普伐他汀能否降低早期兔激素诱导性股骨头坏死发生的风险

背景:研究表明脂质代谢和凝血紊乱以及细胞凋亡与激素性股骨头坏死的发病机制密切相关,而部分研究显示普伐他汀具有降脂、抗凝以及干预骨细胞凋亡的作用。目的:探讨普伐他汀能否降低早期兔激素诱导性股骨头坏死发生的风险,是否可作为兔激素诱导性股骨头坏死的早期靶向干预药物。方法:将60只新西兰雄性兔随机分为3组,模型组和干预组各24只,对照组12只。模型组采用激素联合马血清的方法准备激素性股骨头坏死模型,干预组在模型组的基础上给予普伐他汀治疗,对照组注射等量生理盐水,分别于造模第2、4、6周行血脂、凝血指标检测以及MRI检查,随后处死动物,在光镜下观察组织病理学改变,并计算空骨陷窝率,应用TUNEL法检测骨细胞凋亡,并计算凋亡指数。结果与结论:(1)干预组的大体标本和MRI表现与模型组相比,各周坏死程度相仿,无明显差别;(2)干预组在第2,4周的胆固醇、三酰甘油及低密度脂蛋白水平高于对照组(P<0.05),干预组在第6周的胆固醇、三酰甘油及低密度脂蛋白水平明显低于模型组(P <0.05),但与对照组相比无明显差异(P> 0.05);(3)各组间不同时间点凝血酶原时间及组织纤维溶酶原激活物水平均无显著性差异(P> 0.05);(4)病理组织学显示,干预组骨髓腔内脂肪细胞数、空骨陷窝数较模型组少,骨小梁稀疏程度相对较轻。干预组第2,4周的空骨陷窝率高于对照组(P <0.05),在第6周时,与对照组相比无明显差异(P> 0.05),但显著低于模型组(P <0.05);(5)干预组各时间点的凋亡指数显著高于对照组(P <0.05),但与模型组相比,无显著差异(P> 0.05);(6)结果显示,普伐他汀不能降低早期兔激素诱导性股骨头坏死发生的风险,尚不能作为兔激素诱导性股骨头坏死早期的有效靶向干预药物。

细胞凋亡在激素诱导性股骨头坏死中的研究进展

目前糖皮质激素作为治疗某些疾病如SARS、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、白血病、器官移植后等的有效手段[1]，已广泛使用于临床，因而激素的使用已成为目前非创伤性股骨头坏死的最常见原因。激素诱导性股骨头坏死又称激素诱导的股骨头缺血性坏死或股骨头无菌性坏死，是一种由于股骨头血供中断或受损，引起骨细胞及骨髓成分死亡及随后的修复，继而导致股骨头结构改变、股骨头塌陷、关节功能障碍的疾病，大部分患者最终不得不接受人工关节置换。如能早期诊断股骨头坏死，尤其在MRI发现之前，积极治疗后可防止股骨头塌陷，保护关节功能，控制和延缓病情发展，可显著减少致残率[2]。

骨内外动脉损害在糖皮质激素诱导性股骨头坏死中作用的实验研究

目的：初步探讨股骨头内外动脉损害在糖皮质激素（Glucocorticoid，GC）诱导性股骨头坏死（Femurheadnecrosis，FHN）病理发展过程中的作用及其发生机制。方法：给家兔注射2．sing·kg－1·d－1地塞米松建立FHN动物模型，观察用药过程中和停药后血脂、股骨头内外血循环病理（脂肪组化学及HE染色光镜和透射电镜）及其血流量和肝脏病理的变化。结果：1、甘油三脂、胆固醇在用药后均明显升高，8周达最高，分别为对照组的22倍和3倍，停药后6周恢复正常。2、组织病理：股骨头4周出现典型的骨坏死灶，软骨下区小血管腔出现脂肪柱子，脂肪栓塞范围与血脂水平的高低利用药时间密切相关。6周髓内小动脉壁的细胞呈空泡样变；骨内血管的脂肪柱子后方有血栓形成。8周骨坏死灶大且更典型，骨髓内小动脉管壁部分坏死，内皮细胞变性，间隙增宽，部分脱落，管腔内有纤维蛋白网。停药后，骨坏死程度更严重，2周电镜下见髓内小动脉管腔中有脂肪柱子，内皮细胞变性、间隙明显增宽，可见脂质沿增宽的间隙进入内膜下并沉积；6周髓腔小动脉内有血栓形成，并且少数骨内血管仍有脂肪柱子。铁关节囊外的动脉损害随用药时间的延长而加重，8周动脉病变严重，管壁结构紊乱，出现类粥样硬化性改变，管腔狭窄，重者管壁呈玻璃样变性、?

髓腔内脂肪填塞在糖皮质激素诱导性股骨头坏死中作用的实验研究

目的：初步探讨髓腔内脂肪填塞（即骨髓严重脂肪化）在糖皮质激素（Glucocorticoid，GC）诱导股骨头坏死（Fe－murheadnecrosis，FHN）的病理过程中对血循环的影响及其作用机制。方法：给家兔注射2．sing／kg·d的地塞米松建立FHN动物模型，采用血脂监测、血管铸型、血管墨汁灌注、放射微球法血流量测定、组织病理等技术，观察用药过程中和停药后血脂和股骨头病理、血循环及肝脏病理的变化。结果：1、血脂：甘油三脂、胆固醇在用药后均明显升高，第8周达最高，分别约为对照组的22倍和3倍，停药6周恢复正常。2、组织病理：用药2周股骨头髓腔内明显脂肪化，窦状隙血管受压变细。4－6周骨髓脂肪化更严重，临软骨下骨板的髓内血管扩张淤血，其下窦状隙血管严重受压，随时间的延长而加重。8周最严重，骨髓基本为脂肪细胞所取代，血管稀少；停药2周髓内脂肪细胞皱缩、死亡，周围窦状腺血管增粗，临软骨下的血管仍淤血扩张；停药6周骨髓再次脂肪化，以负重区最严重。用药过程中肝细胞出现严重脂肪变性和灶性坏死，肝脏血管内可见脂滴泡。3、股骨头墨汁灌注和血管铸型的观察及血流量测定：用药4周窦状隙血管因受压而出现压迹、变形，使其变细且面积减少，并伴有其上方近关节面的血管扩张；股骨头明显血流量下降?

糖皮质激素诱导股骨头坏死发病机制的研究进展

糖皮质激素作为治疗炎症和免疫性疾病的有效药物被广泛应用,但长期使用可能会导致许多严重的副作用,其中包括股骨头坏死。本文回顾了近年来在糖皮质激素诱导股骨头坏死发病机制方面取得的研究进展。研究发现,糖皮质激素通过增加活性氧产生和氧化应激、损伤内皮细胞和凝血功能、调节脂质代谢、影响细胞凋亡和自噬以及干扰非编码RNA的调控等途径参与股骨头坏死的发生发展。

三七有效成分调控激素性股骨头坏死的相关信号通路

背景:激素性股骨头坏死是骨科领域难治和难愈性疾病,尚无确切研究观点完整解释其病理机制。随着三七有效成分干预多种疾病相关信号通路的研究增加,三七有效成分通过调控激素性股骨头坏死相关信号通路治疗该病逐渐成为时下研究热点。目的:系统总结分析近年来激素性股骨头坏死病理机制研究文献和三七有效成分调控该病相关信号通路的相关文献内容,为后续研究三七有效成分治疗该病提供参考。方法:检索中国知网及万方数据库,中文检索词为“糖皮质激素,激素性股骨头坏死,病理机制,信号通路,三七,有效成分”等;检索PubMed数据库,英文检索词为”Glucocorticoid,steroid associated necrosis of the femoral head,Pathological mechanism,signaling pathway,Panax notoginseng,active ingredient”等,筛选激素性股骨头坏死病理机制相关文献和三七有效成分调控激素性股骨头坏死相关信号通路文献,最终共纳入63篇文献。结果与结论:①三七主要成分包括三七总皂苷、人参皂苷、三七皂苷、槲皮素和山柰酚等。②在调控相关通路方面,三七总皂苷、人参皂苷Rb1和槲皮素作用于转化生长因子β/骨形态发生蛋白通路,能促进骨修复和血管新生;三七总皂苷、人参皂苷CK和山柰酚作用于Wnt/β-catenin通路,可促进成骨分化和脂质代谢;三七总皂苷及三七皂苷R1/R2作用于MAPK通路,抑制破骨和促进骨修复;三七总皂苷、人参皂苷Rb2及槲皮素作用于RANKL/RANK/骨保护蛋白通路,可抑制破骨增殖并促进成骨分化;三七总皂苷、槲皮素及山柰酚作用于缺氧诱导因子1α通路,能修复血管损伤和促进成骨。③三七皂苷R1、槲皮素联合羟基磷灰石纳米颗粒、三七总皂苷联合聚乙烯-L-乳酸等生物材料治疗激素性股骨头坏死具有良好的研究前景。④三七有效成分可通过多种机制调控激素性股骨头坏死相关信号通路,对该病起到积极的干预作用,但目前相关研究深度和广度不足,未来应基于现有的机制研究,深入探究三七调控该病不同通路的具体机制及通路间相互作用,将有利于运用三七有效成分治疗激素性股骨头坏死的多元发展。

鹿仲健骨汤治疗股骨头坏死模型大鼠:肠道菌群及血清激素变化

背景:股骨头坏死是一种常见的致残性疾病,主要表现为微循环障碍、骨细胞代谢紊乱。鹿仲健骨汤由山东省中医药研究院研制而成,在临床以汤剂形式使用,对股骨头坏死具有良好疗效,然而其作用机制尚未明确。目的:基于16S rDNA技术研究鹿仲健骨汤对股骨头坏死模型大鼠肠道菌群的影响,探究其治疗股骨头坏死的作用机制。方法:采用维甲酸灌胃的方式建立Wistar大鼠股骨头坏死模型,通过股骨头部位骨形态计量学、骨组织病理学和血清激素水平评价鹿仲健骨汤的治疗作用,采用16S rDNA测序技术对空白对照组、模型组及鹿仲健骨汤中剂量组大鼠肠道菌群进行分析,构建相应文库并进行OTU聚类以及微生物群落多样性、丰度等分析,明确肠道菌群的组成及各组间的菌群种类、多样性变化。结果与结论:(1)鹿仲健骨汤可以显著提高骨钙素、骨桥蛋白等成骨相关因子的表达,缓解骨小梁的破坏,增加骨密度,对股骨头坏死具有显著的治疗作用,鹿仲健骨汤中剂量组效果最为显著;(2)肠道菌群测序结果显示,鹿仲健骨汤在一定程度上改善了股骨头坏死大鼠菌群紊乱,共筛选出杆菌门、脱硫弧菌门、脱硫孤菌属、异杆菌属、双歧杆菌属等差异菌落;能上调双歧杆菌等有益菌丰度,下调脱硫弧菌等有害菌丰度,改善肠道菌群结构;(3)通过功能预测分析发现鹿仲健骨汤治疗股骨头坏死可能主要影响氨基酸代谢、能量代谢等;(4)相关性分析显示,鹿仲健骨汤中剂量组的差异菌双歧杆菌属(Bifidobacterium)、肠单胞球菌(Intestinimonas)与维生素D3、雌二醇、降钙素呈正相关,与前列腺素E2呈负相关;模型组的差异菌大肠杆菌-志贺氏菌(Escherichia-Shigella)、脱硫孤菌属(Desulfovibrio)、格鲁比卡氏菌属(Globicatella)、链球菌属(Streptococcus)与前列腺素E2呈正相关,与维生素D3、雌二醇、降钙素呈负相关。结果表明:鹿仲健骨汤可能通过调节肠道菌群结构,上调有益菌丰度,影响维生素D3、雌二醇、降钙素及前列腺素E2激素分泌,起到治疗股骨头坏死的作用。

骨痹通消颗粒干预激素性股骨头坏死小鼠模型的作用及机制

背景:研究发现,糖皮质激素可抑制甲状旁腺素1受体(parathyroid hormone typeⅠreceptor,PTH1R)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号轴中关键基因表达,干扰骨髓间充质干细胞向成骨、成血管方向分化,导致骨内血供、骨组织结构的破坏。课题组前期研究结果表明骨痹通消颗粒可诱导血管形成、抑制成骨细胞凋亡,对激素性股骨头坏死具有一定的防治作用,其机制尚未明确。目的:观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗效果,从PTH1R/PKA信号轴探讨其作用机制。方法:采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙建立激素性股骨头坏死模型,将造模成功的60只C57小鼠随机分成模型组、骨痹通消颗粒组和通络生骨胶囊组,每组20只,另选取12只健康小鼠作为正常对照组,分别灌胃相应药物12周后,苏木精-伊红染色观察股骨头组织形态学变化,酶联免疫吸附测定法检测血清中骨碱性磷酸酶、Ⅰ型氨基端延长肽、甲状旁腺激素、骨钙素、碱性磷酸酶水平,Western blot和RT-qPCR法检测股骨头组织中PTH1R、PKA、MEF2、SOST、GNAS的蛋白及基因表达水平。结果与结论:骨痹通消颗粒可能通过降低小鼠血清甲状旁腺激素水平,抑制PTH1R/PKA信号轴的激活,进一步上调SOST、MEF2的表达,提高骨碱性磷酸酶、Ⅰ型氨基端延长肽、骨钙素、碱性磷酸酶水平,从而改善股骨头坏死情况,与通络生骨胶囊干预效果相当,推测骨痹通消颗粒可能通过调节PTH1R/PKA信号轴发挥防治激素性股骨头坏死的作用。

基于微血管研究激素性股骨头坏死发生机制系统综述

目的对微血管在激素性股骨头坏死(steroid induced avascular necrosis of femoral head,SANFH)发生机制中的作用研究进展进行综述。方法广泛查阅近年来国内外有关ONFH发生机制研究的相关文献,总结股骨头内微血管对ONFH发生作用相关研究进展。结果血运受损被认为是SANFH发生的关键。股骨头内存在大量微血管,其中H型血管在“血管生成-成骨耦合”中起着决定性作用,从而在股骨头坏死的发生发展中有着重要影响。长期使用糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)会使得股骨头内的低氧诱导因子(HIF-1α)、血小板衍生生长因子BB型(PDGF-BB)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管生成素(ANG)表达减少,骨微血管内皮细胞(BMCS)活性降低等导致血管生成受损和抑制,尤其是H型血管的生成受抑制;股骨头微血管血运受损,成骨减少,成骨破骨平衡破坏,SANFH发生。结论糖皮质激素主要通过凝血功能障碍、内皮功能障碍和血管生成受损引起股骨头血运损伤,糖皮质激素可能通过降低HIF-1α、PDGF-BB、VGEF等因子的表达,抑制H型血管的生成,从而对股骨头“血管生成-成骨耦合”造成损害,降低股骨头坏死重建和修复能力,导致激素性股骨头坏死的发生。

淫羊藿苷治疗激素性股骨头坏死分子机制研究进展

淫羊藿苷在治疗激素性股骨头坏死方面的研究取得了显著进展。淫羊藿苷可通过提高促血管生成因子表达及抑制炎性因子,减少血管损伤,保护骨内血管的完整性。同时,淫羊藿苷能减少骨细胞凋亡,抑制骨髓脂肪细胞增生,促进局部骨修复,延缓病情进展。淫羊藿苷还可以通过促进成骨相关基因的表达,抑制脂肪分化,并通过表观遗传机制,发挥其治疗股骨头坏死的作用。此外,淫羊藿苷能通过激活相关信号通路,逆转缺氧引起的不良影响,保护成骨细胞功能。未来研究应深入解析淫羊藿苷在不同细胞类型间的相互作用及其在免疫调节中的作用机制,以全面了解其在治疗激素性股骨头坏死中的分子机制。该文就淫羊藿苷治疗激素性股骨头坏死分子机制研究进展进行综述。

激素性股骨头坏死囊性变组织骨修复机制分析与活血通络胶囊含药血清对肥大软骨细胞成骨分化影响的实验研究

目的:分析激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)囊性变组织的骨修复机制,并观察活血通络胶囊含药血清对肥大软骨细胞成骨分化的影响。方法:(1)SONFH囊性变组织的骨修复机制分析。纳入6例采用全髋关节置换术治疗的SONFH患者,术后收集坏死股骨头6个,其中3个股骨头用于囊性变组织的单细胞转录组测序,采用生物信息学方法分析囊性变组织中的细胞分类、软骨细胞的细胞亚群、肥大软骨细胞参与的生物过程;另外3个股骨头用于囊性变组织的病理学检查,分别采用苏木素-伊红染色、阿利新蓝染色、番红O-固绿染色观察囊性变组织中软骨细胞、肥大软骨细胞的分布与特征,采用免疫组织化学染色观察囊性变组织中肥大软骨细胞标志蛋白Ⅹ型胶原α1(collagen typeⅩα1,Col10α1)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)13和成骨分化相关蛋白Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达情况。(2)活血通络胶囊含药血清对肥大软骨细胞成骨分化影响的分析。采用活血通络胶囊(活血通络胶囊粉末溶于蒸馏水)给大鼠灌胃,制备活血通络胶囊含药血清。取小鼠膝关节软骨,消化分离后进行培养。将小鼠软骨细胞接种于含有不同浓度的活血通络胶囊含药血清的完全培养基中,筛选活血通络胶囊含药血清的最佳干预浓度。取处于对数生长期的第1代小鼠软骨细胞,行肥大软骨细胞诱导成功后,分为成骨诱导组、5%含药血清干预组和对照组,成骨诱导组更换成骨诱导培养基培养,5%含药血清干预组更换含5%活血通络胶囊含药血清的成骨诱导培养基培养,对照组继续采用肥大诱导培养基培养;培养7 d后,分别采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色,观察细胞形态特征,分别采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测Ⅰ型胶原蛋白α1(collagenⅠα1,Col1α1)、ALP、RUNX2、OPN的mRNA相对表达量和ALP、RUNX2、OPN的蛋白相对表达量。结果:(1)SONFH囊性变组织单细胞转录组测序分析结果。共获得30224个细胞的单细胞转录组测序结果;细胞分类结果显示,囊性变组织中有8种细胞,包括T细胞、内皮细胞、成纤维细胞、软骨细胞、巨噬细胞、单核细胞、破骨细胞和肥大细胞;软骨细胞亚群分析共鉴定出5类亚群细胞,包括稳态软骨细胞、成纤维软骨细胞、炎症软骨细胞、肥大软骨细胞、前体肥大软骨细胞;差异基因富集分析结果显示,肥大软骨细胞主要参与细胞迁移正向调节、细胞分化、细胞外基质形成、骨化、细胞迁移和成骨细胞分化等生物过程。(2)SONFH囊性变组织的病理学检查结果。囊性变组织的边缘可见软骨细胞、肥大软骨细胞,且部分软骨组织呈现向骨小梁过渡的形态;Col10α1、MMP13、RUNX2、OPN在囊性变组织的边缘高表达。(3)活血通络胶囊含药血清干预肥大软骨细胞成骨分化的分析结果。经筛选,5%为活血通络胶囊含药血清的最佳干预浓度。ALP染色和茜素红染色结果显示,对照组无明显钙化结节,成骨诱导组有明显钙化结节,5%含药血清干预组钙化结节较成骨诱导组进一步增多;成骨诱导组细胞ALP、RUNX2、OPN、Col1α1的mRNA相对表达量和ALP、RUNX2、OPN的蛋白相对表达量均高于对照组(P=0.000,P=0.000,P=0.001,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.001),5%含药血清干预组细胞ALP、RUNX2、OPN、Col1α1的mRNA相对表达量和ALP、RUNX2、OPN的蛋白相对表达量均高于成骨诱导组(P=0.000,P=0.000,P=0.002,P=0.001;P=0.000,P=0.000,P=0.001)。结论:SONFH囊性变组织中存在肥大软骨细胞向成骨细胞分化的修复机制,而活血通络胶囊含药血清能够促进体外培养的肥大软骨细胞向成骨细胞分化。

基于“成骨-成血管”理论探讨全身振动疗法治疗激素性股骨头坏死的效果及作用机制

目的:观察全身振动疗法(whole body vibration therapy,WBVT)治疗激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)的效果,并探讨其治疗SONFH的作用机制。方法:将50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、WBVT组、Yoda1组、WBVT联合蜘蛛毒液肽(Grammostola spatulata mechanotoxin 4,GsMTx4)组。模型组、WBVT组、Yoda1组、WBVT联合GsMTx4组大鼠采用脂多糖联合甲泼尼龙琥珀酸钠构建SONFH模型。造模后,WBVT组使用WBVT干预,Yoda1组使用Piezo1蛋白激动剂Yoda1干预,WBVT联合GsMTx4组使用WBVT和Piezo1蛋白抑制剂GsMTx4干预。干预结束后,进行大鼠股骨头组织病理学观察(计算股骨头空骨陷窝率)、骨微结构观察,以及股骨头内Piezo1、骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、分化簇31(cluster of differentiation 31,CD31)/内皮粘蛋白(endomucin,EMCN)蛋白表达量检测。结果:(1)大鼠股骨头组织病理学观察结果。空白组大鼠的股骨头内骨小梁致密且排列整齐。与空白组相比,模型组大鼠股骨头内的骨小梁较为稀疏,骨小梁细小、不连续,且排列紊乱。与模型组相比,WBVT组和Yoda1组大鼠的股骨头内骨小梁数量增多,排列较为整齐。与WBVT组相比,WBVT联合GsMTx4组大鼠的股骨头内骨小梁排列则较为紊乱。模型组、WBVT组、Yoda1组、WBVT联合GsMTx4组大鼠的股骨头空骨陷窝率均高于空白组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000),WBVT组、Yoda1组大鼠的股骨头空骨陷窝率均低于模型组(P=0.000,P=0.000),WBVT联合GsMTx4组大鼠的股骨头空骨陷窝率高于WBVT组(P=0.000)。(2)大鼠股骨头骨微结构观察结果。WBVT组和Yoda1组大鼠的股骨头骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨小梁分离度与空白组的差异均无统计学意义(P=0.213,P=0.081,P=0.384,P=0.471;P=0.435,P=0.131,P=0.104,P=0.126)。模型组和WBVT联合GsMTx4组大鼠的股骨头骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量均低于空白组(P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.000),骨小梁分离度均高于空白组(P=0.000,P=0.000)。WBVT组和Yoda1组大鼠的股骨头骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量均高于模型组(P=0.000,P=0.002,P=0.000;P=0.000,P=0.007,P=0.014),骨小梁分离度均低于模型组(P=0.000,P=0.000)。WBVT组大鼠的股骨头骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨小梁分离度与Yoda1组的差异均无统计学意义(P=0.194,P=0.223,P=0.332,P=0.071)。WBVT联合GsMTx4组大鼠的股骨头骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量均低于WBVT组(P=0.002,P=0.021,P=0.000),骨小梁分离度高于WBVT组(P=0.000)。(3)大鼠股骨头内Piezo1、BMP2、Runx2、HIF-1α、VEGF蛋白表达量检测结果。WBVT组和Yoda1组大鼠股骨头内Piezo1、BMP2、Runx2、HIF-1α、VEGF蛋白表达量与空白组的差异均无统计学意义(P=0.061,P=0.122,P=0.773,P=0.814,P=0.991;P=0.112,P=0.071,P=0.955,P=0.749,P=0.915)。模型组和WBVT联合GsMTx4组大鼠股骨头内Piezo1、BMP2、Runx2、HIF-1α、VEGF蛋白表达量均低于空白组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000)。WBVT组和Yoda1组大鼠股骨头内Piezo1、BMP2、Runx2、HIF-1α、VEGF蛋白表达量均高于模型组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000)。WBVT组大鼠股骨头内Piezo1、BMP2、Runx2、HIF-1α、VEGF蛋白表达量与Yoda1组的差异均无统计学意义(P=0.962,P=0.179,P=0.214,P=0.990,P=0.975)。WBVT联合GsMTx4组大鼠股骨头内Piezo1、BMP2、Runx2、HIF-1α、VEGF蛋白表达量均低于WBVT组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000)。(4)大鼠股骨头内CD31/EMCN蛋白表达量检测结果。模型组和WBVT联合GsMTx4组大鼠股骨头内CD31/EMCN表达量均低于空白组(P=0.000,P=0.000)。WBVT组和Yoda1组大鼠股骨头内CD31/EMCN表达量与空白组的差异均无统计学意义(P=0.412,P=0.991)。WBVT组和Yoda1组大鼠股骨头内CD31/EMCN表达量均高于模型组(P=0.000,P=0.000)。WBVT联合GsMTx4组大鼠股骨头内CD31/EMCN表达量低于WBVT组(P=0.000)。结论:WBVT可以促进股骨头坏死组织修复,其作用机制可能与上调Piezo1蛋白的表达影响HIF-1α/VEGF轴,进而促进股骨头内H型血管的生成、改善股骨头血供有关。

激素性股骨头坏死滑膜病变分子机制的实验研究

目的:探讨激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)滑膜病变的分子机制。方法:(1)转录组测序及生物信息学分析。收集9例接受全髋关节置换术的患者(SONFH患者3例、髋骨关节炎患者3例和股骨颈骨折患者3例)术中切除的髋关节滑膜组织,进行转录组测序和生物信息学分析,筛选SONFH滑膜病变核心基因。(2)滑膜组织检测。根据标本来源将髋关节滑膜组织分为SONFH组、髋骨关节炎组和股骨颈骨折组。观察各组髋关节滑膜组织的组织形态,采用实时定量PCR检测3组髋关节滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因的mRNA相对表达量,采用蛋白质印迹法和免疫组织化学染色法检测3组髋关节滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因的蛋白相对表达量。采用免疫荧光染色法检测SONFH滑膜病变的靶细胞。(3)细胞验证。培养大鼠滑膜成纤维细胞,构建滑膜炎细胞模型。采用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测空白细胞(空白细胞组)和滑膜炎模型细胞(模型细胞组)中SONFH滑膜病变核心基因的表达。结果:(1)转录组测序和生物信息学分析结果。经对不同患者来源的髋关节滑膜组织进行差异基因分析,共筛选出1001个与SONFH髋关节滑膜病变相关的基因,这些基因与免疫反应和外泌体有关,其中干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)4和IRF7是SONFH髋关节滑膜病变的核心基因,两者均为参与Ⅰ型干扰素应答的关键转录因子。(2)滑膜组织形态观察结果。苏木素-伊红染色显示,股骨颈骨折组髋关节滑膜组织形态正常,无细胞增生、肥大或间质水肿;髋骨关节炎组髋关节滑膜组织细胞增生,有少量新生血管和细胞聚集;SONFH组髋关节滑膜组织细胞大量增殖和聚集,有新生血管。(3)滑膜组织中SONFH滑膜病变核心基因表达检测结果。SONFH组髋关节滑膜组织中IRF4、IRF7、干扰素-α(interferon-α,IFN-α)的mRNA相对表达量均高于股骨颈骨折组和髋骨关节炎组(P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.001,P=0.000,P=0.036),髋骨关节炎组髋关节滑膜组织中IRF4、IRF7、IFN-α的mRNA相对表达量均高于股骨颈骨折组(P=0.000,P=0.000,P=0.000)。IRF4、IRF7、IFN-α蛋白在SONFH组髋关节滑膜组织中高表达,SONFH组髋关节滑膜组织中IRF4、IRF7、IFN-α的蛋白相对表达量均高于股骨颈骨折组和髋骨关节炎组(P=0.001,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.014,P=0.000),髋骨关节炎组髋关节滑膜组织中IRF4、IRF7、IFN-α的蛋白相对表达量均高于股骨颈骨折组(P=0.002,P=0.005,P=0.000)。(4)SONFH滑膜病变靶细胞检测结果。SONFH组髋关节滑膜组织中IRF7、钙黏附蛋白11(cadherin-11,CDH-11)的蛋白相对表达量均高于股骨颈骨折组和髋骨关节炎组(P=0.001,P=0.000;P=0.000,P=0.001),髋骨关节炎组髋关节滑膜组织中IRF7、CDH-11的蛋白相对表达量高于股骨颈骨折组(P=0.001,P=0.000)。滑膜成纤维细胞为SONFH滑膜病变的靶细胞。(5)细胞验证结果。模型细胞组IRF4、IRF7、IFN-α的mRNA和蛋白相对表达量均高于空白细胞组(P=0.001,P=0.002,P=0.000;P=0.001,P=0.007,P=0.000)。结论:SONFH滑膜病变与免疫炎症反应关系密切,滑膜成纤维细胞可能是SONFH滑膜病变的靶细胞,IRF4和IRF7可能是其潜在的靶点。

中药调控成骨细胞铁死亡治疗激素性股骨头坏死

背景:有研究发现成骨细胞铁死亡可作为重要的发病机制诱导激素性股骨头坏死的发生与发展。随着祖国医学的发展,有学者发现某些中药单体、中药复方及中成药等可通过多种通路机制调控成骨细胞铁死亡,最终起到治疗激素性股骨头坏死的作用。目的:探讨成骨细胞铁死亡与激素性股骨头坏死的关系及中草药调控成骨细胞铁死亡治疗激素性股骨头坏死的作用机制,为激素性股骨头坏死的诊治提供新的思路。方法:以“铁死亡,激素性股骨头坏死,成骨细胞,中草药,糖皮质激素,铁代谢,活性氧,谷胱甘肽过氧化物酶”为中文检索词,以“ferroptosis,Hormonal necrosis of the femoral head,osteoblast,Chinese herbal medicine,glucocorticoid,iron metabolism,ROS,GPX4”为英文检索词,检索中国知网、Pub Med、万方及维普数据库,筛选各数据库建库至2023年成骨细胞铁死亡与激素性股骨头坏死及中草药干预调控研究相关的文章,最终纳入74篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)成骨细胞铁死亡在激素性股骨头坏死发病中起重要作用。(2)成骨细胞铁死亡的发生受到多种机制通路调控,如细胞内铁超载引起铁死亡;细胞发生脂质过氧化损伤细胞膜引起铁死亡;细胞膜上胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白通过影响谷胱甘肽水平和谷胱甘肽过氧化物酶4活性,从而诱导铁死亡;细胞内发生芬顿反应产生大量活性氧引起铁死亡等。(3)中药单体淫羊藿苷等、中药复方青娥丸等及中成药补肾活血颗粒等均可通过调控成骨细胞铁死亡的发生,有助于防治激素性股骨头坏死。(4)目前关于成骨细胞铁死亡相关机制尚不明确,继续深入探明两者的作用机制,有望为临床治疗激素性股骨头坏死提供新选择。

miR-3191-5p在早期激素性股骨头坏死患者中的诊断价值分析

目的检测并探讨外周血中微小RNA(miRNA)-3191-5p在激素性股骨头坏死患者中的表达以及诊断价值。方法前瞻性选取2017年3月至2023年2月于监利市人民医院就诊的201例疑似激素性股骨头坏死患者,分为确诊组(99例)和未确诊组(102例);同期选取体检就诊的82例健康人群作为对照组。分别检测并比较三组外周血中miR-3191-5p相对含量,骨密度(BMD)和骨钙素(BGP)水平,分析miR-3191-5p与BMD、BGP的相关性,采用受试者工作曲线(ROC)评估miR-3191-5p在激素性股骨头的诊断价值。结果确诊组血清miR-3191-5p相对表达水平低于未确诊组和对照组,BMD和BGP高于未确诊组和对照组。确诊组轻中度组miR-3191-5p相对表达水平高于重度组,BMD和BGP低于重度组;且miR-3191-5p分别与BMD、BGP均呈显著负相关(P<0.05)。miR-3191-5p区分轻中度与非轻中度、重度和非重度、激素性股骨头坏死和非该病患者的ROC下面积和分别为0.764、0.916和0.911。结论血清miR-3191-5p能够作为激素性股骨头坏死患者早期诊断的敏感生物标志物。

基于中医四诊仪探讨ARCOⅠ期激素性股骨头坏死患者的舌象特征

目的:基于中医四诊仪客观探讨激素性股骨头坏死患者的高发舌象特征。方法:选取符合纳入标准的119例ARCOⅠ期激素性股骨头坏死患者作为观察组,利用中医四诊仪获取舌象信息,同样措施获取132例健康体检者的舌象信息作为对照组。比较两组舌象信息。结果:本次共收集观察组119例,对照组132例。经过统计学检验,ARCOⅠ期激素性股骨头坏死患者与健康体检者相比,舌色、苔色、苔质具有统计学意义,有无瘀斑瘀点差异不具有统计学意义。与对照组相比,实验组的舌色偏于紫色,苔色偏于黄白相兼,苔质偏于厚腻。结论:本次研究发现ARCOⅠ期激素性股骨头坏死患者的舌象与健康体检者的舌象存在统计学差异。ARCOⅠ期激素性股骨头坏死患者的舌象与患者性别、年龄无明显相关性。

基于多重免疫组化技术探讨股骨头坏死愈胶囊治疗激素性股骨头坏死的作用机制

目的:观察股骨头坏死愈胶囊治疗激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head, SONFH)的效果,基于多重免疫组化(multiplex immunohistochemistry, mIHC)技术探讨其治疗SONFH的作用机制。方法:将100只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、低剂量药物治疗组、高剂量药物治疗组。将模型组、低剂量药物治疗组、高剂量药物治疗组大鼠采用改良的脂多糖联合甲泼尼龙法建立SONFH模型。造模结束后,低剂量药物治疗组按照0.33 g·kg^(-1)的剂量给予股骨头坏死愈胶囊溶液(将股骨头坏死愈胶囊粉剂溶于水中)灌胃,高剂量药物治疗组按照0.67 g·kg^(-1)的剂量给予股骨头坏死愈胶囊溶液灌胃,正常对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃。每日灌胃2次,连续治疗4周。治疗结束后,采用Micro-CT扫描分析大鼠股骨头松质骨微结构,组织切片染色观察大鼠股骨头组织病理学改变,并采用mIHC分析巨噬细胞极化及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子初次应答基因88(myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路相关蛋白表达。结果:(1)一般结果。模型组1只大鼠于造模后死亡,低剂量药物治疗组和高剂量药物治疗组分别有3只和2只大鼠在治疗过程中死亡。正常对照组大鼠精神状态良好、进食正常、毛发光泽无脱落,模型组、低剂量药物治疗组、高剂量药物治疗组大鼠在造模开始后第3天出现神情不振、进食减少、少量脱毛,1周后精神、进食等逐渐恢复。(2)大鼠股骨头松质骨微结构Micro-CT扫描分析结果。模型组大鼠股骨头松质骨骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量小于正常对照组(P=0.000,P=0.000,P=0.000),骨小梁分离度大于正常对照组(P=0.000);低剂量药物治疗组大鼠股骨头松质骨骨体积分数、骨小梁厚度与模型组的差异均无统计学意义(P=0.052,P=0.071),骨小梁数量大于模型组(P=0.012),骨小梁离散度小于模型组(P=0.001);高剂量药物治疗组大鼠股骨头松质骨骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量大于模型组(P=0.001,P=0.011,P=0.000),骨小梁离散度小于模型组(P=0.001),骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨小梁离散度与低剂量药物治疗组的差异均无统计学意义(P=0.146,P=0.414,P=0.086,P=0.146)。(3)大鼠股骨头组织病理学观察结果。模型组大鼠股骨头空骨陷窝率、骨坏死发生率均高于正常对照组(P=0.000,P=0.000);低剂量药物治疗组大鼠股骨头空骨陷窝率低于模型组(P=0.000),骨坏死发生率与模型组的差异无统计学意义(P=0.054);高剂量药物治疗组大鼠股骨头空骨陷窝率和骨坏死发生率均低于模型组(P=0.000,P=0.000),空骨陷窝率低于低剂量药物治疗组(P=0.049),骨坏死发生率与低剂量药物治疗组的差异无统计学意义(P=0.556)。(4)巨噬细胞极化mIHC分析结果。模型组大鼠股骨头M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞占比均高于正常对照组(P=0.000,P=0.000);低剂量药物治疗组大鼠股骨头M1型巨噬细胞、M2型巨噬细胞占比与模型组的差异均无统计学意义(P=0.270,P=0.533);高剂量药物治疗组大鼠股骨头M1型巨噬细胞占比低于模型组(P=0.009),与低剂量药物治疗组的差异无统计学意义(P=0.131),M2型巨噬细胞占比高于模型组和低剂量药物治疗组(P=0.006,P=0.038)。(5)TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白表达mIHC分析结果。模型组大鼠股骨头TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白相对表达量均高于正常对照组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);低剂量药物治疗组大鼠股骨头TLR4、MyD88蛋白相对表达量与模型组的差异均无统计学意义(P=0.268,P=0.280),NF-κB p65蛋白相对表达量低于模型组(P=0.034);高剂量药物治疗组TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白相对表达量均低于模型组和低剂量药物治疗组(TLR4:P=0.002,P=0.040;MyD8:P=0.000,P=0.013;NF-κB p65:P=0.000,P=0.039)。结论:股骨头坏死愈胶囊治疗SONFH,能够显著改善股骨头骨微结构、抑制骨坏死,其作用具有一定的剂量依赖性;其作用机制与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及巨噬细胞极化有关。

基于“药邪理论”浅析激素性股骨头坏死病机

“药邪”为药物炮制或使用不当引起的人体生理生化功能紊乱。“激素性股骨头坏死”指高剂量激素导致股骨头活性成分死亡的病理过程。基于“药邪理论”,结合糖皮质激素对股骨头的不利影响,分析激素性股骨头坏死发生发展的病机;激素作为药邪,影响激素性股骨头坏死的病机归结为气血凝滞,气滞血瘀或津液失调,痰瘀互结,进而内舍脏腑,损肝脾肾,最终导致骨失濡养,久而坏死。治疗以行气、祛瘀、化痰、补肾为基本治法,除邪以安疾。基于此理论,为今后实验验证及临床治疗提供思路。

激素性股骨头坏死的中医护理研究进展

激素性股骨头坏死(Steroid induced Avascular Necrosis of Femoral Head, SANFH)是一种因服用糖皮质激素类药物导致的非创伤性股骨头坏死。其病率逐年增加,且致残率较高,一直为热门研究方向。中医特色护理技术在激素性股骨头坏死的早期防止及晚期手术患者的康复都发挥者重要作用,且因其操作安全简便,舒适的体验感,获得了广大患者的信赖,本文主要针对目前激素性股骨头坏死,中西医发病机制,临床上常用的中医特色护理方法进行总结归纳,旨在为临床工作中为护理同道提供思路和依据。