灰绿黄堇生物碱成分研究

目的:研究灰绿黄堇Corydalis adunca Maxim.生物碱类的化学成分。方法:利用正相硅胶柱层析、反相制备色谱、重结晶等方法分离纯化灰绿黄堇75%乙醇提取物中的化学成分,并通过质谱数据(MS)、核磁共振数据(^(1)H-NMR、^(13)C-NMR)确定其结构。结果:从灰绿黄堇75%乙醇提取浸膏中分离得到9个生物碱单体,分别原阿片碱(Ⅰ),Rupestrine C(Ⅱ)、二氢血根碱(Ⅲ)、四氢黄连碱(Ⅳ)、Norjuziphine(Ⅴ)、8-酮基黄连碱(Ⅵ)、氧化血根碱(Ⅶ)、Rupestrine A(Ⅷ)、(+)-8-oxostylopine(Ⅸ)。结论:化合物Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ为首次从灰绿黄堇中分离得到。

国内灰绿基础设施协同策略研究进展及展望

从构建城市生命支持系统的视角,重新认知灰色与绿色基础设施以及灰绿协同的重要性。通过系统梳理国内相关研究,总结灰绿协同在涉水基础设施、交通基础设施、能源基础设施三个热点方向上的研究进展,继而提出灰绿协同的概念、内涵、特征及理论框架,为后续细化的协同技术体系提供理论支撑和现实依据。此外,探讨灰绿协同理论在过往研究中的局限,并在长期视角下针对协同方向、协同技术、协同评价、协同数字化提出四点展望,为强化基础设施协同,扎实推进生态文明建设提供相应建议。

地铁车辆段灰绿耦合雨水系统综合评价体系及应用

针对灰色措施生态价值低和绿色措施经济成本高的弊端,综合考虑环境、经济、工程以及社会等因素,以径流量削减率、洪峰削减率、施工难度、雨水资源利用、施工成本等作为评价指标,采用层次分析法和熵权法确定组合指标权重,基于云模型构建针对地铁车辆段特点的灰绿耦合雨水系统评价体系,并在西安地铁鱼化寨车辆段进行应用实践。研究结果表明,车辆段内灰绿耦合雨水系统方案性能总体优于单独灰色措施和单独绿色措施方案。本文构建的指标以及评价方法可以为后续地铁车辆基地灰绿雨水系统设计运行阶段评价提供参考。

盐分和水分胁迫对盐生植物灰绿藜种子萌发的影响

研究了不同浓度的NaCl和复合盐及等渗溶液(PEG 6000)处理下盐生植物灰绿藜(ChenopodiumglaucumL.)种子的萌发状况。结果表明:灰绿藜种子的萌发率与处理溶液的浓度或渗透势之间有显著的负相关关系;在低浓度盐溶液(2.9g·L-1)中灰绿藜种子的萌发率高于对照(蒸馏水);NaCl溶液对灰绿藜种子萌发的抑制作用大于复合盐溶液。渗透势为-0.2和-0.5mPa时,PEG 6000溶液对灰绿藜种子萌发的抑制作用小于等渗NaCl溶液,而在较高渗透势溶液中则正好相反。用渗透势≤-1.8mPa的PEG 6000溶液及所有浓度的NaCl和复合盐溶液处理的种子复水后相对萌发率都达到了90%以上,说明一定程度的盐分和水分胁迫对灰绿藜种子萌发潜力并没有很大的影响,并且萌发恢复率随处理盐浓度或PEG 6000溶液渗透势(≤-1.4mPa)的增加而增加。

青海湖盐碱湿地灰绿藜叶的形态解剖学研究

利用光学显微镜和透射电镜对生长于青海湖湖滨盐碱湿地的先锋植物灰绿藜(Chenopodium glaucum Linn.)及生长于甘肃兰州大学校园内中生环境对照灰绿藜叶片的显微、超微结构进行了比较观察研究。结果发现中生环境灰绿藜叶片较薄 ,有明显的栅栏与海绵组织分化 ;叶绿体呈椭圆形 ,基粒片层较发达且普遍含有淀粉粒。与对照相比 ,生长于高海拔湖滨盐碱湿地灰绿藜叶为等面叶 ,叶片厚 ,角质层厚 ,栅栏组织发达 ,气室明显 ,具表皮毛 ;线粒体较多 ,但嵴不发达 ,叶绿体呈扁船型沿着壁的边缘排列 ,叶绿体的基粒片层不发达且普遍含有脂质球 ,一些细胞中常出现大量的多层膜结构。研究结果表明 2种生态型灰绿藜的形态结构已发生了深刻的变异 。

灰绿曲霉高产纤维素酶突变株的选育

以一株具有较高纤维素酶活性的野生菌株-灰绿曲霉XC9为出发菌株,经过紫外线、氯化锂、甲基磺酸乙酯(EMS)等物理化学诱变剂多重诱变处理,获得了抗葡萄糖阻遏的突变株E2-26、E5-65、U6-31和EU7-22,其CMC酶活与出发菌株相比分别提高至1.7、1.4、1.3、2.0倍.突变株经PDA斜面接种传代5次后产酶性能仍然保持稳定.变株的菌丝、孢子颜色也发生了较大的改变.对突变株EU7-22的形态结构进行了观察,并与出发菌株XC9作了发酵性状的比较,发现其产酶性能有了明显提高.

灰绿黄堇挥发性成分的分析研究

采用水蒸气蒸馏法提取 ,同时采用毛细管气相色谱—质谱联用法对灰绿黄堇挥发性化学成分进行了分析研究 ,经毛细管色谱分离出 1 3个峰 ,并且确认了所含的全部化合物 .用气相色谱面积归一化法测定了各成分的相对百分含量 ,其主要化学成分为 :3 ,7-二甲基 -1 ,6-辛二烯 -3 -醇 ( 4 6.80 % ) ;2 -氨基苯甲酸 -3 ,7-二甲基 -1 ,6-辛二烯 -3 -酯 ( 1 1 .90 % ) ;4-甲基 -1 -( 1 -甲基乙基 ) -3 -环己烯 -1 -醇 ( 1 0 .66% ) ;α-松油醇 ( 8.3 1 % )等 ,上述 4种化合物的含量占全油的 77.67% .

灰绿藜和碱蒿NHX基因3'-UTR序列的差异性分析

采用3'末端快速扩增技术,分别从新疆野生盐生植物灰绿藜和碱蒿中克隆CgNHX和AaNHX cDNA3'末端。测序结果表明克隆获得的片段为CgNHX和AaNHX基因3'末端,并且CgNHX和AaNHX3'-UTR的不同拷贝之间存在很大的差异性。序列同源性分析结果显示,AaNHX基因3'-UTR与CgNHX基因3'-UTR同源性高达52%,两者与SsNHX(碱蓬NHX)同源性分别达到60%和54%,表明NHX基因的加工方式可能相同,同时说明该基因在野生盐生植物中的功能是很重要的。

灰绿黄堇生物碱化学成分的研究(Ⅰ)

目的研究灰绿黄堇CorydalisaduncaMaxim生物碱的化学成分。方法按不同的pH值,对95%乙醇热提浸膏进行分段处理,柱色谱分离,根据理化性质和现代波谱技术等进行结构鉴定。结果从灰绿黄堇中分离得到8个生物碱,本研究报道其中的5个化合物二氢血根碱(Ⅰ),四氢非洲防己胺(Ⅱ),1,2,3,4四氢7甲氧基1[4甲氧基苯基]甲基8异喹啉醇(Ⅲ),原阿片碱(Ⅳ),6丙酮基5,6二氢血根碱(Ⅴ)。结论5个化合物均是首次从该植物中得到。

灰绿葡萄孢发酵液中天然型脱落酸的分离纯化

对脱落酸产生菌灰绿葡萄孢 (Botrytiscinerea)发酵生产脱落酸的分离纯化工艺进行了初步探索。发酵液经过滤、浓缩、去杂、乙酸乙酯萃取、NaHCO3 反萃取、硅胶柱层析、结晶等步骤进行分离纯化可得脱落酸 ,测定总收率可达 39 7%。产品经光谱鉴定、旋光测定证实为天然型脱落酸 ,纯度在 98%以上。

灰绿黄堇生物碱化学成分研究Ⅱ

目的:研究灰绿黄堇Corydalis adunca生物碱的化学成分。方法:按不同的pH值,对95%乙醇热提浸膏进行分段处理,柱色谱分离,根据理化性质和现代波谱技术等进行结构鉴定。结果:从灰绿黄堇中分离得到4个生物碱:四氢巴马亭(Ⅰ),1,2,3,4-四氢-6-甲氧基-1-[4′-羟基苯基]甲基-7-异喹啉醇(Ⅱ),黄连碱(Ⅲ),巴马亭(Ⅳ)。结论:4个化合物均是首次从该植物中得到。

响应面法优化灰绿青霉Penicillium glaucum NS16产酶条件

采用响应面法对灰绿青霉Penicillium glaucum NS16生产纤维素酶的发酵条件进行了优化,通过Plackett-Burman实验方法研究有关碳源、氮源、无机盐、发酵时间、摇床转速等18个发酵因子对菌株发酵产纤维素酶活力的影响。结果显示,影响产酶的显著因子是麸皮、CMC的含量和发酵时间。根据实验结果和经验方法对显著影响因子的取值范围进行预估,并采用Box-Behnken设计实验进行优化,然后应用响应面模拟预测和摇瓶发酵实验验证,结果表明,优化发酵条件为培养基中麸皮6.0g/L,CMC7.0g/L,发酵时间96h,摇瓶发酵液中CMC酶活均接近309IU/mL,优化预测值和实验验证值拟合度达到99%,比初始培养基和发酵条件下菌株产CMC酶活94.51IU/mL提高了227%。

盐生植物灰绿藜对NaCl和NaHCO3胁迫的生理响应

【目的】应对日益严重的土壤盐渍化问题,开发新的具有生态效益和经济价值的盐生植物。【方法】以具经济价值的新疆盐生植物灰绿藜为材料,采用分光光度法测定了不同浓度NaCl和NaHCO3胁迫后植株的日相对生长率（RGR）、丙二醛（MDA）、多种渗调质、抗氧化剂含量变化及几种重要的抗氧化酶活力变化,探讨了其对盐碱胁迫生理响应机制的差异性。【结果】（1）在0-300 mmol/L,NaCl对植株生长的抑制作用较小,300mmol/L NaHCO3对植株生长产生了一定程度的抑制;（2）150和300 mmol/L NaCl和NaHCO3处理后植株叶片丙二醛含量均显著增加;叶片超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）活力均无显著变化;抗氧化剂ASA显著升高。（3）随盐碱处理浓度增加,叶片脯氨酸（Pro）、甜菜碱（BADH）、可溶性糖含量显著升高,其中脯氨酸在较高浓度NaCl处理下升高幅度显著高于相同浓度的NaHCO3。【结论】植株体内抗氧化剂和渗调质ASA和脯氨酸Pro积累的差异可能是造成灰绿藜对高浓度盐碱胁迫耐受差异的原因之一。

藜科植物藜和灰绿藜实时荧光定量PCR内参基因的选择

选择合适的内参基因是实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究的关键,目前对藜科耐盐(盐生)植物胁迫相关基因的表达分析中所用内参基因的报道较为有限。该研究利用Ge Norm、Norm Finder和Best Keeper 3个内参基因分析软件,对已选择过的β-TUBULIN、β-ACTIN、GAPDH 3个常用候选内参基因进行了比较分析,筛选出在Na Cl和PEG胁迫下藜和灰绿藜中表达相对稳定的内参基因。结果表明:Ge Norm、Norm Finder内参软件分析在Na Cl和PEG胁迫下,GAPDH是藜和灰绿藜中均共同稳定表达的内参基因,同时在藜和灰绿藜中也有各自表达较稳定的内参基因,β-ACTIN在藜中稳定表达,β-TUBULIN则在灰绿藜中稳定表达。对相同科不同种的植物内参基因表达差异进行比较,内参基因在相同科中具有相同稳定表达的内参;对相同胁迫下两种不同植物内参基因表达稳定性进行分析,内参基因的选择需根据实际的实验材料和实验条件而定。基于3个分析软件对以上3个常用内参基因的分析结果,初步确定了在藜科植物藜和灰绿藜中相对稳定的内参基因,为藜和灰绿藜胁迫相关基因的定量表达分析提供了参考依据。

灰绿藜形态性状与繁殖性状的异速关系

通过对不同光照强度、营养和萌发时间处理条件下灰绿藜的形态指标和繁殖指标的测定,本研究探讨了灰绿藜形态性状和繁殖性状之间的异速关系及其异速生长对环境变化的响应。结果表明:灰绿藜形态性状与繁殖性状之间存在显著的异速生长关系,随着灰绿藜个体大小的增大,单个枝条的大小增速更快,并且将更多的资源分配到灰绿藜的繁殖生长。但灰绿藜的花序密度与个体大小之间具有显著的权衡关系:灰绿藜越小,花序密度越高。光照处理引起植物的繁殖性状发生了变化,但是这些变化主要是由在光照梯度下的个体大小不同造成的,繁殖策略(异速生长)未发生改变。而营养及萌发时间处理对灰绿藜的形态性状与繁殖性状间的异速关系产生了影响。营养变化对不同性状间的异速关系无一致影响,而萌发时间则具有显著的影响,晚萌发的灰绿藜将更多的资源投入到繁殖生长。

灰绿藜RNA提取方法及在cDNA文库构建中的应用

目的:为分离灰绿藜耐盐相关新基因,构建叶片cDNA文库,探索从盐生植物中提取高质量RNA的方法。方法:以灰绿藜叶片为材料,应用RNAPlant Reagent法(Tiangen)、Plant RNA purification Reagent法(Invitrogen)、UNIQ柱式总RNA试剂盒提取法(Sangon)、SDS-LiCl法、TRIZOL试剂法(Invitrogen)等进行总RNA的提取,并构建其全长cDNA文库和抑制消减文库。结果:RNA Plant Reagent法、Plant RNA purification Reagent法和UNIQ柱式总RNA试剂盒提取法获得的RNA完整性均不好;SDS-LiCl法提取的RNA完整性好(28S条带亮度是18S的2倍、条带锐利清晰)、纯度高(A280/A260为1.89±0.03,A260/A230为2.23±0.02),适合用于直接反转录及构建全长cDNA文库,并获得成功;TRIZOL试剂法简单快捷,产率高(2724±82μg/g),完整性较好,可经mRNA纯化后用于抑制消减文库的构建并获得成功。结论:建立了用于构建高质量cDNA文库的灰绿藜RNA的制备方法。

灰绿曲霉产纤维素酶的研究

灰绿曲霉（Aspergillus glaucus）发酵液通过硫酸铵盐析、Sephadex G-100分子筛、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱和Phenyl Sepharose Fast Flow疏水层析,分离纯化一种外切葡聚糖酶（CBH）和一种内切葡聚糖酶（EG）.通过SDS-PAGE和凝胶柱层析法测定分子质量表明：CBH全酶分子质量为71 ku,由两个分子质量为35 ku的同型亚基组成;EG为单体蛋白,全酶分子质量为32 ku.酶学性质研究表明：CBH催化pNPC的最适pH为6.0,最适温度为55℃,酶活在pH 5.0~8.0区间和温度低于55℃时稳定;EG催化CMC-Na的最适pH为4.0,最适温度为50℃,酶活在pH3.5~7.5区间和温度低于65℃时稳定.Na＋、K＋、Ba2＋、Mg2＋以及NO3-和SO42-对CBH和EG酶活均无影响;Ca2＋和Mn2＋对CBH有激活作用,Fe2＋和Mn2＋对EG有激活作用,而Zn2＋、Cd2＋和Cu2＋对CBH和EG均有不同程度的抑制效应.酶动力学分析表明：CBH催化pNPC水解的米氏常数Km值为1.4 mmol/L（pH 6.0,55℃）,EG催化CMC-Na水解的米氏常数Km值为5.0 mg/mL（pH 4.0,50℃）.

灰绿黄堇生物碱的研究

目的:研究灰绿黄堇根中的化学成分。方法:采用柱层析和制备薄层方法分离化学成分,光谱法鉴定其结构。结果:从灰绿黄堇根中分离得到3种生物碱,分别鉴定为紫堇碱dorydaline(Ⅰ),去氢紫堇碱dehydrocoryda-line(Ⅱ),二氢血根碱dihydrosanguinarine(Ⅲ)。结论:紫堇碱和去氢紫堇碱两种生物碱均为首次在灰绿黄堇中发现。

灰绿黄堇镇痛抗炎作用研究

目的:观察灰绿黄堇的镇痛抗炎作用。方法:采用醋酸致小鼠扭体模型、小鼠热板法、二甲苯致小鼠耳廓炎症模型、棉球致大鼠炎性肉芽肿模型观察镇痛、抗炎作用。结果:灰绿黄堇能显著减少小鼠扭体反应的次数,延长热板所致的小鼠舔后肢的时间,对小鼠耳廓肿胀及大鼠炎性肉芽肿胀均有显著的抑制作用。结论:灰绿黄堇具有镇痛、抗炎作用。

灰绿藜幼嫩花序的组织培养及植株再生

选用盐碱地灰绿藜（Chenopodium glaucum L.）幼嫩花序为外植体,建立了快速而高效的离体组织培养体系。在附加1.0 mg/L 6-BA和0.4 mg/L IBA的MS培养基上培养35 d可诱导出不定芽,诱导频率达到66.7%;不定芽在此培养基上可快速扩增和长期继代培养。不定芽转至1/2 MS＋NAA 0.2 mg/L培养基中培养2~3周,生根形成完整植株。