8种杀菌剂抑制灰葡萄霉孢毒力的研究

为筛选出高效防治葡萄灰霉病的杀菌剂,采用菌落生长量法,室内测定8种市场主流杀菌剂抑制武威灰葡萄霉孢菌株的毒力。结果表明:80%腐霉利、50%多菌灵、10%叶菌唑为高毒力药剂,半效浓度≤100mg/L;250g/L苯醚甲环唑、25%吡唑醚菌酯、25%氰烯菌酯为中毒力药剂,半效浓度290~380mg/L;720g/L百菌清、0.3%四霉素为低毒药剂,半效浓度>700mg/L。0.3%四霉素、10%叶菌唑随浓度增加其抑菌效应的增长较快,80%腐霉利增长较慢,其余5种供试药剂的增长则相对平缓。综合分析,筛选出50%多菌灵、10%叶菌唑、四霉素,供武威市防治葡萄灰霉病中交替使用。

ARTP诱变灰葡萄孢霉筛选高产脱落酸菌株

目的:利用常压室温等离子体(Atmospheric Room Temperature Plasma,ARTP)技术对生产脱落菌的潜力宿主灰葡萄孢霉进行诱变,以获得遗传稳定性好的高产脱落酸的突变菌种。方法:利用酶解法去除灰葡萄孢霉细胞壁,从而获得灰葡萄孢霉原生质体。接着将灰葡萄孢霉原生质体在输出功率120 W,工作气流10 L/min,照射距离2 mm,照射时间120 s的条件下进行ARTP诱变处理。检测突变菌株的脱落酸产量,并对最佳突变菌株进行发酵优化。结果:与野生型相比,突变菌株的脱落酸生产能力有了不同程度的提高,其中突变菌株A4和A7的脱落酸生产能力显著提高,分别提高了26.3%和30.5%。进一步通过单因素实验,确定突变菌株A7的最佳发酵碳源和氮源成分为葡萄糖和黄豆粉,最佳接种量为8%。结论:采用ARTP诱变技术能够有效获得高产脱落酸的突变菌株,为脱落酸的工业化生产提供了有利支撑。

灰霉病致病机理及其防治措施研究进展

灰霉病是果蔬中的一种常见真菌病害,由灰葡萄孢霉感染所致,可以造成植物的严重损害或死亡,给果蔬产业带来巨大的经济损失。本文总结了植物生长过程中灰霉病的病害症状及其影响因素,阐述了灰葡萄孢霉引起灰霉病的分子机理,讨论了植物灰霉病的防治方法,为果蔬灰霉病的绿色防治奠定基础。

灰葡萄孢霉对不同葡萄品种致病力差异的检测和分析

为了探明适合中国葡萄灰霉病菌致病力检测的方法以及合适的待测葡萄品种,采用菌丝块接种法和改良的保湿培养法,分别测定3个不同致病力类型的灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)菌株SDXL7-1、SDLK1-1、LNXCetz6-1对红提、青提、巨峰、紫奶、玫瑰香5个葡萄品种的致病力,并进行差异分析。结果表明,供试菌株均可引起5种葡萄发病,但致病力不同的菌株所致的平均病斑面积有明显差异,同一菌株在不同葡萄品种上的平均病斑面积也有明显差异。其中,巨峰和青提对灰葡萄孢霉具有较强抗性,红提和玫瑰香对3个灰葡萄孢霉菌株普遍易感,紫奶对菌株LNXCetz6-1具有较强抗性,但对另外两个菌株易感。试验结果为系统和全面地研究中国灰葡萄孢霉菌株的致病力分化提供重要依据。

灰葡萄孢霉高效拮抗木霉菌株的筛选及其翻译延伸因子序列分析

为进一步开发利用木霉菌资源,对从菜田土壤中初步分离纯化获得的12株木霉菌株,采用对峙培养和生长速度测定法进行灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)高效拮抗木霉菌株的筛选,并通过翻译延伸因子序列同源性比较对其进行分子鉴定。结果表明:菌株Tr 9701和Tr 1108的生长速度快,对病原菌的抑制率高,且协同应用有一定的增效作用。经对Tr9701和Tr1108翻译延伸因子同源序列分析,并结合其形态特征结果表明,Tr9701为绿色木霉(Trichoderma viride)和Tr1108为深绿木霉(Trichoderma atroviride)。绿色木霉和深绿木霉为菜田生境习居菌,2种菌株协同利用对蔬菜灰霉病有较好的协同增效作用,应进一步设计利用多靶位木霉菌来提高防病效果。

季也蒙毕赤酵母对草莓采后灰葡萄孢霉的抑制机理

以季也蒙毕赤酵母为拮抗酵母菌、草莓(Fragaria ananassa Duch)为供试果实,初步研究并探讨拮抗酵母菌对果实采后灰葡萄孢霉的抑制机理.结果表明:季也蒙毕赤酵母对草莓采后灰葡萄孢霉抑制机理不包括产生抗菌物质:两者之间存在营养竞争,在营养相对充足即营养浓度较高的情况下会减弱季也蒙毕赤酵母的抑制效果;接入拮抗酵母菌能够诱导寄主产生抗性,能够诱导超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,使其保持较高活性,同时能够保持较低的丙二醛(MDA)含量.

防腐剂对红提葡萄中灰葡萄孢霉和交链孢霉抑制效果初探

研究了25种防腐保鲜剂对红提葡萄中灰葡萄孢霉和交链孢霉的抑制效果。结果表明,抑制灰葡萄孢霉,过氧乙酸、双氧水、对羟基苯甲酸乙酯的能力最强,次氯酸钠、冰醋酸,新洁尔灭、蜂胶、扑海因和次亚磷酸钠的抑制能力相对较弱;抑制交链孢霉,扑海因、新洁尔灭、对羟基苯甲酸乙酯能力最强,过氧乙酸、双氧水、次氯酸钠和冰醋酸,蜂胶和次亚磷酸钠抑制能力相对较弱;其它药剂如苯甲酸钠、山梨酸钾、蔗糖脂肪酸酯、壳聚糖等对上述两种霉均无抑制效果。

灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)对碳源的利用

测试了灰葡萄孢霉（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）对２４种碳源的利用，并建立了相应的生长函数Ｙ＝Ｘ０ｅπ。结果表明与无碳源对照相比，不同的碳源都能显著地促进病苗的生长（山梨酸除外），但对病菌的产孢无作用。分别对不同碳源生长函数的生长速率（Ｘ０）和初始生长量（ｒ）进行方差分析，结果证明这两组参数均无显著性差异，说明绝大多数碳源都能被病菌利用。

四种芽孢杆菌对蒜薹灰葡萄孢霉抑制作用的时效性研究

旨在对保存的4种芽孢杆菌菌株种属水平做初步鉴定并研究其在离体条件下对蒜薹灰葡萄孢霉的抑制作用以及活体条件下对蒜薹保鲜的时效性。采用平板对峙法和菌丝生长法进行离体实验,采用有伤接种法在不同时间段进行预防和治疗活体实验。结果表明,离体条件下,与对照相比,4种芽孢杆菌对灰葡萄孢霉菌落扩展和菌丝体生长都有显著的抑制作用且效果HB-2>B579>B1>B001(P<0.05)。20℃活体实验中,4种芽孢杆菌的预防处理均能较好地控制蒜薹灰葡萄孢霉病斑扩展,且效果好于治疗处理,但是不同芽孢杆菌最佳的预防时间有所不同。其中,HB-2和B579预防处理能较好地保持蒜薹的可溶性固形物、维生素C以及可滴定酸含量。综合来说,芽孢杆菌HB-2比其他3种芽孢杆菌能更有效地预防蒜薹灰霉病。

灰葡萄孢霉角质酶粗提液酶学特性研究

为探究灰葡萄孢霉角质酶的酶学性质以及角质酶对植物角质层的降解作用,以灰葡萄孢霉为材料,采用角质诱导的方法得到角质酶发酵液,上清液经过分离得到角质酶粗提液,采用分光光度法探究温度、pH值、金属离子及有机溶剂对角质酶活力的影响,并通过扫描电镜探究角质酶粗提液对葡萄角质层的作用。结果表明,灰葡萄孢霉角质酶的最适反应温度为35℃,最适反应pH值为7.5,此条件下能够保持较高的热稳定性;Na+、Mg2+、Ca2+对酶活有促进作用,而Zn2+、Cu2+、Fe3+对酶活有抑制作用;甲醇、丙酮、异丙醇对酶活具有促进作用,乙醇、乙腈和三氯甲烷对酶活具有抑制作用;角质酶粗酶液对葡萄角质层具有明显的降解作用。本研究结果为果蔬采后病害的控制提供了理论依据。

灰葡萄孢毒素对产后蒜薹的致病性及其毒素基因的检测

为明确灰葡萄孢毒素对产后蒜薹的致病性及其毒素基因的检测方法,本研究运用蒜薹灰霉病强致病菌株灰葡萄孢霉BC-3,通过蒜薹悬滴接种法、系统侵染法和毒素浸渍法,测定灰葡萄孢毒素对蒜薹薹条和薹苞组织损伤及细胞叶绿素降解的活性。结果表明,灰葡萄孢毒素是导致产后蒜薹灰霉病的重要因素,可造成蒜薹组织细胞损伤、叶绿素降解,并可由输导组织传导造成蒜薹组织系统侵害。同时建立了灰葡萄孢毒素Bc BOT2基因特异性检测方法,可用于其引起的蒜薹灰霉病早期检测。

设施葡萄灰霉病的发生规律与综合防治

葡萄灰腐病．俗称“烂花穗”．病原菌为灰葡萄孢霉。是葡萄生产上危害较大的病害之一。近年来随着葡萄设施栽培面积的扩大．葡萄灰霉病的发生呈逐年上升趋势．再加上设施棚内温度高、湿度大、光照差、栽植密度大、葡萄枝蔓生长较弱等原因．使灰霉病成为设施栽培中最容易发生、经常性发生的病害，造成葡萄产量和品质的下降．严重影响果农的经济效益。

红提葡萄贮藏期灰霉病的防治方法

红提灰霉病是由灰葡萄孢霉病原菌引起的果粒腐烂病害，在-5℃条件下该病原菌仍可生长，属于葡萄低温贮藏保鲜的主要病害之一。灰霉病发病初期症状为淡褐色，圆形，不明显的病斑，中期病斑点逐渐转变为明显裂纹，只要用手轻擦果皮即与果肉脱离，腐烂仅限于表皮与亚表皮细胞被离析。

灰霉菌的抗药性与适合度测定

室内监测了北京、沈阳、保定等地区番茄灰霉菌 (Botrytis cinerea)对不同杀菌剂的抗药性 ,发现抗多菌灵菌株占监测总数的 74 .6 7% ,抗乙霉威菌株占 2 5.82 % ,还监测到 3株抗多菌灵、乙霉威菌株——即双抗菌株 ;利用菌落直径法和番茄叶片法测定了 3种抗药类型的番茄灰霉菌在离体和活体条件下的适合度 ,结果表明 ,不同抗药类型菌株在生长速率、致病力、繁殖力等方面差异不明显。

天津市茄子灰霉病菌的抗药性检测

从天津市茄子保护地中分离出１２２个茄子灰霉病菌株中，多菌灵的抗性菌占４１０％，且多为高抗菌株；多菌灵与乙霉威间表现负交互抗性关系；速克灵和扑海因的抗性菌比率为２７９％，均为低抗水平，ＥＣ５０为２３０１１２０３８１０μｇ／ｍＬ，两种药剂存在交互抗性；对多菌灵、速克灵、扑海因均有抗性的菌株占供试菌株的２７９％，均敏感的菌株占５９０％，对多菌灵有抗性而对速克灵和扑海因敏感的菌株只占１３１％。

灰霉病菌对多菌灵和乙霉威抗性研究

从１９９６年３～４月辽宁省主要蔬菜种植区采集的番茄、黄瓜灰霉病果上，分离得到２８２个灰葡萄孢霉（ＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａＰｅｒｓ．）菌株，测定了其对多菌灵和乙霉威的敏感性。结果表明，８７．２％的菌株为抗性菌株（ＢｅｎＲ），１２．８％的菌株为敏感菌株（ＢｅｎＳ）。中抗（ＢｅｎＩＲ）和低抗（ＢｅｎＷＲ）菌株为优势菌株。抗性菌株与敏感菌株在生长速率、产孢能力及致病力等方面无明显差异。作为苯并咪唑杀菌剂负交互抗性药剂而开发的Ｎ－苯基氨基甲酸酯杀菌剂乙霉威，对ＢｅｎＨＲ菌株具有优良的抑制作用，但对ＢｅｎＷＲ，ＢｅｎＩＲ和ＢｅｎＳ菌株的抑制作用很小。由多菌灵和乙霉威复配而成的多菌灵可有效控制ＢｅｎＨＲ和ＢｅｎＳ菌株对黄瓜子叶的侵染，但不能控制ＢｅｎＷＲ和ＢｅｎＩＲ菌株的侵染。

β-氨基丁酸抑制草莓低温贮藏过程中灰霉病的效果及其机理

以‘红颜’草莓为实验材料,研究β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)对草莓果实采后贮藏在低温((5±1)℃)条件下灰霉病的抑制效果及相关机理。草莓果实经过20 mmol/L的BABA处理后接种灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)孢子,然后在(5±1)℃的条件下贮藏12 d,结果发现BABA显著抑制了灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与对照组相比,处理组几丁质酶(chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)的活力分别提高了9.2%和54.9%,多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)和纤维素酶(cellulose,Cel)的活力分别降低了29.3%和24.4%,同时,BABA提高了FaCHI和FaGLU基因的表达,抑制了FaPG和FaCel基因的表达;此外,体外实验的结果发现,BABA能够破坏灰葡萄孢霉孢子的质膜完整性,导致了孢子内部可溶性蛋白质和可溶性糖的泄漏。结果表明,BABA通过诱导抗病相关酶活力来提高抗病性、延缓果实软化并通过对病原菌的直接抑制作用减轻草莓果实采后灰霉病的发生。

蔬菜灰霉病菌(Botrytis cinerea)抗药性变异分析

蔬菜灰葡萄孢霉对多菌灵（Ｃａｒｂｅｎｄａｚｉｎｍ）和速克灵（Ｐｒｏｃｙｍｉｄｏｎｅ）的抗药性与药剂种类及使用时间的长短有密切关系，而与地点和作物的种类关系不大。多菌灵５ｍｇ·Ｌ－１和速克灵 １０ｍｇ·Ｌ－１对敏感菌株菌丝生长抑制率都达１００％，对单抗菌株的抑制率分别为０～６．２５％和１００％，对双抗菌株的抑制率分别在０～３９．３４％和５６．０６％～９６．４３％。来自上海闵行华漕与安徽和县的灰葡萄孢霉分离物全为双抗菌株，上海青浦赵屯的菌株具有敏感、单抗、双抗三种类型，而金山漕泾、亭林等地的全为敏感菌株。单抗菌株对多菌灵高抗、对速克灵敏感；双抗菌株对多菌灵高抗、对速克灵低抗；敏感菌株对多菌灵、速克灵皆敏感。抗药性可稳定遗传。

产后蒜薹灰霉病菌产毒条件研究

由灰葡萄孢霉引起的蒜薹灰霉病是贮藏期蒜薹的重要病害之一。灰葡萄孢霉可以产生真菌毒素,为明确灰葡萄孢霉的最佳产毒培养基和培养时间,本研究从蒜薹主产区采集的蒜薹灰霉病病样上分离到灰葡萄孢霉强致病菌株BC-3,通过黄瓜种子萌发生长法、叶片圆盘法、蒜薹悬滴接种法及系统侵染法4种方法测定灰葡萄孢霉毒素对黄瓜和蒜薹的生物活性。结果表明,蒜薹灰葡萄孢霉毒素为非寄主选择性毒素,最适产毒培养基为马铃薯葡萄糖培养基和淀粉酵母培养基,培养时间为12~18 d。