灰毛泡根部的化学成分

目的 研究灰毛泡根部甲醇提取物的化学成分。方法 用乙酸乙酯萃取 ,正相和反相硅胶 (MCI ,Rp 18)柱色谱分离 ,并通过波谱技术 (13 CNMR ,DEPT ,1HNMR ,FABMS)及标准样品对照鉴定结构。结果 分离鉴定了10个化合物 ,分别为 2α ,19α 二羟基 3 羰基乌索 12 烯 2 8 酸 (Ⅰ )、2 羰基坡曼酸 (Ⅱ )、覆盆子酸 (Ⅲ )、蔷薇酸 (Ⅳ )、2α ,3α ,19α 三羟基齐墩果 12 烯 2 8 酸 (Ⅴ )、2 ,3 O 异丙叉蔷薇酸 (Ⅵ )、坡曼酸 (Ⅶ )、2α ,3β 二羟基羽扇豆烷 2 0 (2 9) 烯 2 8 酸 (Ⅷ )、儿茶素 (Ⅸ )和胡萝卜苷 (Ⅹ )。结论 这是首次报道该植物的化学成分。

灰毛浆果楝的化学成分研究

目的对灰毛浆果楝的化学成分进行研究,以期寻找活性成分。方法运用大孔吸附树脂、正反相柱色谱、葡聚糖凝胶、高效液相制备色谱法等技术分离。根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定化合物的化学结构。结果从中分离得到了7个化合物:annuionone D(Ⅰ)、dehydrovomifoliol(Ⅱ)、alangionoside L(Ⅲ)、儿茶素(Ⅳ)、scopoletin(Ⅴ)、2-hydroxyandrosta-1,4-diene-3,16-dione(Ⅵ)、β-谷甾醇(Ⅶ)。结论以上化合物均是首次从该植物中分离得到。

毛球莸和小叶灰毛莸的化学成分

从毛球莸中分离出4个化合物,经MS、~1H-NMR和^(13)C-NMR等波谱分析方法分别鉴定为刺槐素(Ⅰ),香叶木素(Ⅱ),赪桐甾醇(Ⅲ)和一个环烯醚萜甙——8-acetyl ha-pagide。从小叶灰毛莸中除分离到上述环烯醚萜甙,还另外获得一个环烯醚萜甙ajugoside(Ⅴ)。

灰毛含笑在南京的引种与繁殖

灰毛含笑能够基本适应南京的气候,能正常开花结实,完成生活史,具有较好的观赏价值。灰毛含笑可通过播种育苗和嫁接进行繁殖。

灰毛浆果楝提取物对菜青虫拒食活性的初步研究

对灰毛浆果楝根的95%乙醇提取物分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等进行萃取获得各部分萃取物,分别对菜青虫进行拒食活性测试,结果显示灰毛浆果楝根的95%乙醇提取物的石油醚和氯仿萃取部分对菜青虫具有较好的拒食活性。

灰毛浆果楝叶绿体基因组密码子使用特征分析

通过分析灰毛浆果楝叶绿体基因组密码子的使用特征,探讨影响其密码子使用偏性的主要因素。从灰毛浆果楝叶绿体基因组中筛选出54条编码序列(CDS),利用Codon W 1.4.2和CUSP软件计算不同基因密码子各位置的GC含量,以明确灰毛浆果楝叶绿体基因组密码子的使用偏性规律。结果显示:灰毛浆果楝叶绿体基因组密码子第3位碱基的GC含量为28.95%,即第3位密码子富含A和U,有效密码子数(Nec)在34.60~61.00之间,Nec值大于45的CDS有39个;相对同义密码子使用度(URSC)值大于1的密码子有29个,其中16个以U结尾,12个以A结尾;中性绘图分析结果显示GC 12和GC 3的相关系数为0.0984,相关性不显著,回归系数(对角线斜率)为0.1379;基因N ec比值大多数分布在-0.05~0.05区间外,即大部分基因N ec值与预期值差距较大;相关关系分析显示,GC 3与GC1、GC2均未达到显著相关,Nec与GC3呈极显著相关。综合分析发现灰毛浆果楝叶绿体基因组密码子偏好性较弱,选择为主要影响因素,同时受到其他因素的影响。结合高表达优越密码子和高频密码子确定GUU、GUA、UCU、AGU、CCU、ACU、GGU、GCU、CAA、AAA、UGU、AGA和AUU等13个密码子为最优密码子。

黔产灰毛浆果楝枝叶中一个新环戊烯酮结构

目的:研究黔产灰毛浆果楝Cipadessa cinerascens(Pell.)Hand.-Mazz.枝叶的化学成分。方法:运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱、HPLC等方法分离化合物,综合运用多种波谱方法和理化性质对化合物进行结构鉴定。结果:从黔产灰毛浆果楝枝叶乙酸乙酯萃取部位中分离得到11个化合物,分别鉴定为:2-cyclopenten-1-one,4-hydroxy-2-(16-hydroxy-12E,14E,18E-hexadeceneyl)(1)、十六烷酸(2)、13(R)-羟基-(9Z,11E,15Z)-十八三烯酸(3)、甘油亚麻酸酯(4)、cipatrijugin A(5)、cipatrijugin D(6)、21α-methylmelianodiol(7)、21β-methylmelianodiol(8)、labd-13(E)-ene-8α,15-diol-15-yl acetate(9)、labd-13(E)-ene-8α,15-diol(10)、(11E)-8-hydroxy-14,15-dinor-11-labden-13-one(11)。结论:其中,化合物1为新化合物,化合物3、4、11为首次从该科植物中分离得到,化合物7、8为首次从该属植物中分离得到,化合物2、9为首次从该植物中分离得到。

灰毛莸挥发油化学成分的研究

采用GC/MS联用法研究了通过同时蒸馏萃取法(SDE)提取灰毛莸挥发油的化学成分,同时结合WILEY、NIST谱图库检索出其主要化学成分。结果表明,在所给的分析条件下,共分离并鉴定出70个化学成分。主要成分为:反-(-)-2(10)-蒎烯-3-醇乙酸酯、(+)-柠檬烯、L-香芹醇、异香芹醇、左旋-β-蒎烯、β-蒎烯、桃金娘烯醇、L-香芹酮等,占挥发油总质量的80.88%,其结果为该植物挥发油的生理活性研究和产品的开发应用提供了重要的理论依据。

灰毡毛忍冬bZIP25基因的克隆及其表达模式分析

目的克隆灰毡毛忍冬bZIP25基因序列全长,并进行生信分析及表达模式分析,以初步探索其在灰毡毛忍冬中的生物学功能。方法通过逆转录PCR技术克隆bZIP25基因的序列全长,采用生物信息学分析方法对bZIP25及其编码的蛋白进行分析。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术测定其在茎、叶及七个花期花中的表达水平。结果克隆得到LmbZIP25基因(OR551766),其编码191个氨基酸,具有典型的bZIP家族结构,在bZIP结构域中与其他植物同源性较高。LmbZIP25基因具有组织特异性,在茎中的表达量显著高于花和叶,在七个花期中黄色花蕾期的表达量最高。结论克隆得到LmbZIP25基因全长,分析其在不同器官和不同花期的表达差异,为进一步探索其在灰毡毛忍冬中花发育中的功能奠定了研究基础。

灰毡毛忍冬MADS-box基因家族鉴定与CMB1基因克隆

目的鉴定灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides MADS-box家族基因并进行生物信息学分析与表达模式验证,克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬MADS-box家族成员CMB1全长。方法基于转录组数据,利用在线工具对灰毡毛忍冬MADS-box进行生物信息学分析,并利用qRT-PCR验证MADS-box基因在不同品种中的表达模式,通过RT-PCR、RACE技术克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬CMB1基因全长。结果28个灰毡毛忍冬MADS-box蛋白长度为89~359 aa,碱性蛋白占比85.7%,不稳定蛋白占比96.4%,亲水性蛋白占比96.4%,均定位于细胞核,均为无跨膜结构的非分泌蛋白。转录组显示,与野生型比较,湘蕾型中28个MADS-box基因有17.86%表达下调,MIKCC型基因中有18.75%表达下调。克隆得到在两个品种的灰毡毛忍冬花中高度特异性表达的CMB1基因全长,均包含一个738 bp的ORF,编码245个氨基酸。CMB1基因在两个品种的花中表达量存在显著差异(P<0.01),且与茎、叶相比,在花中高度特异性表达(P<0.01)。结论基于灰毡毛忍冬转录组数据,鉴定了28个MADS-box家族基因,克隆得到湘蕾型与野生型灰毡毛忍冬CMB1基因全长,为进一步研究灰毡毛忍冬花发育、优良表型形成的分子机制提供研究基础与理论依据。

灰毡毛忍冬ERF基因家族鉴定及其在衰老过程中的表达分析

【目的】灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides为我国南方地区大宗道地中药材和重要经济植物,绿原酸和木犀草苷等药效物质在器官衰老过程中积累且受转录因子调控。乙烯信号转导相关ERF基因家族广泛参与植物的衰老、胁迫响应和次生代谢。鉴定灰毡毛忍冬ERF家族成员并探究其表达模式,可为该类基因调控次生代谢的功能研究提供参考。【方法】基于转录组数据鉴定灰毡毛忍冬ERF转录因子家族,通过系统发育树分析其进化关系,利用MEME在线网站分析序列的结构基序。QRT-PCR分析LmERFs基因在不同器官衰老过程以及冷胁迫和乙烯处理后的表达模式。【结果】在灰毡毛忍冬中共鉴定出65个具AP2保守结构域的LmERFs基因,可将其分为3个亚组。利用RNA-Seq技术筛选了在幼嫩和衰老叶片之间差异表达的20个LmERFs。进一步qRT-PCR分析显示,分别有18个、13个和11个LmERFs基因在叶片、茎和花的衰老过程显著差异表达,其中LmERF2、LmERF9、LmERF16、LmERF17和LmERF19基因表达在不同器官衰老过程中均具显著差异。冷胁迫后,叶和茎中7个LmERFs(LmERF1、LmERF2、LmERF6、LmERF7、LmERF8、LmERF11和LmERF12)显著上调,LmERF3、LmERF9、LmERF16和LmERF19显著下调;而乙烯处理诱导了LmERF1、LmERF8和LmERF12基因的表达,抑制了LmERF2、LmERF4、LmERF9、LmERF10、LmERF14、LmERF15、LmERF16、LmERF17、LmERF18和LmERF19基因的表达。【结论】8个LmERFs(LmERF1、LmERF2、LmERF6、LmERF9、LmERF10、LmERF15、LmERF16和LmERF19)响应了器官发育、冷胁迫和乙烯诱导的衰老过程,这为后续挖掘高效调控灰毡毛忍冬次生代谢的靶点LmERFs提供了数据支持。

灰毡毛忍冬花器官发育相关LmSOC1基因克隆及表达分析

【目的】克隆灰毡毛忍冬MADS-box家族基因SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1),对其进行生物信息学和表达模式分析,为探究灰毡毛忍冬花冠不开放机制奠定理论基础。【方法】基于花蕾型灰毡毛忍冬转录组数据,筛选到开花调控基因LmSOC1的Unigene序列并克隆全长cDNA序列,通过生物信息学分析和实时荧光定量PCR技术分析编码蛋白特性和不同品种中LmSOC1基因的表达特异性,最后将LmSOC1基因插入到原核表达质粒载体pTOPO-D1中,并在表达宿主BL21(DE3)中进行蛋白表达。【结果】LmSOC1基因包含645bp的ORF区,LmSOC1蛋白不含信号肽、无跨膜区,为稳定的亲水性蛋白。系统进化树分析表明,LmSOC1蛋白与黄花蒿、榴莲、可可等的SOC1蛋白亲缘关系更近。实时荧光定量PCR分析表明,在2个花蕾型灰毡毛忍冬品种的花蕾和叶片中均检测到LmSOC1基因的表达,而叶片中表达量明显高于花蕾。同时,在早期花蕾中LmSOC1基因的表达量高于晚期花蕾,在‘金翠蕾’品种中这一表达差异极显著(P<0.01)。最后成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出重组蛋白。【结论】通过对LmSOC1基因的克隆和表达分析发现,该基因可能在灰毡毛忍冬花器官发育过程中发挥重要作用,为进一步研究该基因在植物花发育中的生物学功能奠定了基础。

灰毡毛忍冬SS基因的克隆及表达分析

[目的]克隆灰毡毛忍冬SS基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析。[方法]提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆LmSS基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量。[结果]克隆的LmSS基因开放阅读框(ORF)长度为1245 bp,编码414个氨基酸,属于亲水性蛋白,定位于细胞质中,具有典型的多聚异戊二烯基合成酶活性结构域,与其他植物SS基因具有较高同源性。LmSS基因在灰毡毛忍冬不同花期和器官中表达有组织特异性。[结论]该研究成功地克隆灰毡毛忍冬中的SS基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础,同时为探究灰毡毛忍冬皂苷生物合成和调节机制提供了科学依据。

施硒对灰毡毛忍冬硒含量、产量及药用成分的影响

【目的】探究施硒对灰毡毛忍冬硒含量、产量和药用成分含量的影响。【方法】以灰毡毛忍冬优良品种‘金翠蕾’为试验材料,采用叶面喷施亚硒酸钠方法,设计喷施硒浓度0、50、100、150、200、250 mg/L及喷施次数0次、1次、2次、3次,测定不同喷施硒浓度和喷施次数的干花硒含量、鲜花产量、干花绿原酸和木犀草苷含量。【结果】施硒后灰毡毛忍冬的干花硒含量、鲜花产量、干花绿原酸和木犀草苷含量显著增加,喷施硒浓度150~200 mg/L比不施硒分别显著提高了192.42%~231.82%、53.14%~70.29%、16.32%~19.51%、14.61%~21.35%,喷施硒2次比不施硒显著提高了226.23%、63.41%、21.45%和22.31%。鲜花产量、干花绿原酸和木犀草苷含量均随着喷施硒浓度和喷施硒次数的增加呈现先增加后降低的趋势,干花硒含量与喷施硒浓度之间也表现出类似的趋势,但随着施硒次数的增加干花硒含量呈现递增的趋势。【结论】施硒能显著提高灰毡毛忍冬硒含量和产量,改善干花的品质,最适喷施硒浓度为150~200 mg/L,最适喷施硒次数为2次,即在花芽分化前期和花蕾初现期各喷施硒1次。

我国灰毡毛忍冬的生态适宜性区划研究

【目的】探明影响灰毡毛忍冬生长的生态因子与其地理分布,为其适宜栽培区的选址、规划建设及植物资源的利用提供科学依据。【方法】收集全国1 242个灰毡毛忍冬分布样点的信息,综合58个生态因子,利用MaxEnt(最大熵)模型筛选影响灰毡毛忍冬适宜性分布的主导生态因子,结合ArcGIS预测灰毡毛忍冬在全国潜在的适宜分布区。【结果】构建的MaxEnt模型对预测灰毡毛忍冬潜在适宜分布区具有极高的准确度和可信度(AUC=0.971);影响灰毡毛忍冬分布的生态因子按建模贡献率大小包括11月降水量、寒冷指数、5月降水量、土壤类型、海拔、4月降水量、等温线、最干月降水量、坡度、年均温变化范围、9月平均气温、3月降水量、8月平均气温和10月降水量,其中,主要生态因子是11月降水量、寒冷指数和5月降水量,贡献率分别为35.4%、21.6%和17.5%;按适宜性综合评价等级分为最适宜区、中适宜区、低适宜区和不适宜区4类,灰毡毛忍冬的潜在分布集中在秦岭以南,包括贵州、重庆、湖南、广西、广东、江西、福建、浙江、台湾地区和陕西等区域;最适宜分布区包括贵州中部及东部、广西北部、湖南西部和南部小部分地区、湖北西南部、重庆南部、四川东南部及广东北部小部分地区,以及福建、江西、浙江、安徽两两交汇地区。【结论】影响灰毡毛忍冬适宜性分布的主导生态因子是11月降水量、寒冷指数和5月降水量,灰毡毛忍冬的潜在分布集中在秦岭以南;最适宜分布区在贵州中部及东部、广西北部、重庆南部,以及福建、江西、浙江、安徽两两交汇地区。

赤霉素、水杨酸、柠檬酸和蔗糖对灰毛黄栌叶色变化的影响

2011年秋,选取长势一致的4年生灰毛黄栌(Cotinus coggygria var.cinerea Engl.)组培苗,喷施不同浓度的赤霉素(GA3)、水杨酸、柠檬酸和蔗糖水溶液,研究其对叶色的影响。结果表明,使用浓度为0.01 mmol·L-1的赤霉素处理可以推迟灰毛黄栌的落叶期,从而使叶片观赏期平均延后5 d;用浓度为0.5 mmol·L-1的水杨酸处理,会使叶片观赏期平均推迟7 d,而浓度为1.0 mmol·L-1的水杨酸处理,叶片的观赏期平均提前了3 d;喷施4.8 mmol·L-1的柠檬酸和200.0 mmol·L-1的蔗糖溶液,都能显著提高灰毛黄栌叶片中花青素的相对含量,使叶片更红,并且使叶片的观赏期分别提前了6 d和9 d。

电喷雾检测器高效液相色谱法测定复方北豆根氨酚那敏片中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙

建立电喷雾检测器高效液相色谱法测定复方北豆根氨酚那敏片中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙。选用Waters XBridge C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,以甲醇为流动相A,0.05%三氟乙酸溶液为流动相B,梯度洗脱,检测器温度为35℃。灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的质量浓度分别在2.33~291.57μg/mL、2.42~302.40μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.9996、0.9992,检出限分别为1.17、1.21μg/mL,定量限分别为2.33、2.42μg/mL。测定结果的相对标准偏差分别为2.54%和0.66%(n=6),样品加标平均回收率分别为104.8%和101.5%。该方法简单快捷,可为控制制剂中金银花投料的规范性提供技术支持。

灰毛浆果楝茎的化学成分

目的研究灰毛浆果楝Cipadessa cinerascens茎的化学成分。方法采用正、反相硅胶柱色谱与Sephadex LH-20凝胶柱色谱进行分离纯化,并运用各种波谱方法对分离的化合物进行结构鉴定。结果从灰毛浆果楝茎中分离得到17个化合物,分别鉴定为羊毛甾-7-烯-3-酮-22,25-环氧-23,24-丙酮乙缩醛(1)、chisopanin M(2)、3β-羟基-5-烯-豆甾(3)、7α-羟基-4-烯-3-酮-豆甾(4)、3β-羟基-5-烯-7-酮-豆甾(5)、7α-羟基-谷甾醇(6)、22E-7α-甲氧基-5α,6α-环氧-8(14),22-二烯-3β-羟基麦角甾(7)、7β-羟基-4-烯-3-酮-胆甾(8)、3β-乙酰氧基-2β,4β-二羟基-16-酮-孕甾(9)、17α,20R-二羟基-3,16-二酮-孕甾(10)、2β,3β-二羟基-16-酮-孕甾(11)、3β,7α-二羟基-20-酮-孕甾(12)、2α,3β-二羟基-5-烯-20-酮-孕甾(13)、1,4-二烯-3,16-二酮-2-羟基雄甾(14)、5-烯-17-酮-3β,16β-二羟基雄甾(15)、芹菜素(16)和annuionone D(17)。结论除化合物14和17外,其余化合物均为首次从灰毛浆果楝中分离得到。

银翘解毒片(胶囊)中灰毡毛忍冬皂苷乙的检查研究

目的 建立银翘解毒片(胶囊)中灰毡毛忍冬皂苷乙的检查方法,考察是否存在山银花掺伪金银花情况。方法 以灰毡毛忍冬皂苷乙为检测指标,采用薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD)进行定性分析,并运用超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)进行结果确认。结果 在薄层色谱中,有3批样品出现与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品位置和颜色一致的斑点,在液相色谱中,有4批次样品出现与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品保留时间一致的色谱峰,通过UPLC-MS/MS法验证,4批样品检出灰毡毛忍冬皂苷乙成分,出现山银花掺伪情况。结论 所建方法能准确甄别银翘解毒片(胶囊)中灰毡毛忍冬皂苷乙的情况,有助于控制该制剂中金银花药味的质量。

灰毛牡荆化学成分研究

目的：分离鉴定灰毛牡荆Vitex canescens的化学成分。方法：乙醇提取物硅胶拌样后不同极性溶剂洗脱，各部分经Sephadex LH-20、硅胶、ODS和HPLC分离，所得单体通过UV，IR，NMR及MS波谱分析确定结构。结果：分得6个化合物分别鉴定为20-羟基蜕皮甾酮（1），turkesterone（2），芹菜素（3），（＋）-lyoniresinol 3-O-D—glucopyranoside（4），（-）-lyoniresinol3-O-D—glucopyranoside（5）和异绿原酸（6）。结论：化合物4—6首次从该属植物得到。