雌激素受体相关受体γ在肿瘤中的研究进展

雌激素受体相关受体γ(ERRγ)是孤儿核受体家族(NRs)的成员之一,可在无天然配体存在时转录调控多种基因的表达,在维持细胞的基本生物学活动中发挥重要作用。近年来,越来越多的研究显示ERRγ参与肿瘤的发生发展过程,包括肿瘤细胞代谢、增殖、转移以及血管生成等。而ERRγ在肿瘤进展及预后中的作用具有细胞和组织特异性,本文就ERRγ在肿瘤中的临床相关性及其作用机制进行综述,为代谢、雌激素相关肿瘤发生及靶向治疗提供理论依据。

雌激素受体相关受体α与雌激素受体在子宫内膜癌组织中的表达

目的雌激素受体(estrogen receptor,ER)α、β在子宫内膜癌的发生发展中起着非常重要的作用。有研究提示,雌激素受体相关受体α(estrogen receptor-related receptorα,ERRα)与ER竞争配体也参与子宫内膜癌的发生,但详细的机制尚不明了。文中研究的目的是检测ERRα和ERα、ERβ在子宫内膜癌中mRNA的表达水平,并探讨其关系。方法采用real-time TaqMan PCR定量的方法,检测37例子宫内膜癌组织(内膜癌组)、25例癌旁组织(癌旁组)以及20例正常子宫内膜(对照组)中ERRα和ER亚型mRNA的表达量。结果3组患者中所有受体均有表达,在内膜癌组中,ERα和ERβ表达水平较对照组明显下降(P<0.05),ERRα的表达水平明显升高(P<0.05)。癌旁组患者的所有指标与癌组织和正常内膜组织相比均显著升高(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中ERα、ERβ低表达,而ERRα相对高表达,癌旁组织中3种受体均为高表达,说明癌组织中部分ERα、ERβ失活,ERRα在内膜细胞向癌细胞进展过程中起着非常重要的调节作用。

实时荧光定量PCR分析雌激素受体相关受体α,β,γ与雌激素受体α,β在卵巢癌中mRNA的表达模式

目的:明确孤儿受体—雌激素受体相关受体(estrogen receptor-related recep-tor,ERRs)各亚型以及雌激素受体亚型在卵巢癌中mRNA的表达模式。方法:采用Light-Cycler-PCR定量检测40例卵巢癌标本以及15例正常卵巢组织中各种ERRs亚型和ERs亚型mRNA的表达丰度。采用ELISA方法分析各样本血清CA-125水平。结果:卵巢癌组织中ERRαmRNA表达的丰度和阳性表达率显著高于正常卵巢组织(P=0.04和P=0.02),ERRβ在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的RNA表达的丰度和阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);ERRγmRNA在正常卵巢以及卵巢癌组织中表达的丰度差异无统计学意义(P>0.05),但卵巢癌组织中ERRγ的阳性表达率显著增高(P=0.045)。ERRs家族和ERs家族在卵巢癌中有很高的共同表达率,ERα/ERRα的比率在卵巢癌组织中明显下降(P=0.0412)。结论:ERRs与ERs在卵巢癌中有共同表达,两个家族间的相互作用可能是卵巢癌复杂的肿瘤内分泌生物学行为的分子基础。

组蛋白去甲基化酶JMJD2和雌激素受体相关受体α在绝经后骨质疏松症的表达

背景:研究发现组蛋白去甲基化酶具有促进成骨细胞分化的作用;雌激素相关受体α可促进成骨细胞分化,增加骨形成。然而绝经后骨质疏松症组蛋白去甲基化酶表达以及与雌激素受体相关受体α的相关性未见报道。目的:观察绝经后骨质疏松症患者组蛋白去甲基化酶2家族的变化及其对组蛋白甲基化(H3K9me3、H3K36me3)水平的影响,以及与雌激素受体相关受体α的相关性。方法:选择年龄50-70岁因髋关节骨性关节炎行关节置换的绝经后患者,通过检测腰椎骨密度,收集10例绝经后骨质疏松症患者(实验组)和10例非骨质疏松症患者(对照组),术中提取股骨头松质骨标本,免疫组织化学、蛋白质印迹法检测骨组织中组蛋白去甲基化酶(JMJD2A、JMJD2B)、组蛋白甲基化(H3K9me3、H3K36me3)以及雌激素受体相关受体α的表达。结果与结论:绝经后妇女组蛋白去甲基化酶2A、组蛋白去甲基化酶2B、雌激素受体相关受体α表达为弱阳性到阳性不等,骨质疏松症患者组表达水平低于非骨质疏松症患者组,组间差异有显著性意义(P<0.05);骨质疏松症患者组H3K9me3、H3K36me3表达水平高于非骨质疏松症患者组,组间差异有显著性意义(P<0.05)。结果说明,绝经后骨质疏松症患者组蛋白呈高甲基化状态,组蛋白去甲基化酶2A、组蛋白去甲基化酶2B低表达,雌激素受体相关受体α水平与组蛋白去甲基化酶相一致;组蛋白去甲基化酶可能为骨质疏松的一种拮抗酶。

雌激素受体相关受体α在胃腺癌中表达及意义

目的探讨雌激素受体相关受体(ERR)α在胃腺癌发生、发展中的作用以及临床应用价值。方法采用免疫组化法检测84例胃腺癌组织中ERRα的表达,评估其与临床病理参数之间的关系。结果胃腺癌中ERRα阳性率(69.05%)高于对照组(10.00%);胃腺癌组中,ERRα阳性率与胃腺癌分化程度、临床分期、淋巴结转移有关。ERRα阳性表达组3 a生存率明显低于ERRα阴性表达组。结论ERRα可作为判断胃腺癌患者病情进展的指标。

雌激素受体相关受体在妇科恶性肿瘤细胞株中的表达

目的明确孤儿受体—雌激素受体相关受体ERR(estrogenreceptorrelatedreceptors,ERR)α、β、γ各亚型在子宫内膜癌细胞株,卵巢细胞株,乳腺癌细胞株中的表达情况。方法采用定量PCR方法定性检测ERRs家族中各亚型的mRNA表达,采用WeststonBlot印迹的方法检测雌激素受体相关受体ERR各亚型的表达。结果实时荧光定量PCR分析及WesternBlot蛋白印记检测显示子宫内膜癌细胞株、卵巢癌细胞株及乳腺癌细胞株中ERRα均有高水平表达;子宫内膜癌Hec1A、Hec1B细胞和卵巢癌Mdah2774、SKOV3、OVCAR3呈现ERRβ阳性表达;而ERRγ表达见于宫内膜癌Hec1B、Ishikawa细胞,卵巢癌Mdah2774、SKOV3、OVCAR3细胞和乳腺癌MCF7细胞。结论ERRα和ERRγ在多种不同类型的恶性肿瘤细胞株中均有表达,而ERRβ的表达水平相对较低,本研究提供了ERR家族表达在细胞株中的表达模式。

孤儿核受体—雌激素受体相关受体研究进展

雌激素受体相关受体(ERRs)是最早被识别的孤儿核受体家族成员之一,因其与雌激素受体竞争结合于同一靶基因位点,因而可能在雌激素依赖性疾病如乳腺癌、子宫内膜癌、骨质疏松症等疾病的发生、发展过程中发挥重要作用。现就雌激素受体相关受体的研究进展进行综述。

人雌激素受体相关受体逆转录病毒载体的构建及鉴定

目的构建人雌激素受体相关受体α(hERRα)逆转录病毒载体。方法用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pSG-hERRα质粒和pLXSN空白质粒,采用凝胶DNA回收方法回收纯化hERRα片段,用T4连接酶进行连接反应,构建成PLXSN-neo-hERRα重组体。结果经PCR、酶切鉴定、测序等对重组体进行鉴定,证实构建的重组体方向、序列正确。结论已成功构建hERRα逆转录病毒载体,为研究hERRα的功能奠定了基础。

孤儿核受体-雌激素受体相关受体α-1亚型在卵巢癌中表达的临床意义

目的:明确孤儿核受体-雌激素受体相关受体(Estrogen receptor-related receptors,ERRs)α-1亚型在卵巢癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用实时荧光定量RT-PCR和免疫组化方法检测人ERRα-1在45例卵巢癌组织标本和15例正常卵巢组织中的mRNA和蛋白表达情况;采用ELISA方法分析各样本的血清CA125水平;随访指标为整体生存时间和无瘤生存时间。结果:免疫组化分析表明ERRα-1在卵巢癌组织中的表达率显著高于正常组织(P<0·05)。定量PCR分析表明卵巢癌组织中ERRα-1的mRNA平均表达丰度显著高于正常卵巢组织(P<0·05)。卵巢癌患者血清CA125水平分析显示ERRα-1阳性组CA125明显升高(P<0·05)。随访结果显示ERRα-1阳性的卵巢癌患者的整体生存时间比ERRα-1阴性患者明显减少(P<0·05),但两组无瘤生存时间并无差异(P>0·05)。结论:ERRα-1可能在卵巢癌的发生发展中起重要作用,ERRα-1表达增加与卵巢癌的预后不良有关。

雌激素受体相关受体α与骨代谢

雌激素受体相关受体α(estrogen receptor-related receptorα,ERRα)是最早发现的一种孤儿核受体,是核受体超家族中一员。它与雌激素受体(estrogen receptors,ERs)有着一定的同源性,但尚未发现任何配体。目前研究证明ERRα在骨代谢、能量代谢的调节以及乳腺癌发生中都起到重要作用。本文主要综述ERRα在骨代谢方面的研究进展,特别是在骨组织中对受体介导的雌激素信号途径的参与,以求进一步了解雌激素调控骨改建的机制,以及展望ERRα作为靶点治疗雌激素相关的骨代谢病的前景。

雌激素相关受体α对沉默重组腺病毒载体转染MG63细胞和骨相关蛋白的影响

目的雌激素相关受体α(ERRα)可调节成骨细胞的功能活动。文章研究ERRα对Wnt信号通路抑制因子DKK1、骨硬化蛋白Sost腺病毒载体转染人成骨肉瘤细胞(MG63)和相关蛋白的影响。方法将培养好的MG63细胞用包装好的沉默DKK1、沉默Sost腺病毒载体转染后分为空白对照组、沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默(DKK1+Sost)组;再用过表达ERRα干预上述转染的各组MG63细胞,将细胞分为ERRα干预空载腺病毒组、ERRα干预沉默DKK1组、ERRα干预沉默Sost组、ERRα干预沉默(DKK1+Sost)组,应用MTT法检测MG63细胞的活性,碱性磷酸酶试剂盒检测ALP的活性,流式分析MG63细胞的Ca2+浓度;Western blot检测低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、骨桥蛋白(OPN)、骨保护蛋白(OPG)的表达。结果空白对照组、沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默(DKK1+Sost)组、ERRα干预空载腺病毒组、ERRα干预沉默DKK1组、ERRα干预沉默Sost组、ERRα干预沉默(DKK1+Sost)组细胞活性分别为(100.00±5.61)%、(118.89±4.72)%、(123.31±8.17)%、(139.72±9.18)%、(100.00±7.17)%、(131.07±8.17)%、(125.29±9.46)%、(145.98±6.51)%,ALP活性分别为(5.89±0.12)、(6.69±0.23)、(8.92±0.37)、(9.47±0.31)、(7.10±0.38)、(7.82±0.21)、(8.02±0.26)、(9.82±0.21)U/μL,Ca2+浓度分别为(123.48±2.95)、(77.81±7.06)、(64.22±7.67)、(50.81±4.76)、(80.02±14.50)、(38.06±7.66)、(26.72±6.54)、(12.92±2.75)nmol/L。沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默(DKK1+Sost)组较空白对照组MG63细胞活性和ALP活性升高,Ca2+浓度降低(P<0.05);而ERRα干预空载腺病毒组较空白对照组ALP活性提高,Ca2+浓度降低(P<0.05)。ERRα干预沉默DKK1组较沉默DKK1组细胞,ERRα干预沉默(DKK1+Sost)组较沉默(DKK1+Sost)组MG63细胞活性和ALP活性升高,Ca2+浓度降低(P<0.05);ERRα干预沉默Sost组较沉默Sost组MG63细胞活性升高,Ca2+浓度降低(P<0.05)。与空白对照组对比,沉默Sost组、沉默(DKK1+Sost)组MG63中LRP5、BMP2、OPN、OPG蛋白表达升高(P<0.05);沉默DKK1组MG63中LRP5、OPG蛋白的表达亦升高(P<0.05)。ERRα干预沉默DKK1组较沉默DKK1组细胞,ERRα干预沉默(DKK1+Sost)组较沉默(DKK1+Sost)组MG63中LRP5、BMP2、OPN、OPG蛋白的表达升高(P<0.05);ERRα干预沉默Sost组较沉默Sost组LRP5、BMP2、OPG蛋白亦升高(P<0.05)。结论 ERRα可调节骨LRP5、BMP2、OPN、OPG蛋白来促进骨形成和抑制骨吸收。

绝经后妇女雌激素受体相关受体亚型的表达与血管性痴呆的相关性研究

目的:探讨绝经后妇女雌激素受体相关受体ERR(estrogen receptorrelated receptors,ERR)α、β、γ各亚型表达与血管性痴呆的关系。方法:随机抽取盐城地区绝经后女性40例作为对照组,40例VD绝经期女性患者为试验组。采用RT-PCR方法定性检测ERRs家族各亚型的mRNA表达,采用Westston Blot印迹的方法检测雌激素受体相关受体ERR各亚型的表达;VD采用简易精神状态检查(MMSE-R)和临床痴呆分级表的判定。结果:RT-PCR分析及Western Blot蛋白印记检测显示ERRα在对照组低表达、在实验组高表达;ERRβ基本无变化;ERRγ在对照组高表达、在实验组低表达。结论:在对照组组和实验组中,ERRα和ERRγ表达方式不同,ERRβ无明显差别,提示用ERRα/ERRγ比值的改变显示血管性痴呆的发病密切相关,有一定的临床意义。

17β-雌二醇调控子宫内膜癌细胞孤儿核受体ERRα表达的研究

背景与目的:雌激素受体相关受体α(estrogenreceptor-relatedreceptorα,ERRα)是孤儿核受体亚家族成员之一,可与雌激素受体α(estrogenreceptorα,ERα)竞争结合同一靶基因位点,从而干扰雌激素-雌激素受体核内信号通路的转导,因而可能在子宫内膜癌的发生方面发挥一定作用。本研究旨在探讨17β-雌二醇(E2)对子宫内膜癌细胞孤儿核受体ERRα的调控作用,明确ERRα在子宫内膜癌发生中的作用及与ER信号通路的关系。方法:采用RT-PCR和Westernblot方法,检测不同浓度17β-E(210-10、10-8、10-6mol/L)作用于ERα阳性的子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞和ERα阴性的子宫内膜癌细胞系HEC-IA细胞24h、48h后ERRαmRNA水平和蛋白水平的变化,并应用完全性ER拮抗剂ICI182780同时作用细胞,观察是否可阻断E2对ERRα的调控作用。结果:不同浓度的17β-E2作用于Ishikawa细胞24h、48h后ERRαmRNA水平及蛋白水平均有不同程度的下调,以10-8mol/L作用后下调最明显。同时加入10-8mol/LE2和10-6mol/LICI182780作用于Ishikawa细胞后,E2对ERRα的下调作用被阻断。不同浓度的17β-E2作用于HEC-IA细胞24h后ERRαmRNA水平出现不同程度上调,但蛋白水平未见明显变化。当17β-E2作用细胞48h后,ERRα蛋白水平出现明显上调,以10-8mol/L作用后上调最明显。同时加入10-8mol/LE2和10-6mol/LICI182780作用于HEC-IA细胞后,E2对ERRα的上调作用无明显变化。结论:17β-E2可下调Ishikawa细胞ERRα的表达,且这种降调作用是通过ER介导完成的;17β-E2可上调HEC-IA细胞ERRα的表达,且这种上调作用不被完全性ER拮抗剂ICI182780所阻断。

ERR1与核受体辅活化子相互作用位点研究

目的 分析ERR1与核受体辅活化子相互作用的位点。方法 用常规PCR方法和重叠延伸PCR构建ERR1的各种突变体到表达质粒pGBT9上 ,通过酵母双杂交实验分析其与已知核受体辅活化子PNRC的相互作用。结果 成功构建了ERR1的缺失突变体pGBT9 ERR11 412、pGBT9 ERR11 14 4、pGBT9 ERR1190 412、pGBT9 ERR114 5 42 3、pGBT9 ERR1190 42 3、pGBT9 ERR1190 42 3F2 3 2A、pGBT9 ERR1190 42 3K2 44A。酵母双杂交实验显示ERR1的氨基酸 14 5 42 3和 190 42 3可分别与PNRC相互作用 ;ERR1190 42 3K2 44A与PNRC的相互作用明显低于ERR1190 42 3 ;其它突变体与PNRC的相互作用未检测到。结论 ERR1与核受体辅活化子相互作用的位点位于ERR1的配体结合结构域 (LBD ,aa190 42 3 ) ,ERR1与核受体辅活化子相互作用依赖于其LBD的AF2结构域 ,AF2结构域外的其它氨基酸F2 3 2、K2 44也对ERR1与核受体辅活化子相互作用起关键作用。

雌、孕激素对子宫内膜癌细胞株HEC-1B ERRα表达调控的研究

目的:探讨ERRα与雌、孕激素的相互作用及其在ERα阴性子宫内膜癌发病中的作用。方法:用MTT、实时定量PCR方法,检测不同浓度雌二醇(E2)、孕酮(P)作用于HEC-1B细胞后细胞增殖和ERRα mRNA的变化。结果:E2促进细胞增殖,E2(10-6～10-8mol/L)组OD值与对照组相比在48h时有统计学差异(P<0.05);E2明显上调ERRα表达,且10-7mol/L时上调最明显,Pearson相关分析ERRα mRNA表达含量与相应细胞生长变化显示:24、48h呈正相关(P<0.05),表明雌激素通过上调ERRα表达而诱导细胞增殖。P抑制细胞增殖,并具有浓度和时间依赖性,P(10-4～10-6mol/L)组OD值与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);P明显下调ERRα表达,且10-4mol/L时下调最明显,Pearson相关分析ERRαmRNA表达含量与相应浓度细胞生长变化在24h呈正相关(P<0.05),表明孕激素通过下调ERRα表达而抑制细胞增殖。结论:ERRα在ERα阴性子宫内膜癌的发生中发挥一定作用。

17β-雌二醇对乳腺癌细胞的增殖作用及其对雌激素受体相关受体的调控作用

目的研究17β-雌二醇(17β-E2)对乳腺癌细胞MCF-7增殖作用及其对雌激素受体相关受体(ERRα)的调控作用。方法分别用10-12、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的17β-E2作用于MCF-7细胞24h,以DMSO作为溶剂对照,采用MTT法测定细胞增殖情况。分别用10-10、10-9、10-8、10-7mol/L17β-E2作用于MCF-7细胞24h后,采用RT-PCR法检测ERRα表达水平的变化。结果10-12、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/L剂量17β-E2作用于MCF-7细胞24h后,对细胞的增殖率分别为112.09%,122.09%,123.42%,120.46%,124.60%,109.23%,均能促进细胞生长,并且随着受试物浓度的增加,细胞增殖效应增加,在10-8mol/L剂量时达到最大,而10-6mol/L剂量的17β-E2作用于MCF-7细胞24h后,其增殖率为67.97%,对细胞生长的产生抑制。10-10、10-9、10-8、10-7mol/L17β-E2作用于MCF-7细胞24h后,ERRα的表达水平上调。结论一定剂量范围内17β-雌二醇对MCF-7细胞有增殖作用,并且可以上调ERRα表达,提示ERRα在调节乳腺癌细胞生长中可能发挥着重要作用。

雌激素受体相关受体α与子宫内膜异位症关系的研究进展

雌激素受体相关受体(ERR)属于核受体超家族,因缺乏天然配体而被称为孤儿核受体,在调节代谢基因和细胞能量代谢中发挥核心作用,参与多种生物进程。近年来,许多研究表明雌激素受体(ER)通过调节子宫内膜异位组织的凋亡和炎症作用,参与子宫内膜异位症的发病机制,但关于不同类型的子宫内膜异位症中的ER亚型表达仍有争议。ERRα与ER在结构上有高度同源性,两者竞争结合部分靶基因,在核内信号通路中相互作用,ERRα可能参与子宫内膜异位症的发生发展,本文综述ERRα与子宫内膜异位症关系的研究进展。

酵母双杂交技术构建重组雌激素受体相关受体(ERR)基因酵母

应用酵母双杂交技术构建了重组雌激素受体相关受体(ERR)基因酵母,用以筛选环境中具有ERR干扰活性的化合物.实验先提取并纯化含有ERRγ基因的酵母表达质粒pGBT9-ERRγ,称为诱饵质粒;再提取并纯化含有ERRγ协同激活因子GRIP1基因的酵母表达质粒,形成靶质粒pGAD424-GRIP1,然后将诱饵质粒和靶质粒同时转化到酵母细胞Y187中,于营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu)上筛选阳性菌落,构建ERRγ-GRIP1双杂交酵母.同时,考察了ERRγ-GRIP1酵母与典型的雌激素拮抗剂——4-羟基他莫西酚(4-OHT)的结合情况.结果表明,4-OHT能够抑制ERRγ-GRIP1酵母酶活性,并存在显著的剂量-效应关系,半数抑制浓度(RIC50)值为7.9×10-6mol·L-1.最后,进一步建立了检测环境化合物诱导/抑制ERRγ-GRIP1酵母β-半乳糖苷酶活性的实验方法,用于检测典型的内分泌干扰物.双酚A(BPA)实验结果表明,BPA不能诱导/抑制ERRγ介导的酶活性,但BPA与4-OHT共同暴露时,能够修复4-OHT的抑制活性;经体外代谢活化后,BPA的修复活性得到加强,证实了该重组基因酵母用于环境污染物内分泌干扰效应筛选的可行性.

胃腺癌细胞株和高转移株中雌激素受体相关受体的表达

目的探讨雌激素受体相关受体(ERR)α、β、γ各亚型在胃腺癌细胞系SGC-7901及高转移株OCUM-2MD3中的表达情况。方法采用RT-PCR法定性检测ERRs家族各亚型的mRNA表达,采用Western blot蛋白印迹检测ERR各亚型的表达。结果ERRα在SGC-7901低表达、在OCUM-2MD3高表达;ERRβ基本无变化;ERRγ在SGC-7901高表达、在OCUM-2MD3低表达。结论在不同类型的胃腺癌细胞株中,ERRα和ERRγ表达方式不同,提示用ERRα/ERRγ比值的改变显示胃腺癌转移有一定的临床意义。

绝经后女性重度血管性痴呆患者雌激素治疗效果与雌激素受体相关受体亚型表达的关系

目的探讨绝经后重度血管性痴呆(VD)患者雌激素治疗效果与雌激素受体相关受体(ERR)α、β、γ各亚型表达的关系。方法以雌激素治疗的80例绝经后重度VD患者(有效组40例,无效组40例)在施行雌激素治疗前后的血液样本作为研究对象,同年龄阶段的80名正常老年绝经女性作为对照组。用ELISA测定各组患者治疗前后的血清雌二醇浓度。用半定量RT-PCR法检测VD有效组和无效组患者ERRs家族各亚型的mRNA在雌激素治疗前后的表达;用Western blot印迹法检测ERRs各亚型蛋白在雌激素治疗前后的表达。结果 ERRα、β和γ的mRNA和蛋白在VD患者显示特殊的表达模式:ERRα在无效组低表达,在有效组高表达,但表达均明显低于正常对照组(P<0.05);ERRβ在有效组、无效组和正常对照组之间基本无变化;ERRγ在无效组高表达,在有效组低表达,正常对照组表达最低(P<0.05)。结论 ERRα/ERRγ比值的改变可能与血管性痴呆的发病、雌激素的疗效有密切关系,EERs将是雌激素治疗重度血管性痴呆的分子生物学基础。