激肽释放酶相关肽酶5在疾病中的研究进展

激肽释放酶相关肽酶5(KLK5)是一种胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶,在正常生理条件下参与裂解基质底物、激活蛋白酶酶原以及介导皮肤脱屑、精液液化、大脑发育等生命过程。此外,KLK5的异常激活还与肿瘤、皮肤炎症、病毒感染等疾病密切相关。在正常生理条件下,KLK5具有调控细胞生长和分化、皮肤脱屑、精液液化、免疫应答等基本生物学功能。因此,未来深入研究KLK5在疾病中的作用机制,有助于全面揭示KLK5作为生物标志物和潜在靶点的临床应用价值。

人激肽释放酶相关肽酶5在卵巢癌中的表达及意义探讨

目的检测人激肽释放酶相关肽酶5(KLK5)在卵巢癌患者血清中的水平,初步评估其作为肿瘤标志物的临床应用价值。方法应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验对40例卵巢癌血清和40例女性健康体检血清标本进行检测,分析KLK5水平与临床病理特征相关性,并对其临床预测价值进行分析。结果临床标本检测结果提示,KLK5在卵巢癌患者血清中表达水平(3.77±1.47)ng/mL,显著高于健康女性血清(0.86±0.45)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05);且KLK5表达水平与肿瘤临床分期呈正相关,即临床Ⅲ期KLK5水平(4.44±2.73)ng/mL显著高于Ⅰ/Ⅱ期血清中KLK5水平(2.14±1.66)ng/mL;中低分化肿瘤血清中KLK5水平高于高分化组;KLK5在淋巴结转移组水平显著高于无转移组。结论 KLK5在卵巢癌血清中表达升高,且KLK5表达与临床分期呈正相关,提示KLK5表达水平检测可以用于肿瘤的诊断与预后判断。

人类激肽释放酶基因4、5在卵巢癌中的表达

目的研究人类激肽释放酶基因4(KLK4)与激肽释放酶基因5(KLK5)在卵巢癌组织中的表达水平,探讨其在恶性肿瘤中的作用机制。方法50例卵巢肿瘤组织标本分为恶性肿瘤组(n=23)、交界性肿瘤组(n=6)和正常或良性肿瘤组(对照组,n=21)。采用荧光定量RT-PCR技术对各组卵巢肿瘤组织标本进行检测,获得KLK4与KLK5的表达水平。结果KLK4在卵巢癌中的表达水平显著高于对照组(P<0.05);KLK5在卵巢癌和交界性卵巢肿瘤中的表达水平也显著高于对照组(P<0.001);KLK5在浆液性囊腺癌中的表达水平显著高于其他组织学类型的恶性肿瘤(P<0.05)和对照组(P<0.001),且低分化浆液性囊腺癌的表达水平高于中分化浆液性囊腺癌的表达(P<0.05)。KLK5的表达水平与血清CA125水平呈正相关。结论KLK5在卵巢癌,尤其是浆液性囊腺癌的发生与发展过程中可能具有潜在促进作用。

激肽释放酶基因过表达对5/6肾切除大鼠肾脏细胞凋亡和炎症的影响和机制

目的探讨凋亡和炎症在人组织型激肽释放酶基因(hum an tissue kallire in,HK)肾脏保护中的作用和机制。方法健康雄性Wistar大鼠32只,随机分为假手术组(sham)、手术组(operation),手术+绿色荧光蛋白(GFP)尾静脉注射组(GFP组)以及手术+人组织型激肽释放酶基因组(HK组)。尾静脉注射病毒后3周,采取5/6肾切除术构建动物模型。术后第12周处死动物,肾组织石蜡切片行HE染色和M asson染色检测肾脏结构和胶原沉积。Tunnel染色和Caspase-3活性测定以检测凋亡细胞。Western blot技术检测肾组织Bcl-2、Bc l-xl、Bax、VCAM-1和MCP-1表达水平。结果 HE染色显示HK过表达明显抑制了5/6肾切除大鼠肾小管扩张和组织节段性硬化。Masson染色表明HK明显抑制了5/6肾切除大鼠肾脏胶原沉积(P<0.05)。Tunnel染色和Caspase-3活性测定结果显示HK显著减少肾脏细胞的凋亡(P<0.05)。W estern b lot显示HK明显降低了促凋亡蛋白Bax和炎症相关蛋白MCP-1和VCAM-1的表达,上调了凋亡抑制蛋白Bc l-2和Bc l-xl的表达(P<0.05)。结论 HK基因的肾脏保护作用至少部分是通过抑制细胞凋亡和炎症。机制至少包括下调促凋亡蛋白Bax和上调凋亡抑制蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表达,抑制炎症相关蛋白MCP-1和VCAM-1的表达。

清渣汤对玫瑰痤疮模型小鼠皮损组织VEGF、TLR2、KLK5表达的影响

目的:观察清渣汤口服对玫瑰痤疮模型小鼠皮损组织血管内皮生长因子(VEGF)、Toll样受体2(TLR2)、激肽释放酶5(KLK5)表达的影响。方法:7周龄健康雄性小鼠36只,用随机数字表法将其分为6组:清渣汤高剂组、中剂组、低剂组、阳性对照组(多西环素片)、模型对照组、正常对照组,每组6只。除正常组外,其余各组均进行玫瑰痤疮造模。造模24 h后给药,模型组给予0.2 mL生理盐水灌胃,清渣汤3剂组分别给予25 mg/kg(低剂量组)、50 mg/kg(中剂量组)和100 mg/kg(高剂量组)清渣汤灌胃,阳性对照组给予30 mg/kg盐酸多西环素溶液灌胃,每日1次,共给药4周。免疫组化法检测皮损部位皮肤组织VEGF、TLR2、KLK5蛋白表达水平。结果:模型组小鼠皮损组织VEGF、TLR2、KLK5蛋白表达较正常组明显增强(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组和清渣汤高、中、低剂量组小鼠皮损组织VEGF、TLR2、KLK5蛋白表达减弱(P<0.05)。结论:清渣汤能够抑制玫瑰痤疮小鼠模型皮损部VEGF、TLR2、KLK5蛋白表达水平,从而减轻炎症反应。

贝伐单抗联合奥沙利铂对耐药卵巢癌患者生存期及血清miR-17-5p、人激肽释放酶10表达的影响

目的:探究了贝伐单抗联合奥沙利铂对耐药卵巢癌患者生存期及血清微小RNA(miR)-17-5p、人激肽释放酶10(HK10)表达的影响。方法:将耐药卵巢癌患者68例,根据治疗方案的不同,分为贝伐单抗组和常规组,各34例。常规组使用奥沙利铂进行治疗,贝伐单抗组联合应用贝伐单抗和奥沙利铂。比较两组的客观缓解率、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)和不良反应发生率。比较两组治疗前后的miR-17-5p、HK10水平。结果:贝伐单抗组的客观缓解率明显高于常规组(P<0.05)。两组的PFS、OS比较经LogRank检验差异具有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,两组的miR-17-5p和HK10水平均明显下降,其中贝伐单抗组下降更明显(均P<0.05)。贝伐单抗组高血压、蛋白尿的发生率明显高于常规组(均P<0.05)。结论:贝伐单抗联合奥沙利铂治疗耐药卵巢癌,可有效改善客观缓解率、PFS和OS,降低miR-17-5p和HK10水平,但可增加高血压、蛋白尿的发生风险。

人乳腺癌细胞株KLK5 mRNA的表达及雌激素的调节作用

目的探讨雌激素对雌激素受体阳性人乳腺癌细胞株MCF-7和B37组织激肽释放酶5(KLK 5)mRNA的表达水平,以及雌激素对KLK5 mRNA表达水平的影响。方法分别取生长良好的MCF-7和B37细胞,在不同浓度的雌激素(17-βE2)存在下培养72小时后,收集细胞,提取总RNA,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应,检测KLK5 mRNA表达水平及变化。结果在未经刺激的乙醇对照组,MCF-7细胞KLK5 mRNA的相对表达水平(KLK5 mRNA/GAPDH mR-NA)为(3.23±0.51)×10-5,B37细胞KLK5 mRNA表达水平为(3.13±0.62)×10-4。B37细胞KLK5 mRNA表达水平高于MCF-7细胞。当17-βE2浓度10-11mol/L以下时,MCF-7和B37细胞中KLK5 mRNA表达水平与乙醇对照组无明显差异(P<0.05)。随17-βE2浓度的增高,MCF-7和B37细胞中KLK5 mRNA的表达呈递增趋势,各组与乙醇对照组相比差异有显著意义(P<0.01)。结论雌激素对人乳腺癌细胞株MCF-7和B37细胞的KLK5 mRNA表达有剂量依赖的上调作用。

ST段抬高型心肌梗死患者血运重建前后血清生成素Ⅱ组织激肽释放酶1水平变化及与预后的关系

目的探讨直接经皮冠状动脉介入(PCI)术前、术后血清血管生成素Ⅱ(AngⅡ)、组织激肽释放酶1(KLK1)水平变化以及对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者6个月内发生主要不良心血管事件(MACE)的预警价值.方法前瞻性选择2018年1月至2019年3月在广州市第一人民医院接受直接PCI术的STEMI患者220例,记录术前5 min和术后24 h血清AngⅡ和KLK1水平,随访6个月,记录MACE发生情况.结果与术前相比,STEMI患者血清AngⅡ总体水平(3.15±0.97)μg/L降低,而血清KLK1总体水平(27.97±12.86)ng/L升高(P<0.05).术前和术后血清AngⅡ水平与Gensini评分均呈正相关性(r=0.578,0.337,P<0.05),且随着心肌梗死面积增加术前血清AngⅡ增加(P<0.05).术前血清KLK1水平与Gensini评分具有负相关性(r=-0.346,P<0.05);且随着心肌梗死范围的扩大血清KLK1水平逐渐降低(P<0.05).随访6个月,MACE组患者术后血清AngⅡ降低率和KLK1升高率分别为(-29.14±17.52)%、(33.46±14.51)%,高于非MACE组患者(P<0.05).术后血清AngⅡ降低率(OR=6.895,95%CI 2.178~13.994)和KLK1升高率(OR=19.165,95%CI 2.469~36.883)是MACE发生的独立影响因子(P<0.05).经受试者工作特征(ROC)曲线分析,术后AngⅡ联合KLK1变化率对术后6个月发生MACE预测的ROC曲线下面积(AUC)为0.913(95%CI0.837~0.990).结论动态观察血清AngⅡ和KLK1水平变化,对于STEMI患者PCI术后6个月MACE的发生风险有一定的预测价值.

人类组织激肽释放酶基因14与卵巢癌研究进展

人类组织激肽释放酶14属于人类组织激肽释放酶家族中的一员,由人类组织激肽释放酶基因14编码,定位于人类染色体19q13.3-13.4上,受甾体类激素调节,其功能可能有降解胶原IV等细胞外基质作用,但具体尚不十分清楚。部分研究表明人类组织激肽释放酶基因14与卵巢癌的生长、转移和浸润有关,对卵巢癌的早期诊断、临床监测和判断预后具有一定价值。

人组织激肽释放酶6在肿瘤的表达及其预期诊断价值

激肽释放酶相关肽酶6(kallikrein-related peptidase 6,KLK6)由人组织激肽释放酶基因6编码而成,是一种含有223个氨基酸残基的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶。研究发现,KLK6在卵巢癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、结肠癌等恶性肿瘤的体液和组织中异常表达,可能具有一定的诊断和预后价值。

人类组织激肽释放酶基因6与卵巢癌研究进展

人类组织激肽释放酶基因6(human tissue kallikreins gene6,KLK6)是组织激肽释放酶基因家族成员之一,位于人类染色体19q13.3-13.4上,编码人类组织激肽释放酶6(human tissue kallikreins,hK6)。近年发现hK6广泛存在于人体组织和体液中,与卵巢癌的生长、转移和浸润有关,hK6过度表达与卵巢癌患者较短存活期相关,可作为一种新的肿瘤标志物,对卵巢癌的早期诊断、临床监测和预后判断有一定价值。

雌孕激素对人卵巢癌细胞KLK5 mRNA表达和增殖的影响

目的探讨雌孕激素对其受体阳性人卵巢癌HO8910细胞中组织激肽释放酶5(KLK5)基因mRNA表达的调控。方法取对数生长期的HO8910细胞,雌激素组分别加入10-10、10-9、10-8、10-7mol/L的17-β雌二醇(17-βE2),孕激素组分别加入10-7、10-6mol/L的黄体酮(P),对照组加入无水乙醇,培养72h。用实时荧光定量逆转录PCR检测各实验组和对照组中KLK5mRNA表达变化。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖。结果作用72h后,17-βE2各实验组(10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)HO8910细胞KLK5mRNA水平均高于乙醇对照组(P<0.01);P各实验组(10-7、10-6mol/L)HO8910细胞KLK5mRNA水平均低于乙醇对照组(P<0.01)。经MTT检测17-βE2各实验组HO8910细胞光吸收度A值与乙醇对照组相比明显增加(P<0.01);P各实验组细胞光吸收度A值与乙醇对照组相比明显降低(P<0.01)。结论雌激素对KLK5mRNA的表达具有上调作用,同时能促进卵巢癌HO8910细胞的增殖;而孕激素作用正相反。

激肽释放酶与特应性皮炎的关系研究进展

特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种反复发作的皮肤炎症性疾病,其发病机制复杂,与遗传、免疫、环境等因素有关。研究表明激肽释放酶5(kallikrein5,KLK5)和激肽释放酶7(kallikrein7,KLK7)在AD患者的表皮中表达上调,且激肽释放酶的抑制剂LEKTI(lympho-epithelial Kazal-type-related inhibitor,LEKTI)表达水平降低,表明激肽释放酶KLK5,KLK7可能与特应性皮炎的发病有关。

组织激肽释放酶相关肽酶的作用和治疗潜力的研究进展

组织激肽释放酶家族由15种分泌型丝氨酸蛋白酶组成,是由人类基因组中最大的蛋白酶基因簇编码。在过去10年间,关于激肽释放酶的底物、内源性抑制剂以及在体内功能方面的研究已取得巨大进步。研究表明,这些蛋白酶在不同组织中具有病理生理学作用,并且目前认为激肽释放酶是研发气道、心血管、牙齿、皮肤和肿瘤疾病新型药物的潜在靶点。因此,阐述激肽释放酶生理功能和病理意义方面认识的新进展,并了解鉴定激肽释放酶抑制剂中的进步,有助于我们在特定疾病环境下更好地靶向激肽释放酶。

结直肠癌组织KLK5 mRNA表达及其与临床病理参数的关系

目的对正常结直肠组织和癌组织KLK5 mRNA进行定量,并分析其表达与部分临床病理特征的关系。方法应用荧光实时PCR(RT-PCR)技术检测51例结直肠癌切除的癌组织及相应正常组织中KLK5基因mRNA的表达。结果67%(33/51)的患者结直肠癌组织可检测到KLK5 mRNA表达。KLK5基因表达与淋巴结转移和临床分期显著相关(P<0.05)。结论KLK5基因在结直肠癌组织中为异常高表达,并与淋巴结转移和临床分期显著相关。

医用保湿剂对老年皮肤瘙痒症患者的疗效及对鳞屑中CE、KLK5水平的影响

目的分析医用保湿剂治疗老年皮肤瘙痒症(SP)患者的临床疗效及对鳞屑中不成熟角质套膜(CE)、人组织激肽释放酶5(KLK5)水平的影响。方法选取2018年1月至2019年8月沧州市人民医院收治的78例SP患者作为研究对象,根据治疗方法不同分为观察组和对照组,每组39例。其中,对照组予以咪唑斯汀和安慰剂(甘油)治疗,观察组予以咪唑斯汀和医用保湿剂(透明质酸修护生物膜)治疗。比较治疗前后两组患者的瘙痒情况(瘙痒面积、瘙痒程度及瘙痒持续时间)、皮肤屏障功能[CE、KLK5、经皮水分丢失(TEWL)及表皮含水量]变化和临床疗效,以及皮肤病生活质量指数(DLQI)评分变化。结果不同时点间、组间瘙痒面积、瘙痒程度及瘙痒持续时间评分的主效应差异有统计学意义(P<0.01),且组间和时点间存在交互作用(P<0.01),治疗4周后两组瘙痒面积、瘙痒程度及瘙痒持续时间评分明显降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。不同时点间、组间不成熟CE比例、KLK5、TEWL及表皮含水量水平的主效应差异有统计学意义(P<0.01),且组间和时点间存在交互作用(P<0.01),治疗4周后两组不成熟CE比例及TEWL水平低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);KLK5及表皮含水量水平高于治疗前,且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组的总有效率为94.87%(37/39),对照组为79.49%(31/39),观察组的总有效率高于对照组(χ^(2)=5.638,P=0.040)。不同时点间、组间DLQI评分的主效应差异有统计学意义(P<0.01),且组间和时点间存在交互作用(P<0.01),治疗4周、治疗8周后两组DLQI评分均下降,且观察组低于对照组(P<0.05)。结论采用医用保湿剂治疗SP患者临床疗效显著,可明显改善其临床症状及皮肤屏障功能,提高患者生活质量。

大肠腺癌组织中KLK5 mRNA的表达及临床意义

目的探讨激肽释放酶5(KLK5)在大肠腺癌发生、发展中的作用。方法选择大肠腺癌标本74份(观察组)及正常结直肠组织标本30份(对照组),RT-PCR法检测两组KLK5 mRNA的表达,并分析其与大肠腺癌临床病理参数的相关性。结果观察组及对照组KLK5 mRNA阳性率分别为78.4%、6.7%,P<0.01。KLK5 mRNA阳性表达与大肠腺癌临床分期、淋巴结转移及其他脏器转移、术后复发、生存时间相关,P均<0.05。结论 KLK5mRNA表达测定可作为判断大肠腺癌的恶性程度、估价预后的客观可靠指标。

岳氏抑肝和胃汤对胃食管反流患者肠胃动力学及血清激肽释放酶5、胃蛋白酶原水平的影响

目的探究岳氏抑肝和胃汤对胃食管反流(gastroesophageal reflux disease,GERD)患者肠胃动力学及血清激肽释放酶(kaliikrein,KLK)5、胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)水平的影响。方法将北京中医药大学东直门医院2018年4月至2020年1月中医内科收治的肝胃不和型胃食管反流病患者120例作为研究对象,按照随机数字表法分为观察组及对照组,各60例。观察组采用岳氏抑肝和胃汤治疗,对照组采用雷贝拉唑钠肠溶片治疗。两个疗程后,对两组患者的临床疗效,治疗前后中医症候积分、血清胃动素(motilin,MTL)、胃泌素(gastrin,GAS)、KLK5及PG水平及不良反应进行比较。结果治疗后,观察组临床有效率高于对照组(93.34%vs 81.67%,P<0.05)。治疗后,两组中医证候反酸、烧心、嗳气及胸骨后疼痛积分均有所改善,观察组改善优于对照组(P<0.05),且治疗后,观察组中医证候平均积分低于对照组,差异具有统计学意义(Z=-2.096,P=0.037)。治疗后,观察组MTL水平明显升高,且高于对照组,GAS水平明显降低,且低于对照组(P<0.05);治疗后,观察组血清KLK5水平明显下降,且低于对照组,PG水平明显上升,且高于对照组(P<0.05)。观察组不良反应发生率为3.33%,低于对照组的15.00%(P<0.05)。结论岳氏抑肝和胃汤治疗胃食管反流疗效更显著,安全有效。

KLK7基因与妇科肿瘤的研究进展

KLK7基因(PRSS6)是人组织激肽释放酶家族的一个新成员,编码人角化层糜蛋白酶(SCCE,hK7),主要在上皮的角化层细胞中表达,参与皮肤脱屑过程。近来发现KLK7基因在人体许多组织、器官中都有表达,并与肿瘤细胞的生长、浸润、转移相关,尤其在妇科肿瘤领域,可作为判断早期转移和预后的标记物,也为治疗提供了新方向。