胎盘生长因子、可溶性fms样酪氨酸激酶-1及糖基化纤连蛋白在子痫前期预测中的应用价值

目的:探讨胎盘生长因子(placental growth factor,PLGF)、可溶性fms样酪氨酸激酶-1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,SFLT-1)和糖基化纤连蛋白(glycosylated fibronectin,GLYFN)检测对子痫前期的预测价值。方法:选择在无锡市妇幼保健院就诊的188例孕妇,分154例正常孕妇(对照组)和34例子痫前期患者(子痫组),应用免疫荧光法分别检测其在孕16~18周血清中PLGF、SFLT-1和GLYFN的浓度,比较子痫前期组和对照组各标志物的水平,并使用受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)对3种标志物的预测价值进行效能评估。结果:在妊娠中期,子痫前期组血清PLGF浓度低于对照组,SFLT-1及GLYFN浓度均高于对照组,3种标志物的差异均有统计学意义(3指标P=0.000)。95%置信区间的ROC曲线下面积(areas under the ROC curve,AUC)为,PLGF为0.941(0.907~0.974),SFLT-1为0.881(0.800~0.962),GLYFN为0.951(0.918~0.985),联合指标SFLT-1和GLYFN、3项指标联合检测在ROC曲线下面积(areas under the ROC curve,AUC)分别为0.968、0.986。结论:PLGF、SFLT-1、GLYFN 3种标志物水平在对照组和子痫前期组均存在明显差异,对子痫前期的发病具有一定的预测价值,SFLT-1联合PLGF、SFLT-1联合GLYFN、3项指标联合检测对子痫前期的预测价值高于任一单项指标。

血清凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物、可溶性fms样酪氨酸激酶-1水平与脓毒症患者病情进展和预后的关系

目的探讨血清凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物(TAT)、可溶性fms样酪氨酸激酶-1(sFlt-1)水平与脓毒症患者病情进展和预后的关系。方法选取2021年1月至2023年5月该院收治的脓毒症患者117例作为观察组,另选取同期在该院的体检健康志愿者42例作为对照组。脓毒症患者根据病情程度分为普通脓毒症组(60例)、脓毒性休克组(57例)。观察组根据治疗90 d后的预后情况分为死亡组和存活组。采用酶联免疫吸附试验法检测血清TAT、sFlt-1水平。通过Logistic回归分析脓毒症患者死亡的影响因素并建立基于TAT、sFlt-1的脓毒症患者预后预测模型,受试者工作特征(ROC)曲线分析指标对脓毒症患者死亡的预测价值。结果观察组血清TAT[(12.59±5.35)ng/mL]、sFlt-1[(28.58±4.05)ng/mL]水平高于对照组[分别为(2.65±0.88)ng/mL、(16.50±3.60)ng/mL],差异有统计学意义(t=19.386、17.065,P<0.001)。脓毒性休克组血清TAT[(15.09±4.99)ng/mL]、sFlt-1[(30.45±3.30)ng/mL]水平高于普通脓毒症组[分别为(10.22±4.57)ng/mL、(26.81±3.92)ng/mL],差异有统计学意义(t=5.503、5.429,P<0.001)。死亡组脓毒性休克占比、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、血乳酸、降钙素原、TAT、sFlt-1水平高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒性休克、SOFA评分增加、APACHEⅡ评分增加和血乳酸、TAT、sFlt-1升高为脓毒症患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,预测模型预测脓毒症患者死亡的曲线下面积(AUC)为0.947,大于病情程度、SOFA评分、APACHEⅡ评分、血乳酸、TAT、sFlt-1单独预测的AUC(Z=6.525、4.414、4.835、3.787、3.956、3.507,P<0.001)。结论脓毒症患者血清TAT、sFlt-1水平升高与病情进展和预后不良密切相关,且基于TAT、sFlt-1建立的预测模型对脓毒症患者死亡有较高的预测价值。

和血柔肝方含药血清通过鞘氨醇激酶-1对肝星状细胞增殖与凋亡的作用

目的:和血柔肝方(HXRGF)含药血清调节鞘氨醇激酶-1(SphK1)对肝星状细胞(HSC)增殖与凋亡的作用。方法:采用Resistin处理HSC-T6细胞,建立纤维化HSC模型,采用LV-rSphK1-OE、LV-rSphk1-shRNA慢病毒方法构建SphK1过表达、低表达稳转细胞株,运用实时定量PCR、WB检测TGF-β、α-SMA、Col I、FN、Smad、SphK1mRNA及蛋白的表达、CCK8实验检测细胞活力、AnnexinV-APC/7-AAD流式细胞学检测细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,MF-HSC-T6细胞中可见TGF-β、α-SMA、Col I、FN、SphK1mRNA及蛋白表达水平升高,Smad mRNA水平降低(P<0.01);HSC-T6 SphK1过表达细胞株中SphK1及相关纤维化标志物的表达水平升高(P<0.01);HSC-T6 SphK1低表达细胞株中TGF-β、α-SMA、Col I、FN mRNA等纤维化相关标志物降低,Smad mRNA水平升高(P<0.01)。与模型组比较,中药复方HXRGF含药血清干预后,可见MF-HSC T6 SphK1mRNA及蛋白表达水平降低,并同时伴有α-SMA、Col I、FN表达水平的下降(P<0.01),HSC细胞增殖率下降(110.85%);shRNA-SphK1转染组细胞增殖率下降,凋亡率(12.14%)升高(P<0.01);HSC-T6 SphK1低表达组细胞凋亡率(16.48%)升高(P<0.01)。结论:SphK1可作为肝纤维化潜在治疗靶点。HXRGF干预通过抑制SphK1表达,下调TGF-β、α-SMA等促纤维化因子的表达水平,抑制活化的HSC增殖,诱导HSC凋亡,缓解肝纤维化。

建立基于磁微粒化学发光免疫分析法检测血清可溶性fms样酪氨酸激酶-1的方法及初步性能评价

目的基于磁微粒化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)建立一种定量检测人血清中可溶性fms样酪氨酸激酶-1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)含量的方法,并对其性能进行初步评价。方法采用“三明治”夹心法,血清中的sFlt-1与生物素化sFlt-1单克隆抗体和吖啶酯标记的sFlt-1单克隆抗体反应,形成生物素化抗体-抗原-吖啶酯标记抗体的免疫复合物。通过生物素与链霉亲和素的反应,免疫复合物被链霉亲和素包被的磁微粒捕获,标记在免疫复合物上的吖啶酯在碱性H2O2条件下产生化学发光。利用免疫复合物的光强度计算血清中sFlt-1的浓度,优化抗体浓度,建立检测sFlt-1的磁微粒CLIA方法。对该方法的灵敏度、精密度、线性范围、抗干扰、准确度及方法学比对等性能进行评价。收集2022年2~8月宁波鄞州中医院孕妇血清样本100份,应用建立的方法进行检测,结果与罗氏电化学发光法检测结果进行比较。结果最终确定试剂中生物素化抗体的最佳浓度为2μg/ml,吖啶酯标记抗体的最佳浓度为100 ng/ml。该方法空白限为1.67 pg/ml;批内及批间精密度变异系数(variable coefficient,CV)均<5%;线性范围为8.9~81206 pg/ml;血红蛋白浓度不大于500mg/dl,胆红素浓度不大于20mg/dl,乳糜浓度不大于1450 FTU,生物素浓度不大于50μg/L时,对检测结果不产生明显干扰;添加回收率为98%;与罗氏电化学发光法比对的相关系数r2为0.9953,两组数据之间差异具有统计学意义(P=0.0003)。结论建立的方法具有良好的初步性能,进一步开发后可应用于子痫前期的辅助筛查。

血管内皮细胞生长因子、可溶性胸苷激酶-1对乙型病毒性肝炎治疗效果的预测

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)、可溶性胸苷激酶-1(TK-1)对乙型病毒性肝炎(HBV)治疗效果的预测价值。方法:选取2021年2月~2022年2月厦门医学院附属第二医院收治的130例HBV患者为治疗组,另选取同期体检的130名健康人为对照组。根据治疗效果,将治疗组分为有效组和无效组,比较治疗组与对照组、有效组和无效组的肝功能、免疫功能以及VEGF、TK-1水平的差异,探讨VEGF、TK-1与肝功能、免疫功能的相关性,通过受试者工作特征(ROC)曲线评估不同指标对HBV治疗效果的预测价值。结果:治疗组VEGF、TK-1水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IgA、IgG、IgM均显著高于治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);经治疗后,两组VEGF、TK-1、HBV DNA均有显著改善,且有效组改善程度较无效组更为显著,差异有统计学意义(P<0.05);经治疗后,有效组丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平均明显低于无效组,差异有统计学意义(P<0.05);无效组免疫功能显著低于有效组,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性分析显示,VEGF、TK-1与CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IgA、IgG、IgM呈负相关,与AST、TBIL、ALT、HBV DNA呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);对于HBV患者治疗效果的预测,VEGF检测与TK-1检测联合的ROC曲线下面积明显高于单项VEGF检测与单项TK-1检测结果,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:VEGF和TK-1的表达水平与HBV患者的肝功能和免疫功能显著相关,VEGF和TK-1对HBV的治疗效果有显著的预测价值。

Doublecortin样激酶-1在胃癌组织中的表达及其与预后关系

目的研究doublecortin样激酶-1(DCLK1)在胃癌组织的表达情况及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法收集北京协和医院2002年7月至2006年12月收治的122例胃癌根治患者的临床病理资料及标本,采用免疫组织化学法检测DCLK1在胃癌及癌旁组织中的表达水平,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Cox比例风险模型进行单因素及多因素生存分析。结果 122例胃癌患者中,51例存在DCLK1高表达。DCLK1与患者淋巴结转移(P=0.029)、脉管癌栓(P=0.029)密切相关。Kaplan-Meier分析结果显示,DCLK1高表达者的5年总生存率和5年无病生存率分别为39.0%和37.0%,明显低于DCLK1低表达者的65.8%和64.5%(P均=0.001)。Cox模型分析结果显示,DCLK1是胃癌患者总生存时间和无病生存时间的独立预后因素(P均=0.036)。结论 DCKL1高表达与胃癌淋巴结转移和脉管癌栓相关,是胃癌患者预后不良的一个潜在分子指标。

3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1激活AGC家族激酶的机制研究进展

3磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(3phosphoinositidedependentproteinkinase1,PDK1PDPK1)是蛋白激酶B(proteinkinaseB,PKBCAKT)的上游激酶,通过与3,4,5三磷酸磷脂酰肌醇[PtdIns(3,4,5)P3]作用激活相邻的PKB分子.同时,PDK1被称为AGC激酶的掌管者(master),能够激活包含PKB在内的一系列的AGC激酶家族成员.PDK1磷酸化这些激酶的保守区域Tloop区,使它们充分激活,从而调节细胞代谢,生长,扩散,生存,抗凋亡等诸多生理过程.本文就PDK1调节AGC激酶的活性,与功能上命名的PDK2的关系,PDK1分子自身的调节,PH结构域对自身活性及AGC激酶活性的影响,PDK1定位以及作为一个新药物靶标等方面做了综述.

吴茱萸碱对人胃癌SGC7901细胞增殖、侵袭和保罗样激酶-1基因表达的影响

目的:观察中草药提取物吴茱萸碱(evodiamine)对人胃癌细胞侵袭的影响及可能的机制。方法:采用不同浓度的吴茱萸碱处理人胃癌SGC7901细胞后,以软琼脂集落培养试验检测癌细胞锚着不依赖性增殖,以Boyden小室模型方法检测癌细胞侵袭能力;分别以荧光实时定量RT-PCR和免疫荧光方法检测癌细胞保罗样激酶-1(polo-likekinase 1,PLK1)基因表达水平。结果:胃癌SGC7901细胞经吴茱萸碱处理后,恶性增殖和穿膜细胞数均明显下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。吴茱萸碱处理组PLK1 mRNA和蛋白水平均明显下调,且呈时间和浓度依赖性(P<0.05)。结论:吴茱萸碱可明显抑制胃癌细胞侵袭力,其机制可能与下调PLK1基因表达有关。

鞘氨醇激酶-1、C-反应蛋白对急性胰腺炎严重程度的预测价值

目的比较C-反应蛋白(CRP)和鞘氨醇激酶-1(SphK1)在预测急性胰腺炎(AP)严重程度方面的价值。方法选取2012年12月—2013年7月收治的30例AP患者,分为轻型AP(MAP)组17例和重型AP(SAP)组13例,另外纳入10例健康者作为健康对照组。AP患者在症状发生后、健康者在被选入组后48 h、72 h、5 d、7 d时分别检测血清CRP、外周血白细胞中SphK1 mRNA及其活性。结果 MAP组和SAP组患者血清CRP的水平、外周血白细胞中SphK1 mRNA、SphK1活性4个时间都高于健康对照组(P<0.05),但血清CRP的含量在MAP组和SAP组之间均无统计学差异(P>0.05)。48 h、72 h、5 d时,SAP组外周血白细胞中SphK1 mRNA、SphK1活性都高于MAP组(P<0.05);7 d时SAP组和MAP组的SphK1 mRNA、SphK1活性均无统计学差异(P>0.05)。在48 h时,SphK1的诊断灵敏度和诊断准确性最高,而且ROC曲线下面积高达0.946。结论在早期预测AP严重程度方面,与血清CRP相比,测定外周血白细胞中的SphK1是一个更好的方法。

鞘氨醇激酶-1调控ERK和NF-κB通路促进HT-29细胞的增殖和侵袭

目的探讨鞘氨醇激酶-1(Sphk1)对结肠癌HT-29细胞的增殖、凋亡和侵袭转移的影响及其作用机制。方法采用(12-)十四酸佛波酯(-13-)乙酸盐(PMA)诱导人结肠癌HT-29细胞Sphk1的活化和表达,N,N-二甲基鞘氨醇(DMS)抑制Sphk1的活化和表达;采用MTT法测定细胞的增殖,流式细胞术分析细胞的凋亡,γ-32P-ATP掺入法检测Sphk1的活性,Western杂交检测蛋白的表达,Transwell小室模型观察细胞迁移和侵袭能力的变化,ELISA法检测细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂(uPA)的分泌。结果 PMA和DMS能分别有效地诱导和抑制HT-29细胞Sphk1活性和蛋白的表达;同时,PMA能促进细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞的凋亡;DMS则抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞的凋亡。诱导Sphk1的活化以及表达可促进细胞ERK、p-ERK和NF-κBp65的蛋白表达以及MMP-2、MMP-9和uPA的分泌,而抑制Sphk1则抑制ERK、p-ERK和NF-κBp65的蛋白表达以及MMP-2、MMP-9和uPA的分泌。结论 Sphk1可能是通过激活ERK和NF-κB通路,上调MMP-2、MMP-9和uPA的分泌,从而促进结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞的凋亡。

丙酮酸脱氢酶激酶-1在人结肠癌中的表达及意义

目的检测丙酮酸脱氢酶激酶-I(pyruvate dehydrogenase kinase-I,PDK1)在人结肠癌组织和细胞中的表达。探讨抑制PDK1对结肠癌细胞活性的影响。方法应用RT-PCR、荧光定量PCR和免疫荧光法、Western blot检测结肠癌组织、癌旁组织以及4种人结肠癌细胞PDK1基因的表达情况。在PDK1抑制剂(dichloroacetate,DCA)的诱导下,通过MTT法观察结肠癌细胞活性。结果PDK1基因在结肠癌组织中表达较癌旁组织中高;在4种人结肠癌细胞中明显表达。抑制PDK1能抑制结肠癌细胞增殖活性,抑制效应随药物浓度而递增,其中90 mmol/L DCA的活性细胞率分别为(23.90±2.79)%、(5.90±1.31)%、(32.82±4.50)%和(29.72±3.03)%。结论PDK1基因在结肠癌组织和细胞中高表达,在癌旁组织中低表达,抑制PDK1明显抑制结肠癌细胞增殖活性,PDK1可望成为结肠癌有效治疗靶点。

吴茱萸碱抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及对细胞外信号调节激酶-1表达的影响

目的明确吴茱萸碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及对细胞外信号调节激酶-1(ERK-1)和丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响。方法贴壁法培养大鼠胸主动脉VSMC,MTT比色法测定吴茱萸碱对AngⅡ诱导大鼠VSMC增殖的抑制作用,Real-time PCR检测VSMC中增殖细胞核抗原(PCNA)、ERK-1和原癌基因c-myc m RNA的表达,Western blot检测VSMC中MKP-1蛋白的表达。结果吴茱萸碱0.1μmol/L和1.0μmol/L明显抑制AngⅡ(1.0μmol/L)诱导VSMC光密度值的增加(P<0.05,P<0.01),抑制AngⅡ上调ERK-1(P<0.01)、PCNA(P<0.05)和c-myc m RNA(P<0.05)的表达,上调MKP-1蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论吴茱萸碱明显抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,其机制与下调ERK m RNA、上调MKP-1蛋白的表达有关。

细胞质胸苷激酶-1联合癌胚抗原、cyfra21-1检测对非小细胞肺癌的诊断价值

目的探讨细胞质胸苷激酶(TK)-1联合癌胚抗原(CEA)、非小细胞癌相关抗原(cyfra21-1)检测在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断中的应用价值。方法检测60例NSCLC患者(NSCLC组)、30例良性肺疾病患者(良性肺疾病组)和30例健康体检者(正常对照组)血清中TK-1、CEA和cyfra21-1水平,并应用受试者工作特征曲线(ROC)对TK-1、CEA和cyfra21-1的诊断效能进行分析。结果 NSCLC组患者的血清TK-1、CEA和cyfra21-1水平均高于良性肺疾病组和正常对照组(P<0.05);良性肺疾病组患者血清TK-1、CEA和cyfra21-1水平高于正常对照组但无统计学差异(P>0.05);以良性肺疾病组为对照,血清TK-1、CEA和cyfra21-1的AUC分别为0.789 2、0.814 3和0.872 5,cyfra21-1的AUC最大,准确性最高;TK-1、CEA和cyfra21-1的诊断临界点分别为2.54 pmol/L、30.78 ng/L和28.74 ng/L;三者联合检测的敏感度为88%,特异性为94%。结论 TK-1、CEA和cyfra21-1对NSCLC有较好的诊断价值,以cyfra21-1最高;三者联合检测可大大增加NSCLC临床诊断的准确性。

NF-κB决定小鼠胎肝激酶-1基因启动子的基本活性

为克隆小鼠胎肝激酶-1(fetal liver kinase-1,FLK-1)基因上游启动子序列,并观察其不同截短片段在小鼠血管内皮细胞中的启动子活性,以小鼠全基因组为模板,通过PCR扩增方法获得-258^+299bp、-96^+299bp、-71^+299bp、-36^+299bp大小的FLK-1启动子片段,将其定向克隆入pGL3-Basic,构建荧光素酶报告基因载体,并制备NF-κB结合位点的突变或缺失体.在阳离子脂质体介导下,报告基因载体瞬时转染小鼠血管内皮细胞株SVEC4-10.结果发现,在小鼠血管内皮细胞中,各FLK-1启动子片段均有活性;-71^-36bp区存在FLK-1启动子的核心调控元件.针对该区域NF-κB结合位点进行突变或缺失,能导致启动子活性显著降低;凝胶电泳迁移率实验表明该区段能结合转录因子NF-κB.结果提示,成功克隆了在血管内皮细胞中具有活性的FLK-1上游启动子序列,NF-κB是决定其基本活性的重要转录因子,为进一步研究FLK-1基因的转录调控机制奠定了基础.

细胞外信号调节激酶-1、细胞周期蛋白D1表达与儿童急性白血病关系研究

目的探讨细胞外信号调节激酶_1(ERK1)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达与儿童急性白血病(AL)的关系。方法50例儿童AL(AL组)和26例AL完全缓解(AL_CR组)患儿为病例组,23例非肿瘤性疾病患儿为对照组,采用超敏SP免疫组织化学法,检测各组骨髓细胞中ERK1、cyclinD1的表达情况。结果AL组ERK1、cyclinD1阳性率分别为68.00%和56.00%,明显高于AL_CR组(3.85%,3.85%)和对照组(0,0)(P<0.01);高危AL患儿中阳性率分别为90.91%、86.36%,明显高于标危AL患儿(P<0.01);16例AL患儿化疗前ERK1、cyclinD1阳性率分别为75.00%、68.75%,化疗缓解后阳性率均为0(P<0.01);AL组中ERK1、cyclinD1表达相同(χ2=2.5,P>0.05)。结论AL患儿ERK1、cyclinD1表达率较高,可作为近期疗效的观察指标;ERK1与cyclinD1过度表达相同,可能在AL发生发展过程中有协同作用。

白介素受体相关激酶-1基因多态性与类风湿关节炎的相关性

目的探讨白介素受体相关激酶-1(IRAK1)rs3027898和rs1059703多态性性与类风湿关节炎(RA)易感性及临床参数的关系。方法收集RA患者123例和体检的220名健康对照者外周血标本,采用聚合酶链反应-连接酶检测反应(PCR-LDR)方法检测IRAK1 rs3027898和rs1059703基因多态性,收集并计算RA患者临床参数:发病年龄、性别、RF抗体、抗CCP抗体、RA疾病活动(DAS28≥3.2)、骨破坏和用药情况。结果 RA组IRAK1 rs3027898和rs1059703的基因型频率和等位基因频率与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RA患者IRAK1 rs3027898和rs1059703基因型与发病年龄、性别、RF抗体和抗CCP抗体阳性率、骨破坏阳性率均无相关性(P>0.05)。RA患者IRAK1 rs3027898基因型与RA疾病活动无相关性(P>0.05),RA患者IRAK1 rs1059703基因型与RA疾病活动存在相关性(P<0.05),携带CT+TT基因型RA患者疾病活动的风险是携带CC基因型RA患者4.243倍(P=0.023,OR=4.243,95%CI为1.223～14.715)。结论我国汉族人群中,IRAK1 rs3027898和rs1059703多态性与RA的易感性无关,但IRAK1 rs1059703多态性可能是RA患者疾病活动的一个遗传危险因素。

胸苷激酶-1在直肠癌患者血清中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨细胞质胸苷激酶-1(TK-1)在直肠癌患者血清中表达,分析其表达水平与临床病理特征之间的关系。方法回顾性分析了2008年12月—2012年12月在该院行手术治疗的60例直肠癌患者的临床资料,选择30例健康查体者为正常对照组,采用化学发光结合斑点杂交技术检测血清TK-1水平。结果直肠癌组、正常对照组血清TK-1水平分别为(2.96±0.99)pmol·L-1、(0.92±0.31)pmol·L-1,直肠癌组血清TK-1水平显示高于正常对照组,相比较差异有显著性(t=15.294,P<0.05)。肿瘤低分化组血清TK-1水平显著高于肿瘤高中分组(t=8.412,P<0.05),肿瘤≥6 cm组血清TK-1水平显著高于肿瘤<6 cm组(t=9.865,P<0.05),TNM分期Ⅲ～Ⅳ期组血清TK-1水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期组(t=11.356,P<0.05),发生淋巴结转移组血清TK-1水平显著高于淋巴结未转移组(t=9.842,P<0.05)。结论 TK-1在直肠癌患者血清中呈高表达,血清TK-1的表达对直肠癌的诊断、肿瘤的侵袭和转移评估有一定临床意义。

子宫内膜癌鞘氨醇激酶-1与1-磷酸鞘氨醇的表达和意义

目的探讨鞘氨醇激酶-1(sphingosine kinase 1,SphK1)与1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)在子宫内膜癌的表达和意义。方法收集正常子宫内膜和子宫内膜癌患者血浆,行子宫全切手术的子宫内膜癌和子宫肌瘤旁组织,ELISA法检测血浆或组织匀浆液S1P的表达,Western blot法检测组织SphK1的表达,组织SphK1激酶活性定量检测试剂盒测定SphK1酶活性。结果和正常对照组相比,子宫内膜癌患者血浆S1P的水平和组织S1P的表达明显增加(P<0.01),子宫内膜癌SphK1酶活性约是正常子宫组织的2.6倍。结论被激活的SphK1/S1P信号通路可能参与子宫内膜癌的发生发展。

子痫前期孕妇血清STOX1可溶性Fms样酪氨酸激酶-1水平及意义

目的:研究子痫前期孕妇血清STOX1、可溶性Fms样酪氨酸激酶-1(sFlt-1)水平及意义。方法:选择本院2018年2月到2020年2月90例子痫前期孕妇作为研究对象,根据病情分为轻度组45例和重度组45例,另选择同期的40例健康孕妇作为对照组。比较三组的心率、血压[收缩压(SBP)和舒张压(DBP)]、平均动脉压(MAP)、脐动脉收缩末期峰值与舒张末期峰值比(S/D)、24h蛋白尿、血小板计数、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血肌酐(Scr)、胎盘生长因子(PLGF)、STOX1、sFlt-1,并用Pearson相关性分析子痫前期孕妇血清STOX1、sFlt-1与各指标的关系。结果:对照组的心率、SBP、DBP、MAP、S/D、24h蛋白尿、ALT、AST、Scr、STOX1、sFlt-1显著低于轻度组和重度组,轻度组的心率、SBP、DBP、MAP、S/D、24h蛋白尿、ALT、AST、Scr、STOX1、sFlt-1显著低于重度组;对照组的血小板计数、PLGF显著高于轻度组和重度组,轻度组的血小板计数、PLGF显著高于重度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析,STOX1与心率、SBP、DBP、MAP、S/D、24h蛋白尿均呈正相关(P<0.05),与PLGF呈负相关(P<0.05),与血小板计数、ALT、AST、Scr均无相关性(P>0.05);sFlt-1与心率、SBP、DBP、MAP、S/D、24h蛋白尿均呈正相关(P<0.05),与PLGF呈负相关(P<0.05),与血小板计数、ALT、AST、Scr均无相关性(P>0.05)。结论:子痫前期孕妇血清STOX1、sFlt-1水平随病情进展而升高,临床可结合SBP、DBP、MAP、24h蛋白尿、PLGF的变化,对孕妇的病情进行预测和控制,以延长孕周或及时终止妊娠。

鞘氨醇激酶-1激活ERK通路介导人结肠癌细胞株LoVo侵袭与迁移的实验

目的研究Sphk1对人结肠癌LoVo细胞侵袭与迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法将人结肠癌LoVo细胞分成Sphk1激活组,Sphk1抑制组,空白对照组。以Phorbol 12-myristate 13-ace-tate(PMA)为Sphk1激活剂(终浓度为100 nM),N,N-dimethyl-D-eryt-hro-sphingosine(DMS)为Sphk1抑制剂(终浓度为50μM),NaCl(终浓度为0.9%)为空白试剂处理LoVo细胞24 h后,用Transwell Boyden小室模型测定LoVo细胞的相对侵袭率与迁移率;用Western blot方法测定细胞Sphk1、ERK1/2与p-ERK1/2蛋白水平的变化;用ELISA方法检测细胞培养上清中MMP-2、MMP-9及uPA的蛋白含量;用半定量RT-PCR检测细胞中MMP-2、MMP-9和uPA的mRNA水平。结果 Sphk1激活剂可促进LoVo细胞侵袭与迁移,同时明显增强LoVo细胞中Sphk1、ERK1/2及p-ERK1/2的蛋白表达,并促进MMP-2、MMP-9及uPA的mRNA表达与蛋白分泌。Sphk1抑制剂则抑制LoVo细胞侵袭与迁移,同时抑制Sphk1、ERK1/2与p-ERK1/2的蛋白表达,并抑制MMP-2、MMP-9及uPA的mRNA表达与蛋白分泌。结论 Sphk1可促进人结肠癌细胞株LoVo细胞的侵袭与迁移,其机制可能与激活ERK1/2信号通路从而促进MMP-2、MMP-9及uPA mRNA表达与蛋白分泌有关。