大鼠自体原位肝移植中逆行灌注法对急性肺损伤的影响

目的探讨大鼠自体原位肝移植术中经下腔静脉逆行灌注与经门静脉顺行灌注法对急性肺损伤的影响。方法 Sprague-Dawley(SD)大鼠75只随机分成逆行灌注组、顺行灌注组、假手术组,建立大鼠自体原位肝移植逆行灌注、顺行灌注和假手术模型,各组于术后6h、12h、24h分别随机处死6只大鼠,测定肺干/湿重量比值、肺组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,行肺组织病理学检查。结果与假手术组比较,逆行灌注组和顺行灌注组术后肺干/湿重量比值变小,肺组织MPO活性、MDA含量、TNF-α含量增加,以术后6h与12h明显。与顺行灌注组比较,逆行灌注组术后6h、12h的肺干/湿重量比值较高,而肺组织MPO活性、MDA含量较低,差异有统计学意义(均为P<0.05);术后24h两组间在上述指标差异无统计学意义(均为P>0.05);逆行灌注组肺组织TNF-α含量在术后6h、12h、24h均显著降低,两组间差异有统计学意义(均为P<0.05)。肺组织苏木素-伊红染色:逆行灌注组、顺行灌注组均表现不同程度的肺泡结构破坏,肺泡间隔增厚,小静脉、毛细血管充血、淤血,炎症细胞浸润。其中术后6h、12h表现较重,术后24h较轻;同时显示逆行灌注组肺组织病理损伤较顺行灌注组明显减轻。结论大鼠自体原位肝移植术中用顺行灌注或逆行灌注,术后早期均存在急性肺损伤,其中术后6h和12h损伤较严重,术后24h肺损伤减轻;逆行灌注造成的急性肺损伤程度比顺行灌注要轻。

灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质的研究

目的探讨灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质(ACM)支架的可行性。方法取12周龄的Wistar大鼠的肾脏,保留输尿管、肾静脉及肾动脉,沿肾动脉插入留置针建立灌注通道。灌注压强为100cmH2O,依次灌注肝素化PBS溶液,1%十二烷基磺酸钠(SDS)溶液,去离子水,1%TritonX-100溶液以及含青链霉素的PBS溶液。经脱细胞处理后,采用HE染色法光镜观察及扫描电镜观察支架微观结构,DAPI染色法荧光显微镜观察残留细胞核成分。结果所有经SDS及TritonX-100联合处理后的脱细胞基质支架在HE染色光镜观察下未发现细胞残留,扫描电镜观察仅见基膜及胶原蛋白等细胞外基质形成网状结构而无细胞,DAPI染色荧光显微镜观察未见DAPI与细胞核结合后所发出的强荧光。结论灌注法用于制备大鼠全肾脏脱细胞基质支架,简便可靠,该支架无细胞成分残留,是一种理想的细胞支架。

灌注法制备脉冲给药装置的新型非渗透性胶囊体

目的制备一种用于脉冲给药装置的新型非渗透性胶囊体,优化制备工艺并考察处方对其渗透行为的影响,研究其药剂学性质。方法灌注法制备非渗透性胶囊体,通过HPLC法测定渗透介质中药物磷酸川芎嗪的浓度,考察影响药物通过胶囊体渗出量的影响因素。结果用11%的45 cps乙基纤维素(EC)溶液制备的胶囊体可在24 h内保持非渗透能力。随着制备胶囊体的EC粘度级别的增加和EC溶液浓度的增大,制得的EC胶囊体的非渗透能力逐渐增大。结论调整EC黏度级别和EC浓度,用灌注法可制备在一定时间内保持非渗透的合适胶囊体,为进一步制备用于时辰治疗的脉冲释药装置奠定基础。

复方大黄配伍抗生素腹腔灌注法治疗急性出血坏死性胰腺炎的实验研究

目的 :实验观察大黄复方与抗生素配伍腹腔灌注对急性出血坏死性胰腺炎 (ANP)的作用。方法 :制备ANP模型 ,随机分组后分别以腹腔灌注给药 ,以ELISA法及鲎试验法检测血浆或组织中白细胞介素 6 (IL 6 )和内毒素脂多糖 (LPS)水平。结果 :各治疗组IL 6、LPS水平均明显低于实验对照组 (非治疗组 )。结论 :大黄复方配伍头孢哌酮钠腹腔灌注法对ANP大鼠内毒素和炎性介质的产生有一定的抑制作用。

原位胶原酶循环灌注法分离猪肝细胞

本文建立了原位胶原酶循环灌注分离猪肝细胞方法并与离体两步胶原酶灌注法进行了比较。猪门静脉和下腔静脉分剐插管,先用D-Hanks液灌注,再采用自制的循环灌流装置进行胶原酶循环原位灌注分离猪肝细胞,分离后的肝细胞以5×105/ml培养,观察分离和培养7d的肝细胞产量、活率、蛋白质合成功能、葡萄糖合成功能和LDH含量。同时测定离体组的上述指标。研究结果表明采用原位胶原酶循环灌注法每克肝组织分离获得的肝细胞总量为5.1×107,肝细胞活率98.6％,培养7d肝细胞活率89.5％。肝细胞的蛋白质合成功能在培养7d中保持稳定;葡萄糖合成功能从1d时1.05±0.15nmol/cell下降到3d时0.74±0.09nmol/cell;LDH含量在3d较高。原位胶原酶循环灌注法分离的猪肝细胞总量、活率高于离体法;蛋白质合成功能和葡萄糖合成功能强于离体法。因此,原位胶原酶循环灌注分离猪肝细胞方法可获得大量高活率和良好功能的猪肝细胞。

灌注法制备器官去细胞支架的研究进展

在人的生命过程中，组织与器官均有发生异常或不可逆性损伤的可能性，医学界目前主要依靠脏器的移植来重新恢复其功能。但随着器官移植技术的不断发展，供体来源的匮乏，已经成为制约器官移植发展的非技术性瓶颈。故学者们开始寻找异体移植以外的方法，以缓解供体短缺的不足和患者的经济负担，提高患者的生活质量。而近年来去细胞生物支架研究的不断发展为这一难题的解决提供了新思路。

一种新型低压灌注法在既有混凝土结构中的应用研究

为解决既有混凝土结构中钢筋锈蚀问题,研发了一种新型钢筋阻锈剂低压灌注法,并与传统涂抹法相比较,研究其渗透性能及阻锈效果。结果表明:低压灌注法比涂抹法具有更为良好的渗透性能,钢筋表面能快速达到临界阻锈摩尔浓度,且有效避免了采用涂抹法时暴露于空气中的亚硝酸盐对人、环境的影响,但灌注间距、灌注量、灌注压力等因素会影响阻锈剂阻锈效果。

碘化油肝动脉造影与灌注法肝动脉造影

我院从1986年1月开始应用油性造影剂作肝动脉造影术，经临床初步应用认为本法可进一步提高肝癌的诊断率，特别是对直径小于1cm的小肝癌，优于常规的肝动脉造影法（1），对此：我们从1986年5月至1987年5月，就45例原发性肝癌患者同时作碘化油肝动脉造影平片检查（以下简称碘油片）和超选择性灌注法肝动脉造影（以下简称IHA），并对两种方法进行比较，现将其结果报告如下。

灌注法制备全肾脏脱细胞基质支架的体内生物相容性

背景:应用灌注法制备的大鼠全肾脏脱细胞基质支架具有良好的体外细胞相容性,但其体内生物相容性尚不明确。目的:应用灌注法制备大鼠全肾脏脱细胞基质支架,检测其体内生物相容性。方法:应用灌注法制备Wistar大鼠全肾脏脱细胞基质支架,进行以下实验:1急性毒性实验:在小鼠腹腔分别注射全肾脏脱细胞基质支架浸提液、生理盐水及苯酚。2溶血实验:将抗凝新西兰兔血分别与全肾脏脱细胞基质支架浸提液、生理盐水及蒸馏水混合。3热源实验:向新西兰兔耳缘静脉注射全肾脏脱细胞基质支架浸提液。4内皮刺激实验:在新西兰兔皮下注射全肾脏脱细胞基质支架浸提液,观察有无皮肤刺激反应。5皮下植入实验:将全肾脏脱细胞基质支架埋入新西兰兔背部皮下。结果与结论:全灌注法制备的Wistar大鼠全肾脏脱细胞基质支架无细胞残留,未引起全身毒性反应、急性溶血反应、热源反应及皮肤刺激反应,植入兔体内具有良好的组织相容性。说明大鼠全肾脏脱细胞基质材料在动物体内具有很好的生物相容性。

整体护理干预在白内障囊外摘除联合前房灌注法植入人工晶体术中的应用

目的探讨整体护理干预在白内障囊外摘除联合人工晶体植入术中的应用效果。方法 80例白内障患者随机分为对照组和观察组,各40例。围手术期间对照组采用常规护理,观察组采用整体护理干预。评价2组术后视力矫正情况,记录2组术后并发症情况并评估患者对护理服务的满意程度。结果术后3个月观察组矫正视力达4.8者占75%(30/40),对照组占62.5%(25/40),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后无并发症发生,对照组并发症发生为4例。观察组满意率90.0%(36/40),高于对照组的75.0%(30/40),差异有统计学意义(P<0.05)。结论整体护理对促进白内障患者术后视力恢复、提高护理满意度具有积极意义。

灌注法去细胞技术构建食管全层细胞外基质的实验研究

目的利用灌注法去细胞技术构建食管全层去细胞外基质,为组织工程食管重建选择1种理想的支架材料。方法成年新西兰大白兔(雌雄不限)24只,随机分为灌注组(n=16)和正常对照组(n=8),采用灌注法去细胞技术处理兔食管,处理后的标本均行大体、组织学、扫描电镜、免疫荧光R染色检测及MTT细胞毒性试验。结果大体观察:离体食管经灌注2h后可见大部分变白,经16h灌注后食管变得苍白剔透,清楚可见脉管纹理。组织学与扫描电镜观察:灌注法构建的食管全层去细胞外基质的去细胞程度均匀,孔隙多,孔隙率为(88.25±2.37)%。免疫荧光染色:离体食管MHC-I和MHC-II染色呈阳性表达,灌注法构建的食管全层去细胞外基质MHC-I和MHC-II染色呈阴性表达。MTT细胞毒性试验:含食管外基质浸提液培养的骨髓间充质干细胞与普通细胞培养液培养的骨髓间充质干细胞相比较,细胞相对增殖率>1。结论采用灌注法构建食管全层去细胞外基质可操作性强,安全性好,免疫原性极低,且食管全层去细胞外基质对细胞无毒性,有一定的促生长作用,是组织工程食管重建的理想支架材料。

肢体静脉标本逆向加压灌注法

目前断指再植、足趾移植和末端部位小皮瓣的应用解剖学研究资料中,涉及动脉部份较为丰富,静脉部份奇缺。究其原因,动脉灌注标本制备容易,静脉标本制备困难,是影响静脉应用解剖学研究的原因之一。1982年,我们用固定材料灌注躯体静脉虽已获得成功(李忠华,等。已固定材料的静脉标本灌注法—乳胶加压灌注。广东解剖学通报1982;4:180),但对肢体末梢部份的静脉显示仍未解决。

灌注法示踪微血管技术的实验研究

灌注法示踪微血管技术的实验研究熊正文，朱森树，李春光，苏红（中国人民解放军２５１医院，张家口０７５０００）在脊髓损伤后修复、断肢再植，心脑血管疾病，肿瘤生长与转移，皮瓣移植等的研究中，常需要了解其微血管生长变化，构形，立体分布，走行及相互联系等。目前...

灌注法压井液替换溢流气体过程理论计算

介绍灌注法压井原则;分析灌注法压井中注入压井液顶替环空内溢流气体的过程;推导出一次注入压井液体积的计算公式和释放气体时井口压力最低值的计算公式;用计算机程序模拟灌注法压井过程,绘制压井过程中的套压数据和曲线。

观察卵巢移植后血管重建的墨汁灌注法

组织器官的墨汁灌注是一种传统的观察血管分布的检测方法，由于其不与一般的化学试剂发生反应，灌注后可同时附加其它组织学制片技术，因此可用于血管走向和重建的研究。为了观察促血管化因素对无血管吻合卵巢组织移植物血管化的影响，我们使用了墨汁灌注法，目的在于观察移植物与受体移植部位的血供重建时间。

人工推注灌注法输尿管软镜液体流量体外测定及影响因素

目的:体外测定不同直径不同长度延长管下人工推注注射器灌注法输尿管软镜的液体流量,研究其稳定性及影响流量的因素。方法:根据延长管长度不同分为AB两组:A组延长管长度为1m,B组延长管长度为0.5m。60ml注射器抽取生理盐水后连接到直径分别为0.2、0.5、0.8cm的延长管,再连接到输尿管软镜人工推注,体外计算每分钟的流量。对AB两组的体外液体灌注量进行多次重复测定,所测得的数据进行统计学比较。结果:A组使用直径为0.8、0.5、0.2cm延长管人工推注液体的流速分别为(70.59±1.68)、(65.45±1.50)及(60.16±1.27)ml/min;B组使用直径为0.8、0.5、0.2cm延长管推注的液体流速分别为(76.59±1.56)、(75.00±1.40)及(69.23±1.14)ml/min。对以上数据进行统计学比较分析可以发现,使用0.5m延长管流量明显大于使用1m延长管时的流量(P<0.001);当使用1m延长管时,三种不同直径的延长管之间的流量均差异有统计学意义(P<0.001);而使用0.5m延长管时,直径为0.8cm和0.5cm的延长管之间的流量差异无统计学意义(P=0.093),而直径为0.2cm延长管与其他两组相比,流量明显减少。结论:输尿管软镜碎石术中采用人工推注射器灌注法流量不稳定,受延长管长度和直径的影响,不同的人推注的力量不同,难以调控,浪费人力资源,应用到临床的安全性及合理性值得商榷。

灌注法构建小肠黏膜全层去细胞外基质

背景:对于解剖层次复杂的细胞外基质,单纯浸泡法则很难达到理想的去细胞效果。目的:观察灌注法去细胞技术制备小肠黏膜全层去细胞外基质的效果。方法:采用灌注法去细胞技术,经成年雄性新西兰大白兔小肠黏膜上动脉灌注去离子剂后处理获得小肠黏膜全层去细胞外基质。采用MTT法检测小肠黏膜全层去细胞外基质浸提液(实验组)或含体积分数20%小牛血清的DMEM(对照组)与1月龄新西兰大白兔骨髓间充质干细胞共培养后的细胞相对增殖率。结果与结论:①大体观察:小肠黏膜上动脉经灌注30min后变得苍白透明,经2h灌注后肠段变得苍白剔透,清楚可见脉管纹理。②组织学与扫描电镜观察:灌注法构建的小肠黏膜全层去细胞外基质的去细胞程度均匀,胶原纤维未受损,孔隙多,孔隙率为(86.72±2.98)%。③MTT检测实验:培养2,4,7d,实验组细胞A值明显高于对照组细胞A值(P<0.05),且实验组细胞相对增殖率均>1。表明采用灌注法构建小肠黏膜全层去细胞外基质可操作性强,安全性好,且小肠黏膜全层去细胞外基质对骨髓间充质干细胞无毒性,并有一定的促生长作用。

灌注法提取大鼠胰岛及其体内外分泌功能的实验研究

目的:评估胶原酶灌注法提取大鼠胰岛体内外分泌功能。方法:Wistar大鼠以质量浓度0.05%V型胶原酶胆管灌注提取大鼠胰岛。DTZ、AO/PI染色计数及纯度、活性。葡萄糖刺激试验及体内肾被膜下移植检测其体内外分泌活性。结果:以0.05%的胶原酶提取大鼠胰岛有良好体外分泌活性,胰岛移植可使糖尿病大鼠血糖水平获不同程度下降,部分血糖水平正常。结论:灌注法提取胰岛数量多、活性良好,有良好葡萄糖刺激反应性及移植活性。

已固定材料的静脉标本灌注法——乳胶加压灌注

由于静脉的形态结构特点,以及人体死亡后血液多淤集在静脉内,使静脉标本的灌注比较困难。王兴海曾在未经固定的材料上,经大隐静脉注入橡胶,成功地灌注了整体静脉标本。但经常规防腐固定后的材料静脉灌注法,尚未见介绍。我们考虑到腔静脉干及其属支没有或少有瓣膜,且管腔较大,凝血不可能完全阻塞血管;面部静脉虽有瓣膜,但与颅内静脉有广泛交通。我们采用橡胶加压灌注法,通过深浅静脉的交通,制作出了一批躯体静脉标本,有些标本的上臂和大腿的静脉均能充盈,效果较好。