生殖激素对母猪发情周期的调节

母猪的生产效率越高、产仔数量越多越能促进肉猪养殖经济的发展,为此在肉猪的养殖过程中养殖人员需要通过科学的方法提升母猪发情率和妊娠率。生殖激素的合理使用可以有效提高母猪的繁殖效率,增加产仔数,提升养殖效益。外源生殖激素的应用是有效提升动物繁殖机能的重要措施,也是母猪展开高效生产繁殖的重要保障。该文就以生殖激素对母猪发情周期的调节为关键点展开相关探究。

雄激素受体调控的lncRNA ARLNC1对前列腺癌细胞增殖、克隆、迁移和细胞周期的影响

目的:探讨雄激素受体(androgen receptor,AR)调控的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)ARLNC1对前列腺癌细胞增殖、克隆、迁移和细胞周期的影响。方法:选取正常前列腺上皮细胞株WPMY-1和前列腺癌细胞株PC3、VCaP、22RV1、DU145和LNCaP为研究对象,qRT-PCR分析lncRNA ARLNC1的表达水平;双氢睾酮(DHT)以时间和浓度依赖的方式刺激LNCaP细胞,分析lncRNA ARLNC1的转录水平;采用数据库预测和双荧光素酶报告基因系统分析雄激素受体与lncRNA ARLNC1的关系;将LNCaP细胞分为sh-NC和sh-lncRNA ARLNC1组,采用CCK-8分析细胞增殖,检测细胞克隆和迁移能力;流式细胞仪分析细胞周期变化,Western blot分析细胞周期蛋白CyclinD1、CDK6、p27的表达水平。结果:与正常前列腺上皮细胞相比,lncRNA ARLNC1在雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP、VCaP、22RV1)中的表达水平明显增加,而在雄激素非依赖性前列腺癌细胞株(PC3、DU145)中几乎不表达(P<0.05),其中LNCaP细胞变化最显著,所以下续选用LNCaP细胞作为实验株。100 nmol/L DHT刺激LNCaP细胞0、6、12、18、24 h后,lncRNA ARLNC1的转录水平相对于对照组以时间依赖的方式逐渐升高(P<0.05);不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol/L)DHT刺激LNCaP细胞24 h后,lncRNA ARLNC1转录水平随浓度不断增加(P<0.05);JASPAR数据库预测到lncRNA ARLNC1启动子区域有AR结合的位点,双荧光素酶报告基因系统表明AR能结合在lncRNA ARLNC1启动子区域,并激活其转录(P<0.05);与sh-NC组相比,sh-lncRNA ARLNC1组细胞增殖、迁移和克隆能力减弱,细胞周期阻滞在S、G 2期(P<0.05);sh-NC组相对于sh-lncRNA ARLNC1组,CyclinD1、CDK6蛋白水平增加,而p27蛋白水平降低(P<0.05)。结论:AR调控的lncRNA ARLNC1作为癌基因在雄激素受体阳性的前列腺癌细胞系中高表达,能促进前列腺癌细胞的增殖、克隆、迁移和细胞周期进展。

促性腺激素释放激素激动剂降调节后激素替代周期方案对反复种植失败患者冻融胚胎移植妊娠结局的影响

目的探讨降调节后激素替代周期(HRT)方案对反复种植失败(RIF)患者冻融胚胎移植(FET)妊娠结局的影响,为提升该疾病的临床治疗效果提供依据。方法选取2020年1月至2023年11月南通市妇幼保健院收治的78例RIF患者,根据随机数字表法分为对照组(39例,HRT方案进行内膜转化)和观察组[39例,促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合HRT方案进行内膜转化]。比较两组患者转化日情况、移植日情况和临床妊娠结局。结果与对照组比,转化日观察组患者子宫内膜厚度更厚,孕酮水平更高,雌二醇、促黄体生成素水平均更低;与对照组比,观察组患者胚胎植入率、临床妊娠率和活产率均更高(均P<0.05);移植日两组患者平均移植胚胎数、不同时期胚胎数和移植优胚率比较;两组患者早期流产率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论降调节后HRT方案可显著改善RIF患者FET的周期结局,提高胚胎植入率、临床妊娠率和活产率。

光周期对反刍动物激素分泌、生产性能和繁殖性能影响的研究进展

光周期是指昼夜周期中光照期和暗期长短的交替变化,它与不同类型和颜色的光线共同作用后,对动植物和人类生命活动规律产生重要影响。我国幅员辽阔,南北方光照时长差异明显,将这些光周期差异与现代养殖技术和气候变化等相结合应用于生产,对促进家畜养殖节本增效和高品质畜产品生产具有重要意义。本文聚焦光周期对反刍动物的影响,主要针对光周期变化对反刍动物体内激素分泌、生产性能(生长性能、肉品质和泌乳性能)、繁殖性能和行为等的影响进行综述,并通过对比相关研究成果进一步解析光周期对反刍动物的综合影响,以期为光周期在反刍动物实际生产中的应用提供指导。

坤泰胶囊联合人工周期激素疗法对卵巢早衰患者的临床效果观察

目的探讨坤泰胶囊联合人工周期激素疗法对卵巢早衰患者的临床效果。方法选取106例卵巢早衰患者作为研究对象,根据患者的用药差异性进行分组,采用雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片等人工周期疗法治疗的患者为对照组(n=52),在对照组基础上加服坤泰胶囊治疗的患者为试验组(n=54)。对比两组患者治疗前后激素[促黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E_(2))]水平、卵巢体积、窦卵泡数,临床疗效,不良反应发生率。结果相较于治疗前,两组患者治疗后LH和FSH水平均有明显的下降,E_(2)水平则明显提高(P<0.05);治疗后,试验组患者E_(2)水平(90.1±19.4)pmol/L显著高于对照组的(80.5±17.6)pmol/L(P<0.05),而两组FSH和LH水平均无显著性的差异(P>0.05)。相较于治疗前,两组患者治疗后卵巢体积较大,窦卵泡数较多(P<0.05);治疗后,试验组卵巢体积(2.59±0.04)cm^(3)稍大于对照组的(2.38±0.05)cm^(3),窦卵泡数(4.7±2.1)个多于对照组的(3.5±1.4)个(P<0.05)。试验组患者的不良反应发生率5.6%(3/54)明显低于对照组的19.2%(10/52)(χ^(2)=4.604,P=0.032<0.05)。试验组临床总有效率88.9%较对照组的71.2%更高(P<0.05)。结论针对卵巢早衰患者采用坤泰胶囊联合人工周期激素疗法治疗,能够让患者的雌激素水平得到显著改善,提高治疗效果,无明显不良反应发生,因而该措施更适用于临床治疗。

温针灸联合雌孕激素周期疗法治疗脾肾阳虚型卵巢早衰临床研究

目的:观察温针灸联合雌孕激素周期疗法治疗脾肾阳虚型卵巢早衰的疗效。方法:选取68例脾肾阳虚型卵巢早衰患者,按随机数字表法分为治疗组及对照组各34例。常规处理基础上,对照组予以雌孕激素周期疗法(地屈孕酮片+戊酸雌二醇片)治疗,治疗组在对照组基础上加用温针灸治疗。2组均治疗6个月。比较2组临床疗效及不良反应发生情况,比较2组治疗前后性激素水平[血清促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E_(2))、促黄体素生成素(LH)],中医证候积分、B超检查指标值的变化。结果:治疗组总有效率为88.24%,对照组为67.65%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组E_(2)水平均较治疗前升高(P<0.05),LH、FSH水平均较治疗前下降(P<0.05);治疗组E_(2)水平高于对照组(P<0.05),LH、FSH水平均低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组子宫内膜厚度、卵巢体积及窦状卵泡数均较治疗前升高(P<0.05),治疗组上述3项指标值均高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组中医证候积分均较治疗前下降(P<0.05),治疗组中医证候积分低于对照组(P<0.05)。治疗组不良反应发生率为2.94%,对照组为8.82%,2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:温针灸联合雌孕激素周期疗法治疗脾肾阳虚型卵巢早衰临床疗效确切,可促进卵巢功能恢复,改善性激素水平与卵巢储备功能,安全性高。

环境因素对蛋鸡激素水平和产蛋周期的影响研究

目的探讨和分析环境因素对蛋鸡激素水平和产蛋周期的影响。方法选择河北省任丘市某大型规模化蛋鸡养殖场的200只蛋鸡作为试验研究对象,平均分为4组。对照组温度22℃,光照时长16 h;试验组A温度35℃,光照时长16 h;试验组B温度22℃,光照时长10 h;试验组C温度22℃,光照时长20 h。比较和分析不同温度和光照时长对蛋鸡激素水平和产蛋周期影响的差异显著性。结果在35℃高温环境下试验组蛋鸡的血清FSH、P、LH等激素水平显著低于对照组(p<0.05),蛋鸡血清ACTH水平显著高于对照组(p<0.05);不同光照时长条件下,对照组与试验B、试验C组鸡蛋血清FSH、E 2、P、MELT、ACTH等激素水平差异显著(p<0.05);35℃高温环境下的试验组A蛋鸡产蛋周期显著低于对照组(p<0.05),光照时长为16 h的对照组蛋鸡产蛋周期显著高于光照时长为10 h的试验组B和光照时长为20 h的试验组C(p<0.05)。结论温度和光照等环境因素对蛋鸡激素水平和产蛋周期具有显著的影响,温度22℃和光照时长16 h为适宜的环境因素。

黄体酮胶囊剂量对无排卵型月经不调患者性激素水平及月经周期的影响

目的:探讨黄体酮胶囊剂量对无排卵型月经不调患者性激素水平及月经周期的影响.方法:将2021年1月至2022年12月在我院就诊的60例无排卵型月经不调患者,随机分为两组,各30例.对照组口服黄体酮胶囊,1日1次,1次100 mg,观察组口服黄体酮胶囊,1日2次,1次200 mg.比较临床疗效、月经周期、子宫内膜厚度、阴道流血量、阴道流血持续时间、促黄体生成素(Luteotropic hormone,LH)、卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)、雌二醇(Estradiol,E2)以及不良反应情况.结果:两组总有效率无显著差异;治疗后两组LH、E2水平均低于治疗前,且观察组明显低于对照组(P<0.05);对照组不良反应发生率明显低于观察组(P<0.05).结论:低剂量与常规剂量对患者性激素水平及月经周期的影响差异不大,但低剂量黄体酮表现出的不良反应更少,安全性更高.

光周期对不同秋眠型苜蓿光敏色素和内源激素的影响

本试验研究了不同光周期对3种秋眠型苜蓿光敏色素和植物体内源激素含量的影响,为揭示苜蓿秋眠性的调控机理提供科学依据。试验采用FQ-PCR SYBR-Green I方法,在人工气候室,以美国苜蓿秋眠级标准对照品种Norseman(FD1,秋眠型苜蓿,秋眠1级)、Dupuils(FD5,半秋眠型苜蓿,秋眠5级)和CUF101(FD9,非秋眠型苜蓿,秋眠9级)为材料,设计4个不同的日照长度梯度(7,10,13和16 h/d),对其植株处理35 d,测定叶片中光敏色素(PHYA、PHYB)mRNA表达量,采用(ELISA)试剂盒法测定内源激素生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、玉米素核苷(ZR)、赤霉酸(GA3)的含量。结果表明,3种不同秋眠型紫花苜蓿PHYA和PHYB在短日照条件下合成量大,其中以Norseman表现最为明显。不同秋眠类型苜蓿叶片中的GA3/ABA、ZR/ABA和IAA/ABA均随着光照时间延长而增大;短日照条件下3种秋眠型苜蓿ABA的合成量均为最大,GA3的含量最低,生长严重受到抑制。可能PHYA和PHYB直接或间接影响了内源激素GA3、ZR、IAA、ABA合成量,进而调控了苜蓿的秋眠。

济宁青山羊发情周期内促性腺激素和性激素分泌规律的研究

本试验对处于繁殖季节的济宁青山羊进行颈静脉采血，用放射免疫分析法测定了血浆内促性腺激素（FSH、LH）和性激素（E2、P）的含量。结果表明：整个发情周期中FSH、LH和E2均先后出现4个分泌峰，FSH的4个分泌峰分别晚于LH峰2d出现。E2的分泌峰除第3个分泌峰出现在第10天之外，其余3个峰均与LH峰同时出现。P在发情周期的第5天开始逐渐升高，间情期（第7～17天）维持在一个较高的水平（P〉O．05），发情前一天（第18天）骤然下降。在发情期和间情期，FSH和LH分泌方式均呈脉冲式，E2和P为波动式分泌。发情期FSH的脉冲频率较间情期低（P〉0．05），而LH的脉冲频率则高于间情期（P〉0．05）。

自然周期与激素替代周期准备内膜对冻融胚胎移植结局的影响

目的:探讨同一黄体支持剂量时两种内膜准备方案对冻融胚胎移植妊娠结局的影响。方法:回顾性分析2016年1月至2016年12月在兰州大学第一医院生殖医学专科医院采用自然周期和激素替代周期准备内膜,并采用相同剂量黄体支持的冻融胚胎移植(FET) 233例患者资料,其中自然周期121例,激素替代周期112例。比较不同内膜准备方案患者的年龄、体质量指数(BMI)、多囊卵巢综合征(PCOS)/排卵障碍比例、ICSI比例、移植胚胎数、移植日子宫内膜厚度、临床妊娠率、早期流产率、晚期流产率、早产率及活产率等。结果:自然周期组年龄大于激素替代周期组(31. 99岁vs 30. 89岁),BMI(21. 35 kg/m2vs 22. 23 kg/m2)、PCOS/排卵障碍比例(4. 13%vs 19. 64%)小于人工周期组,差异有统计学意义(P<0. 05)。两组移植胚胎数、有优胚移植比例、胚胎种植率、多胎率比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。自然周期组和激素替代周期组患者临床妊娠率(57. 85%vs65. 18%)、早期流产率(13. 04%vs 15. 28%)、晚期流产率(1. 45%vs 4. 17%)、早产率(28. 81%vs36. 21%)、活产率(85. 51%vs 80. 56%)比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论:足量黄体支持的情况下,在冻融胚胎移植中自然周期和激素替代周期准备内膜均可获得相似的妊娠结局,临床工作中可根据实际情况灵活选择。

不同光照周期对蛋鸡高峰期血液激素水平的影响

将320只10周龄海兰褐商品蛋鸡,随机分为8组,每组4个重复,每个重复10只鸡。采用渐增和骤增两种增光方式,光照周期设11L∶13D、13L∶11D、15L∶9D、17L∶7D 4个水平。29周龄末,每个重复随机抽取2只鸡单笼饲养,每隔2 h采1次血,测定FSH、LH、P4和E2水平。结果表明:FSH和LH协同能促进卵泡成熟,促进卵巢分泌E2和P4,并引起排卵。以缓增,光照周期为11L∶13D(处理组Ⅱ)组的FSH、LH峰值含量最高;

枫泾和长白青年母猜正常发情周期内(五种)生殖激素含量的变化

枫泾猪以产仔率高驰名中外,长白猪的生产性能也比较高。以前我们报导了这两种母猪正常发情周期中血清孕酮的含量变化,对枫泾猪周期内其他生殖激素含量变化迄今尚未见报导。本实验目的在于用放射免疫法测定两猪种青年母猪正常发情周期内外周血清促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、17β一雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)和睾酮(T)激素的含量变化,了解其正常变化规律和品种间激素分泌异同对探讨枫泾猪高排卵率特性在生殖激素方面的有关因素有重要意义。

褪黑激素对绒山羊皮肤中毛囊周期相关miRNAs表达模式的影响

褪黑激素（Melatonin, MT）和miRNAs在毛囊的生长发育过程中发挥重要的作用，但MT对绒山羊皮肤毛囊miRNAs表达模式的影响尚未见报道。为探索MT从miRNAs层次影响山羊绒生长的机制，文章在内蒙古绒山羊中实施了褪黑激素埋植试验：5只青年母羊作为实验组埋植褪黑激素，另外5只青年母羊作为对照。利用荧光定量 PCR 检测褪黑激素埋植前后毛囊周期相关 miRNAs 的表达变化。结果表明，埋植 MT 明显改变了6个绒毛相关 miRNAs的表达规律：在一个绒毛周期内，除 let-7a外，miR-203、miR-205、miR-96、miR-183和miR-199a的表达量均发生3次跃迁；埋植MT改变了miRNAs之间的共表达模式。对照组各miRNA之间相关系数范围为0.87-0.99（P〈0.01）。与对照组相比，埋植组中 let-7a 与 miR-96、miR-199a、miR-205，miR-203与miR-96、miR-199a，miR-96与miR-183，miR-183与miR-199a之间的相关系数被明显消弱；MT通过下调6月份埋植组各miRNA的表达量提早诱发二次生绒。

光周期对大豆叶片内源激素含量及其平衡的影响

选用生育期不同的3个品种,采用酶联免疫检测技术(ELISA),研究了开花前和开花后光周期处理对大豆叶片内源激素含量及其平衡状况的影响。结果表明,短日照与长日处理相比,脱落酸(ABA)含量显著上升,赤霉素(GA_(1-3))含量及GA/ABA比例明显下降,细胞分裂素(DHZR,二氢玉米素核苷)有下降趋势,生长素(IAA)的变化不大。短日下GA和IAA含量负相关,GA与ABA正相关,长日下IAA与DHZR负相关;DHZR与ABA在长日和短日下均呈极显著正相关。不同品种及开花前和开花后激素的变化趋势基本一致。作者提出,在大豆光周期反应过程中,促进激素间通过此消彼长的变化,保持总量的相对稳定;促进激素与抑制激素含量的同趋势消长维持体内激素水平的相对平衡,两类激素,特别是GA和ABA的平衡状况在大豆光周期反应中起重要作用。

雌激素和雄激素对鸡成骨细胞增殖、凋亡、细胞周期及其受体mRNA转录的影响

为探讨雌激素和雄激素对鸡胚额骨成骨细胞(OB)增殖、凋亡、细胞周期及其受体mRNA转录的影响,用雌激素(17β雌二醇)和雄激素(十一酸睾酮)单独以及联合处理鸡胚额骨成骨细胞,MTT法测定细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化,荧光定量PCR检测成骨细胞中雌激素受体(ER)及雄激素受体(AR)mRNA的转录。结果显示:一定浓度的雌激素或雄激素在24h内均能促进成骨细胞的增殖,促进成骨细胞的细胞周期进程,但对细胞凋亡无明显作用。雌激素单独或联合雄激素作用能上调ERmRNA的转录,对ARmRNA的转录无明显作用。

基础血清抗苗勒管激素与新鲜/冷冻胚胎移植周期活产率的相关性分析

【目的】探讨基础血清抗苗勒管激素(AMH)水平与新鲜周期和冷冻周期活产率的关系及血清AMH水平对胚胎移植的活产率的预测价值。【方法】选取2010年6月-2015年5月在我生殖中心进行第一次新鲜或冷冻胚胎移植周期的不孕患者共2 942例进行回顾性分析。排除多囊卵巢综合征的患者。根据不孕患者的血清AMH水平分为低AMH水平组(<1.1 ng/m L,485例),中AMH水平组(1.1~7.0 ng/m L,1 989例)及高AMH水平组(>7.0 ng/m L,468例)。再根据年龄将患者分成不同的年龄亚组:A组:≤29岁,B组:30~34岁,C组:35~39岁及D组:40岁以上。比较同一年龄组内不同血清AMH水平的种植率、临床妊娠率、流产率及活产率的差异。进一步采用多元回归分析方法分析基础血清AMH对活产率的影响。利用受试者工作特征曲线分析(ROC),评估血清AMH对活产率的预测价值。【结果】(1)在新鲜胚胎和冷冻胚胎移植周期,基础血清AMH水平均与临床妊娠结局相关,血清AMH水平越低,种植率越低,同样临床妊娠率越低,活产率越低,而流产率则越高,差异均有统计学意义。(2)年龄亚组分析显示,在新鲜及冷冻周期,A、B及C组的患者的基础血清AMH与活产率相关,AMH越低,活产率越低,差异均有统计学意义。D组患者的基础血清AMH与冷冻周期的活产率相关(P<0.05),与新鲜周期的活产率无关(P=0.092)。多元回归分析显示,在纳入了年龄、不孕年限、不孕原因、移植胚胎数、内膜准备方案等影响结局的因素后,血清AMH对活产率的影响仍保持有统计学意义。(3)基础血清AMH预测新鲜周期及冷冻周期胚胎移植活产率的受试者工作特征曲线(ROC)下面积分别为0.647、0.633。【结论】基础血清AMH是反映卵巢储备的良好指标之一,与胚胎移植周期的妊娠结局有相关性,基础血清AMH水平越低,活产率越低。基础血清AMH是影响胚胎移植周期活产率的独立影响因素,但对活产率的预测价值有限。

降调节联合激素替代周期方案在多次胚胎种植失败患者冻融胚胎移植周期中的应用

目的探讨多次胚胎种植失败的患者行降调节联合激素替代周期方案对冻融胚胎移植妊娠结局的影响。方法回顾性分析2013年12月至2014年12月在首都医科大学附属北京妇产医院生殖中心接受冻融胚胎移植且既往胚胎种植失败次数≥2次的患者共174例。根据本次冷冻移植周期子宫内膜准备方法分为2组:其中A组采用促性腺激素释放激素-激动剂(gonadotrophin-releasing hormone agonist,GnRHa)降调节联合激素替代周期(hormone replacement therapy,HRT)方案(n=78),B组采用单纯激素替代周期方案(n=96),分析2种内膜准备方案对患者妊娠结局的影响。结果 2组患者的不孕年限、年龄、体质量指数、基础内分泌激素浓度;移植胚胎数、优质胚胎数、胚胎复苏率、黄体酮转化日子宫内膜厚度;胚胎种植率(22.8%vs19.8%)、临床妊娠率(42.3%vs 37.5%)、早期流产率(9.1%vs 11.1%)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对多次胚胎种植失败的患者,GnRHa降调节联合激素替代方案在胚胎着床率和临床妊娠率方面较单纯激素替代周期方案有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),有待于进一步扩大样本量研究。

斜带石斑鱼雌鱼卵巢发育与血清性类固醇激素的生殖周期变化

斜带石斑鱼Epinepheluscoioides卵母细胞发育可分为6个时相,以卵母细胞在卵巢中组成的差异可以把卵巢发育划分为相应6个时期。测定了成熟雌鱼血清中雌二醇和睾酮含量的生殖周期变化,在生殖季节成熟雌鱼血清中雌二醇和睾酮含量最高。生殖季节成熟雌鱼的平均性腺成熟系数GSI显著高于其它月份,并且血清性类固醇激素水平的季节变化与性腺成熟系数的变化基本一致,都是在生殖季节达到最高峰。

不同光周期对丝瓜幼苗生长生理及其内源激素含量和性别分化的影响

以该课题组自主选育的普通丝瓜(BG-1-1-3-1)为材料,采用人工遮光的方式,研究不同光周期[6、8、10和14 h/d(自然光周期,CK)]处理对丝瓜幼苗生长生理及其内源激素含量和性别分化的影响,为丝瓜设施栽培中的光照管理提供理论基础。结果表明:(1)随着光周期的缩短,丝瓜幼苗生物量的积累呈显著减少的趋势;幼苗叶片叶绿素含量,SOD、POD和CAT活性,以及可溶性糖、可溶性蛋白和游离氨基酸含量均呈先升高后降低的趋势,并均以光周期为10 h/d时最高。(2)丝瓜幼苗叶片GA3、IAA和ZT含量在光周期为8和10 h/d时较低,而在光周期为6和14 h/d时较高,但ABA含量变化趋势却相反。(3)当光周期为10 h/d时,丝瓜的第一雌花节位、第一雄花节位均最低,雌花总数和果实产量最高。研究发现,适当的短日处理可以促进丝瓜雌花的分化和果实产量提高,并以光周期10 h/d处理的效果最佳。