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采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性及瞬时外向钾电流观察
被引量:
1
1
作者
何水静
徐瀚哲
+5 位作者
胡棣文
孟宪睍
李辛一
王腾
胡丹
黄燕
《山东医药》
CAS
2023年第3期17-21,共5页
目的通过观察采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞形态、活性及瞬时外向钾电流,以验证胶原酶Ⅱ循环灌流消化法对心肌细胞急性分离的效果。方法利用自制Langerdorff灌流装置进行主动脉逆行灌流,胶原酶Ⅱ循环灌流消化,...
目的通过观察采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞形态、活性及瞬时外向钾电流,以验证胶原酶Ⅱ循环灌流消化法对心肌细胞急性分离的效果。方法利用自制Langerdorff灌流装置进行主动脉逆行灌流,胶原酶Ⅱ循环灌流消化,分离成年大鼠单个心肌细胞;利用逐步梯度复钙法选出耐钙心肌细胞;在共聚焦显微镜下观察单个心肌细胞的形态、舒缩能力,并用全细胞膜片钳记录心肌细胞瞬时外向钾电流。结果胶原酶Ⅱ循环灌流消化法分离大鼠心肌细胞可获取90%质量良好的细胞,分离出来的心肌细胞边缘锐利、横纹清晰,折光性强,舒缩规律;复钙后仍有60%质量良好的活细胞;用全细胞膜片钳可记录到标准的瞬时外向钾电流。结论采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性较好且耐钙,可记录到标准的瞬时外向钾电流。
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关键词
心肌细胞分离术
细胞急性分离术
胶原酶Ⅱ循环
灌流消化法
心肌细胞
细胞活性
钾电
流
下载PDF
职称材料
人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定
被引量:
8
2
作者
余继海
许戈良
+2 位作者
汪建
荚卫东
傅斌生
《安徽医学》
2003年第5期4-6,共3页
目的 探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法 ,建立血管内皮细胞培养模型 ,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法 采用胶原酶Ⅱ灌流消化法培养人脐静脉内皮细胞 ,当原代培养细胞 80 %以上汇合后 ,用胰蛋白酶消化传代 ;根据...
目的 探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法 ,建立血管内皮细胞培养模型 ,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法 采用胶原酶Ⅱ灌流消化法培养人脐静脉内皮细胞 ,当原代培养细胞 80 %以上汇合后 ,用胰蛋白酶消化传代 ;根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和分泌蛋白流式细胞术 (FM术 )免疫荧光检查对细胞进行鉴定。结果 种植在培养瓶中的内皮细胞 12小时贴壁生长 ,48~ 72小时生长最快 ,7~ 10天汇合。内皮细胞呈接触抑制生长、呈鹅卵石样外观 ,FM术检测CD3 1和VⅢ -R -Ag均为阳性表达。 结论 消化酶灌注脐静脉消化内皮细胞是获取血管内皮细胞的一种好方法 ,可靠性大 ,成功率高 。
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关键词
人脐静脉
内皮细胞
培养
鉴定
胶原酶Ⅱ
灌流消化法
下载PDF
职称材料
人胎肝细胞分离与培养技术的研究
被引量:
6
3
作者
唐智敏
詹春姣
+2 位作者
李航森
章敏
石淑仙
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期438-439,共2页
目的 探讨分离及培养人胎肝细胞的最佳方法。方法 比较两种灌流消化法对分离人胎肝细胞的效果 ,观察不同条件对体外培养人胎细胞生长及生存时间的影响。结果 经腹主动脉及脐静脉双灌流消化法分离人胎肝细胞效果明显优于单纯经脐静脉...
目的 探讨分离及培养人胎肝细胞的最佳方法。方法 比较两种灌流消化法对分离人胎肝细胞的效果 ,观察不同条件对体外培养人胎细胞生长及生存时间的影响。结果 经腹主动脉及脐静脉双灌流消化法分离人胎肝细胞效果明显优于单纯经脐静脉灌流消化法 ,前者肝细胞获得率为 (5.97± 1 .81 )× 1 0 8/kg体重 ,后者肝细胞获得率为 (4 .1 2± 2 .3 1 )× 1 0 8/kg体重 (P <0 .0 5)。促肝细胞生长素对体外培养的人胎肝细胞生长和生存时间无明显影响 ,均在培养第 1 0~ 1 4天开始变性、坏死。鼠尾胶可延长体外培养人胎肝细胞的生存时间达 2 0~ 2 8d。与球体细胞培养方法相结合 ,人胎肝细胞在体外生存时间延长至 3 0~ 3 8d。结论 人胎肝细胞的分离应首选经腹主动脉及脐静脉双灌流消化法。人胎肝细胞在体外生存时间受培养条件的影响。
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关键词
细胞培养
肝细胞
灌流消化法
促肝细胞生长素
鼠尾胶
球状体细胞
原文传递
题名
采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性及瞬时外向钾电流观察
被引量:
1
1
作者
何水静
徐瀚哲
胡棣文
孟宪睍
李辛一
王腾
胡丹
黄燕
机构
武汉大学人民医院心内科
武汉大学第一临床学院
出处
《山东医药》
CAS
2023年第3期17-21,共5页
文摘
目的通过观察采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞形态、活性及瞬时外向钾电流,以验证胶原酶Ⅱ循环灌流消化法对心肌细胞急性分离的效果。方法利用自制Langerdorff灌流装置进行主动脉逆行灌流,胶原酶Ⅱ循环灌流消化,分离成年大鼠单个心肌细胞;利用逐步梯度复钙法选出耐钙心肌细胞;在共聚焦显微镜下观察单个心肌细胞的形态、舒缩能力,并用全细胞膜片钳记录心肌细胞瞬时外向钾电流。结果胶原酶Ⅱ循环灌流消化法分离大鼠心肌细胞可获取90%质量良好的细胞,分离出来的心肌细胞边缘锐利、横纹清晰,折光性强,舒缩规律;复钙后仍有60%质量良好的活细胞;用全细胞膜片钳可记录到标准的瞬时外向钾电流。结论采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性较好且耐钙,可记录到标准的瞬时外向钾电流。
关键词
心肌细胞分离术
细胞急性分离术
胶原酶Ⅱ循环
灌流消化法
心肌细胞
细胞活性
钾电
流
Keywords
cardiomyocyte isolation
acute isolation
collagenase typeⅡcyclic perfusion digestion
cardiomyocytes
cell viability
potassium current
分类号
R33 [医药卫生—人体生理学]
下载PDF
职称材料
题名
人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定
被引量:
8
2
作者
余继海
许戈良
汪建
荚卫东
傅斌生
机构
安徽省立医院普外科
安徽医科大学
出处
《安徽医学》
2003年第5期4-6,共3页
基金
安徽省自然科学基金安科医药专项资助项目 (0 1 0 4 370 8)
文摘
目的 探讨新生儿脐静脉内皮细胞的培养及鉴定方法 ,建立血管内皮细胞培养模型 ,为体外研究血管内皮细胞提供实验手段。方法 采用胶原酶Ⅱ灌流消化法培养人脐静脉内皮细胞 ,当原代培养细胞 80 %以上汇合后 ,用胰蛋白酶消化传代 ;根据细胞生长特点、形态特征、细胞表型和分泌蛋白流式细胞术 (FM术 )免疫荧光检查对细胞进行鉴定。结果 种植在培养瓶中的内皮细胞 12小时贴壁生长 ,48~ 72小时生长最快 ,7~ 10天汇合。内皮细胞呈接触抑制生长、呈鹅卵石样外观 ,FM术检测CD3 1和VⅢ -R -Ag均为阳性表达。 结论 消化酶灌注脐静脉消化内皮细胞是获取血管内皮细胞的一种好方法 ,可靠性大 ,成功率高 。
关键词
人脐静脉
内皮细胞
培养
鉴定
胶原酶Ⅱ
灌流消化法
Keywords
Endothelial cells
Culture
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
下载PDF
职称材料
题名
人胎肝细胞分离与培养技术的研究
被引量:
6
3
作者
唐智敏
詹春姣
李航森
章敏
石淑仙
机构
湖北中医学院附属医院国家中医肝病诊疗中心
华中科技大学同济医学院附属同济医院外科
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期438-439,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目 (3 96 70 91 0 )
文摘
目的 探讨分离及培养人胎肝细胞的最佳方法。方法 比较两种灌流消化法对分离人胎肝细胞的效果 ,观察不同条件对体外培养人胎细胞生长及生存时间的影响。结果 经腹主动脉及脐静脉双灌流消化法分离人胎肝细胞效果明显优于单纯经脐静脉灌流消化法 ,前者肝细胞获得率为 (5.97± 1 .81 )× 1 0 8/kg体重 ,后者肝细胞获得率为 (4 .1 2± 2 .3 1 )× 1 0 8/kg体重 (P <0 .0 5)。促肝细胞生长素对体外培养的人胎肝细胞生长和生存时间无明显影响 ,均在培养第 1 0~ 1 4天开始变性、坏死。鼠尾胶可延长体外培养人胎肝细胞的生存时间达 2 0~ 2 8d。与球体细胞培养方法相结合 ,人胎肝细胞在体外生存时间延长至 3 0~ 3 8d。结论 人胎肝细胞的分离应首选经腹主动脉及脐静脉双灌流消化法。人胎肝细胞在体外生存时间受培养条件的影响。
关键词
细胞培养
肝细胞
灌流消化法
促肝细胞生长素
鼠尾胶
球状体细胞
Keywords
Cell culture,hepatacellular
Irrigation digestive method
Promoting hepatocyte growth factor
Rat tail gel
Cell culture spheroids
分类号
R329-33 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
采用胶原酶Ⅱ循环灌流消化法急性分离的成年大鼠心肌细胞活性及瞬时外向钾电流观察
何水静
徐瀚哲
胡棣文
孟宪睍
李辛一
王腾
胡丹
黄燕
《山东医药》
CAS
2023
1
下载PDF
职称材料
2
人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定
余继海
许戈良
汪建
荚卫东
傅斌生
《安徽医学》
2003
8
下载PDF
职称材料
3
人胎肝细胞分离与培养技术的研究
唐智敏
詹春姣
李航森
章敏
石淑仙
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
6
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