巨噬细胞的激活诱导死亡

淋巴细胞的激活诱导细胞死亡(AICD)的分子机制已经得到了广泛的研究。巨噬细胞中也存在AICD,但是诱导巨噬细胞AICD的分子机理仍不是很清楚。最近,一些研究表明zVAD或IFNγ通过提高MEF2C蛋白稳定性,从而增加其在巨噬细胞中的含量。MEF2C和TLR2、4信号通路一起,诱导了Nur77的表达。Nur77的表达介导了巨噬细胞的凋亡。LPS激活的ERK和p38是诱导Nur77表达和细胞凋亡所必需的。p38/STAT1/ROS途径也介导了巨噬细胞的AICD。撤除血清诱导的巨噬细胞凋亡可能是一种新的巨噬细胞AICD模型。这些发现将有助于我们对巨噬细胞AICD的进一步了解。

肾综合征出血热患者T淋巴细胞诱导凋亡的研究

目的研究肾综合征出血热(HFRS)患者外周血T淋巴细胞(PBL-T)激活诱导细胞死亡(AICD)的发生情况,探讨AICD在肾综合征出血热发病机理中的作用。方法以免疫磁珠负性分离PBL-T;应用植物血凝素(PHA)和离子霉素(ionomycin)体外培养诱导细胞活化;采用HE染色和TUNEL染色观察凋亡情况并用流式细胞仪检测PBL-T的凋亡率和淋巴细胞亚群分布。结果采用免疫磁珠分离的PBL-T体外培养12 h后,经诱导发生凋亡的细胞出现DNA断裂;HFRS患者诱导组PBL-T凋亡率为(27.79±0.99)%,明显高于未诱导组(17.16±1.14)%,P<0.01;正常人PBL-T诱导与否其凋亡率差异无显著性(11.29±0.66)%(、10.94±0.71)%(P>0.05),无论是否诱导,患者PBL-T的凋亡率均高于正常人。结论以植物血凝素和离子霉素可有效地诱导体外培养PBL-T的凋亡;HFRS患者PBL-T经激活诱导后凋亡率明显提高;无论诱导与否患者PBL-T的凋亡率均高于正常人;HFRS患者PBL-T存在AICD现象,并且与EHFV感染有关。

慢性重型乙型肝炎肝内淋巴细胞AICD现象的探测

目的 了解肝脏局部浸润淋巴细胞是否存在AICD现象及其意义。方法 采用S P法检测 10例慢性重型乙型肝炎肝组织Fas和FasL表达。结果 10例慢性重型乙型肝炎肝内浸润淋巴细胞和肝细胞皆有不同程度的Fas和FasL的表达 ,Fas和FasL在淋巴细胞和肝细胞皆以膜浆型表达为主。结论 慢性重型乙型肝炎肝组织内细胞损伤的效靶关系十分复杂 ,肝组织浸润淋巴细胞存在激活诱导细胞死亡现象 ,浸润的淋巴细胞可能通过Fas/FasL介导的凋亡途径而下调免疫反应。

JNK信号通路在慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中的活化

目的:研究c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路在慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)激活诱导细胞死亡(activation induced cell death,AICD)过程中的作用.方法:选取慢性乙型肝炎患者40例,采用完全随机化方法随机分为2组,慢性乙肝组(n=20),慢性乙肝+抑制剂组(n=20),选取健康对照组(n=20).体外分离培养PBMC,模拟细胞在体内的AICD过程,其中慢性乙肝+抑制剂组在重新刺激凋亡前用JNK特异性抑制剂SP60012520μmol/L预处理2h.应用Western blot检测各组中磷酸化JNK(p-JNK)、总JNK、磷酸化c-jun(p-c-jun)、Bim(bcl-2 interacting mediator of cell death)的表达,流式细胞术检测PBMC凋亡.结果:慢性乙肝组PBMC凋亡率高于健康对照组,也高于慢性乙肝+抑制剂组,差异有统计学意义(P<0.05).慢性乙肝+抑制剂组PBMC凋亡率高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05).慢性乙肝组p-J N K的表达高于健康对照组(t=5.885,P<0.01),也高于慢性乙肝+抑制剂组(t=11.502,P<0.01).总JNK在三个组的表达无统计学差异.慢性乙肝组p-c-jun的表达高于健康对照组(t=5.477,P<0.01),也高于慢性乙肝+抑制剂组(t=12.899,P<0.01).慢性乙肝组Bim的表达高于健康对照组(t=9.133,P<0.01),也高于慢性乙肝+抑制剂组(t=10.086,P<0.01).慢性乙肝组PBMC凋亡率与p-JNK蛋白的表达成正相关(r=0.823,P<0.01).结论:JNK信号通路参与介导了慢性乙型肝炎患者PBMC的AICD过程,是其凋亡增多的机制之一.

乙型肝炎病毒相关肾炎患者外周血淋巴细胞Fas表达和凋亡的临床研究

目的研究外周血淋巴细胞激活诱导细胞死亡(activationinducedcelldeath,AICD)在乙型肝炎病毒相关肾炎发病中的作用。方法分离经肾穿病理活检确诊为乙型肝炎病毒相关肾炎患者22例、单纯慢性乙型肝炎患者17例和21例对照组外周血淋巴细胞,用流式细胞仪检测其Fas表达率及培养后凋亡(AICD)情况。结果A组患者外周血淋巴细胞Fas表达率及AICD分别为41.25±9.04和40.92±12.38;B组分别为29.83±13.12和29.88±13.12;C组分别为18.05±9.23和19.26±9.66。A组患者外周血淋巴细胞Fas表达及AICD明显高于其它两组(P值分别为<0.05和0.01)。结论外周血淋巴细胞Fas表达率和AICD增加,可能在乙型肝炎病毒相关肾炎发病中起一定的作用。

细胞凋亡对尖锐湿疣患者外周血单个核细胞的影响

目的 :探讨激活诱导细胞死亡 (AICD)对尖锐湿疣患者细胞免疫功能的影响。方法 :分离CA患者和健康体检正常人的外周血单个核细胞 (PBMC) ,在PHA的刺激下体外培养 2 4小时后收集细胞和上清液 ,经流式细胞术检测凋亡细胞 ,采用酶联免疫吸附试验检测培养上清液IL 2及IL 10。结果 :发现CA组新鲜血PBMC的凋亡率很低和对照组相似 (P >0 0 5 ) ,培养 2 4小时后CA患者的外周血单个核细胞凋亡明显高于正常对照组 (P <0 0 0 1) ,CA患者的培养上清液IL 2浓度明显低于对照组 (P <0 0 0 1) ,而IL 10浓度显著高于对照组 (P<0 0 0 1)。结论 :AICD可能是引起尖锐湿疣患者细胞免疫功能低下的一个重要机制 ,在尖锐湿疣患者发病机制中起重要作用。

外周血单一核细胞凋亡对复发性生殖器疱疹患者Th1/Th2分化的影响

目的:研究复发性生殖器疱疹(RGH)患者外周血单一核细胞凋亡对Th1/Th2型细胞分化的影响。方法:分离RGH患者和健康体检正常人的外周血单一核细胞(PBMC),在PHA的刺激下体外培养48h后收集细胞和上清液,经流式细胞仪检测凋亡细胞,应用酶联免疫吸附试验检测培养上清液IL-2及IL-10。结果:RGH组新鲜血PBMC的凋亡率很低,与对照组相似(P>0.05)。培养48h后RGH患者的外周血单一核细胞凋亡明显高于正常对照组(P<0.001),RGH患者的培养上清液IL-2浓度明显低于对照组(P<0.001),而IL-10浓度显著高于对照组(P<0.001)。结论:PBMC凋亡异常严重影响了Th1/Th2型细胞分化,可能是导致复发性生殖器疱疹患者细胞免疫功能低下的重要机制之一,也可能在生殖器疱疹复发中起一定的作用。

口腔扁平苔藓固有层淋巴细胞中Fas及Fas配体的表达变化

目的检测Fas及Fas配体（Fasligand，FasL）在口腔扁平苔藓（oral lichen planus，OLP）固有层淋巴细胞中的蛋白表达，探讨Fas、FasL和活化诱导的细胞死亡（activation—induced cell death，AICD）与OLP发病的关系。方法采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法检测31例OLP和10例正常口腔黏膜（normal oral mucosa，NOM）中淋巴细胞凋亡情况；分别使用免疫组化法检测组织总淋巴细胞及CD8＋、CD4＋T细胞Fas、FasL的表达。结果OLP与NOM固有层淋巴细胞凋亡率[分别为（1．9±1．8）％、（11．5±9．0）％]差异有统计学意义（P=0．013）。OLP淋巴细胞Fas、FasL表达与NOM组相比明显增强[阳性表达率分别为52％（16／31）、71％（22／31），P值分别为0．005、0．000]。OLP中CD8＋与Fas＋细胞双阳性表达率为10％，与NOM组相比无明显升高（P=0．313），而CD8＋与FasL＋细胞双阳性表达率[58％（3／31）]显著升高（P=0．002）。CD4＋与Fas＋细胞双阳性表达率为35％（11／31），较NOM组显著升高（P=0．031），其中网纹型的表达明显升高（阳性表达为8／19，P=0．019），但糜烂、萎缩型的表达无显著升高（阳性表达为3／12，P=0．097）。CD4＋与Fas L＋表达率为16％（5／31），与NOM组相比无明显增强（P=0．182）。结论OLP淋巴细胞凋亡低下；OLP中T细胞亚群Fas、FasL表达不均衡，CD8＋细胞和萎缩、糜烂型OLP中CD4＋细胞可能逃逸AICD，与炎症的持续和进展有关；网纹型OLP中部分CD4＋T细胞可能经历AICD。