多花黄精灰霉病病原菌Botrytis deweyae生物学特性及防治药剂筛选

为全面了解多花黄精灰霉病病原菌杜威葡萄孢(Botrytis deweyae)特性,并有效防治由该病原菌引起的病害,本研究对Botrytis deweyae的生物学特性进行分析,并通过室内毒力测定,筛选出有效的化学杀菌剂与生物杀菌剂。结果表明,最适宜Botrytis deweyae菌丝生长的环境条件是24 h光照,25℃恒温培养,最适宜Botrytis deweyae菌丝生长的培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA),pH值6.0~7.0,以葡萄糖为碳源,以牛肉膏为氮源。8种化学杀菌剂中,抑菌效果最好的是500 g/L异菌脲悬浮剂和25%抑霉唑·咯菌腈悬浮剂,半最大效应浓度(EC_(50))分别为0.076μg/mL和0.094μg/mL。7种生物杀菌剂中,0.3%四霉素水剂抑菌效果最好,EC_(50)为0.418μg/mL。本研究结果为Botrytis deweyae引起的多花黄精灰霉病的有效防控提供了科学依据。

茶香螺烷对草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)抑菌活性研究

研究茶香螺烷对草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)抑菌活性的影响,以期为开发醉蝶花提取物防治草莓灰霉病提供依据。结果表明,茶香螺烷对草莓灰霉病菌具有显著抑菌活性,其中熏蒸处理效果优于直接接触的抑菌活性。茶香螺烷在最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)处理下对菌丝表面造成损伤,胞外电导率分别升高31.20%和44.66%,麦角固醇合成量分别降低8.18%和12.58%,丙二醛含量分别升高0.335和0.373μmol·L^(-1);茶香螺烷处理后草莓灰霉病菌致病力BcPDR1基因和过氧化物酶BccatA基因显著下调,细胞壁降解酶Bcpg5基因相对表达量显著上调。

芽胞杆菌JZB30-1的鉴定及其对番茄灰霉病的生防作用

为获得对番茄灰霉病具有良好防效的生防芽胞杆菌,采用对峙培养、双层平板以及生防相关特性检测等方法筛选高活性拮抗菌株,根据形态学、生理生化特性及多基因测序进行菌株种类鉴定,通过离体果实和盆栽试验明确供试菌株的防病促生效果。结果表明,芽胞杆菌JZB30-1对番茄灰霉病菌等10余种植物病原真菌和细菌具有广谱抑菌活性;该菌株具有合成蛋白酶、纤维素酶、脂肽类物质,分泌铁载体、生长激素及溶磷等特性,经鉴定其为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens;菌株JZB30-1无菌发酵滤液50倍液喷施处理,对番茄果实灰霉病防效为95.0%,发酵液10倍稀释液灌根,番茄株高、鲜重分别较对照增加25.7%和28.4%。相关结果为利用解淀粉芽胞杆菌JZB30-1进行番茄灰霉病生物防治提供理论依据。

不同植物精油对草莓灰霉病菌的体外抑菌效果研究

为筛选出对草莓灰霉病菌具有显著抑菌作用的植物精油,采用熏蒸法,研究茶树精油、牛至精油等6种植物单方精油及其复配精油对草莓灰霉病菌的体外抑菌效果。结果表明:牛至精油的抑菌效果最佳,其次为1-辛烯-3-醇和茶树精油,其抑菌效果明显优于肉桂精油、桉叶精油和茉莉酸甲酯;茶树精油、1-辛烯-3-醇和牛至精油的最低抑菌浓度(MIC)分别为200、100、100 mg/L;茶树精油与牛至精油复配具有协同增效作用,且二者以质量比1∶4进行熏蒸时,对草莓灰霉病菌的抑制作用最强。综上,牛至精油、1-辛烯-3-醇、茶树精油及茶树精油与牛至精油复配(质量比1∶4)对草莓灰霉病菌的抑菌效果较优。该研究结果可为新型草莓保鲜剂的开发利用提供新的研究思路。

河南省番茄灰霉病病原菌鉴定、生物学特性分析及杀菌剂筛选

番茄灰霉病是番茄生产上的重要病害之一。本试验以河南商丘市蔬菜大棚内疑似患灰霉病番茄植株叶片为试材,采用组织分离法纯化获得3株病原菌菌株,其形态特征一致,选择一株代表性菌株命名为SQBC1。对该菌株rDNA-ITS序列、CHS-1、tubA基因进行测序、比对和系统进化分析,结合菌株培养性状、显微形态学观察、致病性分析,将河南商丘番茄灰霉病致病病原菌确定为灰葡萄孢菌Botryotinia cinerea。生物学特性研究表明28℃为最适生长温度,12 h光照12 h黑暗为最适光照条件,6.0为最适pH值,乳糖为最适碳源,蛋白胨为最适氮源。测试了7种杀菌剂对灰霉菌菌丝生长的抑菌效果,其中嘧菌酯和吡唑醚菌酯的抑菌效果最好。该研究为番茄灰霉病的有效防治提供一定的参考依据。

砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓灰霉病的抑制作用

由灰葡萄孢菌Botrytis cinerea引起的草莓灰霉病是草莓栽培中最具破坏性的病害之一,严重降低食用以及经济价值。本研究以“红颜”草莓为试验材料,测定砖红镰刀菌Fusarium lateritium Pa2对草莓灰霉病菌的抑菌活性、防治效果以及草莓病程相关基因表达水平的影响。结果表明,菌株Pa2对草莓灰霉病菌具有显著的抑菌活性,其上清液可以破坏草莓灰霉病菌菌丝细胞膜,导致细胞内容物泄露。离体接种试验结果表明菌株Pa2对草莓叶片灰霉病、草莓果实灰霉病防治效果分别为79.13%、54.29%。经菌株Pa2上清液处理24h后草莓果实病程相关基因FaPR1、FaPR4、FaGR分别上升19.05、24.64、3.69倍。综上所述,砖红镰刀菌菌株Pa2是一种防治草莓灰霉病的新型生防菌资源。

月季灰霉病菌抗药性监测及防控技术研究

监测月季灰霉病抗药性发生现状,探索防控药剂的应用技术。病原鉴定采用分子鉴定和形态学鉴定法,抗药性监测采用菌落生长区分剂量法,田间试验采用喷雾法。3省份采集分离的月季灰霉病菌株均为灰葡萄孢菌。抗性监测结果表明,采集的月季灰霉病菌对多菌灵、嘧菌酯和戊唑醇的抗性频率分别为66.67%、50%和77.78%,应降低使用频次。田间药效试验结果表明,推荐剂量下啶酰菌胺和嘧霉胺对月季灰霉病的防效分别为70%~88%和70%~84%,两者在江苏的防效均>80%。植物安全性试验结果表明,啶酰菌胺在有效剂量225、450、900 g a.i./hm2嘧霉胺在有效剂量800、1600、3200 g a.i./hm2范围内对月季安全。基于本研究成果,建议生产上可使用啶酰菌胺和嘧霉胺防控月季灰霉病,注意轮换用药。

草莓灰霉病病原菌分离鉴定及拮抗微生物筛选

草莓灰霉病是草莓种植过程中的主要病害之一。通过对连云港市东海县和徐州市贾汪区草莓基地草莓灰霉病病原菌进行分离纯化,获得一株生长优势病原菌,命名为A03。经过形态学观察、分子生物学鉴定,鉴定其为灰葡萄孢属(Botrytis cinerea)富克葡萄孢盘菌(Botryotinia fuckeliana)。利用平板对峙生长法筛选出一株对A03具有拮抗作用的微生物,命名为ZXY-1,通过分子生物学鉴定为海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。ZXY-1对A03抑菌圈半径达12.67 mm, ZXY-1发酵上清液对A03孢子萌发相对抑制率为58.92%,结果显示ZXY-1发酵液对草莓果具有明显的保鲜作用。海洋解淀粉芽孢杆菌ZXY-1在草莓种植和生长中具备应用潜力。

两种矿物源农药与化学农药混配对百合灰霉病菌抑菌增效作用评价

【目的】为明确矿物源农药与化学农药混配对百合灰霉病的防治效果。【方法】采用菌落生长速率法、黄瓜子叶法及喷雾法测定了氧化亚铜、石硫合剂分别与3种化学农药混配对百合灰霉菌的抑菌增效作用、离体防效、室内盆栽防效及持效期和对百合的安全性。【结果】混配剂86.2%氧化亚铜WP∶70%噁霉灵SP(9∶1)及混配剂29%石硫合剂AS∶75%百菌清WP(9∶1)抑菌活性最强,EC50分别为99.90μg/mL、105.58μg/mL,CTC分别为130.65、122.28,表现为增效作用,其中混配剂86.2%氧化亚铜WP∶70%噁霉灵SP以9∶1混配时对百合灰霉病的防效最好,保护作用防效为87.01%,治疗作用防效为81.81%,室内盆栽防效测定表明第7天防效最大,为76.18%,持效期为7 d。【结论】试验所选药剂对兰州百合安全,86.2%氧化亚铜WP∶70%噁霉灵SP(9∶1)混剂防效高于单剂防效,而29%石硫合剂AS∶75%百菌清WP(9∶1)混剂的防效则低于其单剂防效。

酥梨采后灰霉病生防菌株的鉴定及抑菌作用

以微生物拮抗病原菌是防治病害安全高效的可行手段。通过对果实表面微生物进行筛选鉴定,以期得到一株可以有效抑制灰霉病的生物防治菌株。对拮抗菌株H-1进行形态学特征、生理生化特性分析,结合16S r DNA序列分析和gyrB基因序列分析构建系统发育树;采用平板对峙法结合果实伤口试验考察拮抗菌H-1在体外及梨果表面的抑菌作用。结果表明:经鉴定H-I菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis);B.velezensis H-1在体外条件下可显著抑制灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)、细极链格孢(Alternaria tenuissima)和串珠镰孢菌(Fusarium verticillioides)的菌丝生长,其中对灰葡萄孢霉菌丝的抑制作用最强;果实伤口试验表明,1×1011CFU/mL的B.velezensis H-1可完全抑制梨果表面灰霉菌生长。由此可见,B.velezensis H-1可以有效抑制梨果采后灰霉病的发生。

啶酰菌胺和咯菌腈对番茄灰霉病联合毒力及田间防效

为筛选出啶酰菌胺和咯菌腈最佳配比,对番茄灰霉病的防治能达到最优程度,本文采用离体叶盘法测定啶酰菌胺与咯菌腈单剂及9个复配组合对番茄灰霉的毒力,从中选出最佳组合,进行田间药效试验。结果为啶酰菌胺与咯菌腈对番茄灰霉的EC50值分别为0.7481、0.397μg/mL,啶酰菌胺与咯菌腈5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3配比下表现为增效作用,其中啶酰菌胺:咯菌腈配比为2∶1时增效作用最明显,SR值为1.91。田间药效试验结果显示,30%啶酰菌胺·咯菌腈悬浮剂1500倍液,50%腐霉利可湿性粉剂600倍液和50%异菌脲可湿性粉剂600倍液,对番茄灰霉病的防效分别为87.32%、74.35%和78.43%,啶酰菌胺·咯菌腈和异菌脲防效差异不显著,但显著高于腐霉利。因此,本文推荐30%啶酰菌胺·咯菌腈悬浮剂在番茄灰霉上使用。

9种杀菌剂对苹果炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌的抑制效果

为明确能有效防控苹果炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌的杀菌剂,本文从田间发病叶片中分离得到了苹果炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌,借助形态学观察和分子生物学手段进行了鉴定,测试了9种常见杀菌剂对苹果炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌的抑制效果,同时选取初筛抑制率高的杀菌剂进一步测试了EC50值。结果表明,抑制复合体Ⅲ细胞色素bc1氧化酶的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂吡唑醚菌酯可有效防治苹果炭疽病菌,抑制甾醇生物合成脱甲基化酶的三唑类杀菌剂戊唑醇可有效防治黄瓜灰霉病菌。

2种生物杀菌剂及其助剂对葡萄灰霉病菌室内抑制效果评价

[目的]为达到降低农药抗性及减少农药用量的目的,筛选防治葡萄灰霉病的有效生物杀菌剂及增效的农药助剂。[方法]研究采用菌丝生长速率法测定不同浓度的多抗霉素和小檗碱单剂使用及分别与加倍强、有机硅2种助剂复配对葡萄灰霉病病菌的室内毒力。[结果]生物杀菌剂多抗霉素抑菌效果较好,在有效浓度是8 mg/L时抑菌率最高,达(86.67±1.11)%;小檗碱的抑菌效果相对较差,最高抑菌率仅(35.93±1.28)%。结果还表明:2种助剂均能起到较好的增效作用,其中加倍强的增效作用更明显;有效浓度为4 mg/L的多抗霉素复配助剂加倍强5000倍液时,抑菌率可达到100%;小檗碱复配加倍强5000倍液后,抑菌率均在85%以上,比单剂抑菌增效60%以上,其中有效浓度为0.8 mg/L的小檗碱复配加倍强5000倍液抑菌效果最佳,达(97.04±2.57)%。[结论]生产中可直接选择10%多抗霉素1000倍液防治葡萄灰霉病;也可选用添加农药助剂加倍强的小檗碱250倍液防控葡萄灰霉病。

木醋液对葡萄灰霉病菌的抑制作用

为挖掘更多葡萄(Vitis vinifera L.)灰霉病的生防资源,分析不同浓度木醋液对葡萄灰霉病菌菌丝生长、孢子量、孢子萌发的抑制作用以及对葡萄离体叶片灰霉病菌的防治效果。结果表明,木醋液浓度为0.500 0%,灰霉病菌菌株HM22-5菌丝生长和产孢受到明显抑制,菌丝生长抑制率为55.93%,分生孢子量显著降低,分生孢子萌发抑制率为97.08%;当木醋液浓度为1.000 0%时,葡萄灰霉病菌菌丝生长抑制率可达90.00%以上,分生孢子萌发抑制率为100.00%,对葡萄离体叶片的防效达77.32%;木醋液浓度为2.000 0%时,葡萄灰霉病菌菌丝生长抑制率为100.00%,对葡萄离体叶片的防效达89.69%。

30%啶菌·威悬浮剂防治黄瓜灰霉病田间药效试验

通过对比不同浓度的30%啶菌·威悬浮剂在防治黄瓜灰霉病上的田间药效来分析该药剂在黄瓜灰霉病上的防效、安全性和实际推广价值,同时对比的还有25%啶菌恶唑乳油和65%万霉灵可湿粉。结果表明:1)30%啶菌·威悬浮剂在防治黄瓜灰霉病上具有一定的防效,平均防效70.16%,推荐使用量为22.2~88.8 g.mL/667 m^(2),且防效随用药量的增加而提高;2)30%啶菌·威悬浮剂用药量合理,对黄瓜安全,且未见药害;3)25%啶菌恶唑乳油和65%万霉灵可湿性粉剂防治黄瓜灰霉病的最后一次调查防效为76.40%、73.41%,防效较高,增产率为17.12%、15.31%,增产效果较为明显,且方差分析表明,25%啶菌恶唑乳油和65%万霉灵可湿性粉剂与30%啶菌·威悬浮剂之间无明显差异,可考虑与30%啶菌·威悬浮剂复配或交替使用,以此来增强药效、减轻抗药性。

咯菌腈对草莓灰霉病Botrytis cinerea的毒力及防效研究初报

用生长速率法测定了咯菌腈、多菌灵、硫菌·霉威、苯醚甲环唑 4种药剂对草莓灰霉病Botrytiscinerea的毒力。结果表明 ,4种药剂对草莓灰霉菌菌丝的生长都有不同程度的抑制作用 ,随药剂浓度增加抑制作用增强 ,其 EC50 值分别为 0 .0 4 72、95 .7193、0 .4 85 4、1.36 11mg/ L,其中咯菌腈的毒力最强。田间防治试验结果表明 :2 .5 %咯菌腈 FC每 6 6 7m2 施药量 12 0 m L时防效为 83.7% ,80 m L时防效为 6 7.7% ;6 5 %硫菌·霉威 WP每 6 6 7m2 施药量 10 0 g时防效为 6 5 .3%。

江苏丘陵地区草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)对QoIs类杀菌剂的抗药性研究

【目的】明确江苏丘陵地区草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)对甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂(QoIs)的抗药性区域分布和抗药性分子机制,为抗药性治理提供依据。【方法】区分计量法和抑制中浓度法测定草莓灰霉病菌对嘧菌酯和吡唑醚菌酯的抗药性区域分布和对药剂的敏感性表型,采用草莓果实离体测定法评估药剂对不同药剂敏感性菌株的防效,通过药剂靶标基因的序列分析确定抗药性分子机制。【结果】236株草莓灰霉病菌中对嘧菌酯和吡唑醚菌酯呈抗性的菌株有192株,2个药剂呈正交互抗性。嘧菌酯和吡唑醚菌酯敏感菌株的平均抑菌中质量浓度(EC50值)分别为0.269 8和0.055 9 mg·L^(-1)。77个嘧菌酯抗性菌株的EC50值全部大于100 mg·L^(-1),而吡唑醚菌酯抗性菌株的EC50平均值为67.680 7mg·L^(-1)。接种抗性菌株后再防治的试验证明,嘧菌酯和吡唑醚菌酯在推荐剂量(a.i 166.67 mg·L^(-1))下失去防效;所有抗性菌株的cyt b基因上都只含有G143A点突变,且第143位氨基酸后均不含有内元(Bcbi-143/144);敏感菌株cyt b基因分为2种,47.4%的敏感菌株不含有Bcbi-143/144,而52.6%的敏感菌株含有Bcbi-143/144。【结论】江苏丘陵地区田间草莓灰霉病菌群体中,对QoIs类药剂产生高水平抗药性的种群已成为主导种群,生产中不宜再用该类药剂防治草莓灰霉病。所有田间采集灰霉病菌抗性菌株的抗性分子机制均为cyt b基因G143A点突变,未发现其他位点突变类型。

一种测定杀菌剂对灰霉病菌(Botrytis cinerea)毒力方法的改进

为探索一种灵敏度高、准确性高的筛选灰霉病防治药剂的试验方法,笔者通过在灰霉病菌(Botrytis cinerea)分生孢子悬浮液中加入1%酵母浸膏、2.5%葡萄糖和10%胡萝卜汁,接种离体黄瓜子叶,病叶率达100%,发病均匀度达98%以上,确立了一种重复性好、操作简便的测定杀菌剂对灰霉病菌毒力的新方法--黄瓜子叶喷雾法。以该方法、菌丝生长速率法和孢子萌发法分别测定比较了戊唑醇、代森锰锌和异菌脲对灰霉病菌的毒力,发现药剂浓度的对数值与其抑制率的几率值之间有很高的相关性,相关系数均大于0.95。该方法可用于灰霉病菌抗药性监测和杀菌剂敏感性测定。

灰霉病菌(Botrytis cinerea)生物防治研究进展

综述了国内外利用相关拮抗微生物防治作物灰霉病菌的研究历史与现状 ,介绍了国内外用于防治灰霉病菌的几类主要微生物 ;阐述了灰霉病生物防治的主要机理 ;讨论了目前生物防治中存在的主要问题 ,并就应用前景作了评述 ,认为生物防治在未来作物灰霉病的防治和人类安全问题中将发挥重要的作用。

氧化石墨烯对葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)和炭疽病菌(Colletortrichum gloeosporioides)的离体抑菌活性

为确定氧化石墨烯对葡萄灰霉病和炭疽病的离体抑菌活性,将氧化石墨烯配制成50,100,250,500 mg/L的溶液,进行了氧化石墨烯对菌丝生长、病菌分生孢子产量及萌发、病菌菌丝生物产量等影响的试验。结果表明,氧化石墨烯对葡萄灰霉病和炭疽病的菌丝生长速率、孢子萌发率、产孢量及生物产量具有显著的抑制作用。在处理7 d后,各质量浓度的氧化石墨烯处理对菌丝生长的影响与对照相比差异不显著。氧化石墨烯对葡萄炭疽病菌丝的抑制作用明显高于对葡萄灰霉病菌丝的抑制作用;对葡萄炭疽病孢子萌发率与产孢量的抑制作用明显高于对葡萄灰霉病孢子萌发率与产孢量的抑制作用。