灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌株CA23的协同抑菌作用

目的探讨灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌CA23毒力因子的作用和潜在机制。方法微量稀释法、棋盘法及时间-杀菌曲线测定灯台叶总碱与氟康唑联用效果;荧光探针测定菌株外排泵功能,实时荧光定量PCR法检测耐药相关基因表达;倒置显微镜、扫描电镜观察菌丝诱导培养基中菌株形态转换,RT-qPCR法检测菌丝相关基因表达,添加外源性cAMP验证;卵黄琼脂平板法检测菌株胞外磷脂酶活性。结果灯台叶总碱与氟康唑对耐药白念珠菌具有较强的协同抑菌作用;联用处理并不能显著抑制菌株的外排功能,与耐药相关基因表达结果一致;两药联用可以抑制在SD和Spider诱导培养基中菌丝生长,且下调菌丝相关基因CYR1、ALS3、RAS1、BCR1、ALS2、TPK 2表达,添加外源性cAMP后,能恢复部分药物联用引起的菌株形态变化;两药联用能抑制胞外磷脂酶活性,且对灯台叶总碱存在剂量依赖性。结论灯台叶总碱与氟康唑联用对氟康唑耐药株表现为协同抑菌作用,其机制与调节Ras1-cAMP-PKA信号通路抑制菌丝生长,并降低胞外磷脂酶活性从而影响耐药白念珠菌毒力因子有关。

灯台叶中的非碱性成分

目的：研究傣族药灯台叶中的非碱性成分。方法：乙醇提取物经酸碱处理得非碱性成分,正、反相色谱法和Sephadex LH-20凝胶柱色谱法分离,NMR,MS等波谱技术鉴定化合物的结构。结果：分离得到14个非碱性化合物：环桉烯醇（1）,乙酰-α-香树醇酯（2）,β-香树醇-3-棕榈酸酯（3）,羽扇豆-20（29）-烯-3-醇（4）,羽扇豆-20（29）-烯-3-棕榈酸酯（5）,β-谷甾醇（6）,角鲨烯（7）,α-生育酚（8）,α-生育醌（9）,邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（10）,邻苯二甲酸二丁酯（11）,1-羟基-3,5-二甲氧基-酮（12）,7,3＇,4＇-三甲氧基-5-羟基黄酮（13）,3,5,7,4＇-四羟基黄酮-3-O-β-D-葡萄糖苷（14）。结论：化合物3,5,7-13为首次从该植物中分得。

用火焰原子吸收光谱法对傣药灯台叶中八种金属元素进行形态分析

照传统煎煮法对中药灯台叶中铜、锌、铁、镁、钙、铬、锰和镉8种元素进行提取;用微孔滤膜分离提取液中的可溶态与悬浮态,利用大孔吸附树脂柱对可溶态中的有机态与无机态进行分离;采用火焰原子吸收光谱法对各种形态中的8种元素进行测定。结果显示,灯台叶中8种元素的总提取率为9.84%～89.07%,浸留比为10.96%～903.4%,悬浮态颗粒吸附率为3.44%～23.37%。该法对各元素的加标回收率为94.5%～111.6%;相对标准偏差在0.29%～2.47%之间,测定结果的精密度和准确度令人满意。

傣药灯台叶醇提取物体外抗氧化活性

目的：研究傣药灯台叶醇提取物的体外抗氧化活性。方法：利用光照核黄素产生超氧阴离子（O2^-·）,利用Fenton反应产生羟自由基·OH,用分光光度法分别研究灯台叶醇提取物体外清除活性氧自由基的能力和对·OH诱发脂质过氧化和DNA损伤的抑制作用,并与茶多酚的相关性能进行比较。结果：灯台叶乙醇及正丁醇提取物具有与茶多酚相当的清除活性氧自由基能力抑制脂质过氧化和DNA损伤能力。结论：傣药灯台叶醇提物具有较好的体外抗氧化活性。

FTIR结合有效成分定量分析在傣药灯台叶质量控制中的应用

傣医药是我国传统医药的瑰宝,同时也是我国"四大民族医药"(藏、蒙、维、傣)之一。建立灯台树叶片(傣语习称"摆埋丁别")、嫩茎的傅里叶红外光谱和HPLC测定鸭脚树叶碱、熊果酸、齐墩果酸含量的方法以快速鉴别和区分不同药用部位,探讨嫩茎对灯台叶整体质量的影响及红外光谱结合高效液相色谱技术在傣药材质量评价中的应用。采集15批灯台叶和嫩茎红外光谱,平行三次,原始光谱经自动基线校正、自动平滑、纵坐标归一化、二阶求导等预处理后进行主成分分析,分别测定鸭脚树叶碱[乙腈-0.1%氨水(40∶60),检测波长287nm],熊果酸和齐墩果酸[甲醇-0.1%甲酸水(88∶12),检测波长210nm]的含量。灯台叶及嫩茎原始光谱呈现相似的变化规律,差异较小,经自动基线校正、自动平滑、纵坐标归一化和二阶求导处理后在3 000~2 800和1 800~500cm^(-1)波段中吸收峰数目和强度差异明显;由导数光谱数据的主成分得分图可得知叶片和嫩茎各为一类,且不同批次叶片之间的变异大于嫩茎;叶片中有效成分平均含量均明显高于嫩茎(鸭脚树叶碱含量为嫩茎中的3.8倍,熊果酸含量为嫩茎中的5.1倍,齐墩果酸含量为嫩茎中的4.2倍);叶片中鸭脚树叶碱、熊果酸和齐墩果酸平均含量分别为0.79,8.47,7.51mg·g^(-1),嫩茎中三者的平均含量分别为0.21,1.78,1.67mg·g^(-1),熊果酸、齐墩果酸含量均明显高于鸭脚树叶碱含量,而熊果酸和齐墩果酸含量相对稳定。灯台叶的整体质量优于嫩茎,市售掺杂嫩茎的灯台叶不能直接纳入傣药应用,应先进行一定的净选后再加以利用。红外光谱技术结合液相色谱能快速对傣药不同药用部位进行定性定量分析,系统评价药材整体质量,可用于傣药的质量控制。

基于UPLC-ESIQ-TOF-MS法分析灯台叶颗粒的主要活性成分

目的建立超高效液相-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-EIS-Q-TOF-MS)法分析灯台叶颗粒活性成分。方法色谱条件:Agilent Extend C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸胺水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,体积流量为0.4 mL·min^(-1),质谱使用ESI离子源正离子模式下采集数据,并运用Agilent Masshunter Qualitative Analysis工作站中的分子特征提取(MFE)功能,根据提供化合物的准确相对分子质量、质谱碎片离子信息,并结合参考文献等进行成分鉴定。结果从灯台叶颗粒中鉴定出27种化学成分,黄酮及其苷类7个,生物碱类7个,萜类10个,氨基酸类3个。芹菜素、齐墩果酸羧甲酯、齐墩果酸羧乙酯、β-香树脂醇、苯丙氨酸、环(酪氨酸-酪氨酸)、N-乙酰-L-脯氨酸7个化合物均为首次从灯台草制剂中被发现并报道。结论 UPLC-ESIQ-TOF-MS技术能够快速、准确地鉴定灯台叶颗粒中的化学成分,为其质量控制和临床应用提供了理论依据。

UV-Vis结合HPLC FP对不同采收期傣药灯台叶的鉴别及品质研究

建立不同采收期灯台叶紫外-可见光谱指纹图谱及HPLC指纹图谱,结合主成分分析、聚类分析对不同采收期灯台叶进行快速鉴别和品质评价,确定最佳采收期,推动傣药现代化发展进程。通过单因素实验确定灯台叶紫外-可见光谱的最佳提取条件,采集12个月份灯台叶紫外光谱数据,平行3次,扣除背景8点平滑后倒入SIMCA-P+11.5进行主成分分析,以前三个主成分三维得分图快速鉴别不同采收期。Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18(250×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈(B)-0.1%甲酸水(A)为流动相,梯度洗脱(0~5min,5%B;5~35min,5%B→26%B;35~40min,26%B→56%B),流速1mL·min^(-1),进样量7μL,柱温30℃,检测波长287nm。不同采收期灯台叶紫外-可见光谱根据吸收峰位置及变化的幅度可以将光谱分为三段,第一段为235~400nm,第二段为400~500nm,第三段为500~800nm。第一段中吸收峰数目最多,主要集中在270,287和325nm,吸光度及其变化幅度最大,体现出不同月份光谱图的指纹特征。第二段吸收峰较少主要分布在410nm和464nm附近,吸光度及其变化较第一段减小。第三段图谱在665nm处均有一个较大吸收峰,吸光度无明显差异。将UV-Vis光谱数据进行主成分分析,不同月份样品在主成分得分图中离散分布,同一月份样品相对集中,可以将不同月份样品鉴别开。HPLC指纹图谱结合聚类分析可将不同采收期样品分为Ⅲ类,第Ⅰ类为3,4,5和7月份,第Ⅱ类为6,8和9月份,第Ⅲ类为10,11,12,1及2月。结合共有峰面积可以看出同一类样品化学成分含量相近,不同类之间差异较明显,第Ⅲ类样品化学成分含量最高。UV-Vis FP,HPLC FP结合主成分分析和聚类分析能快速鉴别不同采收期灯台叶并对其进行品质评价。灯台叶最佳采收期为10月至次年2月,即傣历中的冷季。

基于网络药理学的灯台叶总生物碱胶囊治疗急性支气管炎的作用机制研究

目的基于网络药理学方法探讨灯台叶总生物碱胶囊治疗急性支气管炎的作用机制。方法通过CTD、Therapeutic Target Database、Drugbank等数据库分别检索急性支气管炎,得到其疾病相关靶点信息,构建急性支气管炎疾病分子生物网络。将灯台叶总生物碱胶囊4个化学成分(灯台树次碱、19表灯台树次碱、瓦来萨明碱、鸭脚树叶碱)上传至Pharm Mapper,得到预测靶标结果后,构建灯台叶总生物碱胶囊的成分-靶点网络。采用Clue GO软件对灯台叶总生物碱胶囊治疗急性支气管炎的相关靶点进行生物过程及作用通路分析。结果灯台叶总生物碱胶囊的4个成分可作用于8个急性支气管炎靶点及25个相互作用靶点,4个成分既可通过相同的靶点及制瘤素M信号通路共同发挥抗炎及调节免疫的作用,亦可分别通过不同的靶点与通路直接或间接地治疗急性支气管炎。结论灯台叶总生物碱胶囊4个成分可通过参与炎症反应、血管内皮保护、调节内分泌等相关通路发挥治疗急性支气管炎的作用。

火焰原子吸收光谱法分析灯台叶中钙铜铁锌的形态

采取正辛醇-水分配体系模拟中药灯台叶水煎液中钙、铜、铁、锌在人体胃肠中的分配情况,用原子吸收光谱法测定了灯台叶及其水煎液、水煎液中水溶态、醇溶态中钙、铜、铁、锌的含量。结果表明,灯台叶中钙、铜、铁、锌的水煮溶出率在55.34%～95.47%之间,该方法对各元素的加标回收率在86.5%～104.6%之间,相对标准偏差RSD≤3.48%;钙、铜、铁、锌在正辛醇-水分配体系中受酸碱度影响较大。

灯台叶中鸭脚树叶碱化学对照品的制备

目的:以灯台叶为原料,研究鸭脚树叶碱对照品的制备与分析技术。方法:用溶剂法提取灯台叶中生物碱,通过色谱方法分离主要成分鸭脚树叶碱,用光谱方法鉴定其结构,并用TLC、HPLC方法检查纯度和标定含量。结果:鸭脚树叶碱对照品经TLC检查无杂质斑点,二维及三维HPLC检查为单一成分,峰纯度因数999.878,含量为99.35%.结论:鸭脚树叶碱对照品已达到中药质量标准用化学对照品技术要求。

测定灯台叶颗粒中鸭脚树叶碱含量的HPLC方法研究

目的:研究并建立灯台叶颗粒中有效成分鸭脚树叶碱含量分析的HPLC方法。方法:系统比较检测波长、流动相、提取方法等因素对灯台叶颗粒中鸭脚树叶碱含量测定的影响,确定最佳分析条件。结果:建立了符合技术要求的HPLC分析方法,色谱柱以十八烷基键合硅胶为填充剂,检测波长287nm,以甲醇-0.01%三乙胺溶液(50∶50)为流动相。结论:该方法分离效果好,灵敏度高,专属性强,能准确、重现的测定灯台叶颗粒中鸭脚树叶碱的含量,可用于灯台叶颗粒产品质量控制。

灯台叶止咳平喘的药效学研究

目的:观察灯台叶的止咳平喘作用并明确灯台叶止咳平喘的有效部位。方法:采用枸橼酸喷雾法构建豚鼠咳嗽模型观察灯台叶不同有效部位的止咳作用,采用小鼠气管酚红排泄模型观察不同有效部位的祛痰作用;采用二甲苯小鼠耳廓肿胀模型观察不同有效部位抗炎作用。结果:生物碱具有较强的镇咳作用,黄酮具有较强的平喘和抗急性炎症作用,而混合成分的同时具有较强的镇咳作用、平喘和抗急性炎症的作用,同时还具有较好的祛痰作用;小鼠急性毒性实验表明灯台叶的毒性作用较小。结论:灯台叶具有较强的止咳平喘作用,不同有效部位均参与了其止咳平喘的药理效应。

傣药灯台叶化学成分、药理作用、质量控制及临床应用研究进展

本文通过调研国内外文献和傣医药相关资料,对灯台叶的化学成分、药理作用,质量控制和临床应用进行整理研究,以期为该药材及其相关新产品的开发利用提供参考,并促进化学、药理及质量控制等现代研究和临床应用的有机结合。

灯台叶碱调节放射性肺炎细胞及大鼠血清细胞因子水平的实验研究

目的探讨灯台叶碱对放射性肺炎细胞及大鼠血清细胞因子水平的调节作用,为灯台叶制剂的临床应用及放射性肺炎的临床治疗提供新思路。方法通过建立放射性肺炎细胞及大鼠动物模型,检测不同浓度灯台叶碱对细胞上清液及大鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10水平的影响。结果放射治疗后灯台叶碱干预的BEAS-2B细胞上清中,炎症介质IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α水平降低(P<0.05),IL-6在灯台叶碱处理前后未见明显变化。放射治疗后灯台叶碱干预的大鼠血清中IL-2、TNF-α等促炎因子下降(P<0.05),但是对血清炎症介质的抑制程度无明显剂量依赖性。灯台叶碱治疗组可升高血清抗炎因子IL-4的水平(P<0.05),而其升高作用无显著的剂量依赖性。结论灯台叶碱可能通过降低血清促炎介质的水平和升高抗炎介质的血清水平抑制放射性肺炎的炎性反应,有望成为防治放射性肺炎的有效药物。

灯台叶颗粒联合环酯红霉素治疗儿童类百日咳综合征临床观察

目的:观察灯台叶颗粒联合环酯红霉素治疗儿童类百日咳综合征的临床效果。方法:86例按随机数字表法分为两组各43例。两组均用环酯红霉素治疗,观察组加用灯台叶颗粒治疗。结果:总有效率观察组93.02%、对照组76.74%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组咳嗽、喘憋、气促和肺部啰音改善时间(6.38±1.04)d、(7.69±1.15)d、(7.23±1.47)d、(6.14±1.02)d,对照组(8.25±1.57)d、(9.43±1.38)d、(8.96±1.52)d、(7.98±1.13)d,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组均无严重不良反应。结论:灯台叶颗粒联合环酯红霉素治疗儿童类百日咳综合征疗效较好,且安全。

灯台叶颗粒联合西药治疗小儿类百日咳综合征60例临床观察

目的:观察灯台叶颗粒联合西药治疗小儿类百日咳综合征的临床疗效。方法:选取120例类百日咳综合征患儿的临床资料,其中对照组60例采用单纯西医治疗;观察组60例采用西医治疗基础上加用灯台叶颗粒,治疗2周后对其临床疗效进行分析。结果:治疗2周后,对照组在痉挛性咳嗽持续天数、痉挛性咳嗽发作持续时间、肺部啰音消失时间、血常规恢复时间方面均较观察组延长,夜间发作次数亦较观察组增多,差异有统计学意义(P<0.05),而在治疗效果方面,对照组治疗总有效率71.7%,观察组总有效率95%,差异有统计学意义(P<0.05);不良反应轻微,停药后消失,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:灯台叶颗粒辅助治疗类百日咳综合征,疗效确切,不良反应少,值得临床推广。

灯台叶颗粒治疗类百日咳综合征临床研究

目的探究灯台叶颗粒治疗类百日咳综合征患儿的临床疗效。方法选取94例类百日咳综合征患儿,按随机数字表法将其分为对照组和研究组,每组47例。对照组给予常规抗病毒、止咳、抗感染治疗,研究组在常规治疗基础上联合灯台叶颗粒治疗。2组均治疗2周。比较2组临床总有效率、临床症状/体征缓解时间、Th17/Treg及其相关因子水平。结果治疗后,研究组临床总有效率显著高于对照组(P<0.05)。研究组咳嗽、憋喘、气促、肺部啰音等症状/体征缓解时间均短于对照组(P<0.05);Treg、TGF-β水平均高于对照组(P<0.05),Th17/Treg、IL-17水平均低于对照组(P<0.05)。2组不良反应总发生率组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论灯台叶颗粒可有效改善类百日咳综合征患儿临床症状,并纠正Th17/Treg细胞失衡,疗效安全可靠。

灯台叶碱对豚鼠镇咳平喘最低有效剂量探究

目的探究灯台叶碱镇咳、平喘的最低有效剂量,为临床拟用剂量的确定提供进一步的实验依据。方法采用豚鼠枸橼酸引咳法、组胺和氯化乙酰胆碱引喘法,考察灯台叶碱对镇咳、平喘的最低有效剂量。结果灯台叶碱以5、7.5、10、15mg/kg.bw剂量连续灌胃给药3d,均能不同程度延长枸橼酸致豚鼠咳嗽的潜伏期,以10、15mg/kg.bw剂量组作用显著,其中7.5、10、15mg/kg还能明显减少咳嗽次数;7.5、10、15mg/kg.bw能明显延长磷酸组胺和氯化乙酰胆碱致豚鼠哮喘的潜伏期和倒地时间。结论灯台叶碱抑制枸橼酸致豚鼠咳嗽及磷酸组胺、氯化乙酰胆碱致豚鼠哮喘的最低有效剂量为7.5mg/kg.bw,研究结果为临床拟用剂量的确定提供了进一步的实验依据。

灯台叶醇提物对C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的研究灯台叶醇提物对C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法建立C57BL/6雄性小鼠腋下皮下注入Lewis肺癌小鼠移植瘤动物模型,将荷瘤鼠分为:正常组,荷瘤小鼠组,灯台叶醇提物低、中、高剂量组(0.2,1.0,5.0g.kg-1),灌胃给药,连续给药14d,分别测定其抑瘤率、T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+;小鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(INF-γ)水平。结果灯台叶醇提物高剂量组对肿瘤生长有明显的抑制作用(P<0.05),其抑瘤率为64.9%;中、高剂量组能显著提高荷瘤小鼠血清INF-γ、IL-6以及IL-10的水平(P<0.05);高剂量组对小鼠胸腺质量增加无明显影响,但抑制脾脏增大;能够降低CD4+/CD8+比例,并且增强T淋巴细胞增殖能力(P<0.05)。结论灯台叶醇提物具有提高荷瘤小鼠免疫功能的作用。

灯台叶醇提物体外抗肿瘤作用研究

目的研究灯台叶醇提物对体外肿瘤细胞增殖和凋亡的影响,以及对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用。方法采用MTT法检测灯台叶醇提物对体外培养肿瘤细胞(人卵巢癌细胞C200、人乳腺癌细胞MNK-7、人肝癌细胞SNU-398)的抗肿瘤作用;以PI/Annexin-V染色检测灯台叶醇提物对人乳腺癌细胞MNK-7凋亡的影响;以鸡胚尿囊膜血管生成(CAM)实验,研究灯台叶醇提物对新生血管生成的抑制作用。结果灯台叶醇提物在0.1～2.0 mg/mL对各肿瘤细胞的增殖有显著抑制作用,2.0 mg/mL灯台叶醇提物对人乳腺癌细胞增殖抑制率达到83.6%;2.0 mg/mL灯台叶醇提物作用后人乳腺癌细胞凋亡率达到62.5%;灯台叶醇提物在1～1000μg/mL对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用,给药鸡胚的新生血管数减少,其中10μg/mL抑制率最高,一级血管抑制率为52.1%,二级血管抑制率为48.3%。结论在实验给药浓度下,灯台叶醇提物对受试肿瘤细胞的增殖具有较强抑制作用,对鸡胚尿囊膜血管生成有显著抑制作用。