红锥组培高效无菌系建立及丛芽诱导研究

红锥(Castanopsis hystrix)为壳斗科栲属常绿乔木,种皮坚硬、渗透性强,这是阻碍以种子为外植体启动组织培养的主要原因之一。为成功建立红锥组培快繁体系,系统研究了红锥种子灭菌方案、种子萌发与丛生芽诱导培养基。结果表明,红锥种子最佳的灭菌方案为:先将带种皮种子用75%酒精浸泡40 s,用无菌水冲洗1次,然后用0.1%升汞浸泡12 min,无菌水冲洗5～6次,接着剥除种皮,再用0.1%升汞浸泡6 min,无菌水冲洗5～6次,污染率最低,为26.7%,发芽率最高,为73.3%;较好的萌发培养基为改良MS+GA3 3.0 mg·L^(-1),接种后第2天种子即开始萌动,萌发率93.3%,生长旺盛;较好的丛芽诱导培养基为改良MS+6-BA2.0～3.0 mg·L^(-1)+NAA 0.2 mg·L^(-1)+GA3 3.0 mg·L^(-1),丛芽数量平均6.01个。外植体诱导效果与灭菌方案、基本培养基、培养基中激素种类和浓度等有显著的关系。较低盐浓度的改良MS培养基、较高水平的6-BA有利于丛芽的诱导。