三七皂苷对激素性股骨头坏死早期细胞凋亡的影响及其机制

目的探讨三七皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)对激素性股骨头坏死(steonecrosis of the femoral head,SONFH)早期细胞凋亡的影响及其作用机制。方法选取健康成年新西兰兔24只,分为正常对照组、模型组及PNS组3组。模型组采用马血清(10mL/kg)加激素(40mg/kg)的方法建立兔SONFH模型;PNS组在模型组基础上同时给予PNS(50mg/kg)干预;正常对照组常规饲养。2周后处死动物取双侧股骨头进行脱钙包埋,TUNEL染色观察细胞内凋亡变化,BCA法检测股骨头内caspase-3活性变化,免疫组化及Western blot检测各组股骨头内Bax及Bcl-2含量的变化。结果 TUNEL染色结果发现,模型组骨组织内可见大量凋亡细胞,PNS组骨组织内凋亡细胞明显减少(P<0.05);与模型组相比,经PNS预处理后股骨头组织内的caspase-3活性明显下降(P<0.05);免疫组化染色及Western blot检测结果证实,模型组骨组织内Bax蛋白表达量明显增加,而Bcl-2蛋白表达量明显减少,而与之相反的是PNS组骨组织内检测到的Bax蛋白表达量明显下降(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论PNS可能通过增强Bcl-2表达,降低Bax表达,抑制caspase-3活性,减少早期SONFH股骨头组织内的细胞凋亡。

基于生物信息学分析鉴定激素性股骨头坏死的关键生物标志物及相关免疫细胞浸润

目的:对激素性股骨头坏死(SIONFH)患者外周血清中的基因芯片数据进行生物信息学分析,探究SIONFH发生的分子机制。方法:通过基因表达综合数据库(GEO)获取SIONFH患者与非SIONFH患者外周血清中的基因表达谱。通过R软件、Perl语言,借助5个疾病相关数据库、基因本体论、基因/蛋白质相互作用关系检索工具、Cytoscape分析软件及DAVID等数据库和分析工具,进行差异表达基因(DEGs)鉴定、功能注释和富集分析,并计算SIONFH患者外周血清中免疫细胞之间的关系。结果:从GEO数据库中下载基因表达序列GSE123568,包括30例SIONFH患者和10例非SIONFH患者。SIONFH组与非SIONFH组比较的外周血清的基因本体论(GO)富集分析中,上调的DEGs在生物学过程中主要富集在免疫反应、细胞防御反应、模式识别受体信号通路、神经炎症反应等方面;在细胞组分中主要富集在分泌颗粒膜、质膜外侧和内溶酶体等方面;在分子功能中主要富集在模式识别受体活性、趋化因子受体活性、免疫受体活性等方面。下调的DEGs在生物学过程中主要富集在组蛋白修饰、共价染色质修饰、肽基赖氨酸修饰和RNA剪接等方面;在细胞组分中主要富集在核斑点、中心粒和前核糖体等方面;在分子功能中主要富集在组蛋白结合、丝氨酸/苏氨酸激酶活性和转录共调节活性等方面。免疫细胞浸润结果显示,树突细胞(DC)和滤泡辅助性T细胞(Tfh)呈正相关性(r=0.670,P<0.05),而CD8+T细胞和中性粒细胞呈负相关性(r=-0.500,P<0.05);SIONFH组活化的DC(P=0.002)较非SIONFH组浸润程度显著降低,而SIONFH组的记忆B细胞较非SIONFH组浸润程度显著提高(P=0.014)。结论:多个富集功能参与了SIONFH发生的过程,精氨酸酶1(ARG1)、Toll样受体2(TLR2)和前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)被认为是SIONFH患者外周血清中的潜在生物标志物。SIONFH患者的外周血清免疫细胞具有一定的特异性。从生物信息学分析对SIONFH可能的发生机制进行探索,为未来的科学研究和临床治疗提供了思路和参考。

基因多态性与糖皮质激素诱导性股骨头坏死的相关性meta分析

目的应用meta分析证实靶基因的多态性是否与糖皮质激素诱导性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)发生相关。方法检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、Clinical Trial、CBM、万方、维普和CNKI等数据库中已发表的文章以获得适宜的研究,并以固定或者随机效应模型计算最终的OR值和95%置信区间(95%CI)。结果检索共发现有37项研究包含41个与SONFH发生风险相关的基因多态性位点。选择含有≥3个适宜研究的多态性位点进入meta分析,纳入的多态性位点主要集中在3个基因即PAI-1、MTHFR和ABCB1。携带有PAI-1突变基因5G的患者应用糖皮质激素后易发生SONFH,但差异不具有统计学意义[OR=0.95,95%CI(0.54,1.67),P=0.85]。SONFH发生率在MTHFR突变型和野生型之间差异存在统计学意义[OR=0.69,95%CI(0.50,0.95),P=0.02],携带有MTHFR 677T的患者较易发生SONFH。携带ABCB13435C等位基因者发生SONFH的风险更高,具有显著的统计学差异[OR=1.40,95%CI(1.11,1.76),P=0.005];而ABCB1 G2677T/A位点的基因多态性与SONFH发生之间无明显的统计学差异[OR=1.32,95%CI(0.76,2.28),P=0.32]。结论 MTHFR C677T和ABCB1 C3435T基因的多态性与股骨头坏死的发生风险显著相关。

激素性股骨头坏死易感基因的研究进展

糖皮质激素类药物应用广泛,但长期或大剂量使用易发生严重的不良反应,其中激素诱导性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head, SONFH)因骨细胞和骨髓渐进性坏死,最终导致股骨头结构改变及塌陷,致残率高,严重降低患者的生活质量。目前SONFH的预防和治疗手段有限,且发生机制尚不清楚。近年来发现SONFH的发生与血液凝溶系统、脂质代谢、药物代谢转运系统等相关基因的遗传多态性密切相关。本研究通过综述近年来与SONFH相关的基因组学研究,为筛选SONFH的易感人群提供重要的遗传学参考,为SONFH的预防和治疗提供可能的靶点。