAF/PH组术后7、14 d可见与PH组相似结果，但EpCAM阳性细胞明显增多且术后21 d依然可见多量的EpCAM阳性细胞。RT-PCR的结果显示：假手术组TGF-β和ALK-5三时间点的表达差异无统计学意义（TGF-β 2－ΔΔCt值：7 d：1.00±0.00、14 d：1.09±0.16、21 d：1.08±0.13，FTGF-β＝0.57，PTGF-β＝0.595；ALK-5 2－ΔΔCt值：7 d：1.00±0.00、14 d：1.10±0.14、21 d：1.07±0.16，FALK-5＝0.54，P＝0.610）；PH组和2-AAF/PH组TGF-β和ALK-5三时间点表达差异有统计学意义（TGF-β PH组和2-AAF/PH组2－ΔΔCt值：7 d：8.66±0.72、7.79±0.58，14 d：5.36±0.53、4.04±0.42，21 d：7.64±0.64、6.88±0.68，FTGF-β PH＝21.52，PTGF-β PH＝0.002，FTGF-β2-AAF/PH＝35.10，PTGF-β2-AAF/PH＝0.001；ALK-5 PH组和2-AAF/PH组：7 d：4.32±0.52、5.91±0.54，14 d：7.79±0.74、9.73±1.04，21 d：4.85±0.46、5.90±0.89，FALK-5PH＝30.43，PALK-5 PH＝0.001，FALK-52-AAF/PH＝20.33，P＝0.002）。Western blot的结果显示：假手术组TGF-β和ALK-5三时间点的表达差异无统计学意义（TGF-β灰度值：7 d：456.4±46.8、14 d：454.8±47.1、21 d：458.8±55.6，FTGF-β＝0.14，P＝0.805；ALK-5灰度值：7 d：20.9±4.5、14 d：21.3±7.9、21 d：22.4±6.5，FALK-5＝0.42，P＝0.960）；PH组和2-AAF/PH组TGF-β和ALK-5三时间点表达差异有统计学意义（TGF-β PH组和2-AAF/PH组灰度值：7 d：1 175.2±106.5、882.6±83.7，14 d：780.4±63.9、639.6±61.3，21 d：1 067.0±91.6、816.2±83.1，FTGF-βPH＝6.61，P＝0.009，FTGF-β2-AAF/PH＝8.06，P＝0.012；ALK-5 PH组和2-AAF/PH组：7 d：72.9±7.0、110.1±13.1，14 d：90.1±9.4、136.9±12.5，21 d：57.8±5.6，91.8±9.7，FALK-5PH＝14.05，P＝0.005，FALK-52-AAF/PH＝10.96，P＝0.011）。结论 在肝再生过程中，TGF-β表达呈现动态趋势并与EpCAM的表达趋势不同；TGF-β受体ALK-5的表达并不和TGF-β同步。