激活蛋白-1在骨代谢相关信号通路中的作用研究进展

激活蛋白-1(AP-1)是调节细胞增殖、分化和凋亡的关键转录因子。AP-1可通过调控成骨细胞和破骨细胞的增殖、分化和凋亡,参与骨骼生长的生理及病理过程。近年来研究发现,AP-1作为核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子信号通路的重要转录因子,主要通过核因子-κB和Jun氨基末端激酶、细胞外信号调节激酶和p38信号通路调节破骨细胞形成,参与骨代谢过程,其与骨质疏松、骨肿瘤等代谢性骨疾病的发生发展相关,这为代谢性骨疾病提供了新的治疗靶点。本文就AP-1在骨代谢相关信号通路的作用研究进展作一综述。

心绞痛患者血清内脂素水平变化与激活蛋白-1、基质金属蛋白酶-2的关系

目的探讨心绞痛患者血清内脂素与激活蛋白-1(AP-1)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的关系。方法选择不稳定型心绞痛患者(UAP组)75例、稳定型心绞痛患者(SAP组)65例和健康对照组60例,采用ELISA法检测其血清内脂素、磷酸化c-Jun(反映活性AP-1数量)、MMP-2及组织金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)的水平。结果UAP组血清内脂素、磷酸化c-Jun、MMP-2、TIMP-2及MMP-2/TIMP-2均高于SAP组(P均<0.01);SAP组上述指标均高于对照组(P均<0.01);Pearson相关分析显示心绞痛患者血清内脂素水平与磷酸化c-Jun、MMP-2、TIMP-2及MMP-2/TIMP-2呈正相关(r分别为0.662、0.657、0.456、0.273,P均<0.01);磷酸化c-Jun与MMP-2、TIMP-2及MMP-2/TIMP-2呈正相关(r分别为0.588、0.433、0.184,P均<0.05)。结论心绞痛患者的血清内脂素水平明显升高,其可能通过促进AP-1活化、增加MMP-2分泌而降低冠脉粥样硬化斑块的稳定性。

内毒素致伤大鼠白介素-10表达及肺组织激活蛋白-1活性的变化

目的 :观察内毒素 (L PS)致伤大鼠血浆 IL 10及肺组织 IL 10 m RNA含量和激活蛋白 1(AP 1)活性的变化 ,探讨 AP 1对 IL 10基因表达的作用。方法 :采用 L PS(2、4、6和 8mg/kg)致伤 Wistar大鼠 ,在各时间点 (1、2、4和 6小时 )制备动脉血浆并取肺组织。采用酶联免疫吸附法 (EL ISA)检测血浆 IL 10含量 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 IL 10 m RNA含量 ;采用凝胶迁移率分析法 (EMSA)检测 AP 1活性。结果 :1L PS可使血浆 IL 10含量及肺组织的 IL 10 m RNA含量和 AP 1活性同步升高 ;2 L PS≥6 mg/kg时 ,血浆 IL 10含量及肺组织的 IL 10 m RNA含量和 AP 1活性的高峰增长幅度显著加大。结论 :急性肺损伤或急性呼吸窘迫综合征时 IL 10基因表达增强与 AP 1活性同步升高有关。

激活蛋白-1、巨噬细胞游走抑制因子与人颈动脉粥样硬化斑块的关系研究

目的探讨激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)、巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)在人颈动脉粥样硬化斑块中的表达变化及作用机制。方法收集60例人颈动脉粥样硬化斑块标本(试验组,A组)和30例正常人肠系膜动脉标本(对照组,B组)。根据颈动脉超声检查结果将颈动脉粥样硬化斑块标本分为软斑组(A1,n=20)、混合斑块组(A2,n=20)、硬斑组(A3,n=20)。分别采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法测定标本中AP-1亚单位c-Jun mRNA及蛋白表达水平,反映AP-1的表达水平。用酶联免疫法(ELISA)测定斑块组和对照组血清中MIF水平。结果 (1)人颈动脉粥样硬化斑块中c-Jun mRNA及蛋白较对照组表达上调(P<0.05),A1组较A3组表达显著升高(P<0.05),A2组与A1组和A3组分别比较无明显差异(P>0.05)。(2)斑块组比健康对照组血清中MIF的含量显著增高(P<0.05);A1组较A3组含量显著增高(P<0.05),A2组与A1组和A3组分别比较无明显差异(P>0.05)。(3)在人颈动脉粥样硬化斑块中,MIF浓度与c-Jun表达水平明显呈正相关(r=0.759,P<0.01)。结论 AP-1和MIF与人颈动脉粥样硬化斑块的形成及稳定性显著相关,其可能作为预测颈动脉粥样硬化斑块病变情况及斑块稳定性的一个指标。AP-1表达量与MIF浓度越高,斑块不稳定性越高。

大鼠急性肺损伤时肺组织激活蛋白-1活性变化的研究

目的 探讨脂多糖(LPS)致伤大鼠后肺组织激活蛋白-1(AP-1)活性与肺组织损害及功能障碍程度的关系。方法 经Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量(2、4、6及8mg/kg)LPS复制急性肺损伤(ALI)模型,以注射生理盐水为对照,观察致伤后不同时相点(1、2、4及6h)大鼠的呼吸频率及死亡情况;检测动脉血氧分压(PaO_2)和肺湿重/干重(W/D)值,并行组织学检查;采用凝胶迁移率分析法(EMSA)检测肺组织AP-1活性。结果 LPS 2mg/kg即可致大鼠呼吸频率增快,LPS≥6mg/kg时出现呼吸困难或呼吸窘迫,死亡率为60％(36/60);各剂量组PaO_2均较对照组低,以LPS≤6mg/kg降低显著(P<0.01);肺组织W/D用值从LPS 2mg/kg、2h时显著升高,LPS≥4mg/kg各时相均显著升高(P<0.05);肺大体观察LPS剂量越大,肺水肿及炎症反应越严重;LPS致伤后肺组织AP-1活性均升高,剂量越大,AP-1活性越高,不同剂量组均在2h点达到高峰,且以LPS≥6mg/kg组升高显著(P<0.01)。结论 ①LPS≥6mg/kg是介导大鼠发生ALI和ARDS的临界剂量;②肺组织AP-1活性升高水平与肺组织损伤和功能障碍程度密切相关。

c-Jun/激活蛋白-1活性调节研究进展

转录因子激活蛋白 1(AP 1)对细胞增殖、细胞存活与细胞凋亡等重要生理过程具有调控作用 ,其核心组成成分是c Jun .c Jun活性从转录调控、翻译后调控 (主要是磷酸化调节 )和相互作用蛋白质调节等三个水平受到正负向调控 .其分子内 8个位点可被JNK1、GSK3、CKII、Abl等激酶磷酸化 .通过N端的转录激活结构域和C端的碱性亮氨酸拉链区 ,c Jun可与bZIP类转录因子、辅助激活因子和其他一些蛋白质直接相互作用而被调控 .另外一些分子可通过CBP、JAB1等重要辅助激活因子的介导间接调控AP 1的活性 ,共同构成AP

TOLL样受体9/激活蛋白-1信号通路在过敏性鼻炎中的作用

目的探讨TOLL样受体9/激活蛋白-1(TLR9/AP-1)信号通路在过敏性鼻炎中的作用机制。方法48只SD大鼠采用随机数字表法分为对照组、实验组、干预组,每组16只。实验组、干预组制备过敏性鼻炎大鼠的动物模型。干预组造模成功后给予治疗药物干预。将各组16只大鼠采用随机数字表法分为两组,每组8只,分别于末次干预后6、12 h处死后采集血液标本和鼻黏膜标本。检测各组大鼠干预后免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、症状评分、鼻黏膜组织中C-Fos、C-Jun表达。结果实验组大鼠IgE[(18.65±1.09)IU/mL比(11.39±1.56)IU/mL]、IL-4[(75.33±7.16)ng/L比(56.55±6.08)ng/L]、TNF-α[(57.25±5.15)ng/L比(32.33±2.26)ng/L]、症状评分、C-Fos[(0.850±0.012)比(0.425±0.050)]、C-Jun[(0.950±0.052)比(0.425±0.030)]均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。干预组大鼠IgE[(15.95±1.02)IU/mL]、IL-4[(65.12±5.47)ng/L]、TNF-α[(48.53±4.18)ng/L]、症状评分、C-Fos[(0.575±0.047)]、C-Jun[(0.615±0.047)]均明显低于实验组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论药物治疗过敏性鼻炎的机制与抑制TLR9/AP-1信号通路及其下游因子的释放和分泌有关。

核转录因子激活蛋白-1对PPARδ表达的调控作用

目的研究在过氧化物酶体增长因子活化受体δ(PPARδ)表达中的相关调控因子.方法用RT-PCR扩增人类PPARδ启动子序列,通过Deletion及重组将不同长短的PPARδ启动子序列转化到PGL3-basic载体中,转染LOVO细胞,通过观测各重组体转染活性,确定PPARδ启动子活性区域.再通过电泳迁移率变更分析(EMSA)、突变等方法确定核转录因子激活蛋白-1(AP1)对PPARδ表达的作用.结果 Deletion及重组转染后发现PPARδ启动子活性区域在序列3361～3464之间,EMSA、突变发现AP1因子结合位点突变后转染活性明显降低.结论 AP1因子结合位点突变后转染活性明显降低,提示AP1是PPARδ的一个增强子.

转录因子激活蛋白-1在Buerger’s病中的表达与意义

目的:观察转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)在Buerger’s病患者腰交感神经元内的表达。方法:收集2011年1月至2012年3月行腰交感神经节切除术的Buerger’s病男性患者腰交感神经节标本,Buerger’s病患者组:23例,对照组:12例。应用免疫组化、RT-PCR、Western blot技术测定对照组腰交感神经节神经元AP-1的表达水平并比较其表达差异。结果:Buerger’s病患者腰交感神经节神经元中AP-1的基因表达(P=0.045 9)、蛋白表达(P=0.028 3),高于对照组。结论:AP-1在调节Buerger’s病细胞增殖和血管炎症反应中发挥着作用。

激活蛋白-1与变应性疾病的研究进展

激活蛋白-1(AP-1)是指一类主要由Jun和Fos两大类蛋白质因子家族组成的转录因子,能与许多基因上AP-1位点即佛波酯反应元件结合,参与众多生长因子和细胞因子的基因转录调控,从而导致机体一系列生理和病理生理变化,近年来关于它与变应性疾病的关系日益得到重视。本文就AP-1的结构、活化及其与变应性疾病之间的关系作一综述。

激活蛋白-1对香烟烟雾提取物诱导气道黏蛋白5AC基因表达的调控作用

目的:了解激活蛋白-1(AP-1)参与调控香烟烟雾诱导的气道黏蛋白(MUC)5AC表达的作用机制,探讨此过程中AP-1活化的可能信号途径。方法:体外培养人气道上皮细胞BEAS-2B,给予香烟烟雾提取物(CSE)刺激,干预实验用c-Jun的显性负性突变体TAM67转染细胞阻断AP-1的DNA结合活性;用SP600125和PD98059预处理分别阻断c-Jun氨基端激酶(JNK)和细胞外信号调节激酶(ERK)的活性。以ELISA法检测MUC5AC蛋白含量,Western印迹检测磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化ERK(p-ERK)和磷酸化P38(p-P38)含量,RT-PCR检测MUC5ACmRNA表达水平,EMSA测定AP-1的DNA结合活性。结果:CSE(1g/L)刺激后MUC5ACmRNA表达水平和蛋白含量明显高于对照组(均P<0.01),AP-1的DNA结合活性也明显强于对照组(P<0.01),伴随p-ERK和p-JNK蛋白含量显著增加,与对照组相比,差异有统计学意义(均P<0.01),而P38含量无明显变化(P>0.05);与CSE组相比,TAM67转染细胞后MUC5ACmRNA表达水平和蛋白含量均显著降低(P<0.01);与CSE组相比,用SP600125或PD98059处理细胞后可明显抑制AP-1的DNA结合活性(均P<0.05),并下调MUC5AC蛋白含量和mRNA的表达(均P<0.05)。结论:AP-1参与调控CSE诱导的气道MUC5AC基因表达的过程,此过程是由JNK和ERK信号转导通路激活AP-1,再由AP-1与MUC5AC启动子上AP-1DNA反应元件结合后在转录水平上调MUC5AC的表达而实现的。

儿童喉乳头状瘤组织中Toll样受体4及激活蛋白-1表达及相关性研究

目的:研究儿童喉乳头状瘤(juvenile onset laryngeal papilloma,JLP)中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)(通常是c-Jun和c-Fos的异源二聚体)蛋白的表达及其相互关系。方法:应用免疫组化法及RT-PCR检测JLP组织中TLR4和AP-1(c-Jun、c-Fos)的表达情况,分析两者表达的相关性及与JLP复发的相关性。结果:儿童JLP组织中TLR4和AP-1(c-Jun、cFos)蛋白和mRNA均为阳性表达,与无复发组比较,复发组有显著性增高(P<0.01),与正常对照组比较,JLP两组均有显著性增高(P<0.01)。其中TLR4蛋白复发组和无复发组阳性率分别为83.33%和58.33%,cJun、c-Fos蛋白复发组阳性率分别为86.67%和83.33%,无复发组阳性率均为66.67%。TLR4和AP-1(c-Jun、c-Fos)蛋白表达均与JLP的复发有明显相关性(P<0.05或者P<0.01);JLP组织中TLR4和AP-1(c-Jun、c-Fos)表达两者呈正相关(P<0.01)。结论:TLR4及AP-1的高表达可能在JLP的发生发展机制中起着重要作用。

激活蛋白-1诱骗寡核苷酸对豚鼠近视眼形成的影响

目的探讨球后注射脂质体包裹的激活蛋白-1诱骗寡核苷酸(activator protein-1decoy oligodeoxynucleotides,AP-1decoy ODN)对豚鼠近视眼屈光状态的影响。方法人工合成AP-1decoy ODN及错配的AP-1decoy ODN的核苷酸序列。半透明眼罩遮盖单眼诱导豚鼠近视眼的形成。遮盖眼球后注射脂质体包裹的AP-1decoy ODN或错配的AP-1de-coy ODN,检影验光测眼球屈光度,用A超(20Hz)测眼轴长度。结果豚鼠遮盖眼眼轴延长,形成近视。球后注射AP-1decoy ODN+脂质体LipofectAMNETM的遮盖眼近视程度减轻,而球后注射错配AP-1decoy ODN+脂质体LipofectAMNETM对遮盖眼的近视程度无影响。结论球后注射脂质体包裹的AP-1decoy ODN能有效抑制豚鼠近视眼的形成。

冠心病患者激活蛋白-1和脂联素与冠状动脉病变的关系

目的:探讨冠心病(CHD)患者外周血白细胞内激活蛋白-1(AP-1)和血浆脂联素浓度与CHD及冠状动脉粥样硬化病变的关系。方法:冠状动脉造影患者142例,分为CHD组和对照组。CHD组根据临床类型分为稳定型心绞痛(SAP)和急性冠脉综合征(ACS)组;根据冠状动脉病变类型分为A,B和C型病变组;根据冠状动脉病变狭窄程度分为轻、中和重度病变组。用ELISA法测定外周血白细胞裂解液中磷酸化c-Jun吸光度(A),反映活化AP-1数量;血浆脂联素浓度通过ELISA法测定。结果:CHD组磷酸化c-Jun明显高于对照组(1.43±0.33vs0.71±0.13,P<0.01),脂联素明显低于对照组[(6.1±1.8)mg/Lvs(10.2±1.5)mg/L,P<0.01];ACS组磷酸化c-Jun明显高于SAP组(1.56±0.28vs1.14±0.25,P<0.01),脂联素明显低于SAP组[(5.4±1.5)mg/Lvs(7.6±1.7)mg/L,P<0.01]。随冠状动脉病变类型和病变程度的加重,磷酸化c-Jun逐渐升高,脂联素逐渐降低。脂联素浓度与冠脉Gensini评分呈负相关(P<0.05)。结论:磷酸化c-Jun表达量增高和血浆脂联素浓度降低与CHD类型及冠脉病变情况显著相关。

冠心病患者血浆激活蛋白-1、巨噬细胞游走抑制因子水平和冠状动脉病变的关系

目的探讨冠心病患者血浆巨噬细胞游走抑制因子(MIF)水平和外周血白细胞激活蛋白-1(AP-1)表达量与冠状动脉粥样硬化病变的关系。方法根据冠状动脉造影结果将142例患者分为冠心病组和对照组,冠心病组根据临床类型分为稳定型心绞痛(SAP)亚组和急性冠状动脉综合征(ACS)亚组,根据冠状动脉病变类型分为A型病变亚组、B型病变亚组和C型病变亚组,根据冠状动脉病变程度分为轻度病变亚组、中度病变亚组和重度病变亚组。通过ELISA法测定外周血白细胞裂解液中磷酸化c-Jun吸光度,反映活化AP-1的数量。血浆MIF通过ELISA法测定。结果冠心病组磷酸化c-Jun表达量明显高于对照组(1.43±0.33比0.71±0.13,P<0.01),MIF水平明显高于对照组(14.97±4.11 ng/mL比9.07±1.28 ng/mL,P<0.01)。冠心病组中,ACS亚组磷酸化c-Jun表达量明显高于SAP亚组(1.56±0.28比1.14±0.25,P<0.01),MIF水平明显高于SAP亚组(16.66±3.56 ng/mL比11.01±2.12 ng/mL,P<0.01)。磷酸化c-Jun表达量和MIF浓度随冠状动脉病变类型和冠状动脉病变程度的加重而逐渐升高。结论AP-1和MIF与冠状动脉粥样硬化发生及冠状动脉病变情况显著相关,其可能作为预测冠状动脉粥样硬化病变情况及斑块稳定性的一个指标。AP-1表达量与MIF浓度越高,斑块不稳定性越高。

转录因子激活蛋白-1在血管重构发生中的作用

激活蛋白-1(AP-1)是目前研究心血管疾病发生和发展的分子机制中倍受关注的转录因子之一。AP-1在调节细胞增殖和血管炎症反应中发挥着重要作用。目前研究最多的与转录因子AP-1激活相关的炎症因子主要为血管紧张素Ⅱ、表皮细胞生长因子、内皮素-1。在不同的细胞中,AP-1的过度激活能够诱导多种炎症因子的释放,介导局部乃至全身血管炎症反应,诱导血管内皮细胞、血管平滑肌细胞及炎症细胞的增殖和迁移,引发病理性血管重构,导致高血压、冠心病等心血管疾病的发生及发展。该文根据目前研究现状,对转录因子AP-1在血管重构发生中的作用作一回顾。

氨溴索对吸烟大鼠肺组织激活蛋白-1、铜锌超氧化物歧化酶表达的影响

目的通过研究氨溴索对吸烟大鼠肺组织中激活蛋白-1(AP-1)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)表达的影响,探讨氨溴索在慢性阻塞性肺疾病(COPD)抗氧化治疗中的作用及其机制。方法健康雄性Wistar大鼠30只随机分为对照组、吸烟组、氨溴索组,分别采用原位杂交半定量技术、免疫组织化学法和免疫细胞化学法检测支气管上皮细胞及肺泡巨噬细胞中AP-1(c-jun和c-fos亚单位)和CuZn-SOD mRNA及其蛋白的表达水平。结果吸烟组大鼠支气管上皮细胞和肺泡巨噬细胞c-jun、c-fos、CuZn-SOD mRNA及其蛋白表达水平明显高于对照组(均P<0.05);氨溴索组c-jun、c-fos mRNA及其蛋白、CuZn-SOD mRNA表达水平明显低于吸烟组(均P<0.01),而CuZn-SOD蛋白表达水平与其他两组相比无统计学差异(P>0.05)。结论氨溴索可以降低吸烟大鼠肺组织AP-1 mRNA及其蛋白和CuZn-SOD mRNA的表达,其可能通过降低AP-1的表达在COPD治疗中发挥一定的抗氧化作用。

高糖环境下西格列汀对大鼠心肌细胞纤维化过程中转录激活蛋白-1及骨膜蛋白表达的影响

目的探讨在高糖环境下西格列汀对大鼠心肌细胞纤维化过程中骨膜蛋白(POSTN)及转录激活蛋白-1表达(AP-1)的影响。方法将大鼠心肌细胞H9c2复苏后接种于含体积分数10%胎牛血清的改良型洛斯维1640培养基持续培养,并用无血清培养基继续培养使其同步化;将同步化的H9c2细胞分为对照组、高糖损伤组及西格列汀处理组,对照组H9c2细胞予以普通培养液,高糖损伤组H9c2细胞予以葡萄糖浓度为33.0 mmol·L^-1的培养基,西格列汀处理组H9c2细胞予以终浓度为33.0 mmol·L^-1葡萄糖+0.1μmol·L^-1西格列汀的培养基。采用细胞计数试剂盒-8检测细胞活力。酶联免疫吸附试验检测H9c2细胞上清液中Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)表达水平;免疫组织化学法检测H9c2细胞中AP-1蛋白表达水平;反转录-聚合酶链反应检测H9c2细胞中POSTN和AP-1 mRNA表达水平。结果高糖损伤组和西格列汀处理组H9c2细胞增殖活力均显著高于对照组(P<0.05);西格列汀处理组H9c2细胞增殖活力显著低于高糖损伤组(P<0.05)。高糖损伤组和西格列汀处理组H9c2细胞中COLⅢ表达水平均显著高于对照组(P<0.05);西格列汀处理组H9c2细胞中COLⅢ表达水平均显著低于高糖损伤组(P<0.05)。高糖损伤组和西格列汀处理组H9c2细胞中AP-1表达水平显著高于对照组(P<0.05);西格列汀处理组H9c2细胞中AP-1表达水平显著低于高糖损伤组(P<0.05)。高糖损伤组和西格列汀处理组H9c2细胞中POSTN、AP-1 mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05);西格列汀处理组H9c2细胞中POSTN、AP-1 mRNA表达水平均显著低于高糖损伤组(P<0.05)。结论体外高糖环境可促进大鼠心肌细胞的增殖活力,并使心肌细胞纤维化;西格列汀可通过抑制H9c2细胞中AP-1的过表达下调POSTN的表达,从而减缓纤维化进程,延缓心肌细胞损伤。

激活蛋白-1对致动脉粥样硬化因子的调节作用研究进展

动脉粥样硬化(AS)现认为是一种慢性炎症性疾病,多种炎症因子参与了AS的形成及进展。核转录因子激活蛋白-1(AP-1)在细胞核内信号传导通路的调节过程中发挥重要作用,其可参与调节多种致AS因子的合成、分泌过程,进而影响AS的形成和发展。本文就此方面的进展作一综述。