灭蚊真菌贵阳腐霉长期保存方法的研究

目的:探讨贵阳腐霉最佳的保存方法,以延长其有效保质期。方法:以菌丝体生长速度和灭蚊毒力为指标,观察分别在不同培养基、温度、氧分压条件下保存1、2、3、4、5个月的贵阳腐霉的质量,总结对该真菌保存影响较大的因素。结果:观察发现,在水琼脂培养基上保存的菌丝体生长速度最快;在葵花籽提取物(SFE)培养基上保存的菌丝体灭蚊毒力最高;4℃是贵阳腐霉长期保存的最佳温度,在-25℃和-75℃条件下菌丝体不能存活;氧分压分别为100%、66.7%、33.3%及0时保存的菌丝体差别不大,但33.3%氧分压保存的菌丝体稍好。结论:本研究总结了贵阳腐霉保存的最佳条件,为其商业开发和工厂化生产提供了有价值的资料。

灭蚊真菌贵阳腐霉最佳保存条件的探索

目的探索贵阳腐霉最佳的保存方法。方法将贵阳腐霉保存在不同的温度、培养基和氧分压条件下,设计正交实验,分别保存2、4、6、8、10个月,观察基于这3个因素的最佳保存条件组合。结果综合分析各因素,长期保存后生长速度最快的组合是4℃-水琼脂培养基-33.3%氧分压;灭蚊毒力最佳的组合是4℃-SFE培养基-33.3%氧分压。在最佳条件组合下,贵阳腐霉可以保存10个月并保持正常生长活力,灭蚊毒力无明显下降。结论总结了保藏贵阳腐霉的最佳条件,为其以后的长期保藏提供实践依据。

根癌农杆菌介导的Pr1基因在贵阳腐霉的组成性表达

【目的】构建组成性表达贵阳腐霉Pr1基因的载体pCambia-hph-Pr1,转化贵阳腐霉,以获得高毒力的基因工程转化菌株。【方法】以双元载体pCambia-Pnos-PNN-hph为基本骨架,将Pr1基因置于组成型启动子PgpdA和终止子TtrpC之间,获得含Pr1基因的表达元件。以贵阳腐霉菌丝体为受体材料,利用根癌农杆菌介导的遗传转化法转化贵阳腐霉,观察转化株的生物学特征和灭蚊毒力。【结果】转化株的菌丝生长速度和游动孢子产量与野生株无显著性差异。生物测定表明转化株对蚊幼虫平均致死率达到32.9%,比野生株提高了约一倍,并且使受试蚊幼虫生长速度明显减缓。【结论】利用根癌农杆菌介导的遗传转化获得了遗传稳定的高毒力菌株。