性成熟小鼠卵巢和性未成熟小鼠体外培养卵泡的雌激素受体α、β亚型表达的研究

目的:探讨小鼠体内成熟与卵泡体外培养两种情况下卵泡的雌激素受体α亚型和β亚型的分布及表达。方法:采用兔抗小鼠ERα、ERβ多克隆抗体分别对性成熟小鼠卵巢和性未成熟小鼠窦前卵泡体外培养后免疫组化染色,检测雌激素受体两种亚型的分布,并对各级卵泡的染色强度进行定量分析。结果:性成熟小鼠卵巢的免疫组化染色显示膜细胞和间质细胞ERα的染色阳性,ERβ染色为阴性;原始卵泡的颗粒细胞ERβ、ERα染色均为阴性,从初级卵泡开始至成熟卵泡的颗粒细胞ERβ的染色呈阳性,ERα染色为阴性。其中ERβ的表达水平在小窦状卵泡的颗粒细胞最高,大窦状卵泡的颗粒细胞染色次之,成熟卵泡的颗粒细胞染色下降。性成熟小鼠卵巢各级卵泡的颗粒细胞ERβ的免疫染色强度显示:除初级卵泡与小窦前卵泡之间颗粒细胞上的ERβ染色无差异外,其余各组卵泡之间颗粒细胞上ERβ的染色强度都具有显著差异(P<0.01)。各级卵泡的卵母细胞两种ER亚型的染色都呈阳性。性未成熟小鼠各级卵泡的颗粒细胞、卵母细胞染色结果和染色强度定量分析结果分别同性成熟小鼠免疫组化染色和染色强度定量分析结果。结论:雌激素受体β亚型在卵泡发育中起主要作用。体内成熟和体外培养两种情况下卵泡两种雌激素受体的表达相似。

雌激素受体亚型在多囊卵巢综合征发病中的作用

雌激素受体是核受体超家族成员之一,其有两种亚型雌激素受体α和雌激素受体β。两种亚型在结构上有高度的同源性,但是组织分布和各组织成分中的表达明显不同,与配体结合后产生的生物效应也不同。二者表达及比例变化与组织的功能和病理变化有关。研究雌激素受体α和雌激素受体β的结构及其在女性生殖系统中的分布和功能,探讨其与多囊卵巢综合征的关系,对了解雌激素受体亚型的分布与功能的关系,以及分布的变异和异常调节与多囊卵巢综合征的关系都有重要意义。

溃疡性结肠炎肠粘膜细胞中糖皮质激素受体α和β的表达

目的 研究溃疡性结肠炎患者肠粘膜细胞中糖皮质激素受体 α、β(GRα、GRβ)表达与糖皮质激素治疗反应以及炎症程度之间的关系。方法 采用免疫组织化学法检测肠粘膜细胞中 GRα、GRβ表达强度。比较激素抵抗、激素敏感及正常对照 3组间以及炎症程度各组间 GRα、GRβ表达差异。结果 肠粘膜组织切片中 GRα、GRβ的表达强度在抵抗与敏感组之间有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ,在激素敏感组与正常对照组间无显著差异 ,且与炎症程度无关。结论 糖皮质激素受体 GRα、GRβ在决定患者对激素治疗的反应中起着重要的作用 ,其中 GRβ可能对 GRα起优势负性抑制作用 ,检测患者肠粘膜细胞中 GRα、GRβ的表达可预测患者对激素治疗的反应 。

雌激素受体在乳腺癌中的研究进展

1ERα、ERβ、ERα亚型和ERβ亚型的研究现状 1.1 ERα、ERβ及其基因结构 ER属于类固醇受体超家族中的一员,雌激素主要是通过与它们的结合发挥生物学功能。研究认为[1-2],ER是由两个独立基因编码的,有两种分型：ERα和ERβ。在人体内,ERα基因位于6号染色体的长臂段,长度约140 kb,

多溴二苯醚类化合物干扰人雌激素受体alpha活性机理的理论研究

基于分子对接方法探讨了多溴二苯醚(PBDEs)类化合物与人雌激素受体α亚型间的分子作用机理.对多溴二苯醚类化合物是否具有拟雌激素功能的研究得出:可通过对接打分值和化合物结构特征来推测PBDEs母体化合物是否具有拟雌激素活性;对HO-PBDEs,与氨基酸残基GLU53和/或ARG394形成氢键可能是影响其拟雌激素活性的重要因素;对MeO-PBDEs,疏水MeO-位于结合腔的疏水中部有利于拟雌激素活性.从结构及构象分析得出,邻位疏水基(Br-、MeO-)有利于PBDEs类化合物的拟雌激素活性.同时对多溴二苯醚类化合物是否具有抗雌激素功能的结合特征研究发现,表现出抗雌激素活性的部分PBDEs类化合物伸进通常被雌激素受体拮抗剂雷洛昔芬和4-羟基它莫西芬的烷基胺侧链占据的通道,而大多数未表现出抗雌激素活性的PBDEs类化合物的结合模式类似雌激素受体激动剂17β-雌二醇,位于结合腔,没有伸进通道.本研究从化合物结构及化合物在受体内结合的构象特征上解释化合物活性不同的原因,以期能够利用构象分析得到的结果进行筛选.

复方麦芽丸对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征大鼠模型卵巢ERα和ERβ表达的影响

目的:观察复方麦芽丸对来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型雌激素受体α亚型(estrogen receptorα,ERα)和雌激素受体β亚型(estrogen receptorβ,ERβ)的影响,探讨其对PCOS的作用机制。方法:建立PCOS大鼠模型,48只6周龄雌性SD大鼠随机均分为6组(正常组、模型对照组、阳性对照组、复方低剂量组、复方中剂量组、复方高剂量组),21 d造模成功后,灌胃治疗21 d。观察治疗后各组大鼠卵巢组织形态变化,采用免疫组织化学、Western印迹和RT-PCR检测各组大鼠卵巢组织中ERα和ERβ蛋白的表达。结果:模型对照组大鼠卵巢囊状扩张数较正常组增多,颗粒细胞减少;与模型对照组比较,治疗后各组大鼠囊状扩张的卵泡明显减少并缩小,原始卵泡、黄体、颗粒细胞增多。模型对照组ERα和ERβ的表达明显降低(P<0.01),药物干预组ERα和ERβ的表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论:复方麦芽丸可通过调控卵巢组织ERα和ERβ蛋白的表达而在PCOS的治疗中发挥作用。

基于K-MEANS算法的抗乳腺癌候选药物ERα活性优化研究

为了探究在乳腺癌药物研制过程中如何通过调节雌激素受体活性来控制体内雌激素水平,针对与乳腺癌相关的ERα活性,以在临床中收集一系列作用于该靶标的化合物及其生物活性数据,和一系列分子结构描述符作为自变量,化合物的生物活性值作为因变量,构建化合物的定量结构-活性关系(quantitative structure-activity relationship,QSAR)模型。之后基于K-MEANS算法构建化合物生物活性的定量预测模型,从而为优化ERα拮抗剂的生物活性提供预测服务。结果表明该模型预测具有很强的实践意义,能够指导已有活性化合物的结构优化,提升抗乳腺癌候选药物活性。

机器学习在抗乳腺癌候选药物预测模型中的应用

为了提高抗乳腺癌候选药物特征筛选与模型预测的准确性,提出一种新的多种组合特征筛选方法对抗乳腺癌候选药物——雌激素受体α亚型(ERα)的分子描述符进行特征筛选,并根据筛选的分子描述符构建化合物活性预测(QSAR)模型。采用1DCNN算法模型预测化合物活性,该模型的RMSE、MAE、MAPE评价指标值分别为0.40、0.41和0.08,相比传统随机森林和支持向量机算法的预测效果提高了10%。基于多种组合的特征筛选方法和1DCNN模型预测为药物化合物特征筛选与活性预测提供了新思路,后续可用于其他药物化合物的预测。

hERα-LBD原核表达载体的构建及蛋白表达活性鉴定

目的构建人雌激素受体α亚型配体结合区(hERα-LBD)的原核表达载体,并进行表达蛋白的活性鉴定。方法以hERα-LBD质粒为模板,采用PCR方法扩增hERα-LBD基因,PCR扩增产物鉴定后与T载体(pGEM-T-easy)连接,将连接物转化到感受态细胞中,阳性菌落经酶切和测序鉴定,和pET-28a(+)质粒分别进行双酶切,T4DNA连接酶连接,构建重组表达载体pET-28a(+)-hERα-LBD,转化到大肠杆菌JM109和BL21感受态细胞中。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导细胞表达hERα-LBD融合蛋白;将雌二醇-牛血清白蛋白(BSA)偶联抗原(E2-BSA)与融合蛋白混合,通过电泳法鉴定hERα-LBD的雌激素配体结合活性。结果 PCR扩增的hERα-LBD基因片段约为1.9kb,与预期目的片段大小一致。与T载体连接,形成pGM-T-hERα-LBD重组质粒,转化到感受态细胞,阳性菌落酶切和测序鉴定正确,与pET-28a(+)质粒酶切后连接,成功构建原核重组表达载体pET-28a(+)-hERα-LBD;在大肠杆菌中异源表达人雌激素受体ERα的配体结合区hERα-LBD蛋白。经亲和色谱法纯化后,hERα-LBD蛋白的表达量可达250mg/L。电泳法证实hERα-LBD具有雌激素结合活性。结论成功构建原核重组表达载体pET-28a(+)-hERα-LBD,hERα-LBD具有雌激素结合活性。