评价快速碳青霉烯酶灭活试验在肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型检测中的应用价值

目的评价快速碳青霉烯酶灭活试验(rCIM)与改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)在肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型检测中的应用价值。方法选择86株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌,使用聚合酶链式反应(PCR)检测常见碳青霉烯酶基因,比较rCIM与mCIM法检测碳青霉烯酶表型的性能。结果共检测到61株碳青霉烯酶基因型,检出率为70.9%。mCIM法发现阳性菌株61株,阴性菌株25株,rCIM法发现阳性菌株62株,阴性菌株24株。以PCR结果作为金标准,mCIM法的准确度、灵敏度和特异度分别为100.0%、100.0%和100.0%,rCIM法的准确度、灵敏度和特异度分别为98.8%、100.0%和96.0%。结论rCIM法检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型,操作简便,不需过夜培养,不需特殊的仪器或试剂,准确度较高。

双浓度联合改良碳青霉烯灭活试验筛查CRE的临床应用价值

目的评估双浓度联合改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)筛查碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)的临床应用价值。方法以VITEK 2 Compact N335卡的体外药物敏感性试验结果为标准,采用双浓度联合mCIM在231株分离自临床样本的肠杆菌科细菌中筛查CRE。结果VITEK 2 Compact N335卡筛选出CRE阳性菌株52株,阴性菌株179株,阳性检出率为22.5%;mCIM筛出CRE阳性菌株52株,双浓度联合mCIM筛出CRE阳性菌株53株,阴性菌株178株,阳性检出率为22.9%。以VITEK 2 Compact检测结果为参考,符合率为98.7%,敏感性为98.1%,特异性为98.9%;将mCIM检测阳性的52株CRE继续进行乙二胺四乙酸改良碳青霉烯灭活试验(eCIM),结果显示有13株肠杆菌科细菌金属-β-内酰胺酶为阳性,金属-β-内酰胺酶占碳青霉烯酶的25%。结论双浓度联合mCIM筛查CRE具有操作简单、不需要特殊仪器、结果易于观察等优点,适合在各级医院的微生物实验室中推广使用。对mCIM阳性菌株加做eCIM非常必要,有利于临床个性化用药。

碳青霉烯类抗菌药物灭活试验筛查产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的效能评价

目的评估碳青霉烯类抗菌药物灭活试验(CIM)快速筛查产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的应用价值。方法以碳青霉烯酶基因聚合酶链反应(PCR)及测序结果为金标准,用CIM在154株肠杆菌科细菌(分离于临床样本)中筛查产碳青霉烯酶的细菌,并与改良Hodge试验结果进行比较。结果 CIM的符合率、特异性和敏感性分别为99.4%、96.6%和100.0%,改良Hodge试验的符合率、特异性和敏感性分别为98.7%、93.1%和100.0%。结论与改良Hodge试验相比,CIM具有符合率和特异性高、结果易于观察等优势,适合在各级医院的微生物实验室中推广使用。

含氯消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活试验方法的研究

为研究含氯消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活试验方法 ,依照 2 0 0 2年版《消毒技术规范》规定的试验程序进行了实验室观察。结果 ,含有效氯 80 0mg/L的次氯酸钠、10mg/L的优氯净和 5 0mg/L二氧化氯对Vero细胞生存率无影响 ;用 0 .0 1mol/LPBS配制的 5g/L硫代硫酸钠中和剂对Vero细胞生存率无影响。用含 5g/L硫代硫酸钠中和剂对含有效氯 4 0 0mg/L的次氯酸钠设计的 6组中和剂鉴定试验 ,结果符合设计要求。用该方法检测证明 ,以含有效氯4 0 0mg/L次氯酸钠消毒剂 ,作用 30min ,对脊髓灰质炎病毒平均灭活对数值≥ 4 .0。试验发现 ,0 .0 3mol/L的PBS、卵磷脂以及吐温

关于血液制品灭活试验的指示病毒及灭活指标问题的商榷

一、血液制品灭活的重要性和必要性 由于血液制品在急救、治疗和防病中具有良好的效用,在临床上已受到十分广泛的大量应用。对于皿液制品的高质量要求,特别是保证使用安全已成为当前大家所关注的首要问题。 制备血液制品的原料是人的血浆,因而通过血液传播的病原体特别是某些病毒是导致不安全的主要因素。自七十年代以后,人们先后发现大批量制备的未经病毒灭活的凝血因子Ⅷ制剂,使甲型血友病患者大多数感染了乙型肝炎、丙型肝炎或AIDS病。

改良碳青霉烯灭活试验和碳青霉烯酶抑制剂增强试验鉴定肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶型别的临床价值

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)/乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(eCIM)、碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶型别的临床价值。方法收集分离自临床样本的肠杆菌目细菌130株,其中碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)100株。首先采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行体外药物敏感性试验,然后分别用mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶并分型。以聚合酶链反应(PCR)结果为标准,评价mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测肠杆菌目细菌碳青霉烯酶基因型的效能。结果100株CRE对替加环素和黏菌素的敏感率>95%,对头孢他啶-阿维巴坦、阿米卡星和复方磺胺甲噁唑的敏感性分别为13.0%、50.4%、55.7%,对其他临床常用抗菌药物的耐药率均>75%,。与PCR结果比较,碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测丝氨酸碳青霉烯酶的敏感性为98.60%,特异性为100%;检测金属β-内酰胺酶的敏感性为100%,特异性为100%。mCIM/eCIM检测丝氨酸碳青霉烯酶的敏感性为97.22%,特异性为100%;检测金属β-内酰胺酶的敏感性为96.30%,特异性为100%;mCIM/eCIM无法检测同时产2种酶的菌株。结论mCIM/eCIM和碳青霉烯酶抑制剂增强试验均都能较好地区分不同类型的碳青霉烯酶,其中碳青霉烯酶抑制剂增强试验操作更加简便,结果更易观察。

减蛋综合症病毒的灭活试验研究

采用不同温度、浓度的甲醛处理病毒，在一定的条件下完全能够使病毒灭活而保持其红细胞凝集活性的特性。最快而简易的灭活方法是加热至６５或７０℃，但是红细胞凝集活性水平下降９７％，抗原材料损耗太多。较为理想的灭活方法是２０℃条件下，终浓度为０１％的甲醛处理４８小时，不仅能使病毒完全灭活，而且病毒的红细胞凝集活性下降不超过５％。

产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌快速碳青霉烯灭活试验的评价

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)所致感染病例在全球范围内日益增多,导致病死率高,并增加医疗费用。产生碳青霉烯酶是CRE最主要的耐药机制,导致对其所致感染的治疗药物极其有限。此外,碳青霉烯酶基因往往存在于可移动元件或质粒上,能在不同细菌间水平传播。为控制该类耐药菌的流行播散,实验室需要建立一种快速可靠、低成本检测菌株中碳青霉烯酶的方法。

“消毒灵”对鸭瘟病毒灭活试验

畜禽传染病的流行,不仅直接造成大批宙畜的死亡,引起巨大的经济损失。而且污染了饲养环境。在与家畜疫病作斗争中,主要是针对传染源,传染途径和易感畜群三个环节,除了通过药物及免疫措施消灭病原体,增强宿主的抗病力外,还可通过化学或物理方法消灭周围环境中的病原体。

“909”消毒剂对大杆菌和核型多角体病毒灭活试验

本试验用新消毒剂“９０９”，按使用说明，配成５００ 倍、１０００ 倍消毒液做灭菌和灭病毒试验，浸渍时间分别为２ 分钟和１０ 分钟。然后把经消毒的大杆菌和病毒给蚕接种。试验结果表明：“９０９”消毒剂对大杆菌作用２ 分钟有灭活作用，对多角体病毒（ＮＰＶ）作用１０

改良碳青霉烯灭活试验在检测肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶中的应用评价

目的评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)在中国产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CPKP)中的应用价值。方法分别用mCIM和eCIM筛查中国271株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)中产酶阳性菌株,并以碳青霉烯酶基因聚合酶链反应(PCR)及测序结果为标准计算灵敏度和特异度。结果 271株非重复CRKP菌株中碳青霉烯酶基因阳性菌有209株,未检测出耐药基因的菌株有62株。mCIM检测到209株基因阳性菌株中208株为阳性菌株,62株基因阴性菌均为阴性; eCIM检测出的阳性菌株有58株,阴性菌株有150株。mCIM检测敏感度为99. 5%,特异度为100. 0%; eCIM检测敏感度为100. 0%,特异度为99. 3%。其中有1株产IMP-4型碳青霉烯酶菌株的mCIM结果为阴性,1株产KPC-2型碳青霉烯酶菌株的mCIM和eCIM都为阳性。结论 mCIM和eCIM在肺炎克雷伯菌中检测碳青霉烯酶有很好的敏感度和特异度,值得推广使用。

饮水中洋葱伯克霍尔德菌的分离鉴定及消毒剂灭活试验

依据GB/T 14926.41—2001《实验动物无菌动物生活环境及粪便样本的检测方法》从无菌环境中无菌操作取水样进行检测时,分离到一种粗短革兰氏阴性杆菌,进一步进行病原菌培养特性、生化鉴定和16S rRNA通用引物PCR扩增分析,结果为洋葱伯克霍尔德菌;并选用常用消毒剂对其进行悬液定量杀菌试验,84消毒液和75%乙醇对其作用10 min杀灭对数值≥5,50%甲酚皂溶液、新洁尔灭消毒液和10%癸甲溴铵溶液对其作用10 min杀灭对数值均<5。

美罗培南灭活试验与亚胺培南灭活试验用于产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌检测的研究

目的评价美罗培南灭活试验与亚胺培南灭活试验用于产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌检测的效果。方法将43株碳青霉烯耐药的肠杆菌(CRE)菌株与30株非CRE菌株,进行碳青霉烯酶编码基因检测及美罗培南灭活试验与亚胺培南灭活试验,以基因检测结果为金标准,分别计算美罗培南灭活试验与亚胺培南灭活试验的符合率、灵敏度、特异性。结果 3种方法测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的检出率差异无统计学意义(χ^2=0. 26,P> 0. 05)。以基因检测PCR法为金标准,美罗培南灭活试验和亚胺培南灭活试验的灵敏度、特异性、符合率分别为100. 0%和100. 0%、97. 1%和91. 2%、98. 6%和95. 9%。结论美罗培南灭活试验与亚胺培南灭活试验均可用于产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌检测,一般微生物实验室都能开展,有望成为实验室检测肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的首选方法。

改良碳青霉烯灭活试验在肺炎克雷伯菌中检测碳青霉烯酶的应用

近年来随着碳青霉烯类抗菌药物在临床上的大量使用，产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的分离率呈逐年上升趋势．及时检测和发现产酶菌株对于耐药菌感染的治疗和流行的控制至关重要。2017年CLSIM100S-27th推荐采用改良碳青霉烯灭活试验（mCIM）检测肠杆菌科细菌中的碳青霉烯酶用于流行病学调查。

超滤法在病毒灭活试验中去除残留消毒剂的应用

目的研究超滤法在病毒灭活试验中对残留消毒剂的去除效果。方法采用碘量法和悬液定量杀菌试验方法,测定超滤法对病毒灭活实验中含氯消毒剂的去除效果。结果经过2次超滤处理,反应体系中的有效氯含量稀释约200倍,而脊髓灰质炎病毒的回收效率约为77.10%,超滤法能有效去除含氯消毒剂的残留作用。病毒灭活试验中,用有效氯400 mg/L的含氯消毒剂作用10 min,脊髓灰质炎病毒杀灭对数值≥4.00。结论超滤法能有效去除病毒灭活实验中的残留消毒剂,准确评价化学消毒剂对病毒的灭活效果。

一种甲型肝炎灭活疫苗灭活验证试验方法的建立

目的探讨细胞培养/链特异性RT-PCR方法可否作为甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗(L-A-1减毒株)的病毒灭活验证试验方法。方法根据甲肝病毒(HAV)L-A-1株基因组序列,设计5条基因特异性引物,提取HAV基因组RNA,应用设计的正向引物进行反转录,再进行两轮PCR扩增,通过检测HAV复制过程中的负链中间体,对甲肝灭活疫苗灭活验证试验方法进行探讨,并与《中华人民共和国药典》甲肝灭活疫苗HAV灭活验证试验方法进行比较。结果细胞培养/链特异性RT-PCR方法对HAV负链RNA特异、敏感。通过方法学验证试验表明,该方法的特异性、敏感性和重复性均良好。利用此方法对5批甲肝灭活疫苗(L-A-1减毒株)进行检测,结果全为阴性,与《中华人民共和国药典》甲肝灭活疫苗HAV灭活验证试验测定结果相同。结论细胞培养/链特异性RT-PCR方法快速、灵敏可靠,可作为检测甲肝灭活疫苗(L-A-1减毒株)HAV灭活验证试验的方法。

多种消毒剂对病毒灭活效果的实验研究

目的研究高、中、低效消毒剂对脊髓灰质炎病毒的灭活效果及有机物浓度对其的影响。方法根据含氯类(次氯酸钠、三氯异氰尿酸钠)、过氧化物类、醛类、含碘类(强力碘、碘伏、碘酊、聚酮维碘)、季铵盐类、复方氯己定等多种消毒剂的适当浓度和作用时间对微生物的杀灭能力,进行灭活病毒的实验研究,并比较灭活效果。结果次氯酸钠400 mg/L作用15 min,三氯异氰尿酸钠500 mg/L作用15 min,二氧化氯100 mg/L作用10 min,聚维酮碘4 048 mg/L作用30 min,复方戊二醛806.4 mg/L作用1 h,对脊髓灰质炎病毒的灭活对数值均>4.00;而强力碘、碘伏、碘酊、复方季铵盐类、复方氯己定等消毒剂对脊髓灰质炎病毒的灭活对数值均<4.00。有机物浓度由10%上升至20%时,消毒剂作用15 min,灭活对数值下降0.62,作用30 min,灭活对数值下降0.63。结论高效及部分中效消毒剂对脊髓灰质炎病毒有较好的灭活效果,低效消毒剂对脊髓灰质炎病毒无灭活效果。有机物浓度增高可影响消毒剂对病毒的灭活效果。

固体碘伏对艾滋病病毒灭活效果的实验观察

经检测，用含３０ｍｇ／Ｌ有效碘的固体碘伏（ＰＶｐ－Ｉ）溶液，作用１０分钟，可将艾滋病病毒完全灭活。