复合酶-微波辅助萃取结合超滤纯化的灰树花子实体多糖的免疫活性研究

目的:研究经酶解-微波辅助萃取、超滤分级纯化的灰树花子实体多糖的免疫活性。方法:采用复合酶解结合微波辅助萃取方法提取灰树花子实体多糖,采用超滤工艺对提取多糖进行分级纯化;采用MTT法研究多糖对小鼠脾淋巴细胞、ConA/LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖作用;建立荷瘤小鼠模型,研究灰树花多糖对肿瘤的抑制作用。结果:获得分子质量范围为<50kD的GFP-I、50～100kD的GFP-II和100～200kD的GFP-III;与RPMI-1640对照组相比,GFP-I、GFP-II和GFP-III对淋巴细胞增殖率分别增加26.558%～74.167%(P<0.001)、20.175%～152.075%(P<0.001)和26.473%～334.797%(P<0.001);对ConA诱导的淋巴细胞增殖率分别增加31.408%～122.894%(P<0.001)、53.075%～235.693%(P<0.001)和83.347%～367.241%(P<0.001);对LPS诱导的淋巴细胞增殖率分别增加20.526%～97.075%(P<0.001)、38.288%～211.348%(P<0.001)和54.454%～344.883%(P<0.001);相对于生理盐水(NS)组,在实验剂量范围内,GFP-I、GFP-II和GFP-III对S180肿瘤的抑制率分别达到10.15%～22.94%(P<0.001)、12.79%～30.10%(P<0.001),23.86%～51.65%(P<0.001)。结论:经复合酶-微波辅助萃取、超滤分级纯化后多糖具有显著免疫活性和抗肿瘤活性,其中GFP-III具有比GFP-I和GFP-II更强的免疫活性和抗肿瘤活性,而且活性与其浓度正相关,多糖可能以对T淋巴细胞增殖的促进作用为主。

S-8大孔树脂对灰树花子实体多糖酶解液色素吸附的影响

目的 研究大孔树脂对灰树花子实体多糖酶解液色素的吸附过程和行为.方法 测定S-8树脂对多糖色素的吸附量,绘制吸附动力学和热力学曲线,并对结果进行模拟,确定相应的动力学和热力学模型参数.结果 拟二级动力学方程可更好地描述S-8树脂对色素的吸附过程;热力学结果表明3种双参数模型对色素在S-8大孔树脂上的吸附均有较好的适用性,适用性依次Langmuir＞ Temkin＞ Freundlich;树脂对多糖色素的吸附焓变和吸附熵变均大于零,吸附自由能小于零,平均吸附能小于20 kJ/mol.结论 S-8树脂对色素的吸附过程是自发进行的单分子层物理吸附,在293～ 313 K范围内,升温有利于吸附过程的进行.

大孔树脂对灰树花子实体酶解液色素的吸附性能研究

目的研究大孔树脂对灰树花子实体多糖酶解液色素的吸附。方法对比HPD 400、AB-8、S-8、D3520、D201、DA201-C等树脂对灰树花子实体多糖酶解液中色素的脱除率、树脂的静态吸附动力学特性及树脂用量对色素脱除率和多糖保留率的影响,筛选出理想树脂,研究料液pH值、初始多糖质量浓度、吸附温度及洗脱剂体积分数等因素对色素吸附和解吸的影响。结果 S-8树脂最为适宜,优化的工艺条件为树脂用量为40 g湿树脂/L酶解液,料液多糖质量浓度控制在4.0 mg/mL,pH 7～8,吸附温度40℃,180 r/min振荡150 min,色素脱除率可达89.5%,多糖保留率为87.9%。采用质量浓度为30%、用量为10 mL/g湿树脂的乙醇对树脂进行再生,色素和多糖解吸率都在90%以上。结论 S-8树脂是脱除灰树花子实体多糖酶解液中色素的理想树脂。

灰树花子实体多糖硫酸酯化及抗凝血活性研究

目的:优化灰树花子实体多糖硫酸酯化的工艺条件,探讨其硫酸酯化多糖的抗凝血活性。方法:灰树花子实体经过醇沉、碱提得到水不溶性多糖组分(Polysaccharide of Grifola frondosa,GF)。对硫酸酯化工艺中的反应温度、时间、原料比例条件进行优化。通过活性部分的凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)和凝血酶原时间(PT)测定硫酸酯化多糖(Sulfated polysaccharide of Grifola frondosa,S-GF)的抗凝血活性。溶栓活性采用纤维蛋白板法测定。结果:最终确定硫酸酯化温度为60℃,时间3 h,GF∶氯磺酸=200 mg∶20 mL为最佳工艺条件。硫酸酯化多糖S-GF的取代度为2.01。经过Sephadex G50柱层析证明S-GF为均一组分。不同浓度的S-GF均能有效延长APTT和TT,并且随着浓度的增大,APTT和TT延长的时间越长,而对PT未见明显延长。结论:S-GF具有一定的抗凝血特性,并且是通过内源性凝血途径来实现抗凝血的,但是比肝素钠的抗凝血能力低。

含灰树花子实体及绿茶提取物眼霜的抗衰老功效研究

目的:观察含有灰树花子实体及绿茶提取物眼霜的抗衰老效果。方法:采用无创性仪器检测以及图像分析的方法,对23例受试者持续6周外用眼霜的效果进行分析。无创性检测的主要功效参数为眼部细纹(鱼尾纹)和皮肤弹力。采用VISIA-CR图像分析的方法进行眼部肤色评价。结果:使用测试眼霜6周后,眼部鱼尾纹各参数较0周基准值相比均有不同程度降低,但结果无显著性差异(P>0.05)。左、右双眼皮肤弹力平均值较0周的0.66/0.64上升到6周的0.76/0.74,且差异有统计学意义(P<0.05)。眼部肤色的亮度和均匀度较0周均有明显改善,改善幅度分别为0.54%和5.63%,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:含灰树花子实体及绿茶提取物眼霜可以有效提高眼部皮肤亮度和均匀度,增强皮肤弹力,且具有较高安全性。

灰树花多糖Sevage法除蛋白工艺的研究

研究了灰树花多糖Sevage法除蛋白的工艺,采用单因素实验确定Sevage试剂添加量、氯仿与正丁醇体积比、脱蛋白次数以及振摇时间对灰树花多糖除蛋白效果的影响,并在单因素实验基础上采用响应面法确定了灰树花多糖Sevage法除蛋白的工艺条件:多糖溶液与Sevag试剂体积比3.073∶1,氯仿正丁醇体积比4.016∶1,振摇时间25.59min,脱蛋白率为37.95%,多糖含量为78.32%。