灯盏花素干预大鼠肝星状细胞Caspase-3、NF-κB表达的研究

目的:研究灯盏花素对CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠Caspase-3、NF-κB p65表达的研究。方法:本实验用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,喂服灯盏花素。60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、灯盏花素高剂量组、灯盏花素中剂量组、灯盏花素低剂量组、秋水仙碱组。用药4周后,检测NF-κB p65mRNA及蛋白的表达,Caspase-3mRNA蛋白的表达。结果:灯盏花素不同剂量组均能使Caspase-3蛋白表达显著降低(P<0.01)。模型组与正常对照组Caspase-3蛋白表达有显著性差异(P<0.01),灯盏花素不同剂量组均能使NF-κB蛋白的表达显著降低(P<0.01或P<0.05)。光镜显示:灯盏花素各剂量组的肝脏病理学改变较模型组减轻。结论:①灯盏花素能保护肝细胞活性,促进肝细胞修复再生;降低转氨酶,具有抗肝纤维化作用。②灯盏花素可以降低Caspase-3、NF-κB p65表达,抑制星状细胞激活。

灯盏花素穴位注射联合针灸对腰椎间盘突出症患者腰背伸肌群表面肌电指标及血清MMP3、PGE_(2)、IL-1β表达的作用

目的探讨灯盏花素穴位注射联合针灸对腰椎间盘突出症(Lumbar disc herniation,LDH)患者腰背伸肌群表面肌电指标及血清基质金属蛋白酶3(Matrix metalloproteinase 3,MMP3)、前列腺素E2(Prostaglandin E_(2),PGE_(2))、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)表达的作用。方法应用前瞻性随机对照研究方法选取2020年3月—2022年5月收治的LDH患者186例,以随机数字表法分为观察组(62例)、对照A组(62例)、对照B组(62例)。对照A组予以灯盏花素穴位注射,对照B组予以针灸,观察组予以灯盏花素穴位注射联合针灸,均治疗1个月。比较3组疗效、不良反应与治疗前、治疗1个月后疼痛程度评分(Visual Analogue Scale/Score,VAS)、日本骨科协会下腰痛功能评价表评分(Japanese Orthopaedic Association Scores,JOA)、日常生活能力评分(Barthel,BI)、腰背伸肌群表面肌电指标(积分肌电值、平均功率频率)、血液流变学指标、血清免疫功能指标[免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)、补体C_(3)]、MMP3、PGE_(2)、IL-1β水平。结果观察组治疗1个月后总有效率93.55%(58/62)高于对照A组7742%(48/62)、对照B组80.65%(50/62)(P<0.05);3组治疗1个月后VAS评分较治疗前降低,且观察组低于对照A组、对照B组,JOA、BI评分与积分肌电值、平均功率频率较治疗前增高,且观察组高于对照A组、对照B组(P<0.05);3组治疗1个月后全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数较治疗前降低,且观察组低于对照A组、对照B组(P<0.05);3组治疗1个月后血清IgG、IgM、补体C_(3)、MMP3、PGE_(2)、IL-1β水平较治疗前降低,且观察组低于对照A组、对照B组(P<0.05);3组治疗期间不良反应发生率相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用灯盏花素穴位注射联合针灸治疗LDH可缓解疼痛程度与腰背伸肌群疲劳程度,提升腰背伸肌群肌肉收缩性,改善腰椎功能及日常生活能力,改善血液流变学、免疫功能,下调血清MMP3、PGE_(2)、IL-1β表达,疗效显著,且安全性好。

灯盏花乙素通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路改善LPS+ATP诱导内皮细胞炎症反应和细胞焦亡

目的探讨灯盏花乙素(scutellarin,Scu)能否对LPS+ATP诱导内皮细胞炎症反应和细胞焦亡发挥改善作用,并初步研究其作用机制。方法用不同浓度Scu预处理原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)1 h后,2.5 mg·L^(-1) LPS处理5.5 h,再用2.5μmol·L^(-1) ATP活化0.5 h。MTT法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)法分析细胞毒性损伤,ELISA法测定上清IL-1β、IL-18、HMGB-1含量。WB法检测炎症小体相关蛋白NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1p20和细胞焦亡相关蛋白GSDMD-NT表达。通过Scu和pan-caspase抑制剂Z-YVAD-FMK联用,检测pro-caspase-1、caspase-1p20、GSDMD-NT蛋白表达和上清IL-1β、IL-18、HMGB-1含量的变化,进一步分析Scu对pro-caspase-1活化的抑制作用。结果与LPS+ATP组比较,Scu可浓度依赖性改善LPS+ATP诱导的细胞毒性损伤,增加细胞活性,减少IL-1β、IL-18、HMGB-1的释放,下调NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、GSDMD-NT蛋白水平,从而有效抑制pro-caspase-1的活化和改善细胞焦亡。Scu对pro-caspase-1活化的抑制作用与Scu/Z-YVAD-FMK联用组比较无明显差异,但明显抑制pro-caspase-1蛋白生成。结论Scu可减少NLRP3炎症小体组成蛋白的生成和抑制pro-caspase-1活化,从而改善LPS+ATP诱导的内皮细胞炎症损伤,并通过降低GSDMD-NT蛋白表达减轻细胞焦亡。

灯盏花素对局灶性脑缺血大鼠海马神经元损伤及Akt/JNK3/caspase-3通路的影响

目的:探讨灯盏花素对局灶性脑缺血大鼠海马神经元损伤及Akt/JNK3/caspase-3通路的影响。方法:SD大鼠100只根据体质量随机分成对照组、模型组和灯盏花素低(10.0 mg·kg-1)、中(20.0 mg·kg-1)、高(40.0 mg·kg-1)剂量组,模型组、灯盏花素各剂量组构建局灶性脑缺血模型,灯盏花素各剂量组于造模成功开始给予相应剂量药物灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水。试验结束后,对大鼠认知功能进行评价;测定大鼠海马组织Akt、JNK3、caspase-3的mRNA、蛋白水平。结果:与模型组比较,灯盏花素各剂量逃避潜伏期降低,经过原平台位置的次数、原平台象限留的时间升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05);但仍未恢复到对照组的水平(P<0.05)。与对照组比较,模型组、灯盏花素各剂量组Akt mRNA及蛋白表达水平降低,JNK3、caspase-3mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05);且灯盏花素各剂量组Akt mRNA、蛋白表达水平高于模型组,JNK3、caspase-3 mRNA、蛋白表达水平低于模型组(P<0.05),均呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:灯盏花素对大鼠脑局灶性脑缺血大鼠海马神经元损伤具有较好的保护作用,能明显改善其神经功能、感觉及运动功能,其机制与灯盏花素能促进Akt mRNA、蛋白的表达,抑制JNK3、caspase-3 mRNA、蛋白的表达,进而抑制海马神经元细胞凋亡有关。

藏花素对H_2O_2诱导PC12细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响

本文通过观察藏花素对H2O2诱导的PC12细胞的保护作用和对Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响,探讨藏花素对阿尔茨海默病细胞模型保护作用的机制。MTT法及LDH活性测定观察藏花素对PC12细胞模型的影响,RT-PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平,Western blot检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。藏花素预保护浓度在0.625μM和5μM之间,细胞存活率随着藏花素浓度的升高而升高;藏花素组和VE组与模型组相比,Bcl-2 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05),Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。研究结果表明:藏花素可能是通过上调Bcl-2的表达,从而介导PC12细胞发挥抗氧化和细胞凋亡的生物学功能。

灯盏花素对肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1,Smad3表达的影响

为了观察灯盏花素对肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1和Smad3表达的影响,探讨灯盏花素抗大鼠肝纤维化的作用机制,方法:将大鼠32只随机分为对照组、模型组、水飞蓟宾组和灯盏花素组,采用皮下注射四氯化碳(CCl_4)造成大鼠肝纤维化模型,每周两次,连续8周。留取肝左叶行H.E.Masson染色,免疫组化方法检测各组TGF-β1和Smad3的表达,然后光镜下观察肝组织学变化和TGF-β1和Smad3表达量。结果与对照组比较,模型组TGF-β1和Smad3的表达明显增强(P<0.05),和模型组比较,灯盏花素可显著减少TGF-β1和Smad3的表达(P<0.05),而且肝纤维化减轻。表明灯盏花素可抑制大鼠肝纤维化模型中TGF-β1和Smad3的表达,从而发挥抗肝纤维化作用。

灯盏花素对急性心肌梗死大鼠的心肌保护作用及机制研究

目的:探讨灯盏花素对急性心肌梗死(AMI)大鼠的心肌保护作用及其分子机制。方法:将32只SD大鼠随机均分为假手术组、AMI组、AMI+灯盏花素组,AMI+灯盏花素+LY294002组。通过超声心动图、TUNEL染色、ELISA、Western blot和qRT-PCR等多种检测方法,探究各组大鼠的心功能、心肌细胞凋亡率、心肌损伤程度、凋亡相关分子以及PI3K/Akt信号通路的表达情况。结果:与假手术组比较,AMI组大鼠的心脏收缩功能降低,心肌细胞凋亡率显著增加,心肌损伤严重;与AMI组比较,AMI+灯盏花素组的上述病理改变明显减轻;当加入PI3K的特异性抑制剂LY294002后,灯盏花素对AMI大鼠的治疗作用被削弱。结论:灯盏花素可能是通过激活PI3K/Akt信号通路抑制心肌细胞凋亡,从而减轻AMI导致的大鼠心肌损伤,改善心功能。

间充质干细胞联合灯盏花素基于Galectin-3/Akt/Snail通路对肾脏纤维化的影响研究

目的观察骨髓源性间充质干细胞(MSCs)和灯盏花素是否能协同抗慢性肾脏病肾脏纤维化,并探讨其可能机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、灯盏花素组、MSCs组和灯盏花素+MSCs组。除正常组外,其余组大鼠采用尾静脉给予阿霉素联合腺嘌呤灌胃方法建立慢性肾脏病模型。建模结束后,灯盏花素组给予灯盏花素连续灌胃7 d;MSCs组在建模结束后第3天,尾静脉注射MSCs悬液;灯盏花素+MSCs组给予灯盏花素连续灌胃7 d,同时建模结束后第3天尾静脉注射MSCs悬液。干预结束后第3天收集尿、血检测24 h尿蛋白、血肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;取肾脏,计算肾脏指数,HE、Masson和Sirius Red染色观察肾脏组织病理变化,免疫组织化学SP法检测肾脏组织中I型胶原A1(ColIA1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达情况,Western blot法检测肾脏组织中p-Akt、Akt、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Galectin-3和Snail1蛋白表达情况。结果灯盏花素组、MSCs组和灯盏花素+MSCs组24 h尿蛋白、血清Cr和BUN水平、肾脏指数均明显低于模型组(P均<0.05)。HE、Masson和Sirius Red染色显示,模型组有肾小管腔内腺嘌呤结晶沉着,肾间质胶原纤维化明显,肾小球系膜增厚;灯盏花素组、MSCs组和灯盏花素+MSCs组肾组织病理改变明显较模型组轻,其中灯盏花素+MSCs组最轻。灯盏花素组、MSCs组和灯盏花素+MSCs组肾组织中ColIA1、p-Akt/Akt、α-SMA、Galectin-3、Snail1表达量均明显低于模型组(P均<0.05),肾组织中MMP-9表达量明显高于模型组(P均<0.05)。灯盏花素+MSCs组MMP-9表达量明显高于灯盏花素组和MSCs组(P均<0.05),灯盏花素+MSCs组p-Akt/Akt、Snail1表达量明显低于灯盏花素组和MSCs组(P均<0.05),灯盏花素组和灯盏花素+MSCs组Galectin-3表达量明显低于MSCs组(P均<0.05)。结论MSCs和灯盏花素联用较单独应用抗慢性肾脏病肾脏纤维化效果更佳,其机制可能与调节Galectin-3/Akt/Snail信号通路有关。

长春西汀联合灯盏花素对急性脑梗死患者血清低氧诱导因子-1α、半胱氨酸蛋白酶3水平及NIHSS评分的影响

目的探讨长春西汀联合灯盏花素治疗急性脑梗死(ACI)的效果。方法选取我院93例ACI患者,按照随机数字表法将其分为对照组(46例)和观察组(47例),对照组给予长春西汀治疗,观察组给予长春西汀联合灯盏花素治疗。比较两组患者治疗前、后NIHSS评分、临床疗效、治疗前、后血清HIF-1α、caspase-3水平、不良反应发生情况及SF-36评分。结果治疗2周后,两组NIHSS评分均显著降低,且观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗总有效率为89.36%,显著高于对照组的67.39%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗2周后,两组血清HIF-1α、caspase-3水平均显著降低,且观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周后,观察组患者SF-36评分显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论长春西汀联合灯盏花素治疗ACI疗效确切,有助于改善神经功能,降低患者血清HIF-1α、caspase-3水平,提高患者生活质量,且安全性高,值得推广应用。

灯盏花素抗凝血作用的研究

目的 :研究灯盏花素的抗凝血作用。方法 :通过测定凝血时间 (CT)、凝血酶原时间 (PT)、血小板第 3因子 (PF3 )和优球蛋白溶解时间 (ELT) ,从抗凝机制的不同角度研究灯盏花素的抗凝作用。结果 :灯盏花素能显著延长CT、PT ,抑制PF3 活性 ,缩短ELT。结论 :灯盏花素的抗凝血作用是通过影响PF3 和凝血因子V而实现的 ,并能显著提高纤溶活性。

灯盏花素通过上调miR-140表达对心肌缺血再灌注损伤发挥保护作用

建立小鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,观察灯盏花素对心肌梗死面积,凋亡因子caspase3及miR-140表达变化影响。体外建立细胞缺血-再灌注损伤细胞模型,MTT测定小鼠心肌细胞细胞活性,通过抑制与过表达miR-140,观察灯盏花素对caspase3及其上游分子TLR4、NF-κB表达的影响。研究发现灯盏花素在体内能减小心肌梗死面积,降低caspase3 mRNA表达,增加miR-140表达。在体外,抑制miR-140表达能抵消灯盏花素的抗凋亡作用,使caspase3 mRNA及TLR4、NF-κB蛋白表达增加;过表达miR-140使caspase3 mRNA及TLR4,NF-κB蛋白表达减少。因此,我们认为灯盏花素可能是通过上调miR-140表达抑制缺血-再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡。

灯盏花素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的观察灯盏花素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组,模型组及灯盏花素Ⅰ、Ⅱ组。灯盏花素组大鼠于术前1 w分别腹腔注射不同剂量的灯盏花素(25、50 mg.kg-1.d-1),另2组给等量生理盐水。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌缺血再灌注模型。缺血30 m in、再灌注2 h后,采用Annexinv/PI双染、流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,采用蛋白印记法定量检测心肌细胞P-STAT1及P-STAT3的表达情况。结果与模型组相比,灯盏花素可明显降低心肌细胞的凋亡率,增加P-STAT3的表达,降低P-STAT1的表达,且差异均有统计学意义(P<0.01)。结论灯盏花素通过上调抗凋亡基因P-STAT3、下调凋亡基因P-STAT1的表达发挥心脏保护作用。

灯盏花素对缺氧/复氧诱导培养乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

目的:探讨灯盏花素对缺氧/复氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其作用机制。方法:利用原代培养的SD乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注(MI/R)模型,分正常对照组,模型组和灯盏花素3个剂量(25、50、100mg/L)预处理组。用MTT法测定细胞存活率,用AnnexinⅤ-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率;用免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达;用Western-blot法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达及细胞色素C(CytC)的释放。结果:缺氧复氧损伤后,与正常对照组比较,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,灯盏花素3个剂量预处理后,细胞存活率增加,细胞凋亡率降低,且显示剂量依赖性。另外,缺氧复氧损伤,可使心肌细胞Bcl-2蛋白表达减少,CytC释放增加,Caspase-3活性增强,灯盏花素预处理后,Bcl-2表达增强,CytC释放减少,Caspase-3活性降低。结论:灯盏花素可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡,其抗细胞凋亡作用可能与其增加Bcl-2蛋白表达,减少CytC的释放,抑制Caspase-3活性有关。

三价铁对灯盏花素与牛血清白蛋白相互作用的影响

运用荧光光谱、紫外吸收光谱探讨了Fe3+对灯盏花素(BR)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的影响;从Fe3+与BSA的静电作用、配位结合以及Fe3+与BR的配位作用等方面分析了影响BR与BSA相互作用的因素.结果表明,Fe3+不改变BSA与BR的作用机制,但使得二者结合的猝灭常数、结合常数及结合位点数减小.

三价铁对灯盏花素与溶菌酶相互作用的影响

目的探讨三价铁(Fe^(3+))在模拟人体正常生理环境下对溶菌酶与灯盏花素相互作用的影响。方法运用同步荧光光谱法观察有无Fe^(3+)参与时灯盏花素与溶菌酶的相互作用。结果有、无Fe^(3+)存在,灯盏花素与溶菌酶均可形成基态复合物从而猝灭溶菌酶的内源性荧光,猝灭原因均为静态猝灭。有、无Fe^(3+)存在,热力学温度为308 K时灯盏花素与溶菌酶的结合常数分别为1.15×10~6、1.08×10~6L/mol,结合位点数分别为0.993、1.19。在Fe^(3+)存在时,灯盏花素与溶菌酶作用力由疏水作用改变为范德华力和氢键,结合位点靠近色氨酸,并使色氨酸的疏水性增强。结论 Fe^(3+)不改变灯盏花素与溶菌酶的猝灭作用机制,但使得两者结合常数、结合位点数和作用力类型发生改变。

灯盏花素对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的实验研究

目的探讨灯盏花素(breviscapine,BRE)对大鼠缺血-再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)心肌缺血凋亡和凋亡指标caspase-3 mRNA表达的影响。方法Male Wistar大鼠48只,随机分为假手术组、生理盐水组、高剂量、中剂量、低剂量及模型组(IMR组),每组8只,缺血30 min后再灌注3 h,用荧光定量PCR方法检测caspase-3 mRNA的活性。结果与假手术组比较,模型组caspase-3mRNA活性明显增高,且有显著差异(P<0.01)。低剂量组、中剂量组、高剂量组同模型组比较caspase-3mRNA活性有所降低,且降低程度依次增大,同时具有显著性差异。他们同生理盐水组比较则有所升高,且升高程度依次减小,同时有显著性差异(P<0.01)。结论caspase-3 mRNA检测结果显示灯盏花素对心肌缺血有一定的防治和保护作用。

芒柄花素对体外培养成骨细胞缺氧损伤的保护作用

目的研究芒柄花素在缺氧培养条件下对成骨细胞增殖、细胞周期、凋亡和成骨分化等的影响。方法采用酶消化法分离培养SD大鼠颅骨成骨细胞,并用三气培养箱建立缺氧模型。将细胞分为常氧对照组、缺氧对照组和缺氧加药组,其中缺氧加药组进一步分为10-6、10-5和10-4 mol·L-1组,分别加入10-6、10-5和10-4 mol·L-1芒柄花素。于缺氧处理36 h后分析各组的细胞存活率、LDH漏出率、细胞凋亡、细胞周期等,并用RT-PCR法检测缺氧诱导因子-1α、Bcl-2及Caspase-3的基因表达情况。缺氧处理48 h后检测ALP活性、钙化结节面积等成骨分化指标。结果与缺氧对照组比较,芒柄花素可提高细胞存活率,降低LDH漏出率,减少细胞凋亡并提高G1期细胞百分比,提高HIF-1α和Bcl-2mRNA的表达水平,抑制Caspase-3 mRNA的表达水平,对ALP活性和钙化结节面积等也有提高作用,且均呈现出剂量依赖性特点。结论芒柄花素对成骨细胞缺氧损伤具有明显保护作用。

灯盏花对血管内皮细胞损伤大鼠Wnt/β-catenin信号通路及炎症介质的影响

目的:研究灯盏花素对血管内皮细胞损伤大鼠的保护机制及对Wnt/β-catenin信号通路的作用机制。方法:选取60只SD大鼠,随机分为健康组、模型组、灯盏花素低剂量组(BL组)、灯盏花素高剂量组(BH组),每组15只。采用苏木精-伊红(HE)染色观察血管形态;逆转录PCR测Wnt信使RNA(mRNA)、卷曲蛋白1(FZD1) mRNA、轴蛋白1(AXIN1) mRNA、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β) mRNA、β-连环素mRNA、血管内皮生长因子(VEGF) mRNA;酶联免疫吸附试验测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP);显微镜观察血管内皮细胞形态;MTT测血管内皮细胞增殖;蛋白质印迹法(Western Blotting)测Wnt、FZD 1、AXIN1、GSK-3β、β-连环素、VEGF水平。结果:健康组大鼠血管内无明显改变;模型组有明显血管损伤;BL组与BH组大鼠血管损伤有所改善,且以BH组效果明显。与健康组比较,模型组血管内皮细胞间隙宽、细胞形态变小、脱落;BL组血管内皮细胞与模型组较为接近;BH组血管内皮细胞间隙变窄且凋亡减少,形态有所改善。与健康组比较,模型组Wnt、VEGF、FZD1、β-连环素、AXIN1、血管内皮细胞不同时间点OD值均降低,GSK-3β、TNF-α、CRP、血管内皮细胞凋亡率升高(P<0.05),与模型组比较,BL组与BH组Wnt、VEGF、FZD1、β-连环素、AXIN1、血管内皮细胞不同时间点OD值均升高,GSK-3β、TNF-α、CRP、血管内皮细胞凋亡率降低(P<0.05),且以BH组效果更为显著(P<0.05)。结论:灯盏花素通过调控Wnt/β-catenin信号通路表达,控制血管的稳定性,从而对血管内皮细胞损伤大鼠的起保护作用。

当归补血汤及其活性成分通过NLRP3/ASC/caspase-1通路调控糖尿病大鼠动脉粥样硬化及网络药理学研究

目的 观察当归补血汤及其主要吸收成分通过NLRP3/ASC/caspase-1信号通路调控糖尿病大鼠动脉粥样硬化,并结合网络药理学预测其他潜在作用靶点。方法 将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、当归补血汤组、当归补血汤吸收生物活性成分组。除正常对照组外,其他各组用链脲佐菌素(STZ,60 mg/kg)一次性腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,正常对照组给予普通饲料,其余3组给予高糖高脂饲料,喂养4周,同时给药组分别灌胃当归补血汤、吸收生物活性成分(ABCs)混合溶液,正常对照组、模型组灌胃等体积的生理盐水。采用ELISA法检测大鼠血清NF-κB、TNF-α、IL-6、ICAM-1水平,Western blot法检测主动脉NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18、ASC蛋白表达,HE染色观察大鼠主动脉病理学变化。采用网络药理学预测当归补血汤治疗糖尿病、动脉粥样硬化、血管内皮炎症的核心靶点、成分及相关通路。结果 与模型组比较,当归补血汤可降低大鼠血清NF-κB、TNF-α、IL-6、ICAM-1水平(P<0.05),修复主动脉组织结构损伤,抑制主动脉组织NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18、ASC蛋白表达(P<0.05,P<0.01),同时ABCs可发挥当归补血汤相似的药理作用。此外,网络药理学预测表明ABCs中阿魏酸、黄芪甲苷为核心活性成分,还可能通过PI3K-Akt、AGE-RAGE信号通路发挥作用。结论 当归补血汤及ABCs可能通过NLRP3/ASC/caspase-1炎症信号通路改善大鼠糖尿病伴动脉粥样硬化,ABCs中阿魏酸、黄芪甲苷可能为发挥作用的主要成分。

灯盏乙素抑制过氧化氢诱导PC12细胞凋亡及机制

目的:观察灯盏乙素对过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞凋亡的抑制作用及其作用机制。方法:采用H2O2诱导PC12细胞凋亡模型,用碘化丙啶(PI)单染和PI/AnnexinV双染检测细胞凋亡,用DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA断裂,并采用RT-PCR检测Bcl-2mRNA表达、荧光光度法检测caspase-3活性。结果:灯盏乙素可以抑制H2O2诱导的膜磷脂酰丝氨酸外翻,增加Bcl-2mRNA表达,减小caspase-3活性,并降低DNA片段化和细胞凋亡率。结论:灯盏乙素显著抑制H2O2诱导的细胞凋亡,其抗细胞凋亡作用可能与其增加Bcl-2表达、抑制caspase-3活化有关。